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中药碳点的合成及其在生物成像和医学治疗方面的应用

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化学进展 2023年第5期35卷 655-682页

作者：何静陈佳邱洪灯中国科学院兰州化学物理研究所中国科学院大学

碳点(Carbon dots, CDs)作为一类粒径小于10 nm新型零维光致发光纳米材料，具备可调荧光发射和激发波长，良好的光稳定性、水溶性和生物相容性、低毒性等显著优势，近年来得到了学者们广泛关注。以富含多种活性成分并可发挥多种药效作... 详细信息

碳点(Carbon dots, CDs)作为一类粒径小于10 nm新型零维光致发光纳米材料，具备可调荧光发射和激发波长，良好的光稳定性、水溶性和生物相容性、低毒性等显著优势，近年来得到了学者们广泛关注。以富含多种活性成分并可发挥多种药效作用的中药(Traditional Chinese Medicines, TCM)为碳源，制备出具有一些特殊功能的中药CDs(TCM-CDs),进而有望发挥出更大的药用价值。本文详细介绍了中药CDs的合成方法及每种合成方法的优缺点，全面综述了中药碳点在生物成像和医学治疗方面的最新研究进展，并对中药CDs研究的重要性及面临的主要问题及挑战和未来的发展方向进行了展望。

关键词：碳点中药合成方法生物成像医学治疗

大气CO2浓度升高和UV-B增强对普通念珠藻生长和光合作用影响的研究

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大气CO2浓度升高和UV-B增强对普通念珠藻生长和光合作用影响的研究

作者：洪灯华中农业大学

学位级别：硕士

陆生固氮蓝藻是某些极端环境及氮源营养缺乏生态系统中的主要初级生产者,未来环境变化如何影响其生产力和固氮活性对这些生态系统将产生重大影响。全球环境正经受着巨大变化,C02升高和UV-B增强将在很长一段时间内同时存在,它们对陆生蓝... 详细信息

陆生固氮蓝藻是某些极端环境及氮源营养缺乏生态系统中的主要初级生产者,未来环境变化如何影响其生产力和固氮活性对这些生态系统将产生重大影响。全球环境正经受着巨大变化,C02升高和UV-B增强将在很长一段时间内同时存在,它们对陆生蓝藻的影响如何,值得关注。本课题以一种广泛分布的陆生固氮蓝藻-普通念珠藻(Nostoc commune)为实验材料,在室内研究了CO2倍增和UV-B增强对其生长、生化组分、光合生理和相关光合基因表达的影响。以了解在未来C02升高和UV-B增强环境下,固氮蓝藻的生物量将如何变化,并从生化、生理和基因表达等方面阐述其可能的原因。另外,本文还对人工UV光源中的UV-A和UV-C的生物学效应和滤除方法进行了研究。主要结果如下：(1)铬酸钾溶液浓度和pH影响其对UV-B的透过和对UV-A及UV-C的吸收。0.4mM(pH为8)的铬酸钾溶液能同时有效滤除UV光源中的UV-A和UV-C,并且保持对UV-B较高的透过性。用自制的的石英容器(35 cm长、1 cm宽和20 cm高)盛满铬酸钾溶液过滤UV光源,能准确快速地研究UV-B的生物学效应,并可重复多次利用,方便经济。(2)无论是在350还是1500μLL-1CO2浓度下,低剂量UV-B辐射(9KJm-2d-1)对普通念珠藻以单位体积干重表示的生长无显著影响;而高剂量UV-B辐射(20 KJm-2 d-1)则显著抑制生长,且抑制程度随C02浓度升高而降低。在同一UV-B辐射水平下,高浓度CO2(1500μL-1)明显促进了普通念珠藻的生长,且促进程度随UV-B强度的增大而增大。在高浓度CO2和高剂量UV-B下,普通念珠藻的生长依然优于在大气CO2和无UV-B辐射处理的普通念珠藻,这表明在未来大气CO2浓度升高的情况下,单纯UV-B增强可能并不会使普通念珠藻的现有生物量减少。在不同UV-B和C02作用下,普通念珠藻单位干重的叶绿素含量和单位体积干重的变化趋势相似。即高剂量的UV-B辐射显著降低了普通念珠藻单位干重的叶绿素含量,而高浓度C02则提高了普通念珠藻单位干重的叶绿素含量。UV-B辐射诱导了普通念珠藻中三苯基咪唑类氨基酸(MAAs)的大量合成。普通念珠藻单位干重的MAAs含量随UV-B强度增大和照射时间的延长而逐步稳定增加。在高剂量UV-B辐射下,C02浓度升高明显促进了MAAs的合成,而在低剂量UV-B下,则促进作用并不明显。(3)UV-B辐射明显抑制了普通念珠藻的Fv/Fm,且抑制程度随UV-B强度的增加而增强。但随着培养时间的延长,抑制程度逐渐变小,最终恢复到对照水平。在同一UV-B辐射水平下,高浓度C02明显提高了普通念珠藻的Fv/Fm。在早期培养阶段,高剂量UV-B辐射降低了普通念珠藻最大光合作用速率、光合作用效率、呼吸作用速率、无机碳饱和的最大光合速率,增大了光饱和点和光补偿点。高浓度C02提高了光饱和的最大光合作用速率、光合作用效率、呼吸作用速率,但降低了光饱和点和光补偿点。(4) ntca基因在培养的第二和八天相对于第一天有显著的降低,尤其是在培养的第八天,无论加富CO2与否,UV-B辐射显著促进了ntca的表达。各处理组ntca基因在第八天的表达差异,在psb和rbcL基因中也出现相似的差异。psb和rbcL基因的表达随着培养时间的改变而改变,总体类似于ntca基因。总之,C02和UV-B影响着普通念珠藻的生长、生理、基因表达。

关键词： CO2 UV-B 普通念珠藻生长光合作用

小鼠GV期卵母细胞核质比、ATP8表达的研究及其RNAi载体构建

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小鼠GV期卵母细胞核质比、ATP8表达的研究及其RNAi载体构建

作者：洪灯山西医科大学

学位级别：硕士

目的:1、分析小鼠卵巢生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞的核质比,探讨核质比在卵母细胞成熟发育中的作用;2、分析GV期卵母细胞线粒体ATP合酶亚基8(ATP8)的表达及其生物信息学数据,研究卵母细胞成熟与线粒体功能的关系;3、构建ATP... 详细信息

目的:1、分析小鼠卵巢生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞的核质比,探讨核质比在卵母细胞成熟发育中的作用;2、分析GV期卵母细胞线粒体ATP合酶亚基8(ATP8)的表达及其生物信息学数据,研究卵母细胞成熟与线粒体功能的关系;3、构建ATP8基因的RNA干扰载体,为研究ATP8基因在卵母细胞成熟发育过程中的作用及其对卵母细胞发育参数—核质比的调控奠定基础。方法:1、用挤压法从卵巢中分离获得GV期卵母细胞并置leica Mps 60倒置显微镜下拍照,测量系统经标准图片校正后,测量GV期卵母细胞面积和半径,按核质比(nucleus-plasma ratio,NP)公式:NP=V/(V-V),式中V为核的体积,V为细胞的体积,由V=4/3pr分别求得,计算出GV期卵母细胞的核质比;2、以Genbank(NC05089)公布的线粒体ATP8序列为参考,设计两对引物,用RT-PCR检测GV期单个卵母细胞中ATP8基因的表达:其中,cDNA的合成分两种方法进行:一是将GV期单个卵母细胞直接进行RT合成cDNA,二是先用DNA酶加EcoRⅠ酶祛除mtDNA和核DNA后再进行RT;回收产物构建克隆质粒并测序;3、用Blastn、VECTOR NIT 9.0、RNAdraw、Treeview等工具对测序结果进行生物信息学分析,在此基础上用RNA聚合酶Ⅲ启动子表达siRNA法构建ATP8的RNA干扰载体。结果1、分离获得GV期卵母细胞51枚,测得卵径为40.940±3.341μm,核径为15.020±2.236μm,其核质比为0.054±0.019;2、RT-PCR结果显示ATP8基因在GV期卵母细胞中表达。克隆测序显示所测昆明小鼠ATP8序列与Genbank序列完全一致;3、blastp序列比对和mRNA二级结构图均显示12种动物间的ATP8氨基酸序列和ATP8核酸序列有较大差异,其中不同品种小鼠间也有差异;4、不同物种ATP8核苷酸序列构建出的分子进化树中,小鼠与棕熊进化距离较远,与田鼠、家猫进化距离相对较近。5、设计ATP8基因干扰序列并且重组质粒经过限制性内切酶和测序鉴定,表明成功构建了pGPH1/GFP/Neo-mouse-shATP8 RNA干扰质粒。结论1、本文测得小鼠GV期卵母细胞的核质比为0.054±0.019,与文献报道其它物种同时相核质比在相同范围内,提示核质比是卵母细胞发育成熟的重要指标;2、线粒体ATP8基因在GV期卵母细胞中有表达,提示GV期卵母细胞发育成熟需要线粒体的参与;3、氨基酸序列比对和mRNA二级结构分析均显示,ATP8序列在多种哺乳动物间、不同品种小鼠间有较大差异;4、成功设计并构建了小鼠线粒体ATP8基因RNA干扰载体,为进一步研究ATP8在小鼠卵母细胞发育过程中的作用奠定了基础。

关键词：小鼠生发泡卵母细胞 ATP合酶亚基8 RNA干扰

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基于碳点的色谱分离材料研究进展

色谱 2023年第10期41卷 825-834页

作者：陈佳邱洪灯中国科学院兰州化学物理研究所中国科学院西北特色植物资源化学重点实验室甘肃兰州730000

色谱分离的核心是色谱柱,色谱柱的灵魂是色谱分离材料,色谱分离材料的种类和性质直接决定色谱的分离模式和分离性能。碳点作为一类新型的零维碳纳米材料,自2004年被首次报道以来,凭借其广泛的原料来源、低毒性、易于功能化、优异的生物... 详细信息

色谱分离的核心是色谱柱,色谱柱的灵魂是色谱分离材料,色谱分离材料的种类和性质直接决定色谱的分离模式和分离性能。碳点作为一类新型的零维碳纳米材料,自2004年被首次报道以来,凭借其广泛的原料来源、低毒性、易于功能化、优异的生物相容性和抗光漂白性等独特性能,已广泛应用于生物成像、发光二极管、传感、催化等领域,并呈现出蓬勃的生机。同时,碳点还具有设计性强、粒径大小适中等优势,将其引入色谱分离新材料中开发高选择性的色谱固定相具有重要意义。本文首先简要回顾了碳点的分类、合成策略、发展历程,然后聚焦于色谱分离材料领域,系统综述了近年来碳点在液相色谱固定相(含亲水色谱、反相色谱、混合色谱、手性色谱等)、气相色谱固定相和毛细管电色谱固定相方面的最新研究进展,特别强调了各类固定相的制备方法及其应用,并对碳点在色谱分离材料领域的发展前景和未来努力方向进行了分析和展望,期望为基于碳点的色谱分离新材料的理性设计及应用提供一些参考。

关键词：碳点固定相液相色谱气相色谱毛细管电色谱

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环境侵权司法鉴定问题研究

环境侵权司法鉴定问题研究

作者：李洪灯复旦大学

学位级别：硕士

环境侵权司法鉴定,是指在环境侵权诉讼活动中,依法取得有关环境司法鉴定资格的鉴定机构和鉴定人,接受法院或当事人委托,依据环境保护法律法规和有关国家、部门、行业标准以及有关环境科学知识,对影响环境的物理指标、化学指标和生态系... 详细信息

环境侵权司法鉴定,是指在环境侵权诉讼活动中,依法取得有关环境司法鉴定资格的鉴定机构和鉴定人,接受法院或当事人委托,依据环境保护法律法规和有关国家、部门、行业标准以及有关环境科学知识,对影响环境的物理指标、化学指标和生态系统等环境侵权纠纷诉讼涉及的专门性、专业性问题进行检验、鉴别和判断,并向法庭提供鉴定意见的活动。近年来,我国环境形势严峻,环境污染和生态破坏现象触目惊心,由此而导致的环境纠纷案件也急剧攀升。各地法院顺势而为,纷纷设立了专门性的环境保护审判机构,意欲集中审理各类环境案件。然而,环境侵权的受害人真正通过诉讼途径解决问题的情况却少之又少。其中重要的原因就是我国环境侵权司法鉴定立法的严重滞后,以及学术研究成果的极度匮乏,导致了实务中环境侵权案件立案难、举证难、定损难以及责任认定难的局面。本文试图在考察两大法系环境侵权司法鉴定制度和实践,并分析我们环境侵权司法鉴定现状和存在问题的基础上,提出可行性建议和立法构想。本文分引言、正文和结语三个部分。引言部分,主要是引出问题,并简要分析我国环境侵权司法鉴定的现实状况和问题,并简要阐述了我国环境侵权司法鉴定的立法状况和学术研究情况。第一章,关于环境侵权司法鉴定的基本理论。笔者主要分析了环境侵权的概念和特征,司法鉴定的概念、特征、分类、原则以及鉴定意见的证据属性,环境侵权司法鉴定的概念、特征、内容、层次及研究内容。第二章,我国环境侵权司法鉴定的发展与现状。通过对环境形势严峻导致环境纠纷频发,但通过诉讼途径解决的却比较少这个现实矛盾和困惑,笔者详细分析了我国鉴定机构的发展现状及现行环境侵权司法鉴定制度。第三章,我国环境侵权司法鉴定之完善。在前文对现状分析的基础上,笔者探讨了我国环境侵权司法鉴定制度存在的诸多问题。通过调研和文献研究的方法,分析了我国个别法院审理环境侵权案件的实践创新。针对现存问题和实践创新,结合两大法系的环境司法鉴定制度和实践,从立法、鉴定管理、鉴定实施、鉴定责任以及鉴定意见适用等角度提出了一些完善我国环境侵权诉讼法律制度的立法构想。

关键词：司法鉴定环境侵权司法鉴定司法鉴定人鉴定机构

基于λ核酸外切酶辅助放大的化学发光传感器用于DNA的灵敏检测

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分析化学 2015年第10期43卷 1513-1519页

作者：陈佳郭芸芸陈桥邱洪灯中国科学院兰州化学物理研究所西北特色植物资源化学重点实验室/甘肃省天然药物重点实验室西南交通大学材料科学与工程学院材料先进技术教育部重点实验室

基于G-四链体/血红素DNA酶的高催化活性以及λ核酸外切酶（λexo）的辅助放大功能,以17个碱基的DNA片段作为模型分析物,构建了一种快速、灵敏、特异性好的新型Luminol-H2O2-G-四链体/血红素DNA酶化学发光传感体系。考察了λexo用量、Lum... 详细信息

基于G-四链体/血红素DNA酶的高催化活性以及λ核酸外切酶（λexo）的辅助放大功能,以17个碱基的DNA片段作为模型分析物,构建了一种快速、灵敏、特异性好的新型Luminol-H2O2-G-四链体/血红素DNA酶化学发光传感体系。考察了λexo用量、Luminol浓度、H2O2浓度、溶液p H值对体系化学发光强度的影响。在最佳实验条件下,即:p H=9.0,10 unitsλexo,1.0×10!3mol/L Luminol,3.0×10!2mol/L H2O2,测得DNA在2.0×10!12;.0×10!9mol/L的浓度范围内与Luminol的相对化学发光强度之间呈现良好的线性关系,检出限（3σ）为0.7×10!13mol/L。本方法可以区分不同错配的核酸序列,并可用于复杂生物样品的分析。

关键词： λ核酸外切酶 G-四链体/血红素DNA酶化学发光 DNA

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“色谱分离新材料专辑”引言

色谱 2023年第10期41卷 823-824页

作者：邱洪灯陈佳中国科学院兰州化学物理研究所

随着人类科学技术的不断进步,人们面临的分析样品日益复杂,色谱作为复杂样品的重要分离分析技术之一,在化学化工、生命分析、环境监测、材料科学、生物医药、食品安全等诸多领域扮演着越来越重要的角色。色谱分离的核心是色谱柱,色谱柱... 详细信息

随着人类科学技术的不断进步,人们面临的分析样品日益复杂,色谱作为复杂样品的重要分离分析技术之一,在化学化工、生命分析、环境监测、材料科学、生物医药、食品安全等诸多领域扮演着越来越重要的角色。色谱分离的核心是色谱柱,色谱柱的灵魂是色谱分离材料。色谱分离的选择性和效率极大程度上取决于所采用的色谱分离材料。因此,色谱分离材料一直是色谱研究领域的前沿和热点之一。

关键词：色谱分离分离分析技术人类科学技术分析样品生物医药食品安全复杂样品环境监测

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槲皮素对牙本质酸蚀性磨损的影响及机制研究

槲皮素对牙本质酸蚀性磨损的影响及机制研究

作者：洪灯伟福建医科大学

学位级别：硕士

目的:牙酸蚀症(dental erosion)越来越成为影响人类口腔健康的一大疾病,其可造成牙釉质的广泛丧失,进而侵蚀牙本质。由于软化的牙本质耐磨性显著降低,易在机械力的作用下发生病理性丧失。因此,如何延缓甚至阻止牙本质酸蚀性磨损已经成... 详细信息

目的:牙酸蚀症(dental erosion)越来越成为影响人类口腔健康的一大疾病,其可造成牙釉质的广泛丧失,进而侵蚀牙本质。由于软化的牙本质耐磨性显著降低,易在机械力的作用下发生病理性丧失。因此,如何延缓甚至阻止牙本质酸蚀性磨损已经成为一个重要议题。槲皮素是一种天然黄酮类化合物,兼具牙本质源性基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)抑制及胶原交联作用,有望成为减少牙本质酸蚀性磨损的药物。根据现有文献及课题组前期研究,我们推论槲皮素可黏附于牙本质表面并渗入牙本质表层下,通过抑制牙本质源性MMPs的活性,以及通过交联作用增强牙本质胶原纤维的机械性能,从而提高牙本质的抗酸蚀性磨损性能。因此本研究的目的是1利用原位实验模型评估槲皮素对牙本质酸蚀性磨损的影响。2评估槲皮素的稳定性,探索槲皮素对牙本质黏附性能的影响因素,包括溶剂的pH、作用时间以及浓度,并评估槲皮素对牙本质的渗透深度。3评估槲皮素对外源性及牙本质源性性MMPs的抑制活性,以及其对牙本质胶原机械性能的影响。方法:1根据不同的处理溶液将牙本质试件随机分为6组(n=10),其中阴性对照组为去离子水和无水乙醇,阳性对照组为120μg/ml氯己定(chlorhexidine,CHX),实验组为75μg/ml、150μg/ml及300μg/ml的槲皮素溶液(以下简称Q75、Q150、Q300)。招募15名志愿者,制作颌垫式牙托(每个牙托包含4个牙本质试件),采用口内原位循环酸蚀再矿化+口外刷磨的方案进行试件处理。每天进行4次循环酸蚀(erosion cycle),每次5 min,在每天的第一次及最后一次酸蚀后30 min进行刷磨实验,刷磨次数为30次,连续7天。采用表面轮廓仪检测,验证槲皮素对牙本质酸蚀性磨损的影响。2以未调节pH的槲皮素为参照(槲皮素-乙醇原液),通过配置pH分别为3、5、7.4、8、10的槲皮素-乙醇溶液,借助紫外-可见光分光光度计(UV-visible spectrophotometer,UV-Vis)检测图谱变化,筛选出槲皮素稳定性较佳的pH值;根据以上结果,制备牙本质粉末,经槲皮素处理后,通过UV-Vis检测各组上清液吸光度,评估pH、浓度(75、150、300μg/ml)以及作用时间(1、2、4 min)对槲皮素黏附性能的影响;以槲皮素特征峰为参照,借助激光共聚焦拉曼光谱仪(laser confocal Raman spectrophotometer,LCRS)绘制经槲皮素处理后牙本质的2D拉曼光谱图像,检测槲皮素在牙本质表面的分布情况。任意选取2D拉曼图像中的一点,沿Z轴(深度)方向进行拉曼光谱扫描,绘制3D拉曼图像,评估槲皮素对牙本质的渗透深度。3以1,10-菲啰啉、CHX为阳性对照组,去离子水、无水乙醇为阴性对照组,Q75、Q150、Q300为实验组,向黑色96孔板中依次加入处理液(每组5个孔),MMP-8(1μg/ml)以及荧光底物,孵育后,分别在0 h、24 h采用酶标仪测取荧光信号强度,评估槲皮素对MMP-8的抑制活性。从Pub Chem数据库下载获得槲皮素的分子结构,从RCSB PDB数据库下载获得MMP-8的晶体结构,采用Auto Dock 4.2进行分子对接,探究槲皮素与MMP-8相互作用的方式及结合模式;制备7 mm×1.7 mm×0.7 mm的牙本质试件,根据不同的处理液随机分为6组(n=3),其中阳性对照组为CHX,阴性对照组为去离子水、无水乙醇,实验组为Q75、Q150、Q300。各组试件经处理液处理10 min后,均用柠檬酸酸蚀2 min,再将100μl荧光染料液滴于牙本质试件表面,孵育24 h后,用激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)获取30μm厚的光学切片,定量检测槲皮素对牙本质源性MMPs的抑制活性;制备0.5 mm×0.5mm×10 mm的牙本质试件,根据不同的处理液随机分为5组(n=12),阴性对照组为去离子水及无水乙醇,实验组为Q75、Q150、Q300。各组试件经处理液处理60 min后,采用微拉伸测试仪以1 mm/min的加载速度进行拉伸试验,记录试件断裂时的最大载荷,千分尺测量断裂面的实际面积,计算微拉伸强度。结果:1原位实验结果表明,与阴性对照组相比,所有实验组的表面丧失均显著降低(P均<0.001),其中Q150、Q300的表面丧失显著低于CHX(P均<0.05)。2在槲皮素稳定性的评估实验中,与槲皮素-乙醇原液相比,pH=7.4、5、3的槲皮素-乙醇溶液波形无明显变化,pH=10、8的槲皮素-乙醇溶液波形明显改变。pH=7.4、5的槲皮素-乙醇溶液在72 h内,最大吸收峰稍变弱,pH=3的槲皮素-乙醇

关键词：牙酸蚀症牙本质基质金属蛋白酶槲皮素

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洪顺珠宝企业经营战略研究

洪顺珠宝企业经营战略研究

作者：洪灯财云南大学

学位级别：硕士

随着市场经济的不断发展,珠宝市场的竞争力度不断加大,尤其是翡翠珠宝企业数目不断增加,无论是消费者还是经营者,都容易在珠宝经济发展过程中失去方向。洪顺珠宝如何在强烈的竞争中立于不败之地?如何在珠宝企业千篇一律中与众不同?如何... 详细信息

随着市场经济的不断发展,珠宝市场的竞争力度不断加大,尤其是翡翠珠宝企业数目不断增加,无论是消费者还是经营者,都容易在珠宝经济发展过程中失去方向。洪顺珠宝如何在强烈的竞争中立于不败之地?如何在珠宝企业千篇一律中与众不同?如何有效保障消费者主要的人脉?如何从采石、加工、销售、售后服务等产销一体化的过程中取得优胜?这就需要洪顺珠宝对自己企业进行深思和反省,确立适合自己的实情、消费者易于接受的、适合在云南发展又辐射全国同时可走向国际的发展经营战略。洪顺珠宝的经营战略涉及采、产、销、服务等各个环节。首先,洪顺珠宝在加工、采购的过程中,坚守质量战略,以质量赢得竞争力,且要搭配分配翡翠珠宝的档次、款式、品种,以多种多样的产品去适应不同消费者的需求。其次,洪顺珠宝需要建立广泛的营销网络,通过直营店、连锁店、互联网网店、会所等不同的形式,让洪顺珠宝迈上一个更完善、更规范、更成熟的阶段,采取合理的营销战略,是增强洪顺珠宝实力的重要途径。再次,还要建立更有人情味的营销方式,提高竞争力。洪顺珠宝须提供更为规范、极具人情味的售前售后服务保障,要争取成为消费者的口碑中的胜者。最后,依据实际情况,进行合理的广告,发展提高洪顺珠宝的影响力。洪顺珠宝的经营战略,建立在对外部与内部环境的详细分析上,通过对市场的了解,掌握实情,同时结合自身发展状况,依据不同层次消费者的需求,从采、产、销、售后的过程中,建立洪顺珠宝特有的既适合高消费群体又适合普通民众的特色珠宝企业。

关键词：洪顺珠宝经营战略研究