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发酵来源莽草酸分离纯化及质量研究

发酵来源莽草酸分离纯化及质量研究

作者：温素萍华南理工大学

学位级别：硕士

莽草酸（3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸,Shikimic Acid,简称SA）是一种天然有机酸,存在于松柏类植物及木兰科植物的成熟干燥果实中,可作为芳香化合物、生物碱及吲哚衍生物等手性药物的重要合成原料,市场价值巨大。优化并建立了从发酵液... 详细信息

莽草酸（3,4,5-三羟基-1-环己烯-1-羧酸,Shikimic Acid,简称SA）是一种天然有机酸,存在于松柏类植物及木兰科植物的成熟干燥果实中,可作为芳香化合物、生物碱及吲哚衍生物等手性药物的重要合成原料,市场价值巨大。优化并建立了从发酵液中分离纯化莽草酸的工艺路线,该工艺具有低成本、高收率、操作简便等优点。首先利用陶瓷膜和纳滤膜去除发酵液中大部分菌体和蛋白,再通过单因素实验确定了影响莽草酸发酵液脱色效果的因素,后采用正交实验优化出最佳的脱色条件:料液p H2.0,1.0%活性炭用量,温度50℃,时间1 h。往脱色浓缩液中加入无水乙醇（终浓度85%）进行脱盐,过滤除去不溶物,滤液浓缩后结晶得到莽草酸粗品。最后继续重复结晶得到莽草酸精品,纯度高达98.5%以上,目前植物提取的市场价格约为800～1000元/kg,而该研究中的综合生产成本远低于此,具有较好的应用前景。基于莽草酸可作为磷酸奥司他韦起始物料,按照中国药典2015年版通则和ICH指南要求,进行一系列的研究并建立相关测定方法。即对精制的莽草酸质量控制中各个指标进行研究,包括性状、鉴别、检查、含量检测四个方面。性状研究结果显示自研莽草酸为白色粉末,在水中易溶,乙醇中微溶,熔点为183～188℃、比旋度为-180～-186°,与莽草酸对照品的一致。鉴别即对比自研莽草酸和对照品的分子量、红外特征吸收峰、核磁共振图谱、晶型,结果显示一致。检查即对莽草酸的干燥失重、KF水分、炽灼残渣、重金属元素、有关物质、DNA残留、蛋白残留进行测定,结果显示莽草酸干燥失重、KF水分、炽灼残渣均小于0.50%,铅元素（Pb）含量低于3 ppm,砷元素（As）含量低于2ppm,镉元素（Cd）含量低于1 ppm,汞元素（Hg）含量低于0.1 ppm,有关物质如脱氢莽草酸（DHS）、没食子酸（GA）、原儿茶酸（PA）含量不大于0.10%,另外还对蛋白和DNA残留进行评估,蛋白残留低于0.10%,未检出残余DNA。含量研究中,建立了基于外标法的高效液相（HPLC）检测方法,多批次自研莽草酸含量均不低于98.5%。对莽草酸含量测定方法进行了系统的方法学验证,结果显示该方法线性范围为0.025～0.150 mg/m L,线性关系r=1.0000,方法精密度RSD为0.52%（n=6）,准确度回收率介于99.39～101.70%之间,且该方法具有一定的耐用性。对DNA残留测定法进行方法学研究,结果显示该方法线性范围为1.28～81.97 ng/m L,线性关系r=0.9990,方法精密度RSD为1.84%（n=6）,准确度回收率介于99.65～114.16%之间,检测限为0.64 ppm,定量限为1.28 ppm,且该方法具有一定的耐用性。综上所述,本研究对微生物发酵液进行提取、纯化可以获得莽草酸产品,并建立莽草酸产品的质量控制方法体系。与传统植物提取制备方法相比,本研究工艺路线简便,成本低,所得莽草酸纯度高,质量可控,可用于大规模生产,满足药物的原料需求。

关键词：发酵莽草酸分离提取质量控制

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C度规(m=0,e≠0)的时空结构

北京师范大学学报（自然科学版） 1999年第4期35卷 459-463页

作者：温素萍王永成北京师范大学物理学系北京100875 晋中师范专科学校物理学系山西榆次030600

采用ｘ－ｙ方块图及虚Ｗｅｙｌ坐标的方法研究了Ｃ度规（ｍ＝０，ｅ≠０）的时空结构，特别研究了Ｃ度规（ｍ＝０，ｅ≠ｍ）的视界内部区域，进一步证明了用这２种方法所描述的时空区域是完全相同的．

关键词： C度规事件视界单向膜区虚Weyl坐标

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一个数据拟合模型程序系统

计算机应用研究 1995年第2期12卷 74-75页

作者：梁吉业温素萍山西大学计算机科学系

本文给出了十三种常用的数据拟合模型，并以模型预测值与实际观测值的误差均方最小为标准，设计了从中选择一个最佳数据拟合模型的计算机程序。该系统采用了ＣＡＤ技术，使数据处理工作完全地在计算机上执行，避免了纸上工作。

关键词：数据拟合模型程序系统数据处理

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张仲景对《内经》五味理论的运用与发挥

广州中医学院学报 1994年第1期11卷 1-4页

作者：温素萍

本文从三个方面讨论了张仲景依味谴方的特点：１．全方一味为主，这些方往往有一个明显、单纯的治疗倾向，体现了“辛散、酸收、甘缓、苦坚、咸软”的原则。２．一方二味为主。这类方剂集中体现了仲景对《内经》“辛甘发散为阳，酸苦涌... 详细信息

本文从三个方面讨论了张仲景依味谴方的特点：１．全方一味为主，这些方往往有一个明显、单纯的治疗倾向，体现了“辛散、酸收、甘缓、苦坚、咸软”的原则。２．一方二味为主。这类方剂集中体现了仲景对《内经》“辛甘发散为阳，酸苦涌泄为阴”理论的运用与发挥。３．一方多味。针对复杂多变的病机，仲景更多的方是多种味，并衡量君臣佐使、轻重缓急而组方。进一步研究药味理论对于仲景学说及中医药理论的研究及发展都有一定的现实意义。

关键词：内经中药五味张仲景

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琼玉膏通便作用的实验研究

广州中医学院学报 1995年第1期12卷 36-39页

作者：温素萍

本文对琼玉膏在通便作用方面进行了药理研究，结果表明：琼玉膏２．５ｇ／ｋｇ及１０９ｇ／ｋｇ对燥结失水型便秘小鼠的排便功能有促进作用，能使排便粒数增加（Ｐ＜０．０１）；琼玉膏上述二剂量对燥结失水型便秘小鼠的肠管含水量有增... 详细信息

本文对琼玉膏在通便作用方面进行了药理研究，结果表明：琼玉膏２．５ｇ／ｋｇ及１０９ｇ／ｋｇ对燥结失水型便秘小鼠的排便功能有促进作用，能使排便粒数增加（Ｐ＜０．０１）；琼玉膏上述二剂量对燥结失水型便秘小鼠的肠管含水量有增加作用，能使小肠湿重、小肠含水量、大肠湿重、大肠含水量明显增加（Ｐ＜０．０５～０．０１）；琼玉膏对正常小鼠小肠推进功能无明显影响，但当小鼠小肠推进功能为阿托品的作用而出现缓慢时，琼玉膏则对小肠推进功能有促进作用。结果提示，琼玉膏对燥热或阴虚燥结便秘者，有一定的润肠通便作用。

关键词：琼玉膏药理学便秘中医药疗法疾病模型

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脑出血行微创术的护理

基层医学论坛 2009年第6期13卷 116-117页

作者：温素萍汝州市第一人民医院河南汝州467500

目的探讨脑出血行微创穿刺引流术的护理经验。方法回顾性分析自2004年3月以来,应用YL—1型颅内血肿粉碎穿刺针对59例高血压脑出血进行微创穿刺粉碎清除术后护理的回顾性分析。结果59例患者中治愈28例,好转19例,放弃治疗8例,死亡4例。结... 详细信息

目的探讨脑出血行微创穿刺引流术的护理经验。方法回顾性分析自2004年3月以来,应用YL—1型颅内血肿粉碎穿刺针对59例高血压脑出血进行微创穿刺粉碎清除术后护理的回顾性分析。结果59例患者中治愈28例,好转19例,放弃治疗8例,死亡4例。结论通过对脑出血患者行微创术后的精心护理,疗效满意。

关键词：脑出血微创术护理

从五苓散加减治膀胱咳及胞痹商榷《内经》古病证名

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广州中医学院学报 1995年第3期12卷 41-42页

作者：温素萍

通过运用五苓散治疗膀胱咳及胞痹实例，探讨中医古病证名的内涵及临床运用价值，认为这些古病证名体现了中医整体的病理生理观，对于认识与之一脉相承的理、法、方、药，提高临床疗效有一定意义。

关键词：咳嗽膀胱咳中医药疗法胞痹五苓散内经

经桡动脉行冠状动脉支架置入术患者的围手术期护理

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中国现代医生 2009年第9期47卷 84-85页

作者：温素萍河南省汝州市第一人民医院河南汝州467500

目的探讨行冠状动脉支架置入术患者围手术期的护理方法。方法回顾性分析80例冠心病患者行冠状动脉内支架置入术的护理措施。结果80例患者经皮冠状动脉介入治疗(PIC)成功,无一例发生心脏严重栓塞、手部缺血及动脉搏动消失等严重并发症。... 详细信息

目的探讨行冠状动脉支架置入术患者围手术期的护理方法。方法回顾性分析80例冠心病患者行冠状动脉内支架置入术的护理措施。结果80例患者经皮冠状动脉介入治疗(PIC)成功,无一例发生心脏严重栓塞、手部缺血及动脉搏动消失等严重并发症。结论冠心病支架置入治疗安全有效成功率高,但基层医院开展较晚,治疗费用高,患者担心治疗效果,因此术前心理疏导、术中实时护理、完善的术后护理措施对行冠心病支架置入术的治疗至关重要。

关键词：桡动脉冠心病支架置入术护理

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多媒体课件的制作方略

中国校外教育（中旬） 2009年第1期 167-167,162页

作者：温素萍太原广播电视中等专业学校山西太原

目前，制作多媒体课件成为普通教师必须掌握的一门技术。多媒体课件通常可分为：演示型、自学型、练习型、模拟试验型等。制作多媒体课件，首先，要设计课件的结构，准备素材。然后，通过多媒体集成工具进行合成。

关键词：多媒体多媒体课件课件脚本素材制作