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中草药中血管紧张素转化酶抑制剂筛选方法的研究

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中草药中血管紧张素转化酶抑制剂筛选方法的研究

作者：洪韫嘉湖南师范大学

学位级别：硕士

血管紧张素转化酶(ACE)是肾素-血管紧张素系统中关键酶类之一,对人体血压调节起着重要作用。ACE抑制剂可以通过抑制ACE的活性,达到降血压的目的,也是目前临床广泛应用的降压药物。近年来研究发现ACE抑制剂广泛存在于天然药物中,这些天然... 详细信息

血管紧张素转化酶(ACE)是肾素-血管紧张素系统中关键酶类之一,对人体血压调节起着重要作用。ACE抑制剂可以通过抑制ACE的活性,达到降血压的目的,也是目前临床广泛应用的降压药物。近年来研究发现ACE抑制剂广泛存在于天然药物中,这些天然的ACE抑制剂除具有降压功效外,副作用更小、安全性更高,更符合高血压患者对健康的期望。然而天然药物种类繁多,成分复杂,从天然药物中筛选ACE抑制剂也成为了研发新型降压药物的难点。为此,本论文对ACE抑制剂的筛选方法进行了研究。本论文主要研究工作如下: 1.发展了检测ACE抑制剂体外活性的高效液相色谱法。应用本方法对23种中草药提取物进行了检测,结果发现有14种提取物对ACE具有抑制作用。 2.以赖诺普利为配体、1,4-丁二醇-2-缩水甘油醚为联接臂、SepharoseCL-4B为固相载体,合成ACE亲和色谱胶,并将合成的亲和胶装填成柱。采用亲和色谱法,从猪肺粗提物中成功分离纯化出了ACE。方法简单,ACE的纯化效果好,适宜实验室自制ACE。 3.制备壳聚糖微球,并以壳聚糖微球为载体、戊二醛为交联剂对ACE进行固定化。探讨了戊二醛浓度与ACE用量对固化酶活性的影响。结果表明ACE被固定化后,酶活的pH范围和热稳定性都比溶液酶有所增加,并且有很好的重复利用率和贮存稳定性。 4.构建了亲和色谱联用HPLC从复杂体系中筛选ACEI的平台。采用固化ACE作为亲和介质,利用ACE抑制剂与ACE之间的亲和作用,结合高效液相色谱对亲和前后的体系进行检测,通过两者各组分色谱峰的差异,以此实现快速筛选复杂体系中的ACE抑制剂。

关键词：血管紧张素转化酶抑制剂固定化酶亲和色谱高效液相色谱

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壳聚糖固定化血管紧张素转化酶及其性质

高等学校化学学报 2009年第2期30卷 328-331页

作者：洪韫嘉李谭瑶陈波姚守拙湖南师范大学化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室长沙410081

以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化血管紧张素转化酶,研究了酶固定化的最优条件和固定化酶的性质.结果表明,在戊二醛质量分数为2.5%、给酶量为8mg/mL时,固定化酶的比活性最大,为0.085U/g.固定化酶在40～50℃,pH在7～9之间有最大... 详细信息

以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂固定化血管紧张素转化酶,研究了酶固定化的最优条件和固定化酶的性质.结果表明,在戊二醛质量分数为2.5%、给酶量为8mg/mL时,固定化酶的比活性最大,为0.085U/g.固定化酶在40～50℃,pH在7～9之间有最大活性,其米氏常数Km为2.39mmol/L.同时,固定化酶具有良好的稳定性,可重复利用.

关键词：壳聚糖血管紧张素转化酶固定化酶

我国污水排放余氯限值规定及监测、控制方法研究进展

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环境科学研究 2022年第12期35卷 2639-2646页

作者：洪韫韬肖融杨文源方超楚文海同济大学环境科学与工程学院上海200092

含氯消毒剂在我国污水处理过程中普遍使用,其在灭活病原微生物的同时会增加出水余氯浓度,对生态环境造成影响.新冠肺炎疫情防控期间,含氯消毒剂的使用量大幅增加,余氯问题更加凸显.为对我国水污染物排放标准中余氯限值的制定和修订提出... 详细信息

含氯消毒剂在我国污水处理过程中普遍使用,其在灭活病原微生物的同时会增加出水余氯浓度,对生态环境造成影响.新冠肺炎疫情防控期间,含氯消毒剂的使用量大幅增加,余氯问题更加凸显.为对我国水污染物排放标准中余氯限值的制定和修订提出可参考的建议,比较了国内外现有各类水污染物排放标准中的余氯限值,并总结分析余氯监测及控制方法的研究进展.结果表明:①我国多项水污染物排放标准包含出水中余氯限值规定,如《医疗机构水污染物排放标准》规定采用氯化消毒的医院污水直接排放总余氯浓度应低于0.5 mg/L,北京、上海等地的地方污水综合排放标准规定直接排放的污水总余氯浓度应低于0.5 mg/L,但我国城镇污水处理厂消毒尾水中的余氯至今仍缺乏标准管控.②我国余氯测定标准中规定的余氯监测方法为N,N-二乙基-1,4-苯二胺(DPD)滴定法和分光光度法,近年来余氯的仪器分析法和传感器法也得到迅速发展.③余氯控制方法包括以二氧化硫和亚硫酸盐为脱氯剂的化学脱氯法、活性炭脱氯法和还原性金属材料脱氯法等.因此,建议我国在未来城镇污水处理厂排放标准中考虑纳入余氯限值规定,并关注余氯监测及控制方法的发展与规范制定.

关键词：余氯污水消毒水污染物排放标准监测方法控制方法

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星星和月亮

小学生作文辅导(上旬) 2009年第Z2期 70-71页

作者：洪韫韬福建省厦门市同安区第二实验小学五(2)班

在无边无际的宇宙中,有一个大家庭,住着太阳、月亮和星星。它们和睦相处,互帮互助,过着愉快的生活。

关键词：月亮太阳恒星

用HPLC法从中药中筛选血管紧张素转化酶抑制剂

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天然产物研究与开发 2008年第4期20卷 728-730,755页

作者：洪韫嘉肖晓峰陈波姚守拙湖南师范大学化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室长沙410081

本文发展了一种从中药中筛选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的高效液相色谱法。以马尿酰-组氨酰-亮氨酸为反应底物,人体血浆中内生的ACE作为反应用酶,反应所生成的马尿酸为检测指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。用阳性药物卡托普利对... 详细信息

本文发展了一种从中药中筛选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂的高效液相色谱法。以马尿酰-组氨酰-亮氨酸为反应底物,人体血浆中内生的ACE作为反应用酶,反应所生成的马尿酸为检测指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。用阳性药物卡托普利对本方法进行了验证。应用本方法对中药提取物进行了ACE抑制活性的筛选,其中地龙的ACE抑制活性最强,其IC50值为2.57 mg/mL。用HPLC法筛选中药ACEI且有很好的精密度和准确性。

关键词：血管紧张素转化酶抑制剂高效液相色谱中药提取物

社区党建创新引领群众自治——走访闸北区大宁街道

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上海支部生活 2014年第1期 42-43页

作者：周兑梦洪韫璋《上海支部生活》编辑部

如何以社区党建创新引领群众自治，促进整个社区和谐健康发展？基层的潜力如何挖掘？群众的智慧如何发挥？

关键词：群众自治党建创新社区闸北区街道和谐健康发展

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光激发下水体系的超快动力学

物理学报 2024年第8期73卷 22-44页

作者：贾韫哲孟胜中国科学院物理研究所北京凝聚态物理国家研究中心北京100190 中国科学院大学物理科学学院北京100049 松山湖材料实验室东莞523808

近年来,实验技术和理论计算在实现超快时间尺度的分辨以及对于原子尺度微观细节的解析上都有了突破性进展,对于水体系的超快微观动力学也带来了更多新的认识.本文将视角集中于水分子、水团簇以及液态水在不同强度的光激发下产生的电离... 详细信息

近年来,实验技术和理论计算在实现超快时间尺度的分辨以及对于原子尺度微观细节的解析上都有了突破性进展,对于水体系的超快微观动力学也带来了更多新的认识.本文将视角集中于水分子、水团簇以及液态水在不同强度的光激发下产生的电离、解离甚至等离子体化的过程,总结了人们在前沿工作中获得的有关水体系原子尺度超快动力学的知识.特别地,围绕光电离实验探讨了阿秒尺度的电离延迟以及水分子Feshbach共振理论分析;围绕液态水的解离过程探讨了水合电子产生、空穴的定域化等重要过程,补足了液态水解离完整过程的微观图像;围绕水的等离子体化介绍了通过含时密度泛函等方法计算得到的水在强激光脉冲作用下转变为等离子体状态的过程与机制,总结了在极高电子温度下水的特殊电子结构的相关知识.这些讨论将给出当前人们看待水的激发态的相对全面的视角.

关键词：光激发水超快动力学激发态

流式细胞术在弥漫大B细胞淋巴瘤骨髓侵犯诊断和预后评估中的价值

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中华医学杂志 2023年第29期103卷 2258-2265页

作者：洪韫万文丽李敏王化董菲景红梅克晓燕朱明霞北京大学第三医院血液科，北京100191 北京大学第三医院病理科，北京100191

目的探讨流式细胞术(FC)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)骨髓侵犯诊断和预后评估中的价值。方法回顾性分析2012年12月至2022年6月北京大学第三医院血液科412例初治DLBCL患者的临床资料,其中男243例,女169例,年龄64(28~92)岁。所有患者均进... 详细信息

目的探讨流式细胞术(FC)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)骨髓侵犯诊断和预后评估中的价值。方法回顾性分析2012年12月至2022年6月北京大学第三医院血液科412例初治DLBCL患者的临床资料,其中男243例,女169例,年龄64(28~92)岁。所有患者均进行骨髓活检(BMB)及FC检测,采用荧光原位杂交(FISH)对FC检出骨髓侵犯的患者进行基因分析。评估BMB及FC检出骨髓侵犯的阳性率以及一致性。根据BMB和FC检查结果将患者分为4组:(1)BMB^(+)FC^(+):115例;(2)BMB^(-)FC^(+):50例;(3)BMB^(+)FC^(-):8例(样本量较小,结果未纳入统计分析);(4)BMB^(-)FC^(-):239例。分析不同组别DLBCL骨髓侵犯患者的临床特征、治疗有效率、5年生存率以及流式免疫表型特点。结果BMB及FC检测骨髓侵犯的阳性率分别为29.9%(123/412)及40.0%(165/412),具有良好的一致性(Kappa=0.841,P=0.001)。BMB^(+)FC^(+)组结外受累数量多(≥2个)、脾肿大、巨大包块、较高增殖指数(Ki‑67>70%)、国际预后指数(IPI)高危评分(3~5分)、血小板减少、乳酸脱氢酶升高等临床特征均高于BMB^(-)FC^(+)组和BMB^(-)FC^(-)组(均P<0.05)。BMB^(+)FC^(+)组患者的治疗有效率为63.5%(73/115),低于BMB^(-)FC^(+)组和BMB^(-)FC^(-)组的88.0%(44/50,P=0.048)和90.0%(215/239,P=0.032)。3组患者5年生存率分别为(53.6±9.7)%、(72.5±8.6)%及(75.2±7.6)%,差异有统计学意义(P=0.037)。FISH基因检测结果显示,102例为非特指型(NOS),48例为双打击淋巴瘤(DHL),15例为三打击淋巴瘤(THL)。与NOS亚型相比,DHL、THL亚型肿瘤细胞侧向散射光(SSC)增大的比例更高,CD10表达、CD38强表达及CD56表达阳性率更高,表达胞膜免疫球蛋白限制性轻链比例更低(均P<0.05)。结论FC用于诊断DLBCL骨髓侵犯与BMB具有较好的一致性。结合FISH检测,有助于DHL、THL辅助诊断和危险分层,对预后评估具有指导意义。

关键词：淋巴瘤,大B细胞,弥漫性骨髓侵犯活组织检查流式细胞术免疫表型

上颌骨混合性上皮–结缔组织型磷酸盐尿性间叶性肿瘤1例

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临床医学进展 2022年第11期12卷 10573-10578页

作者：洪嘉韫王萍雷建园张国平李文生西安医学院陕西西安陕西省人民医院病理科陕西西安陕西省人民医院影像科陕西西安

目的:报道1例上颌骨混合性上皮–结缔组织型磷酸盐尿性间叶性肿瘤(PMTMECT)患者的临床病理特征、治疗及预后。方法:回顾性分析1例PMTMECT患者的临床表现、病理特征、治疗及预后,并进行文献复习。结果:31岁男性患者,双侧髋关节疼痛加重... 详细信息

目的:报道1例上颌骨混合性上皮–结缔组织型磷酸盐尿性间叶性肿瘤(PMTMECT)患者的临床病理特征、治疗及预后。方法:回顾性分析1例PMTMECT患者的临床表现、病理特征、治疗及预后,并进行文献复习。结果:31岁男性患者,双侧髋关节疼痛加重伴腰背部疼痛入院。组织学形态结果显示:肿瘤组织由上皮和间叶两种成分组成,间叶成分由梭形细胞构成,肿瘤细胞呈血管外皮瘤样排列,可见“污浊”或絮状钙化基质。上皮成分类似牙源性上皮,以片状或不规则巢状广泛分布在肿瘤间。免疫组化染色显示肿瘤细胞表达间叶标志物Vimentin、上皮标志物AE1/AE3、Ki-67指数约5%。病理诊断为PMTMECT后,患者经手术切除治疗,目前随访2年,病情未复发。结论:PMTMECT肿瘤体积一般较小,临床无特异性表现,易漏诊,手术切除效果好。

关键词：磷酸盐尿性间叶性肿瘤上颌骨