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精氨酸残基和赖氨酸残基对大鼠血红素加氧酶-1催化功能的影响

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中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 330-332页

作者：王秀宏赵炜明滕悦秋王志刚刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 150086 军事医学科学院野战输血研究所

目的研究和探讨大鼠血红素加氧酶鄄1(RHO鄄1)中保守的碱性氨基酸精氨酸残基和赖氨酸残基对该酶催化功能的影响。方法应用定点诱变制备20种RHO鄄1的变异型酶质粒,其中RHO鄄1中保守的碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸被置换成谷氨酸,将它们在大... 详细信息

目的研究和探讨大鼠血红素加氧酶鄄1(RHO鄄1)中保守的碱性氨基酸精氨酸残基和赖氨酸残基对该酶催化功能的影响。方法应用定点诱变制备20种RHO鄄1的变异型酶质粒,其中RHO鄄1中保守的碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸被置换成谷氨酸,将它们在大肠埃希菌中表达并纯化后,用光谱扫描方法在以NADPH-细胞色素P鄄450还原酶提供电子的模拟体内反应体系下测定变异型酶和野生型酶的活性,从而观察变异型酶的活性是否发生改变。结果变异型酶R35E、K39E、R44E、R136E、K148E、K149E、K153E、R185E和K196E对血红素的降解速度低于野生型酶。结论R35等9个精氨酸残基和赖氨酸残基在参与RHO鄄1催化血红素降解的反应中对该酶的催化功能有着重要影响。

关键词：精氨酸残基赖氨酸残基大鼠血红素加氧酶-1 催化功能氧化应激地方病

血红素加氧酶在大肠杆菌中稳定表达的氨基酸范围的研究

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医学分子生物学杂志 2004年第4期1卷 212-215页

作者：王秀宏滕悦秋王志刚刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150086 军事医学科学院野战输血研究所北京市100850

目的　确定在原核细胞中呈可溶性稳定表达但不改变活性的血红素加氧酶氨基酸范围。方法　应用PCR技术构建了鼠血红素加氧酶 1(RHO 1)和人血红素加氧酶 2 (HHO 2 )的N端和C端部分氨基酸缺失的变异型RHO 1和HHO 2 ,将它们在大肠杆菌中... 详细信息

目的　确定在原核细胞中呈可溶性稳定表达但不改变活性的血红素加氧酶氨基酸范围。方法　应用PCR技术构建了鼠血红素加氧酶 1(RHO 1)和人血红素加氧酶 2 (HHO 2 )的N端和C端部分氨基酸缺失的变异型RHO 1和HHO 2 ,将它们在大肠杆菌中表达并纯化后通过光谱扫描法测定变异型酶与野生型酶的催化活性 ,确定RHO 1和HHO 2中的N端和C端缺失不影响其可溶性表达及催化活性的氨基酸范围。结果　△N8RHO 1(N端缺失 8个氨基酸的RHO 1)和△C70RHO 1在大肠杆菌中表达为可溶性蛋白且催化活性与RHO 1野生型相同 ,△N2 0HHO 2和△C77HHO 2在大肠杆菌中也表达为可溶性蛋白且催化活性与HHO 2野生型相同 ,而△N9RHO 1和△C75RHO 1在大肠杆菌中表达为包涵体。结论　RHO 1和HHO 2的N端和C端部分氨基酸缺失的突变型酶对其催化功能没有影响 ,并可在大肠杆菌中稳定可溶性表达。

关键词：血红素加氧酶大肠杆菌缺失的变异型催化活性

重组NADPH-细胞色素P450还原酶在大肠杆菌中的表达和纯化

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哈尔滨医科大学学报 2004年第2期38卷 99-101,106页

作者：王志刚王秀宏滕悦秋刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　在大肠杆菌中表达重组NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶 (CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白。方法　将已构建的NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶重组质粒pMW1 72a CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL 2 1中 ,依次使用超速离心、DE5 2纤维素阴... 详细信息

目的　在大肠杆菌中表达重组NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶 (CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白。方法　将已构建的NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶重组质粒pMW1 72a CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL 2 1中 ,依次使用超速离心、DE5 2纤维素阴离子交换层析和 2′ 5′ADP亲和层析的方法纯化CPR ,并检测酶的活性。结果　获得了纯度达 99%以上的可溶性CPR蛋白 ,纯化倍数 5 .2 0倍 ,检测酶的比活性为每分钟 1 0 4 5 .4 9nmol mg。结论　获得了纯度高、有活性的CPR蛋白 ,可作为工具酶用于某些相关酶的研究。

关键词：重组NADPH-细胞色素 P450还原酶大肠杆菌基因表达 CPR 生物医学

重组血红素加氧酶-2在大肠杆菌中表达与纯化方法的研究

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哈尔滨医科大学学报 2004年第1期38卷 1-4页

作者：滕悦秋王秀宏赵炜明王志刚刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　确定重组血红素加氧酶 2在大肠杆菌中表达与纯化方法。方法　将已构建的血红素加氧酶 2(HO 2 )的重组质粒pMW1 72a HO 2转入大肠杆菌BL 2 1 ,分析不同温度及摇床转速对HO 2表达的影响 ,确定可溶性表达最佳条件。使用超声波、超速... 详细信息

目的　确定重组血红素加氧酶 2在大肠杆菌中表达与纯化方法。方法　将已构建的血红素加氧酶 2(HO 2 )的重组质粒pMW1 72a HO 2转入大肠杆菌BL 2 1 ,分析不同温度及摇床转速对HO 2表达的影响 ,确定可溶性表达最佳条件。使用超声波、超速离心、分级盐析、分子筛层析等方法纯化HO 2。检测酶活性。结果　确定了HO 2可溶性表达最佳条件为 37℃ ,(85± 5 )r min ;确定了HO 2具体纯化路线。得到蛋白纯度为 95 .0 % ,纯化倍数为 2 .9倍 ,收得率为 4 0 .9%的活性HO 2蛋白。结论　获得了纯度高、具有活性的HO 2蛋白 ,为进一步进行HO

关键词：重组血红素加氧酶-2 大肠杆菌基因表达纯化

三氧化二砷对大鼠血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

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脑与神经疾病杂志 2010年第4期18卷 287-290页

作者：张迎光刘秀华王海洋滕悦秋宋鹏广东省中医院神经三科广州510120 哈尔滨医科大学第一临床医学院中心实验室哈尔滨医科大学第一临床医学院血管外科

目的观察三氧化二砷(As2O3)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响,以提供含As2O3缓释血管内支架植入手术后防止再狭窄的实验依据。方法分离培养大鼠VSMC并以As2O3处理;用四甲基偶氮唑蓝还原反应(MTT法)检测细胞增殖情况,RT-PCR... 详细信息

目的观察三氧化二砷(As2O3)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响,以提供含As2O3缓释血管内支架植入手术后防止再狭窄的实验依据。方法分离培养大鼠VSMC并以As2O3处理;用四甲基偶氮唑蓝还原反应(MTT法)检测细胞增殖情况,RT-PCR检测增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA;以AnnexinV+PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;比色法检测半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。结果 2μmol/L的As2O3对VSMC的生长有明显的抑制作用,且此作用呈时间依赖性(P<0.01)。以2μmol/L的As2O3作用72h后,AS2O3对PCNAmRNA表达有显著的抑制作用(P=0.009),对VSMC凋亡的发生(P=0.0001)及对Caspase-3的激活(P=0.005)均有显著促进作用。结论 As2O3可有效抑制VSMC增殖,诱导VSMC凋亡。As2O3的应用有可能为防治血管内支架植入术后再狭窄的药物研究提供一个新思路。

关键词：三氧化二砷细胞增殖细胞凋亡血管平滑肌细胞

基于风廓线雷达的四川盆地西部强降水过程风场特征

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高原气象 2025年第1期44卷 240-252页

作者：胡迪谢晓林陈朝平周秋雪四川省气象台四川成都610072 高原与盆地暴雨旱涝灾害四川省重点实验室四川成都610072 四川省气象探测数据中心四川成都610072

根据暖区暴雨的分型(西南涡型、副热带高压边缘型、西南急流型和东南风型),选取四类天气背景下四川盆地西部(成都地区)的暴雨过程,利用风廓线雷达新资料,详细分析了青藏高原-四川盆地特殊地形下,不同类型暖区暴雨中典型强降水发生、发... 详细信息

根据暖区暴雨的分型(西南涡型、副热带高压边缘型、西南急流型和东南风型),选取四类天气背景下四川盆地西部(成都地区)的暴雨过程,利用风廓线雷达新资料,详细分析了青藏高原-四川盆地特殊地形下,不同类型暖区暴雨中典型强降水发生、发展时的风廓线特征。研究表明:(1)风廓线雷达资料可以很清楚地表现出对流层及边界层存在的中小尺度系统,不同类型强降水过程的风场演变特征同特殊地形与区域环流及天气系统的相互作用密切相关,除副高边缘型外,其他三种类型暖区暴雨典型过程发生前或发生时都出现了边界层东北风或偏东风;(2)垂直速度变化梯度大,直观地体现了这几次过程时间短、对流强的特征,降水开始后,向下的垂直速度明显减弱甚至转向的突变时期,代表气层中上升运动的明显增强,这种垂直速度的突变对于强降水的预测有指示意义;(3)垂直速度极值在强降水发生前或发生时会明显增大,并伴随有极值层降低的现象,水平风速极值和极值层有同步的增减趋势,大部分强降水过程发生前,中层都出现了中尺度急流,并伴随急流层的降低;(4)在这四种类型的暴雨过程中都有低空急流的参与,其中副高边缘型和西南涡型暴雨过程中,低空急流指数第一次增大都对降水的开始有1~2 h的预报提前量,而在东南风型和西南涡型过程中低空急流指数的突增预示了降水强度的增大。

关键词：风廓线雷达强降水低空急流暖区暴雨

职业与科学之争:燕大新闻系对“新闻学”的本土理念探索

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北大新闻与传播评论 2025年第1期 312-324+337页

作者：张萌秋北京大学新闻与传播学院

在20世纪20年代至40年代的中国,中国新闻学界针对新闻学的科学性问题进行了本土化探索。在这一时期,吸收西方新闻教育理念并努力融入中国社会文化的燕大新闻系也在积极对这一问题进行本土化思考。这种思考为人们对新闻学这一学科的科学... 详细信息

在20世纪20年代至40年代的中国,中国新闻学界针对新闻学的科学性问题进行了本土化探索。在这一时期,吸收西方新闻教育理念并努力融入中国社会文化的燕大新闻系也在积极对这一问题进行本土化思考。这种思考为人们对新闻学这一学科的科学性认识提供了一个独特的视角。为此,本文结合相关史料,考察了这一时期燕大新闻系关于新闻学之科学性的相关讨论,以及相关讨论是否帮助新闻学实现了科学性转向及其原因。研究表明,燕大新闻系一方面认同新闻学的跨学科特性,另一方面对于新闻学是一门与现实结合紧密的应用科学也形成了学科共识。然而,这一认识并未促使早期新闻学从职业教育转变为一门科学教育。

关键词：燕大新闻系新闻学本土化

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以“小面团大变身”为例设计跨学科主题学习

小学科学 2025年第2期 59-61页

作者：高红秋青岛新世纪市北学校山东

《义务教育科学课程标准(2022年版)》明确指出:小学阶段的科学教学需要设立跨学科学习活动,加强学科联系和课程综合性与实践性。与其他学科相比,科学课程的学习本身就具有跨学科学习的特点。以“小面团大变身”为例,从现实生活情境出发... 详细信息

《义务教育科学课程标准(2022年版)》明确指出:小学阶段的科学教学需要设立跨学科学习活动,加强学科联系和课程综合性与实践性。与其他学科相比,科学课程的学习本身就具有跨学科学习的特点。以“小面团大变身”为例,从现实生活情境出发,激发学生内在学习动机,融合劳动、艺术、道德与法治多学科思维,促进学生深度理解多学科的知识和方法,加强培养学生在真实情境中综合运用知识解决实际问题的能力。

关键词：小学科学跨学科主题学习

新乌克兰风格基辅NARODNYI DIM商店

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室内设计与装修 2025年第1期 84-89页

作者：无秋落(编译) MAKHNO Studio 不详

位于乌克兰首都基辅的“NARODNYI DIM”,长久以来一直是基辅居民与游客探寻乌克兰臻品与手工纪念品的首选之地。这个坐落在雅罗斯拉夫瓦尔,紧邻金门的空间,不仅汇聚了众多乌克兰友人,更承载着深厚的乌克兰文化情感。近期,MAKH+NO工作室... 详细信息

位于乌克兰首都基辅的“NARODNYI DIM”,长久以来一直是基辅居民与游客探寻乌克兰臻品与手工纪念品的首选之地。这个坐落在雅罗斯拉夫瓦尔,紧邻金门的空间,不仅汇聚了众多乌克兰友人,更承载着深厚的乌克兰文化情感。近期,MAKH+NO工作室受邀对NARODNYI DIM进行新一轮的翻新,旨在保留传统价值的同时,赋予其新的艺术生命。

关键词：文化情感 ODN DIM 乌克兰工作室纪念品 NAR