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艰难梭菌临床分离株的分子流行病学及耐药性研究

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艰难梭菌临床分离株的分子流行病学及耐药性研究

第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：杨靖温海楠李雅静李继红时东彦宋文杰魏红莲强翠欣李志荣赵建宏河北医科大学第二医院河北省临床检验中心

通过对艰难梭菌临床分离株的毒素基因、PCR-核糖体分型、耐药性及耐药相关基因检测和分析,了解中国石家庄地区艰难梭菌的流行情况,为有效防止艰难梭菌的暴发流行提供依据。方法:采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因tcd...

通过对艰难梭菌临床分离株的毒素基因、PCR-核糖体分型、耐药性及耐药相关基因检测和分析,了解中国石家庄地区艰难梭菌的流行情况,为有效防止艰难梭菌的暴发流行提供依据。方法:采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB;然后,对毒素阳性的标本通过富集芽孢培养法进行培养;最后,分离得到的艰难梭菌再通过多重PCR的方法同时检测艰难梭菌毒素A、B基因tcdA和tcdB、二元毒素基因cdtA和cdtB及16SrDNA基因。用常规PCR的方法对分离到的艰难梭菌进行PCR-核糖体分型。采用琼脂稀释法测定艰难梭菌对左氧氟沙星、万古霉素、甲硝唑、克林霉素、替加环素的最低抑菌浓度（MIC）,并通过PCR的方法检测克林霉素耐药相关基因ermB。结果:235份粪便标本采用常规PCR的方法直接检测粪便中艰难梭菌毒素A、B基因,共检测出37份阳性标本,阳性率为15.7%。对37份毒素基因阳性的标本用富集芽孢培养法进行艰难梭菌培养,共培养出32株菌,培养阳性率为86.5%。用多重PCR分别对分离出的32株菌进行毒素A、B（tcdA、tcdB）、二元毒素A、B（cdtA、cdtB）及16SrDNA检测。发现所有菌株的毒素A、B基因均阳性,未检出二元毒素基因。32株艰难梭菌分成12种不同的PCR核糖体型。其中SⅠ型最多,占28%,没有发现核糖型027和078型。所有菌株对甲硝唑、万古霉素、替加环素均高度敏感。但是对克林霉素（MIC＞128mg/1）和左氧氟沙星（MIC＞64mg/1）出现了高水平耐药,并且耐药率较高,分别为100%和87.5%。对美洛培南的耐药率较低为18.8%。32株对克林霉素耐药的艰难梭菌中,检出18株ermB基因阳性菌株,占56.25%。结论:我国石家庄地区流行的32株艰难梭菌产毒株以A+B+的菌株为主,未发现产二元毒素的菌株。在该地区发现了12种不同的PCR核糖体型别,流行的菌株以SⅠ型为主（28%）,没有发现核糖型027和078型。艰难梭菌对克林霉素、左氧氟沙星、美洛培南均有一定耐药现象,未发现对甲硝唑、万古霉素、替加环素耐药的菌株。

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2016-2020年河北省75家医院门诊、急诊及住院患者血标本分离细菌及耐药状况分析

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中国抗生素杂志 2023年第6期48卷 691-701页

作者：强翠欣刘晓璇温海楠杨靖李志荣牛亚楠王伟刚秦璞牛肖然欧阳紫柔董宁温宝江郝姿赵建宏河北医科大学第二医院河北省临床检验中心石家庄050000 承德医学院附属医院检验科承德067000 河北医科大学石家庄050000

目的分析河北省细菌耐药监测网75家医院2016—2020年门诊、急诊及住院患者的血标本分离细菌分布和耐药性。方法收集2016年1月—2020年12月我省细菌耐药监测网单位血标本分离细菌数据,应用WHONET和SPSS软件分析河北省5年间血标本分离细... 详细信息

目的分析河北省细菌耐药监测网75家医院2016—2020年门诊、急诊及住院患者的血标本分离细菌分布和耐药性。方法收集2016年1月—2020年12月我省细菌耐药监测网单位血标本分离细菌数据,应用WHONET和SPSS软件分析河北省5年间血标本分离细菌分布及耐药性,并按菌株来源及患者不同年龄分组进行分类比较。结果河北省2016—2020年血标本共分离54959株细菌,其中门诊血标本分离菌占0.70%(387/54959)、急诊占5.12%(2815/54959),住院占94.17%(51757/54959)。门诊、急诊及住院患者血标本分离率前3位的细菌分别为大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎克雷伯菌。新生儿及儿童(≤14岁)血标本分离细菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌;成人及老年人(>14岁)常见大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。河北省血标本分离细菌多重耐药率较高,门诊、急诊及住院患者耐药菌检出率存在差异,泛耐药鲍曼不动杆菌在急诊血标本中更常见。所有葡萄球菌均对万古霉素、替加环素敏感,但已出现对利奈唑胺耐药的金黄色葡萄球菌(0.1%)和凝固酶阴性葡萄球菌(0.3%)。结论河北省门诊、急诊和住院患者血标本分离细菌均以大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主;不同分离细菌的耐药率在门诊、急诊与住院患者中存在不同差异。此外,不同年龄段患者的血标本分离细菌不同。

关键词：血标本门诊急诊住院细菌耐药性血流感染

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一起由脓肿分枝杆菌引起臀部感染暴发的分子诊断

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一起由脓肿分枝杆菌引起臀部感染暴发的分子诊断

第三届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：杨靖温海楠李雅静李继红时东彦宋文杰魏红莲强翠欣李志荣赵建宏河北医科大学第二医院检验科河北省临床检验中心

目的:追踪一起肌肉注射引起臀部感染暴发事件的病原菌,并指导临床治疗。方法:首先对采集的标本进行细菌培养、分离、生化鉴定、PCR-直接测序法及基因芯片技术鉴定,然后选用14种抗生素采用K-B纸片法对检出的病原菌进行药敏试验。结果:采...

目的:追踪一起肌肉注射引起臀部感染暴发事件的病原菌,并指导临床治疗。方法:首先对采集的标本进行细菌培养、分离、生化鉴定、PCR-直接测序法及基因芯片技术鉴定,然后选用14种抗生素采用K-B纸片法对检出的病原菌进行药敏试验。结果:采集的5份标本中均分离出非典型分枝杆菌,经生化鉴定、PCR-直接测序法及基因芯片技术检测均为脓肿分枝杆菌。5株脓肿分枝杆菌对阿米卡星（AK）、亚胺培南（IPM）、头孢西丁（FOX）敏感,而对于其它11种抗生素均表现为耐药。结论:本次臀部感染事件是由脓肿分枝杆菌引起,对检出菌株做药敏试验可以指导治疗用药。

关键词：

中国河北33株艰难梭菌临床分离株的多位点序列分型

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中国河北33株艰难梭菌临床分离株的多位点序列分型

第四届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：杨靖赵建宏李志荣强翠欣温海楠时东彦李继红宋文杰魏红莲孙倩李雅静王洁河北医科大学第二医院检验科河北省临床检验中心

目的:了解中国河北地区分离的艰难梭菌多位点序列分型（MLST）情况。方法:对2010年7月到2012年12月河北地区两家医院腹泻患者分离的33株艰难梭菌,采用聚合酶链反应（PCR）扩增7个管家基因并测序,根据7个管家基因的等位基因谱的组合确定... 详细信息

目的:了解中国河北地区分离的艰难梭菌多位点序列分型（MLST）情况。方法:对2010年7月到2012年12月河北地区两家医院腹泻患者分离的33株艰难梭菌,采用聚合酶链反应（PCR）扩增7个管家基因并测序,根据7个管家基因的等位基因谱的组合确定序列分型（sequence type,ST）。结果:所分离的33株艰难梭菌中共检出10种ST型别（ST2/3/4/35/37/53/54/55/102/172）,其中ST37（占27.3%）和ST54（占24.2%）,是该地区流行的主要型别。其中ST172是新发现的ST型,已被MLST数据库录入。33株艰难梭菌的10个ST分成了两个组,其它为零散型别。结论:在河北地区医院内腹泻患者流行的33株艰难梭菌以ST37和ST54型为主,并且医院间没有明显的同源性。

关键词：艰难梭菌分子分型多位点序列分型

2019年河北省血流感染厌氧菌分布特征及耐药性分析

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河北医药 2020年第23期42卷 3654-3656页

作者：温海楠张继东谢守军强翠欣孙倩魏宏莲时东彦梁悦怡李志荣赵建宏承德医学院附属医院检验科河北省承德市067000 河北省遵化市人民医院检验科河北医科大学第二医院检验科河北省临床检验中心石家庄市075000

目的分析河北省74所医院2019年血流感染厌氧菌的分布及耐药特征,为临床治疗厌氧菌感染提供依据。方法使用WHONET软件,回顾性分析2019年河北省29所二级医院、45所三级医院血流感染厌氧菌分离株的分布及药敏特点,按CLSI 2019年标准判断药... 详细信息

目的分析河北省74所医院2019年血流感染厌氧菌的分布及耐药特征,为临床治疗厌氧菌感染提供依据。方法使用WHONET软件,回顾性分析2019年河北省29所二级医院、45所三级医院血流感染厌氧菌分离株的分布及药敏特点,按CLSI 2019年标准判断药敏结果。结果剔除重复菌株后共收集血流感染厌氧菌54株,前三位分别为脆弱拟杆菌19株、卵形拟杆菌10株、棒状双歧杆菌4株;主要集中在60~79岁年龄段,占44.4%;科室分布上,重症医学科最多,13例,占24.1%,其次为肿瘤科、普外科;万古霉素、阿莫西林/克拉维酸,甲硝唑耐药率最低,分别为0、0和0.2%;青霉素G、氨苄西林、克林霉素、头孢曲松耐药率较高,分别为42.9%、42.9%、33.3%和25.6%。结论河北省血流感染厌氧菌以拟杆菌多见,有明显的年龄及科室分布特征,对不同药物敏感性差异较大,临床需结合药敏试验结果进行厌氧菌血流感染治疗;全省实验室厌氧菌分离数量均较少,实验室需加强血流感染厌氧菌的检出能力。

关键词：血流感染厌氧菌耐药性

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住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征

中国微生态学杂志 2015年第8期27卷 895-899,903页

作者：温海楠杨靖赵建宏强翠欣李志荣宋文杰李继红时东彦魏宏莲孙倩王向红郭玉梅河北医科大学第二医院河北石家庄050000 河北省临床检验中心河北石家庄050000 石家庄市妇幼保健医院河北石家庄050000 石家庄市疾病控制与预防中心河北石家庄050000

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection,CDI）患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012... 详细信息

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection,CDI）患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012年6月石家庄三所医院的601份粪便标本进行厌氧培养,筛选出艰难梭菌;应用PCR方法检测A、B毒素基因并进行核糖体分型,Ntsys PC 2.0软件进行同源性分析。结果 601份住院非腹泻儿童粪便标本的艰难梭菌定植率为25.3%（152/601）,其中产毒株定植率为18.3%（110/601）;2岁以下婴儿与2~18岁儿童定植率分别为20.6%（81/394）、34.3%（71/207）。PCR核糖体分型共分有23个型别,其中6种主要型别的菌株占82.2%（125/152）。与该地区成人CDI患者来源菌株的12个型别相比,有10个型别相同。结论石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率不同年龄段有差异,产毒株的定植率较高,且与引起成人CDI的菌株有同源性。提示艰难梭菌可能在儿童与成人间相互传播,尤其是无症状儿童作为艰难梭菌的储存库可能会污染医院环境,成为医院感染的潜在因素。

关键词：艰难梭菌产毒株非腹泻儿童定植核糖体分型

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住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征

住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征

中华医学会第十二次全国临床微生物学术年会暨第十一次全球华人临床微生物学与感染症学术年会

作者：温海楠杨靖赵建宏强翠欣李志荣宋文杰李继红时东彦魏宏莲孙倩王向红郭玉梅承德医学院附属医院河北省临床检验中心河北医科大学第二医院石家庄市妇幼保健医院石家庄市疾病控制与预防中心

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDl)患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012年...

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDl)患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012年6月石家庄三所医院的601份粪便标本进行厌氧培养,筛选出艰难梭菌;应用PCR方法检测A、B毒素基因并进行核糖体分型,Ntsys PC 2.0软

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住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征

住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植及相关特征

第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛

作者：温海楠杨靖赵建宏强翠欣李志荣宋文杰李继红时东彦魏宏莲孙倩王向红郭玉梅承德医学院附属医院检验科河北省临床检验中心河北医科大学第二医院石家庄市妇幼保健医院石家庄市疾病控制与预防中心

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection,CDI）患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012...

目的了解石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率、毒素产生及核糖体分型特征,并与本地区成人艰难梭菌感染（Clostridium difficile infection,CDI）患者中分离的菌株进行同源性分析。方法采用改良快速肉汤孵育法对2011年10月至2012年6月石家庄三所医院的601份粪便标本进行厌氧培养,筛选出艰难梭菌;应用PCR方法检测A、B毒素基因并进行核糖体分型,Ntsys PC 2.0软件进行同源性分析。结果 601份住院非腹泻儿童粪便标本的艰难梭菌定植率为25.3%（152/601）,其中产毒株定植率为18.3%（110/601）;2岁以下婴儿与2-18岁儿童定植率分别为20.6%（81/394）、34.3%（71/207）。PCR核糖体分型共分有23个型别,其中六种主要型别的菌株占82.2%（125/152）。与该地区成人CDI患者来源菌株的12个型别相比,有10个型别相同。结论石家庄地区住院非腹泻儿童艰难梭菌的定植率不同年龄段定植率有差异,产毒株的定植率较高,且与引起成人CDI的菌株有同源性。提示艰难梭菌可能在儿童与成人间相互传播,尤其是无症状儿童作为艰难梭菌的储存库可能会污染医院环境,成为医院感染的潜在因素。

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一起由脓肿分枝杆菌引起臀部感染暴发的初步调查及分子诊断

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一起由脓肿分枝杆菌引起臀部感染暴发的初步调查及分子诊断

第二届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学三江论坛

作者：李雅静李继红时东彦王鑫魏宏莲吕翠环宋文杰李仲兴温海楠强翠欣李志荣李仲兴赵建宏河北医科大学第二医院检验科河北省胸科医院检验科

目的:近年来,由非结核分枝杆菌（nontuberculosis mycobacteria,NTM）引起的感染暴发日益增多,其中的脓肿分枝杆菌（***）可引起皮肤和软组织感染,如手术伤口感染、外伤感染和注射后皮下感染等,国内外已有多起医源性感染脓肿分枝杆菌的... 详细信息

目的:近年来,由非结核分枝杆菌（nontuberculosis mycobacteria,NTM）引起的感染暴发日益增多,其中的脓肿分枝杆菌（***）可引起皮肤和软组织感染,如手术伤口感染、外伤感染和注射后皮下感染等,国内外已有多起医源性感染脓肿分枝杆菌的报道。我们对我省某地一起肌肉注射引起臀部感染事件进行了病原菌的分离鉴定工作,指导临床治疗,并分析了引起感染的可能原因。方法:首先对采集的5份感染脓性分泌物标本及诊所治疗室的物体表面、消毒剂、医用材料等环境标本进行细菌培养、分离及生化鉴定;对脓性分泌物标本中分离出的5株非结核分枝杆菌进一步利用分子生物学方法PCR-直接测序法及基因芯片技术进行菌种鉴定,以非结核分枝杆菌的热休克蛋白hsp65基因为靶基因进行PCR扩增,产物直接测序;同时利用分枝杆菌菌种鉴定试剂盒（DNA微阵列芯片法）对5株临床分离的非结核分枝杆菌进行菌种鉴定;然后选用14种抗生素采用K-B纸片法对检出的非结核分枝杆菌进行药敏试验。结果:采集的5份感染脓性分泌物标本中均分离出非结核分枝杆菌,经生化鉴定初步认为是脓肿分枝杆菌;PCR-直接测序法结果表明这5株非结核分枝杆菌的hsp65基因PCR扩增产物与脓肿分枝杆菌的热休克蛋白hsp65基因（Genbank登录号为FJ536236）同源性达到99%;基因芯片检测结果表明,这5株临床分离的非结核分枝杆菌均为龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌;此外,诊所治疗室环境标本细菌培养也分离到了抗酸阳性菌,表型与人体标本分离株类似,提示为引起感染的可能原因;药敏试验结果表明这5株脓肿分枝杆菌对阿米卡星、亚胺培南、头孢西丁敏感,而对于其它11种抗生素均表现为耐药。结论:由非结核分枝杆菌引起的感染日益增多,应采取各种方式加强对NTM感染的防控。本次肌肉注射引起的臀部感染事件经细菌分离培养、生化鉴定及分子生物学鉴定证实为脓肿分枝杆菌引起,分子生物学技术可以对NTM进行快速、准确的鉴定,在NTM菌种鉴定方面展现了独特的优势及巨大的应用前景。此外,对检出菌株进行药敏试验可以指导治疗用药。

关键词：脓肿分枝杆菌皮肤感染临床诊断菌种鉴定