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OxAc对大鼠缺血性脑损伤的保护作用研究

西南大学学报（自然科学版） 2012年第8期34卷 48-52页

作者：付利娟温纯洁丁裕斌吴兰香重庆医科大学中医药学院重庆400016 重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 重庆医科大学公共卫生学院重庆400016

目的:观察静脉注射草酰乙酸(oxaloacetate,OxAc)对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用.方法:线拴法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注损伤模型,54只雄性SD大鼠随机分为5组:Sham组(n=6),MCAO+0.9%NS组(n=12),MCAO+OxAc组(n=12),MCAO+OxAc+GOT组(n=12)和MCAO+OxAc+Maleate组(n=12).脑缺血2h于再灌注即刻给予不同药物静脉注射,分别检测各组大鼠血清与脑脊液中谷氨酸(glutamate,Glu)体积质量分数、神经行为学评分、脑梗死体积及神经元脱失情况.结果:脑缺血2h后大鼠脑脊液中的Glu体积质量分数显著上升(p<0.001),血浆中Glu体积质量分数无明显变化.静脉注射OxAc可以迅速而明显地降低脑缺血大鼠血浆和脑脊液中的Glu体积质量分数(p<0.05);与MCAO+0.9%NS组相比,OxAc的应用可以明显提高大鼠神经行为学评分(p<0.05)、减小脑梗死体积(p<0.01)、明显改善术后大鼠相关脑区神经元脱失现象;同时静脉注射谷草转氨酶(Glutamate-oxaloacetate transaminase,GOT)可以促进OxAc的作用,而同时应用GOT特异性抑制剂马来酸盐(Maleate)可以减弱OxAc的上述作用效果.结论:静脉注射OxAc对大鼠急性局灶性脑缺血具有明显的神经保护作用,且此作用主要是通过其作为血液中的"谷氨酸清道夫"而实现的.

关键词：草酰乙酸谷氨酸谷草转氨酶缺血性脑卒中

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欣欣向荣的汕头经济特区农业

亚太经济 1986年第4期 57-59页

作者：温纯洁

一、优越的条件汕头经济特区从1981年底建设之初,就成立了农业发展联合公司,积极发展特区农业,这是汕头经济特区的一大特色。汕头市是我国东南沿海的港口城市,管辖八县一市(潮州市),总面积达10,340平

关键词：汕头经济特区水产业汕头市出口渔业农业水产品农产品

帕博西尼逆转人乳腺癌MCF-7/DOX细胞对多柔比星的耐药性

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肿瘤 2017年第8期37卷 831-839页

作者：赵国智温纯洁邹镇吴兰香周宏灏重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 中南大学湘雅医学院临床药理研究所湖南长沙410078

目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent protein kinase4/6,CDK4/6)抑制剂帕博西尼(palbociclib,PAL)对乳腺癌MCF-7/多柔比星(doxorubicin,DOX)细胞耐药性的逆转作用,并探讨药物转运体ATP结合盒蛋白B1(ATP binding cassette protein B1,ABCB1)在其中的作用机制。方法:采用CCK-8法检测PAL对亲本MCF-7及耐药MCF-7/DOX细胞DOX敏感性的影响;FCM法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中DOX蓄积浓度的影响。构建稳定转入ABCB 1基因的MDCKⅡ细胞模型,采用药物跨膜转运实验检测PAL对药物转运体ABCB1介导的DOX外排功能的影响。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中ABCB1 mRNA及蛋白表达水平的影响。结果:0.2与0.4μmol/L的PAL可使DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别降低39%和51%(P值均<0.05),但对MCF-7细胞的IC_(50)值无明显影响;0.4μmol/L PAL可使MCF-7/DOX细胞内DOX的蓄积浓度上调82%(P<0.05),但对MCF-7细胞中DOX的蓄积浓度无明显影响。PAL对ABCB1介导的DOX外排功能有明显抑制作用(P<0.05),但对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中ABCB1 mRNA与蛋白的表达水平均没有明显的调节作用。结论:PAL可以通过抑制ABCB1转运体的功能而逆转乳腺癌MCF-7细胞DOX耐药性,提示PAL与DOX联用有望提高临床乳腺癌DOX的治疗效果,优化临床治疗方案。

关键词：乳腺肿瘤帕博西尼多柔比星耐药性 ABCB1

ACE基因I/D多态性与风湿性心脏病的相关性研究

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中国临床药理学与治疗学 2013年第5期18卷 550-554页

作者：张涛郭成贤温纯洁周宏灏重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 中南大学临床药理研究所

目的:探讨血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与中国人风湿性心脏病(Rheumatic heart disease,RHD)易感性的关系。方法:以病例-对照法,采用聚合酶链反应(PCR)检测246例风湿性心脏病患者和22... 详细信息

目的:探讨血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与中国人风湿性心脏病(Rheumatic heart disease,RHD)易感性的关系。方法:以病例-对照法,采用聚合酶链反应(PCR)检测246例风湿性心脏病患者和223例正常对照组的ACE基因型。病例组进一步分为二尖瓣病变组和联合瓣膜病变组,结合临床资料统计分析各组数据。结果:ACE I/D各基因型在RHD病例组和对照组分布差异无统计学意义,但病例组ACE I型等位基因频率高于对照组(70.1%vs 63.9%),差异有统计学意义(P<0.05)。联合瓣膜病变患者组中,ACE II、ID、DD基因型频率分别为51.8%、39.2%和9.0%,I、D等位基因频率分别为71.4%及28.6%。ACE II基因型和I型等位基因在联合瓣膜病变组和对照组的分布差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ACE基因I/D多态性可能与中国人风湿性心脏病的遗传易感性相关。

关键词：风湿性心脏病 ACE基因基因多态性易感性

CYP2C19基因多态性在中草药物代谢性质筛选中的初步研究

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中国临床药理学与治疗学 2014年第9期19卷 1016-1020页

作者：陈旺温纯洁付利娟暨南大学医学院第四附属医院广州市红十字会医院药学部重庆医科大学生命科学研究院

目的:体外测定三个CYP2C19基因型(CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3)酶动力学常数和药物抑制常数,研究CYP2C19基因多态性对药物代谢的影响。方法:以CEC(3-cynao-7-ethoxycoumarin)作为CYP2C19特异性荧光底物进行酶学反应,检测CYP2C19三个多态性酶的活性,使用非线性回归方法计算酶促反应动力学参数Km值,Vmax值和内在清除率Clint值(Vmax/Km)。通过将特异性荧光底物CEC,待检测中草药物以及其他用来模拟体内环境的相关实验条件相组合进行体外酶抑制反应,分析待检测的19种中草药物对CYP2C19基因多态性的抑制效应,并计算其IC50值。结果:抑制筛选实验表明:2C19参与代谢的底物和已知抑制剂均对其有抑制作用,多数中草药物对CYP2C19抑制作用微弱或者无抑制作用;化学结构或治疗作用类似的同类药品对CYP2C19的抑制情况不一;不同基因型被同一种药物抑制程度也不尽相同,甚至差别较大。结论:建立了高效、稳定、简便的荧光高通量药物筛选平台,为后期研究CYP2C19应用于创新药物或新药先导化合物临床前代谢性质的筛选和预测奠定了基础,为临床潜在药物相互作用提供前期实验依据。

关键词： CYP2C19 基因多态性荧光检测技术

吉非替尼获得性耐药非小细胞肺癌细胞中差异表达环状RNA分析

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肿瘤 2017年第11期37卷 1128-1135页

作者：代谊黄羽棠黄家凤温纯洁周宏灏吴兰香重庆医科大学生命科学研究院分子生物学实验室重庆400016 中南大学湘雅医学院临床药理研究所遗传药理学湖南省重点实验室湖南长沙410078

目的 :建立吉非替尼获得性耐药非小细胞肺癌细胞株,并筛选和分析耐药前后差异表达的环状RNA(circular RNA,circ RNA)。方法:利用吉非替尼敏感性非小细胞肺癌细胞株H292(简称为H292_S),采用逐步加药法建立吉非替尼获得性耐药株(命名为H29... 详细信息

目的 :建立吉非替尼获得性耐药非小细胞肺癌细胞株,并筛选和分析耐药前后差异表达的环状RNA(circular RNA,circ RNA)。方法:利用吉非替尼敏感性非小细胞肺癌细胞株H292(简称为H292_S),采用逐步加药法建立吉非替尼获得性耐药株(命名为H292_R)。CCK-8法检测吉非替尼对2种细胞增殖的抑制作用;RNA测序(RNA sequencing,RNA-seq)法筛选2种细胞中差异表达的circRNA;实时荧光定量PCR法验证RNA-seq结果,并结合统计学和生物信息学方法对差异circRNA来源基因的生物学功能进行分析。结果:吉非替尼对H292_S和H292_R细胞增殖的半数抑制浓度分别为(108.63±0.32)nmol/L和(982.37±2.62)nmol/L,2者间差异有统计学意义(P值均<0.05),耐药细胞H292_R对吉非替尼的耐药指数为9.04。2种细胞中存在36个差异表达circRNA,其中耐药细胞中24个circRNA表达上调(P值均<0.05),12个circRNA表达下调(P值均<0.05);GO富集分析发现,异常表达的circRNA主要涉及调节细胞生长增殖、蛋白转运和基因转录等生物学过程;KEGG通路分析发现,异常circRNA的信号通路主要涉及细胞质DNA感受通路、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、胞吞和凋亡等通路。实时荧光定量PCR法验证2种细胞中差异表达circRNA hsa_circ_0000567和hsa_circ_0000620的表达水平差异,结果显示耐药细胞中这2个circRNA水平均明显上调(P值均<0.05),与RNA-seq结果相符。结论:筛选出吉非替尼获得性耐药相关的差异表达circRNA,这有助于更深入地阐明非小细胞肺癌耐药的机制,并可能为其早期诊断提供生物学标志。

关键词：癌,非小细胞肺抗药性,肿瘤基因表达调控吉非替尼环状RNA RNA测序

草酰乙酸对锂-匹罗卡品癫痫大鼠的神经保护作用

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第三军医大学学报 2012年第14期34卷 1375-1379页

作者：吴兰香王果付利娟温纯洁杨竹王应雄于超重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 中南大学临床药理研究所长沙400078 重庆医科大学中医药学院重庆400016

目的观察静脉注射草酰乙酸(oxaloacetate,OxAc)对氯化锂-匹罗卡品癫痫(lithium-pilocarpine seizures,LPS)模型大鼠的神经保护作用。方法 30只6～8周龄、体质量180～220 g的Sprague-Dawley雄性大鼠按随机数字表法分为5组:生理盐水对照组... 详细信息

目的观察静脉注射草酰乙酸(oxaloacetate,OxAc)对氯化锂-匹罗卡品癫痫(lithium-pilocarpine seizures,LPS)模型大鼠的神经保护作用。方法 30只6～8周龄、体质量180～220 g的Sprague-Dawley雄性大鼠按随机数字表法分为5组:生理盐水对照组(用0.9%生理盐水代替匹罗卡品)、LPS模型对照组、LPS+OxAc组(癫痫持续状态终止时注射OxAc 3.5 mg/100 g)、LPS+OxAc+谷草转氨酶(glutamate-oxaloacetate transminase,GOT)组(癫痫持续状态终止时注射OxAc 3.5 mg/100 g+GOT 3.5μg/100 g)及LPS+OxAc+马来酸盐(Maleate)组(癫痫持续状态终止时注射OxAc3.5 mg/100 g+Maleate 6.3 mg/100 g)(n=6)。用氯化锂和匹罗卡品制备癫痫动物模型,诱发癫痫持续状态(status epi-lepticus,SE)60 min后注射安定终止发作。分别检测SE终止后不同时间点各实验组大鼠脑脊液与血液中的谷氨酸浓度、脑电图表现及神经元脱失情况。结果 LPS模型对照组大鼠SE终止后脑脊液与血液中的谷氨酸浓度显著升高,8 h左右达到最高峰,与生理盐水对照组相比,分别升高了约88%和54%,随后开始缓慢下降。在SE终止后静脉注射OxAc可以在8 h内明显降低癫痫大鼠脑脊液中的谷氨酸浓度(P<0.05),8 h后其作用基本消失;OxAc对癫痫大鼠血液中谷氨酸浓度的降低作用可以持续至注射后12 h(P<0.05)。OxAc对癫痫大鼠脑电图表现及海马、齿状回门区神经元脱失现象也有明显改善作用。在应用OxAc的同时,静脉注射GOT可以增强OxAc对LPS大鼠的神经保护作用,而同时应用GOT特异性抑制剂Maleate可以减弱OxAc的上述作用效果。结论静脉注射OxAc可通过促使血液中谷氨酸浓度下降而对氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠的神经起到保护作用。

关键词：草酰乙酸谷氨酸谷草转氨酶癫痫

MiRNAs对细胞色素P450s药物代谢酶系调控作用的研究进展

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中国临床药理学与治疗学 2011年第11期16卷 1304-1309页

作者：温纯洁傅利娟吴兰得陈旺张涛周宏灏重庆医科大学生命科学研究院重庆400016

MicroRNAs(MiRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,一般含有19～25个寡核苷酸,通过与靶mRNA 3'端非翻译区(3'UTR)完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,发挥基因调控作用。MiRNAs在多种生物学过程中都有重要作用,其异常调节会导... 详细信息

MicroRNAs(MiRNAs)是一类内源性非编码小分子RNA,一般含有19～25个寡核苷酸,通过与靶mRNA 3'端非翻译区(3'UTR)完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,发挥基因调控作用。MiRNAs在多种生物学过程中都有重要作用,其异常调节会导致各种疾病发生,所以miRNAs被认为可能是新的治疗靶点。MiRNAs在遗传药理学中的作用最近才被研究。化学物质、药物、激素或者是病理状态引起的miRNAs表达的改变可能会导致药物代谢和药物效应的改变。本文主要从miRNAs对细胞色素P450代谢酶和核受体的转录后调控作用作一综述。

关键词： MicroRNA 细胞色素P450 遗传药理学转录后调控

β-异硫氰酸苯乙酯多靶向抗肿瘤作用机制研究进展

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中国临床药理学与治疗学 2015年第2期50卷 217-222页

作者：张雪吴兰香张陶蓝温纯洁付利娟周宏灏重庆医科大学生命科学研究院重庆400016 中南大学湘雅医院临床药理研究所中南大学临床药理研究所遗传药理学湖南重点实验室

全球癌症的发病率逐年攀升,癌症治疗已成为科学界和医学界的重要研究课题。β-异硫氰酸苯乙酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)来源于十字花科植物,是广泛被研究的异硫氰酸酯(isothiocyanate,ITC)家族成员之一。越来越多流行病学和病... 详细信息

全球癌症的发病率逐年攀升,癌症治疗已成为科学界和医学界的重要研究课题。β-异硫氰酸苯乙酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)来源于十字花科植物,是广泛被研究的异硫氰酸酯(isothiocyanate,ITC)家族成员之一。越来越多流行病学和病理学研究证实PEITC可以诱导肿瘤细胞周期阻滞和凋亡。PEITC通过调节多种分子机制实现其抗肿瘤作用。本文对这些相关文献进行分析整理,对PEITC药物多靶向抗肿瘤作用机制和潜在的分子靶点进行简要综述。

关键词：肿瘤治疗 β-异硫氰酸苯乙酯分子机制