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米多霉素衍生物的生物合成及结构鉴定

浙江大学学报（工学版） 2006年第11期40卷 1909-1913页

作者：梁立峰叶丹沈文和岑沛霖徐志南浙江大学化学工程与生物工程学系生物工程研究所浙江杭州310027

通过在龟裂链轮丝菌(Streptoverticillium rimofaciensZJU 5119)的发酵过程中添加5-氟胞嘧啶,得到了一种新的核苷类化合物A.通过电喷雾质谱及核磁共振氢谱分析主要信号的归属,推测化合物A是米多霉素的衍生物,区别在于嘧啶环上第5位的取... 详细信息

通过在龟裂链轮丝菌(Streptoverticillium rimofaciensZJU 5119)的发酵过程中添加5-氟胞嘧啶,得到了一种新的核苷类化合物A.通过电喷雾质谱及核磁共振氢谱分析主要信号的归属,推测化合物A是米多霉素的衍生物,区别在于嘧啶环上第5位的取代基是F,而米多霉素则是羟甲基.发酵液中化合物A的产量达到了0.8 g/L.化合物A的最低抑菌质量浓度为0.157 g/L,只有米多霉素的一半.

关键词：核苷类抗生素米多霉素衍生物 5-氟胞嘧啶结构鉴定抑菌活性

反相高效液相色谱法测定发酵液中氨苷霉素的含量

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农药 2004年第4期43卷 171-173页

作者：陈勇徐志南沈文和岑沛霖浙江大学化学工程与生物工程系生物工程研究所杭州310027

建立了应用反相高效液相色谱法测定发酵液中氨苷霉素含量的方法。较佳的分析条件为:色谱柱Hypersil BDS ODS(250×4.6mm I.D.,5μm);流动相为含5.8 mmol／L三氯乙酸和8％(v／v)甲醇的水溶液;检测波长279nm,流速1.0 ml／min。对标准曲线... 详细信息

建立了应用反相高效液相色谱法测定发酵液中氨苷霉素含量的方法。较佳的分析条件为:色谱柱Hypersil BDS ODS(250×4.6mm I.D.,5μm);流动相为含5.8 mmol／L三氯乙酸和8％(v／v)甲醇的水溶液;检测波长279nm,流速1.0 ml／min。对标准曲线、精密度、准确度及发酵液样品测定的重现性进行了详细的研究。该方法的线性相关系数0.9998,日内变异系数0.05％,日间变异系数0.9％,回收率96.30％。本方法具有准确性高、重现性好、灵敏度高及快速测定的优点,非常适合于发酵液中氨苷霉素含量的测定。

关键词：生物杀菌剂白粉病反相高效液相色谱法氨苷霉素发酵液测定

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固定化基因工程菌的培养和hEGF表达

化工学报 2003年第7期54卷 1021-1024页

作者：陈新爱徐志南沈文和岑沛霖浙江大学化学工程与生物工程学系生物工程研究所浙江杭州310027

A genetic recombinant hEGF producer *** JM101 was immobilized in polyurethane foam matrix and a three-phase fluidized-bed bioreactor was used to produce human epidermal growth factor (hEGF).The results indicated that polyurethane foam is an adequate immobilization material. With the addition of polyurethane foam matrix, the free cell density, plasmid stability and hEGF productivity were higher than those without the foam matrix, respectively. The two-stage culture of the immobilized cells was further carried out, in which, the first stage was performed in a three-phase fluidized-bed bioreactor for cell growth and the second stage was performed in bubbling bed for product expression. At a dilution rate of 0.2 h -1 , after continuous cultivation for more than 60 h, the free cell density and product expression were maintained relatively stable. The hEGF productivity was still higher than 140 mg·L -1 and the fraction of plasmid-carrying was more than 27%. The hEGF productivity in two-stage process was higher than the batch process.

关键词：聚氨酯泡沫 hEGF重组菌固定化培养质粒稳定性

Effects of medium composition on the production of plasmid DNA vector potentially for human gene therapy

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2005年第5期6卷 396-400页

作者：徐志南沈文和陈灏岑沛霖 Institute of Bioengineering School of Material Science and Chemical Engineering Zhejiang University Hangzhou 310027 China

Plasmid vector is increasingly applied to gene therapy or gene vaccine. The production of plasmid pCMV-AP3 for cancer gene therapy was conducted in a modified MBL medium using a recombinant E. coli BL21 system. The effects of different MMBL components on plasmid yield, cell mass and specific plasmid DNA productivity were evaluated on shake-flask scale. The results showed that glucose was the optimal carbon source. High plasmid yield (58.3 mg/L) was obtained when 5.0 g/L glucose was added to MMBL. Glycerol could be chosen as a complementary carbon source because of the highest specific plasmid pro- ductivity (37.9 mg DNA/g DCW). After tests of different levels of nitrogen source and inorganic phosphate, a modified MMBL medium was formulated for optimal plasmid production. Further study showed that the initial acetate addition (less than 4.0 g/L) in MMBL improved plasmid production significantly, although it inhibited cell growth. The results will be useful for large-scale plasmid production using recombinant E. coli system.

关键词： Plasmid DNA Growth medium Gene therapy

培养条件优化和菌种选育提高雷帕霉素发酵水平

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化学工程 2011年第1期39卷 81-84页

作者：陈希杨朱湘成杨冬沈文和徐志南岑沛霖浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

研究了雷帕霉素发酵的最佳种子培养时间,发现60 h的种子液能够产生最高的发酵水平。系统地考察了发酵培养基中不同水平的碳氮源和各种无机盐对雷帕霉素发酵水平的影响,并确定最优的培养基配方。在以上优化后的条件下雷帕霉素原始菌的发... 详细信息

研究了雷帕霉素发酵的最佳种子培养时间,发现60 h的种子液能够产生最高的发酵水平。系统地考察了发酵培养基中不同水平的碳氮源和各种无机盐对雷帕霉素发酵水平的影响,并确定最优的培养基配方。在以上优化后的条件下雷帕霉素原始菌的发酵水平从未优化时95 mg/L提高到170 mg/L左右,提高幅度达到79%,取得了明显的效果。然后通过多种诱变手段,经过多轮诱变育种,筛选到最高产量为420 mg/L的一株菌株,比出发菌株提高了3倍多。

关键词：雷帕霉素免疫抑制剂培养条件优化诱变育种

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塑料薄膜表面疵点检测及识别方法研究

工业控制计算机 2011年第5期24卷 74-75页

作者：樊向党林波沈文和河海大学能源与电气学院海军航空工程学院青岛分院四川理工学院自动化与电子信息学院中国人民解放军91867部队

薄膜的表面疵点是影响塑料薄膜品质好坏的重要因素之一,准确快速地检测出薄膜的表面疵点在制膜工艺中起着关键性的作用。提出了一种基于Canny边缘检测算子的塑料薄膜有无疵点的粗检测判断方法,并根据疵点相对于塑料薄膜灰度值的差异,用... 详细信息

薄膜的表面疵点是影响塑料薄膜品质好坏的重要因素之一,准确快速地检测出薄膜的表面疵点在制膜工艺中起着关键性的作用。提出了一种基于Canny边缘检测算子的塑料薄膜有无疵点的粗检测判断方法,并根据疵点相对于塑料薄膜灰度值的差异,用阈值分割方法实现薄膜疵点的精细分类及识别。实验证明,该方法解决了传统检测过程只能针对特定疵点进行特定方法的识别的问题,提高了识别算法的通用性。

关键词：塑料薄膜表面疵点边缘检测阈值分割

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生物农药米多霉素类化合物的研究进展

农药 2006年第12期45卷 799-804页

作者：叶丹沈文和梁立峰徐志南岑沛霖浙江大学化学工程与生物工程系生物工程研究所杭州310027

从发酵技术、合成机理、分离技术以及分析检测技术等几个方面结合本实验室的研究工作详细介绍了米多霉素及其衍生物的国内外研究进展。同时也介绍了其应用领域,并对目前国内研究过程中存在的一些问题进行了分析,对该类化合物的发展前景... 详细信息

从发酵技术、合成机理、分离技术以及分析检测技术等几个方面结合本实验室的研究工作详细介绍了米多霉素及其衍生物的国内外研究进展。同时也介绍了其应用领域,并对目前国内研究过程中存在的一些问题进行了分析,对该类化合物的发展前景进行了展望。

关键词：米多霉素衍生物发酵技术合成机理分离技术

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米多霉素的生物检定法与HPLC测定法

浙江大学学报（工学版） 2006年第3期40卷 515-519页

作者：谢志鹏徐志南陈勇沈文和郑建明岑沛霖浙江大学药学院浙江杭州310027 浙江大学材料与化学工程学院浙江杭州310027

为定量测定米多霉素含量,建立了一种新型的生物检定法.通过考察12种红酵母的最低抑制质量浓度(MIC),筛选出合适的敏感菌.研究了抑菌圈的直径与米多霉素浓度的关系,比较了米多霉素对检定菌的抗菌活性与其对粉霉菌的抗菌活性的关系,对比... 详细信息

为定量测定米多霉素含量,建立了一种新型的生物检定法.通过考察12种红酵母的最低抑制质量浓度(MIC),筛选出合适的敏感菌.研究了抑菌圈的直径与米多霉素浓度的关系,比较了米多霉素对检定菌的抗菌活性与其对粉霉菌的抗菌活性的关系,对比了该生物检定法与高效液相色谱(HPLC)法.结果表明,红酵母AS 2.166为最适检定菌,其抑菌圈的直径与米多霉素浓度的对数值呈显著的线性关系,相关系数为0.999 4.米多霉素对检定菌的抗菌效价与其对黄瓜粉霉菌的抗菌效价具有高度的一致性.该生物检定法与HPLC测定法均具有较好的准确度和精密度,可替代高效液相色谱法,用于米多霉素发酵过程的产量检测.

关键词：米多霉素生物检定法红酵母高效液相色谱

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雷帕霉素产生菌吸水链霉菌的诱变育种

雷帕霉素产生菌吸水链霉菌的诱变育种