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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定动物源性食品中46种食源性兴奋剂残留量

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食品科学 2022年第14期43卷 338-345页

作者：张海超王敬洪灯张婧雯田浩艾连峰黄雪静石家庄海关技术中心河北石家庄050051 杭州海关技术中心浙江杭州310000

建立一种同时测定动物源性食品中46种食源性兴奋剂的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品于37℃酶解16 h,乙腈提取、乙腈饱和正己烷脱脂后,上清液经C_(18)和中性氧化铝混合分散固相萃取(QuEChERS法)净化后,采用Waters ACQUITY BEH C_... 详细信息

建立一种同时测定动物源性食品中46种食源性兴奋剂的超高效液相色谱-串联质谱分析方法。样品于37℃酶解16 h,乙腈提取、乙腈饱和正己烷脱脂后,上清液经C_(18)和中性氧化铝混合分散固相萃取(QuEChERS法)净化后,采用Waters ACQUITY BEH C_(18)色谱柱分离,以0.005%甲酸溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,使用电喷雾正负离子模式同时扫描检测,外标法定量。结果表明:46种食源性兴奋剂在相应质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998,检出限为0.05~1.0μg/kg,定量限为0.1~2.0μg/kg,方法回收率为76.0%~111.9%,相对标准偏差为2.3%~12.4%(n=6)。该方法简便快速,实用性强,可为食源性兴奋剂检测提供有效技术支撑。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱食源性兴奋剂动物源食品 QuEChERS

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青少年身体素养教育治理:目标、困境与策略

吉林体育学院学报 2024年第2期40卷 22-27页

作者：原兴照亓圣华洪灯塔山东管理学院体育教学部山东济南250357 济南大学体育学院山东济南250022 福建省南安市体育学校福建泉州362300

以治理的视角,全面审视青少年身体素养教育的目标与现实困境,提出提升青少年身体素养教育治理效能的策略,旨在全面推进青少年身体素养的提升。方法:采用文献资料法系统梳理相关文献,明确青少年身体素养教育的治理目标与现存困境,并提出... 详细信息

以治理的视角,全面审视青少年身体素养教育的目标与现实困境,提出提升青少年身体素养教育治理效能的策略,旨在全面推进青少年身体素养的提升。方法:采用文献资料法系统梳理相关文献,明确青少年身体素养教育的治理目标与现存困境,并提出相应的治理策略。研究表明:我国青少年身体素养教育在治理过程中面临诸多挑战与困境,包括学校体育资源分配不均、家庭和社会对体育教育认识偏差等问题。提出了优化身体素养教育治理基础环境、完善青少年身体素养评价机制等策略。结论:青少年身体素养教育的治理目标应聚焦于促进青少年身心健康、培养终身体育意识与能力、构建完善的体育公共服务体系等方面。构建学校、家庭、社会多元主体协同治理机制,确保体育教育的优先发展,才能根本性提升青少年身体素养教育的治理效能。

关键词：青少年身体素养教育治理

小鼠GV期卵母细胞核质比、ATP8表达的研究及其RNAi载体构建

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小鼠GV期卵母细胞核质比、ATP8表达的研究及其RNAi载体构建

作者：洪灯山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1、分析小鼠卵巢生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞的核质比,探讨核质比在卵母细胞成熟发育中的作用;2、分析GV期卵母细胞线粒体ATP合酶亚基8(ATP8)的表达及其生物信息学数据,研究卵母细胞成熟与线粒体功能的关系;3、构建ATP... 详细信息

目的:1、分析小鼠卵巢生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞的核质比,探讨核质比在卵母细胞成熟发育中的作用;2、分析GV期卵母细胞线粒体ATP合酶亚基8(ATP8)的表达及其生物信息学数据,研究卵母细胞成熟与线粒体功能的关系;3、构建ATP8基因的RNA干扰载体,为研究ATP8基因在卵母细胞成熟发育过程中的作用及其对卵母细胞发育参数—核质比的调控奠定基础。方法:1、用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞并置leica Mps 60倒置显微镜下拍照,测量系统经标准图片校正后,测量GV期卵母细胞面积和半径,按核质比(nucleus-plasma ratio,NP)公式:NP=V/(V-V),式中V为核的体积,V为细胞的体积,由V=4/3pr分别求得,计算出GV期卵母细胞的核质比;2、以Genbank(NC05089)公布的线粒体ATP8序列为参考,设计两对引物,用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达:其中,cDNA的合成分两种方法进行:一是将GV期单个卵母细胞直接进行RT合成cDNA,二是先用DNA酶加EcoRⅠ酶祛除mtDNA和核DNA后再进行RT;回收产物构建克隆质粒并测序;3、用Blastn、VECTOR NIT 9.0、RNAdraw、Treeview等工具对测序结果进行生物信息学分析,在此基础上用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA法构建ATP8的RNA干扰载体。结果1、分离获得GV期卵母细胞51枚,测得卵径为40.940±3.341μm,核径为15.020±2.236μm,其核质比为0.054±0.019;2、RT-PCR结果显示ATP8基因在GV期卵母细胞中表达。克隆测序显示所测昆明小鼠ATP8序列与Genbank序列完全一致;3、blastp序列比对和mRNA二级结构图均显示12种动物间的ATP8氨基酸序列和ATP8核酸序列有较大差异,其中不同品种小鼠间也有差异;4、不同物种ATP8核苷酸序列构建出的分子进化树中,小鼠与棕熊进化距离较远,与田鼠、家猫进化距离相对较近。5、设计ATP8基因干扰序列并且重组质粒经过限制性内切酶和测序鉴定,表明成功构建了pGPH1/GFP/Neo-mouse-shATP8 RNA干扰质粒。结论1、本文测得小鼠GV期卵母细胞的核质比为0.054±0.019,与文献报道其它物种同时相核质比在相同范围内,提示核质比是卵母细胞发育成熟的重要指标;2、线粒体ATP8基因在GV期卵母细胞中有表达,提示GV期卵母细胞发育成熟需要线粒体的参与;3、氨基酸序列比对和mRNA二级结构分析均显示,ATP8序列在多种哺乳动物间、不同品种小鼠间有较大差异;4、成功设计并构建了小鼠线粒体ATP8基因RNA干扰载体,为进一步研究ATP8在小鼠卵母细胞发育过程中的作用奠定了基础。

关键词：小鼠生发泡卵母细胞 ATP合酶亚基8 RNA干扰

大气CO2浓度升高和UV-B增强对普通念珠藻生长和光合作用影响的研究

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大气CO2浓度升高和UV-B增强对普通念珠藻生长和光合作用影响的研究

作者：洪灯华中农业大学

学位级别：硕士

陆生固氮蓝藻是某些极端环境及氮源营养缺乏生态系统中的主要初级生产者,未来环境变化如何影响其生产力和固氮活性对这些生态系统将产生重大影响。全球环境正经受着巨大变化,C02升高和UV-B增强将在很长一段时间内同时存在,它们对陆生蓝... 详细信息

陆生固氮蓝藻是某些极端环境及氮源营养缺乏生态系统中的主要初级生产者,未来环境变化如何影响其生产力和固氮活性对这些生态系统将产生重大影响。全球环境正经受着巨大变化,C02升高和UV-B增强将在很长一段时间内同时存在,它们对陆生蓝藻的影响如何,值得关注。本课题以一种广泛分布的陆生固氮蓝藻-普通念珠藻（Nostoc commune）为实验材料,在室内研究了CO2倍增和UV-B增强对其生长、生化组分、光合生理和相关光合基因表达的影响。以了解在未来C02升高和UV-B增强环境下,固氮蓝藻的生物量将如何变化,并从生化、生理和基因表达等方面阐述其可能的原因。另外,本文还对人工UV光源中的UV-A和UV-C的生物学效应和滤除方法进行了研究。主要结果如下：（1）铬酸钾溶液浓度和pH影响其对UV-B的透过和对UV-A及UV-C的吸收。0.4mM（pH为8）的铬酸钾溶液能同时有效滤除UV光源中的UV-A和UV-C,并且保持对UV-B较高的透过性。用自制的的石英容器（35 cm长、1 cm宽和20 cm高）盛满铬酸钾溶液过滤UV光源,能准确快速地研究UV-B的生物学效应,并可重复多次利用,方便经济。（2）无论是在350还是1500μLL-1CO2浓度下,低剂量UV-B辐射（9KJm-2d-1）对普通念珠藻以单位体积干重表示的生长无显著影响;而高剂量UV-B辐射（20 KJm-2 d-1）则显著抑制生长,且抑制程度随C02浓度升高而降低。在同一UV-B辐射水平下,高浓度CO2（1500μL-1）明显促进了普通念珠藻的生长,且促进程度随UV-B强度的增大而增大。在高浓度CO2和高剂量UV-B下,普通念珠藻的生长依然优于在大气CO2和无UV-B辐射处理的普通念珠藻,这表明在未来大气CO2浓度升高的情况下,单纯UV-B增强可能并不会使普通念珠藻的现有生物量减少。在不同UV-B和C02作用下,普通念珠藻单位干重的叶绿素含量和单位体积干重的变化趋势相似。即高剂量的UV-B辐射显著降低了普通念珠藻单位干重的叶绿素含量,而高浓度C02则提高了普通念珠藻单位干重的叶绿素含量。UV-B辐射诱导了普通念珠藻中三苯基咪唑类氨基酸（MAAs）的大量合成。普通念珠藻单位干重的MAAs含量随UV-B强度增大和照射时间的延长而逐步稳定增加。在高剂量UV-B辐射下,C02浓度升高明显促进了MAAs的合成,而在低剂量UV-B下,则促进作用并不明显。（3）UV-B辐射明显抑制了普通念珠藻的Fv/Fm,且抑制程度随UV-B强度的增加而增强。但随着培养时间的延长,抑制程度逐渐变小,最终恢复到对照水平。在同一UV-B辐射水平下,高浓度C02明显提高了普通念珠藻的Fv/Fm。在早期培养阶段,高剂量UV-B辐射降低了普通念珠藻最大光合作用速率、光合作用效率、呼吸作用速率、无机碳饱和的最大光合速率,增大了光饱和点和光补偿点。高浓度C02提高了光饱和的最大光合作用速率、光合作用效率、呼吸作用速率,但降低了光饱和点和光补偿点。（4） ntca基因在培养的第二和八天相对于第一天有显著的降低,尤其是在培养的第八天,无论加富CO2与否,UV-B辐射显著促进了ntca的表达。各处理组ntca基因在第八天的表达差异,在psb和rbcL基因中也出现相似的差异。psb和rbcL基因的表达随着培养时间的改变而改变,总体类似于ntca基因。总之,C02和UV-B影响着普通念珠藻的生长、生理、基因表达。

关键词： CO2 UV-B 普通念珠藻生长光合作用

基于果核壳的元素和稳定同位素比值测定及车厘子产地分析

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现代食品科技 2023年第2期39卷 313-318页

作者：侯建波洪灯张明哲张晓峰谢文祝泽龙史颖珠张文华浙江省检验检疫科学技术研究院浙江杭州310016 杭州海关技术中心浙江杭州310016

该研究应用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),元素分析-稳定同位素比质谱仪(EA-IRMS)对车厘子果核壳中37种元素含量和氢、氧、碳、氮稳定同位素比值进行测定,并应用于车厘子产地分析中。车厘子去果肉和果仁后,将果核壳烘干并研磨成粉末,... 详细信息

该研究应用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),元素分析-稳定同位素比质谱仪(EA-IRMS)对车厘子果核壳中37种元素含量和氢、氧、碳、氮稳定同位素比值进行测定,并应用于车厘子产地分析中。车厘子去果肉和果仁后,将果核壳烘干并研磨成粉末,微波消解后通过ICP-MS对元素含量进行测定,果核壳粉末通过元素分析-稳定同位素比质谱仪对氢、氧、碳、氮稳定同位素比值(δ^(2)H、δ^(18)O、δ^(13)C和δ^(15)N)进行测定。应用上述方法对澳大利亚、美国、新西兰、智利和中国的车厘子样品进行元素含量和稳定同位素比值的测定,并对检测结果进行方差分析、主成分分析、聚类分析和判别分析,对车厘子产地的归属进行研究。研究结果表明基于车厘子果核壳的元素含量和稳定同位素比值综合分析,可以对车厘子产地进行区分,其中Mn、Co、Rb、Sr、Ba和δ^(2) H组合指标整体交叉检验判别准确率92.1%。

关键词：车厘子元素稳定同位素比值

高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法快速筛查保健食品中的西布曲明及其5种衍生物

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色谱 2019年第11期37卷 1173-1178页

作者：洪灯谢文侯建波胡晓莉史颖珠李杰浙江省检验检疫科学技术研究院

建立了高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q/Orbitrap HRMS)快速筛查保健食品中的西布曲明及其5种衍生物的方法。样品经甲醇超声提取,高速离心,Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)分离,以甲醇与0.15%(v/v)甲酸水... 详细信息

建立了高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(HPLC-Q/Orbitrap HRMS)快速筛查保健食品中的西布曲明及其5种衍生物的方法。样品经甲醇超声提取,高速离心,Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,3μm)分离,以甲醇与0.15%(v/v)甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,正离子全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS^2)模式下进行质谱分析,一级高分辨准分子离子峰定量。8 min内完成对样品中分析物的分离和高精度一级、二级扫描,得到准确质量数和准确碎片离子信息。实验结果表明,6种化合物的精确质量相对偏差均小于1×10^-6,在0.5~20.0μg/L范围内线性相关系数大于0.999,定量限为25μg/kg,回收率在93.5%~103.5%,相对标准偏差在1.5%~7.7%,本方法具有前处理简单、快速、准确、高灵敏度、高选择性等特点,可用于保健食品中西布曲明及其衍生物等减肥类非法添加物的定性筛查和定量分析。

关键词：高效液相色谱四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱西布曲明衍生物保健食品

高效液相色谱法检测塑料食品接触材料中的双氰胺

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化学通报 2015年第4期78卷 381-383页

作者：洪灯姜士磊陈峰义乌市检验检疫科学技术研究院义乌322000

建立了使用高效液相色谱法检测塑料食品接触材料中双氰胺的分析方法。采用4%乙酸提取样品、色谱柱分离、紫外检测器检测、外标法定量测定双氰胺残留。双氰胺在质量浓度为0.1~5.0 mg/L范围内线性良好,相关系数为0.9996。双氰胺的最低仪... 详细信息

建立了使用高效液相色谱法检测塑料食品接触材料中双氰胺的分析方法。采用4%乙酸提取样品、色谱柱分离、紫外检测器检测、外标法定量测定双氰胺残留。双氰胺在质量浓度为0.1~5.0 mg/L范围内线性良好,相关系数为0.9996。双氰胺的最低仪器检出限为5μg/L,方法的定量下限为0.40mg/kg,样品加标的回收率在94.4%~98.0%之间,相对标准偏差小于1.0%。该方法具有样品处理简单方便、灵敏度高、分析时间短等优点,可以满足塑料食品接触材料中双氰胺残留的测定,并为进出口塑料餐具中双氰胺残留量的检验提供依据。

关键词：双氰胺高效液相色谱塑料食品接触材料

固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中3种大麻素含量

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中国口岸科学技术 2023年第7期5卷 56-63页

作者：曹丹洪灯黄炜朱倩应慧肖道清金华海关综合技术服务中心金华321015 杭州海关技术中心杭州310063 宁波海关技术中心宁波315012

本研究建立了一种固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中3种大麻素含量的方法。样品通过甲醇或乙腈饱和的正己烷/正己烷饱和的乙腈提取,固相萃取净化,以C18色谱柱分离,经二极管阵列检测器测定,外标法定量。结果显示,该方法在0.1~5.0 mg/... 详细信息

本研究建立了一种固相萃取-高效液相色谱法测定化妆品中3种大麻素含量的方法。样品通过甲醇或乙腈饱和的正己烷/正己烷饱和的乙腈提取,固相萃取净化,以C18色谱柱分离,经二极管阵列检测器测定,外标法定量。结果显示,该方法在0.1~5.0 mg/L浓度范围内线性相关系数(r^(2))均大于0.9994,方法定量限为5 mg/kg。对不同基质进行1倍、2倍和10倍定量限3个浓度水平的加标回收试验,3种大麻素的回收率为86.4%~108.0%,相对标准偏差不超过4.83%(n=6)。结果表明,该方法操作方便、灵敏度高、检测速度快、适用性强,可作为化妆品中大麻素含量的快速定量分析方法。

关键词：化妆品大麻素固相萃取高效液相色谱

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淋洗类化妆品中塑料微珠的测定

香料香精化妆品 2023年第6期 147-151页

作者：洪灯谢文胡起立高丽红徐可刘婷浙江省检验检疫科学技术研究院浙江杭州310024 杭州海关技术中心浙江杭州310024

采用乙醇水溶液对洁面乳、沐浴露、磨砂膏等淋洗类化妆品进行加热分散,定性滤纸对固体颗粒进行过滤提取,红外光谱定性分析,并对红外光谱鉴定为塑料材质的颗粒再进行热重分析(TGA)和差示扫描量热分析(DSC),提高定性分析结果的可靠性。结... 详细信息

采用乙醇水溶液对洁面乳、沐浴露、磨砂膏等淋洗类化妆品进行加热分散,定性滤纸对固体颗粒进行过滤提取,红外光谱定性分析,并对红外光谱鉴定为塑料材质的颗粒再进行热重分析(TGA)和差示扫描量热分析(DSC),提高定性分析结果的可靠性。结果表明:10种淋洗类化妆品中含有固体颗粒,其中1种固体颗粒鉴别为聚乙烯塑料,其余9种为植物纤维素。采用激光粒度仪对聚乙烯塑料的粒度分布进行了考察,80%微粒粒度集中在150~600μm;采用超景深显微镜对聚乙烯塑料的微观尺度进行分析,塑料颗粒呈现明显球形状态。该标准化的分析操作方法能满足淋洗类化妆品中塑料微珠的定性测定需求,并为淋洗类化妆品中塑料微珠的管控提供技术支撑。

关键词：红外光谱淋洗类化妆品塑料微珠热重分析(TGA) 差示扫描量热分析(DSC) 粒度分析