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巨桉SNAC基因家族的鉴定及其在非生物逆境下的表达分析

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农业生物技术学报 2024年第1期32卷 115-131页

作者：洪家都倪晓祥俞键烽吴梦洁赵爽程龙军浙江农林大学林业与生物技术学院/亚热带森林培育国家重点实验室

巨桉(Eucalyptus grandis)是我国南方重要用材树种，但其抗逆性较差，限制了其栽培范围的扩大和栽培效益的提高。NAC类转录因子是植物特有的转录因子家族，广泛参与植物生长、发育、代谢和逆境响应，其中非生物逆境响应相关的NAC被称为S... 详细信息

巨桉(Eucalyptus grandis)是我国南方重要用材树种，但其抗逆性较差，限制了其栽培范围的扩大和栽培效益的提高。NAC类转录因子是植物特有的转录因子家族，广泛参与植物生长、发育、代谢和逆境响应，其中非生物逆境响应相关的NAC被称为SNAC(stress-related NAC)。本研究在巨桉全基因组范围鉴定的166个NAC和文献报道的74个SNAC的基础上，通过进化分析，筛选EgrSNAC家族成员，并分析其基因、蛋白序列结构、染色体定位、共线性关系、基因重复情况和启动子的顺式作用元件，以及不同组织中的表达模式，并对巨桉幼苗进行低温、干旱、高盐、脱落酸(abscisic acid, ABA)和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate, MeJA)处理，利用qPCR分析EgrSNAC基因在这些逆境处理下的表达。结果表明，巨桉中共有22个EgrSNAC基因，分别属于ATAF、NAP和AtNAC3亚家族。除EgrSNAC20外，这些基因编码的蛋白均包含典型的NAM结构域的5个子域，对应Motif1～Motif5。22个基因分布在9条染色体上，有4个共线性基因对以及由11个EgrSNAC基因组成的2个串联重复基因区段。启动子顺式作用元件分析显示，EgrSNAC启动子上分布有多种逆境响应元件。EgrSNAC中串联重复基因的组织特异性表达模式类似。4℃低温处理不同时间的qPCR分析表明，除EgrSNAC1、EgrSNAC3和EgrSNAC22外，其他19个EgrSNAC表达均受低温诱导；对干旱有响应的有19个EgrSNAC，除EgrSNAC2、EgrSNAC5、EgrSNAC14和EgrSNAC21表达被抑制外，其他均被干旱诱导；高盐处理下，有19个EgrSNAC表达发生变化，且仅EgrSNAC21被高盐抑制。另外响应ABA(100μmol/L)处理的14个基因均被诱导；而MeJA(100μmol/L)处理下表达有变化的基因有13个为诱导型，4个为抑制型。本研究结果揭示了不同EgrSNAC基因与低温、干旱、高盐和ABA、MeJA等非生物逆境因子之间的关系，为进一步研究巨桉EgrSNAC基因资源提供了参考。

关键词：巨桉 SNAC基因家族非生物逆境表达

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巨桉EgrCIN1响应非生物逆境的分析

浙江农林大学学报 2022年第6期39卷 1194-1202页

作者：李芳燕夏晓雪吴梦洁洪家都程龙军浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300

【目的】对巨桉Eucalyptus grandis中特有的低温响应基因EgrCIN1 (Eucgr.B02882)序列及其表达特征进行分析,并探索其在植物低温响应中发挥的功能,以丰富桉树抗寒基因资源。【方法】利用生物信息学手段分析EgrCIN1基因、蛋白序列的特征... 详细信息

【目的】对巨桉Eucalyptus grandis中特有的低温响应基因EgrCIN1 (Eucgr.B02882)序列及其表达特征进行分析,并探索其在植物低温响应中发挥的功能,以丰富桉树抗寒基因资源。【方法】利用生物信息学手段分析EgrCIN1基因、蛋白序列的特征和启动子上的顺式作用元件信息;采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)技术分析EgrCIN1在巨桉不同组织及4℃不同时间、干旱、 300 mmol·L^(-1)1-氯化钠(NaCl)、 100μmol·L^(-1)脱落酸(ABA)和100μmol·L^(-1)茉莉酸甲酯(MeJA)处理下植株叶片中的表达特征;通过EgrCIN1::GFP载体瞬时转化烟草Nicotiana tabacum进行亚细胞定位;并构建CaMV35S启动子驱动的过表达载体异源转化拟南芥Arabidopsis thaliana,获得3个转基因纯合株系后,对其进行-6℃低温、0.5μmol·L^(-1)ABA等逆境处理,分析EgrCIN1在低温胁迫响应中发挥的功能。【结果】EgrCIN1是巨桉中特有的基因,不含内含子,没有跨膜结构,启动子含有多个与逆境响应相关的顺式作用元件。该基因在茎和叶片中都有表达,而在根中不表达;在叶片中其表达受低温处理强烈诱导;同时,干旱、高盐和ABA等非生物逆境因子也能诱导叶片中EgrCIN1的表达,其编码蛋白被定位在叶绿体中。拟南芥中EgrCIN1过表达转基因株系对低温耐受性提高,对外源ABA敏感程度增强。【结论】EgrCIN1是在叶绿体表达,并可能通过ABA依赖途径参与植物低温胁迫响应,提高植物对低温的抗性。图8表2参27。

关键词：巨桉 EgrCIN1 低温响应叶绿体脱落酸

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闽楠SPX基因家族的鉴定及其缺磷胁迫下的表达分析

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农业生物技术学报 2023年第9期31卷 1832-1845页

作者：吴梦洁洪家都李芳燕周生财程龙军浙江农林大学林业与生物技术学院/亚热带森林培育国家重点实验室丽水职业技术学院

闽楠(Phoebe bournei)是我国特有的珍贵用材树种，在南方红壤土中造林易产生低磷胁迫，影响栽培效益。挖掘闽楠耐低磷重要基因资源，对利用分子辅助育种技术培育耐低磷闽楠品种具有重要意义。SPX基因家族成员与磷吸收和平衡相关，本研... 详细信息

闽楠(Phoebe bournei)是我国特有的珍贵用材树种，在南方红壤土中造林易产生低磷胁迫，影响栽培效益。挖掘闽楠耐低磷重要基因资源，对利用分子辅助育种技术培育耐低磷闽楠品种具有重要意义。SPX基因家族成员与磷吸收和平衡相关，本研究在全基因组范围内对闽楠SPX基因家族成员进行筛选、鉴定，同时，利用qPCR技术分析了PbSPX基因在闽楠根、茎和叶中的组织表达情况，以及在缺磷处理10和60 d时，PbSPX基因在植株根和叶片中的表达模式。结果显示，20个PbSPX基因分布在闽楠的1到10号染色体，根据蛋白序列特征和进化关系分属4个亚家族，包括6个SPX亚家族成员，7个SPX-EXS亚家族成员，3个SPX-MFS亚家族成员和4个SPX-RING亚家族成员。启动子顺式作用元件分析表明，PbSPX基因启动子上含有P1BS、W-box和MBS等磷胁迫响应相关元件。组织特异性分析表明，PbSPX2、PbSPXEXS1、PbSPX-RING2主要在根中表达，在叶中相对表达量较高的有12个PbSPX基因。在缺磷处理10和60 d的闽楠根中，除PbSPX6之外的其他5个SPX亚家族成员和PbSPX-MFS1都被缺磷显著诱导，与对照相比表达显著上调，而PbSPX-MFS2被显著抑制，表达显著下调。PbSPX-RING1和PbSPX-EXS1在缺磷10 d表达显著上调，PbSPX-RING3和PbSPX-EXS2在缺磷60 d表达显著上调。PbSPX-EXS6在缺磷10 d的根中表达显著下调，而在缺磷60 d时表达显著上调。叶片中PbSPX1～PbSPX5、PbSPX-EXS1及PbSPXMFS1均在缺磷60 d时被诱导，与对照相比表达显著上调，而PbSPX-MFS2在缺磷60 d表达显著下调，与根中的表达趋势一致。作为磷转运体的亚家族成员PbSPX-EXS1、PbSPX-EXS2和PbSPX-EXS6在不同组织中对磷水平信号的响应不同。结果表明，闽楠SPX亚家族成员参与了磷胁迫响应，而且其表达受相应组织中磷水平的调控。本研究初步揭示了PbSPX基因家族成员与低磷胁迫响应的关系，为进一步研究其在低磷响应中的功能和机制提供了参考。

关键词：闽楠 SPX基因家族基因表达缺磷

发根农杆菌介导的闽楠遗传转化体系构建与优化

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核农学报 2023年第8期37卷 1516-1522页

作者：吴梦洁洪家都李芳燕周生财林二培程龙军浙江农林大学林业与生物技术学院/亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州311300 丽水职业技术学院浙江丽水323000

闽楠[Phoebe bournei(Hemsl.)Yang]为我国重要的珍贵树种。为建立闽楠遗传转化体系,以闽楠幼苗为材料,利用pCAMBIA1300-GFP质粒转化的发根农杆菌介导植株转化。在比较注射和菌液浸泡两种侵染方式侵染效率的基础上,进一步利用正交[L9(3^(... 详细信息

闽楠[Phoebe bournei(Hemsl.)Yang]为我国重要的珍贵树种。为建立闽楠遗传转化体系,以闽楠幼苗为材料,利用pCAMBIA1300-GFP质粒转化的发根农杆菌介导植株转化。在比较注射和菌液浸泡两种侵染方式侵染效率的基础上,进一步利用正交[L9(3^(3))]试验从菌株种类、菌液侵染浓度和侵染植株苗龄三个方面优化了遗传转化体系。另外,对不同光强影响闽楠毛状根诱导及转化率情况进行了分析。结果表明,注射法的毛状根诱导率和遗传转化率分别为80.0%、66.7%;而菌液浸泡法的诱导率和遗传转化率分别为41.2%、35.3%。正交试验中,影响闽楠毛状根诱导率和遗传转化率的主要因素为菌株种类。最大诱导率和转化效率分别达到了87.5%、70.6%。该体系的最优组合为:K599菌株在菌液浓度OD_(600)=1.2条件下注射侵染三叶期的闽楠幼苗。此外,较弱光强(50μmol·m^(-2)·s^(-1))的培养条件比较强光照(100μmol·m^(-2)·s^(-1))更有利于闽楠幼苗的生长和遗传转化。本研究创建并优化了一套高效、稳定的闽楠遗传转化体系,成功获得了具有转基因毛状根的闽楠植株,为闽楠重要基因挖掘、新种质创建和遗传改良奠定了基础。

关键词：闽楠遗传转化发根农杆菌

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中国人口负增长背景下完善生育支持政策问题研究

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西南民族大学学报（人文社会科学版） 2024年第2期45卷 165-172页

作者：洪振家华东政法大学政府管理学院上海201620

人口规模巨大是中国式现代化的首要特征,当前我国人口除了规模巨大外,还呈现出“人口负增长”和“老龄少子化”的特征,面对人口新形势,适度生育是保持人口长期动态平衡的关键。低生育率情况下,国家政策如何促进生育意愿和生育水平是一... 详细信息

人口规模巨大是中国式现代化的首要特征,当前我国人口除了规模巨大外,还呈现出“人口负增长”和“老龄少子化”的特征,面对人口新形势,适度生育是保持人口长期动态平衡的关键。低生育率情况下,国家政策如何促进生育意愿和生育水平是一个紧迫的时代命题。本研究从生育率持续低水平将对经济社会发展带来深层次结构性挑战、我国人口负增长产生的原因及生育支持体系建设的历程、现状以及面临的瓶颈入手,借鉴日本和新加坡的生育支持经验,从政策顶层设计、生育政策属性、紧迫的现实问题、“一胎体验感”、政策制定的前瞻性和包容性等方面提出了完善中国生育支持政策体系的思路和建议。

关键词：人口负增长低生育率生育支持

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超大规模人口的中国式现代化运行逻辑、内外挑战与难题破解

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江苏行政学院学报 2024年第3期 113-122页

作者：陈毅洪振家华东政法大学政府管理学院上海201620

超大规模人口的中国式现代化既显示出人口优势也面临规模治理焦虑的挑战。其运行逻辑体现为:在党的领导下把超大规模人口有效组织起来,把党的制度优势转化为治理势能;独特的理性观为现代化建设提供了大量廉价的劳动力,为后发国家的现代... 详细信息

超大规模人口的中国式现代化既显示出人口优势也面临规模治理焦虑的挑战。其运行逻辑体现为:在党的领导下把超大规模人口有效组织起来,把党的制度优势转化为治理势能;独特的理性观为现代化建设提供了大量廉价的劳动力,为后发国家的现代化腾飞提供了人力保障和无限的市场潜能;全过程人民民主、社会共同体的构建,有助于破解超大规模人口集体行动的难题;对教育的重视,促进人才与科技的发展。同时超大规模人口的现代化也面临挑战:世俗化社会的竞争和分化、人口老龄化和少子化的叠加、风险社会的不确定性、西方国家对技术的霸权及技术自身论等。基于此,来探究破解超大规模人口的现代化难题的路径:构建社会治理共同体来回应治理负荷、以教育现代化促进人口质量提升、加大风险社会的防控和预警、加强信息技术社会的驾驭能力。

关键词：中国式现代化运行逻辑超大规模人口治理负荷

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圆紫菜快速生长新品系的分离与特性分析

上海海洋大学学报 2024年

作者：应家轩丁洪昌严兴洪上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心

与中国南方紫菜栽培物种—坛紫菜(Pyropia haitanensis)相比，圆紫菜(Pyropia suborbiculata)具有更强的耐高温性，但其圆型藻体不适合生产栽培。为此研究者采用人工诱变技术，从圆紫菜野生型品系中分离出了数个长型突变体。本研究在此... 详细信息

与中国南方紫菜栽培物种—坛紫菜(Pyropia haitanensis)相比，圆紫菜(Pyropia suborbiculata)具有更强的耐高温性，但其圆型藻体不适合生产栽培。为此研究者采用人工诱变技术，从圆紫菜野生型品系中分离出了数个长型突变体。本研究在此基础上，采用60Co-γ射线辐照圆紫菜长型突变体CCT-2的叶状体，以生长速度为主要选育指标，从其后代中筛选出了1个快速生长的新品系PS-M1。在23 ℃下培养60 d的叶状体，PS-M1的平均体长和长宽比分别为68.1 cm和26.3，分别是CCT-2的2.7和2.4倍。在23 ℃下培养30 d的叶状体再在30 ℃下培养30 d，PS-M1和CCT-2的体长分别增加了6.4和3.0倍。在30 ℃下培养14 d，PS-M1和CCT-2的壳孢子存活率分别为47.4%和42.2%，两者之间无显著性差异。在23 ℃下培养45 d的叶状体，PS-M1的叶绿素a和总藻胆蛋白含量分别为6.5和64.9 mg/g，分别比CCT-2增加了19.63%和23.48%；PS-M1的平均厚度为33.6 μm，比CCT-2薄了16.1%。连续10 d的壳孢子放散总量，PS-M1高达223.3万个/贝壳，是CCT-2的4.8倍。综上所述，相比圆紫菜长型突变体CCT-2，新品系PS-M1的叶状体生长速度更快，且在叶状体耐高温性和色素蛋白含量，以及壳孢子放散量等方面也表现出明显优势，有望被应用于中国南方沿海生产栽培。

关键词：圆紫菜 Co-γ射线新品系生长耐高温

鸭TRPV6和SLC4A4基因SNPs对蛋壳品质的影响

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中国畜牧杂志 2024年第5期60卷 154-161页

作者：廖朝美杨红舒畅叶丽杨远青张依裕肖家洪毕节市畜牧站贵州毕节551700 贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室贵州贵阳550025 毕节市牧垦场贵州毕节551700

试验旨在探究三穗鸭TRPV6基因和SLC4A4基因SNPs突变对蛋壳品质的影响,筛选出与蛋壳品质相关的分子标记。利用PCR扩增和直接测序法相结合的方法检测鸭TRPV6基因和SLC4A4基因的SNPs,并与蛋壳品质进行关联分析。结果显示:在TRPV6基因第2内... 详细信息

试验旨在探究三穗鸭TRPV6基因和SLC4A4基因SNPs突变对蛋壳品质的影响,筛选出与蛋壳品质相关的分子标记。利用PCR扩增和直接测序法相结合的方法检测鸭TRPV6基因和SLC4A4基因的SNPs,并与蛋壳品质进行关联分析。结果显示:在TRPV6基因第2内含子发现的g.81465153 C>G和g.81465176A>G突变分别对蛋壳重和蛋重有显著影响,在第3外显子发现同义突变g.81465450 T>C;3个SNPs联合产生5种单倍型和7种双倍型,位点联合对蛋壳重有显著影响。在SLC4A4基因第24外显子发现同义突变位点g.15125097 C>T,在内含子25发现g.15132523 G>A突变对蛋形指数有极显著影响,在内含子26发现g.15135079G>A突变;3个SNPs联合产生4种单倍型和7种双倍型,位点联合对蛋壳重有极显著影响。2个基因聚合后6个SNPs联合产生8种单倍型和7种双倍型,位点联合对蛋壳重和蛋重均有显著影响。表明TRPV6基因和SLC4A4基因新发现的3个SNPs联合和2个基因的6个SNPs联合均对蛋重和蛋壳重有显著效应,可作为鸭蛋壳品质选择的遗传标记。

关键词：三穗鸭 TRPV6基因 SLC4A4基因 SNPs 蛋壳品质

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可再生能源消纳责任权重制下光伏供应链合作与运营决策

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中国管理科学 2024年

作者：戴道明王忆都安徽财经大学管理科学与工程学院

光伏消纳问题是当前制约我国光伏产业发展的重要因素，发电-输配-售电各环节的协调合作是解决该问题的有效途径。本文考虑由两异质性发电厂（即光伏发电厂和火力发电厂）、单电网公司和单独立售电公司组成的三级供应链，研究可再生能源... 详细信息

光伏消纳问题是当前制约我国光伏产业发展的重要因素，发电-输配-售电各环节的协调合作是解决该问题的有效途径。本文考虑由两异质性发电厂（即光伏发电厂和火力发电厂）、单电网公司和单独立售电公司组成的三级供应链，研究可再生能源消纳责任权重制下光伏供应链合作运营决策问题，分别构建电网公司独立运营、电网公司与发电厂合作以及电网公司与独立售电公司合作三种运营模式的决策模型，对比分析不同模式的储能容量水平、碳减排水平、电价、总用电需求和光伏上网电量占比。研究表明：两种合作模式均能降低销售电价和实际弃光率，提高储能容量水平、碳减排水平和总用电需求，实现三方帕累托改进；随着单位超额消纳凭证价格的提高，光伏上网电价和光伏上网电量增加，而火力上网电价和火力上网电量减少；提高超额消纳凭证价格能够提高光伏上网电量占比，而提高可再生能源消纳责任权重不一定能够提高光伏上网电量占比。

关键词：光伏供应链纵向合作弃光率可再生能源消纳