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PCR方法快速检测一些常见医学真菌

中国皮肤性病学杂志 2000年第4期14卷 227-229页

作者：洪少林郭英兰雷鹏程北京医科大学第三医院皮肤科北京100083 中国科学院微生物研究所

目的　为选择一种快速、敏感和特异的方法来检测临床感染的真菌。方法　选取真菌 18SrDNA序列中两个片段设计引物 ,对 12种菌株进行PCR扩增 ,均扩增出长约 3 10bp产物。对一些临床常见细菌扩增均无反应。对酵母相真菌白念珠菌、新生隐... 详细信息

目的　为选择一种快速、敏感和特异的方法来检测临床感染的真菌。方法　选取真菌 18SrDNA序列中两个片段设计引物 ,对 12种菌株进行PCR扩增 ,均扩增出长约 3 10bp产物。对一些临床常见细菌扩增均无反应。对酵母相真菌白念珠菌、新生隐球菌进行敏感性实验检测。结果　发现二者PCR最小检出量均为菌体数达每个反应体系 10 3 。本实验过程总耗时 3 6h以内。结论　本实验方法可快速特异性检测一些常见医学真菌。

关键词：真菌聚合酶链反应检测

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7种杀菌剂对小麦赤霉菌的抑制作用

中国植保导刊 2012年第11期32卷 50-52页

作者：张长青翟平平洪少林杨高峰长江大学农学院/涝渍地工程中心湖北荆州434025

采用菌丝生长速率法,测定了7种杀菌剂对小麦赤霉菌的抑制作用。结果表明,咪鲜胺的抑菌效果最好,EC50为0.062μg/mL;其次是氰烯菌酯、戊唑醇、多.酮.福、多菌灵、己唑醇,EC50分别是0.213、0.349、0.446、0.593、0.679μg/mL。戊.福的抑... 详细信息

采用菌丝生长速率法,测定了7种杀菌剂对小麦赤霉菌的抑制作用。结果表明,咪鲜胺的抑菌效果最好,EC50为0.062μg/mL;其次是氰烯菌酯、戊唑醇、多.酮.福、多菌灵、己唑醇,EC50分别是0.213、0.349、0.446、0.593、0.679μg/mL。戊.福的抑菌效果相对较差,EC50为1.684μg/mL。

关键词：杀菌剂小麦赤霉菌抑菌作用

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治疗重症药疹临床分析

中国麻风皮肤病杂志 2002年第3期18卷 254-255页

作者：洪少林刘跃华曹鸿伟王宝玺中国医学科学院北京协和医院皮肤科 100730 郑州铁路局中心医院皮肤科 450052

重症药疹是皮肤科少见的、威胁生命的疾病,本文报道近1年来我科收治的重症药疹7例,包括重症多形红斑(StevensJohnson Syndrome,SJS)6例和中毒性表皮坏死松解症(Toxic Epidermal Necrolysis,TEN)1例,并讨论本病的治疗.

关键词：重症药疹重症多形红斑中毒性表皮坏死松解症 SJS TEN 治疗

北京地区尖锐湿疣患者皮损中人乳头瘤病毒的检测和分型

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中国医学科学院学报 2002年第4期24卷 397-400页

作者：洪少林王家璧刘跃华司静懿许雪梅郭秀婵曾毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院皮肤科北京100730 Department of Biophysics Institute of Basic Medical SciencesCAMSand PUMCbeijing100005 Institute of Virology CAMPbeijing100052

目的分析北京地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的型别和发病特点,比较普通患者和抵抗力弱的患者的发病差异。方法采用PCR和RFLP方法分析HPV型别,对于难以通过酶切鉴定的PCR产物,构建重组测序质粒,检索GenBank进一步分型鉴定。结果普通患者H... 详细信息

目的分析北京地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的型别和发病特点,比较普通患者和抵抗力弱的患者的发病差异。方法采用PCR和RFLP方法分析HPV型别,对于难以通过酶切鉴定的PCR产物,构建重组测序质粒,检索GenBank进一步分型鉴定。结果普通患者HPV6型为主要感染型别,其次是HPV11型。HPV6型患者年龄较HPV11和HPV6+HPV11型更低;而高龄患者和免疫抑制患者则以HPV11+HPV6的混合感染和HPV11感染为主。部分患者还检测出HPV16和HPV53感染。结论HPV6是尖锐湿疣的主要致病型别,但患者年龄比其他型别更低,而抵抗力弱的患者则多与HPV11的感染有关。一般存在于正常生殖道组织的HPV53也可致尖锐湿疣的发生。

关键词：北京人乳头瘤病毒尖锐湿疣流行病学发病特点 PCR 基因分型

申克孢子丝菌接种的无毛小鼠皮损处蛋白酶抑制剂的作用

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中国皮肤性病学杂志 1997年第5期11卷 268-269页

作者：雷鹏程洪少林吉池高志小川秀兴北京医科大学第三医院皮肤科 100083 日本国顺天堂大学医学院皮肤科

Chymostatin和 Pepstatin能分别抑制申克孢子丝菌产生的蛋白酶和 ,为了证明在孢子丝菌病中 Chymostatin和 Pepstatin能通过抑制这些酶的活性而抑制真菌的生长 ,我们研究了在小鼠的皮损上外用蛋白酶抑制剂的效应 ,用 0 .1% Chymostati... 详细信息

Chymostatin和 Pepstatin能分别抑制申克孢子丝菌产生的蛋白酶和 ,为了证明在孢子丝菌病中 Chymostatin和 Pepstatin能通过抑制这些酶的活性而抑制真菌的生长 ,我们研究了在小鼠的皮损上外用蛋白酶抑制剂的效应 ,用 0 .1% Chymostatin,0 .1% pepstatin和 0 .1% chymostatin+0 .1%pepstatin软膏涂于无毛小鼠的申克孢子丝菌接种部位与对照组相比 ,单用一种成分时 ,皮损处结节大小的变化曲线表现分轻度抑制 ,而用含 chymostatin和 pepstatin的软膏 ,则强烈地抑制了结节的形成。本研究不仅证明了两种蛋白酶对申克孢子丝菌在体内生长的作用。

关键词：皮损蛋白酶抑制剂孢子丝菌病申克孢子丝菌

无毛小鼠接种申克孢子丝菌检测抗申克孢子丝菌细胞外蛋白酶抗体研究

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中国皮肤性病学杂志 1998年第1期12卷 14-16页

作者：雷鹏程洪少林吉池高志小川秀兴北京医科大学第三医院皮肤科日本国顺天堂大学皮肤科

通过申克孢子丝菌接种无毛小鼠（Ｈａｉｒｌｅｓｍｉｃｅ）来检测两种细胞外蛋白酶的血清抗体。在小鼠皮内注射申克孢子丝菌并形成结节，镜下示真菌消失，并在每周通过酶联免疫吸附试验（ＥＩＡ）检测蛋白酶Ⅰ和Ⅱ的血清抗体。结果显示... 详细信息

通过申克孢子丝菌接种无毛小鼠（Ｈａｉｒｌｅｓｍｉｃｅ）来检测两种细胞外蛋白酶的血清抗体。在小鼠皮内注射申克孢子丝菌并形成结节，镜下示真菌消失，并在每周通过酶联免疫吸附试验（ＥＩＡ）检测蛋白酶Ⅰ和Ⅱ的血清抗体。结果显示抗体滴度与实验小鼠孢子丝菌病肉眼和镜下观察的变化趋势相一致。本试验证明了申克孢子丝菌在体内能产生蛋白酶Ⅰ和Ⅱ，而且蛋白酶的抗体可用于孢子丝菌病的血清学诊断。

关键词：抗体蛋白酶小鼠申克孢子丝菌

人乳头瘤病毒6型L1蛋白在原核表达体系中的表达

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临床皮肤科杂志 2003年第6期32卷 311-314页

作者：王家璧洪少林刘跃华李平川周玲曾毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院皮肤科北京100730 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

目的:比较人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1序列的变异,并筛选有代表性的分离标本进行重组HPV6L1蛋白的表达和抗原性检测。方法:根据不同临床特征选择主要致病型HPV6型8个分离标本,扩增L1基因,构建重组测序质粒。分析L1区的氨基酸序列变异状况,... 详细信息

目的:比较人乳头瘤病毒6型(HPV6)L1序列的变异,并筛选有代表性的分离标本进行重组HPV6L1蛋白的表达和抗原性检测。方法:根据不同临床特征选择主要致病型HPV6型8个分离标本,扩增L1基因,构建重组测序质粒。分析L1区的氨基酸序列变异状况,选择L1序列变异较大的临床分离标本,通过对HPV6L1基因的起始和终止端进行基因定点改造,连于表达载体质粒pET32a,在原核表达体系表达重组HPV6L1蛋白,并进行L1蛋白的抗原性检测。结果:HPV6型8个分离标本中有6个分离标本L1区的蛋白质一级结构中分别有1～3个氨基酸发生变异,原核表达重组L1蛋白可与HPV6L1抗体发生特异反应。说明HPV6L1序列的变异并未影响L1蛋白的抗原性。结论:本临床分离标本可提供发展HPV6L1蛋白和病毒样颗粒(VLP)疫苗的候选目的基因,并可通过原核表达体系表达重组HPVL1蛋白进行L1蛋白的免疫学分析,以及L1蛋白疫苗的研究。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒型内变异原核表达抗原性疫苗

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全身皮肤泛发性非何杰金恶性淋巴瘤1例

临床皮肤科杂志 1998年第1期27卷 53-55页

作者：周劲松高子芬高晶付文荣洪少林陈学荣北京医科大学附属第三临床医院皮肤科 100083 北京医科大学病理系

报告1例全身皮肤泛发性非何杰金恶性淋巴瘤。患者女性，34岁，全身皮肤起红斑、斑块6年，伴低热及腹腔、股股沟淋巴结肿大。皮肤活检组织病理改变为真皮内异型淋巴样细胞呈苔薛样浸润，间质血管增生明显，表皮内未见浸润。免疫组织化学... 详细信息

报告1例全身皮肤泛发性非何杰金恶性淋巴瘤。患者女性，34岁，全身皮肤起红斑、斑块6年，伴低热及腹腔、股股沟淋巴结肿大。皮肤活检组织病理改变为真皮内异型淋巴样细胞呈苔薛样浸润，间质血管增生明显，表皮内未见浸润。免疫组织化学、多聚酶链反应（PCR）和电镜检查均证实为T细胞淋巴瘤，埃伯斯坦病毒原位杂交（EBV－ISH）阴性。

关键词： NHL 淋巴瘤皮肤肿瘤 T细胞

小鼠实验性孢子丝菌病病理学研究——正常和免疫损害小鼠白细胞功能观察

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中国皮肤性病学杂志 1997年第6期11卷 340-341页

作者：雷鹏程洪少林吉池高志小川秀兴矢口均北京医科大学第三医院皮肤科 100083 日本国顺天堂大学医学部皮肤科

通过小鼠模型研究机体对申克孢子丝菌的防御机理。正常小鼠在接种申克孢子丝菌后 ,伴随着 PMNs的浸润 ,真菌发生裂解并逐渐消失 ;而裸鼠接种菌体后 ,在早期防御过程中因 PMNs杀伤活性的缺乏导致真菌繁殖扩散 ,直至动物死亡。

关键词：无胸腺裸鼠多形核白细胞孢子丝菌病病理