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乳铁蛋白对脂多糖激活的U937细胞TLR4信号通路相关膜分子表达的影响

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乳铁蛋白对脂多糖激活的U937细胞TLR4信号通路相关膜分子表达的影...

作者：沈名扬重庆医科大学

学位级别：硕士

【目的】本研究旨在从蛋白质和mRNA水平探索重组人乳铁蛋白（Recombinant human lactoferrin，rhLF）对脂多糖（Lipopolysaccharides，LPS）活化的人单核巨噬细胞株U937细胞Toll样受体4（Toll-likereceptor4，TLR4）通路相关膜分子TLR4、CD14及MD2表达的影响。【方法】1、U937细胞经10ng/ml佛波酯（Phorbol12-myristate13-acetate，PMA）诱导分化成熟后分为三个组，即正常对照组，LPS组（LPS100ng/ml）和rhLF干预组（给予LPS100ng/ml＋不同浓度的rhLF50μg/ml，100μg/ml，200μg/ml，500μg/ml）;2、应用逆转录PCR方法分别检测各组细胞TLR4、CD14及MD2mRNA的表达水平;3、应用western免疫印迹方法分别检测各组细胞TLR4、CD14及MD2蛋白质的表达水平。【结果】1、采用10ng/ml PMA刺激U937细胞24h后，细胞停止增殖，伸出伪足，变为呈聚集性生长的贴壁细胞，呈典型的巨噬细胞形态;2、经PMA诱导的正常对照组U937细胞有一定基础量的TLR4、CD14及MD2mRNA表达，给予LPS刺激后三者的mRNA表达水平显著上调（P＜0.05）;TLR4、CD14及MD2mRNA在50μg/ml rhLF干预组的表达水平与LPS组比较不存在统计学差异（P＞0.05）;100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml rhLF干预组呈浓度依赖性地降低了TLR4、CD14国家级临床重点专科，重庆市重点学科建设项目(编号：2010-53)及MD2mRNA的表达水平（P＜0.05）;3、经PMA诱导的正常对照组的U937细胞有一定基础量的TLR4、CD14及MD2蛋白质表达，给予LPS刺激后三者的蛋白质表达是水平显著上调（P＜0.05）;TLR4、CD14及MD2蛋白质在50μg/ml rhLF干预组的表达水平与LPS组比较不存在统计学差异（P＞0.05）;100μg/ml、200μg/ml、500μg/ml rhLF干预组呈浓度依赖性地降低了TLR4、CD14及MD2蛋白质的表达水平（P＜0.05）;TLR4、CD14及MD2三者蛋白质的表达水平变化趋势与mRNA的表达水平变化趋势一致。【结论】1、U937细胞经10ng/ml PMA诱导后分化成为贴壁的巨噬细胞;2、未给予LPS刺激的正常对照组U937细胞即有一定基础量的TLR4、CD14及MD2mRNA和蛋白质表达;3、在给予LPS刺激活化U937细胞后，TLR4、CD14及MD2三者mRNA和蛋白质的表达均显著上调，提示TLR4信号通路相关膜分子TLR4、CD14及MD2的表达可能与TLR4跨膜信号转导通路激活引发的过度放大炎症反应密切相关，这为防治脓毒症的发生发展提供了重要思路;4、rhLF干预组呈浓度依赖性地降低了TLR4、CD14及MD2三者mRNA和蛋白质的表达，推测LF可通过下调TLR4信号通路相关膜分子TLR4、CD14及MD2的表达水平，参与抑制细胞下游级联放大的炎症信号传递，减轻内毒素的损伤效应;这是对LF有效抑制脓毒症引起的过度免疫反应机制的进一步补充，也为LF在治疗新生儿脓毒症中的应用提供新的理论基础。

关键词：乳铁蛋白脂多糖 U937细胞 Toll样受体4 CD14 髓样分化蛋白2

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血清脂联素在结直肠癌中表达的研究

中国实用外科杂志 2011年第8期31卷 699-702页

作者：丛进春沈名扬冯勇王俊江中国医科大学附属盛京医院结直肠肿瘤外科辽宁沈阳110004

目的探讨结直肠癌血清中脂联素的表达,并对影响脂联素水平的因素进行分析。方法选择2010年1月至2010年6月中国医科大学附属盛京医院收治的90例结直肠癌病人作为研究组,选择30名健康成年人作为对照组。用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清... 详细信息

目的探讨结直肠癌血清中脂联素的表达,并对影响脂联素水平的因素进行分析。方法选择2010年1月至2010年6月中国医科大学附属盛京医院收治的90例结直肠癌病人作为研究组,选择30名健康成年人作为对照组。用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清的脂联素水平,对结直肠癌不同临床病理特征下的血清脂联素水平差异进行统计分析。结果研究组血清脂联素水平(13.08±7.99)μg/mL明显低于对照组(21.92±8.76)μg/mL(P0.05)。结论结直肠癌病人血清的脂联素水平要明显低于正常健康人,且随着肿瘤分期的增加,血清脂联素水平呈现进一步下降的趋势。

关键词：结直肠癌脂联素

TNF-α在结直肠癌患者血清中的水平及与瘦素及胰岛素抵抗的关系

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世界华人消化杂志 2011年第24期19卷 2597-2601页

作者：沈名扬陈春生丛进春王俊江中国医科大学附属第四医院胃肠外科辽宁省沈阳市110032 中国医科大学附属盛京医院结直肠肿瘤肛门病外科辽宁省沈阳市110004 辽宁中医药大学附属医院肛肠科辽宁省沈阳市110032

目的:探讨结直肠癌患者血清中TNF-α水平与瘦素表达和肿瘤临床表现型、胰岛素抵抗之间的关系.方法:肿瘤组选择100名结直肠癌患者,选择80名健康成年人作为对照组.采用用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TNF-α及瘦素水平.结果:肿瘤组血清T... 详细信息

目的:探讨结直肠癌患者血清中TNF-α水平与瘦素表达和肿瘤临床表现型、胰岛素抵抗之间的关系.方法:肿瘤组选择100名结直肠癌患者,选择80名健康成年人作为对照组.采用用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TNF-α及瘦素水平.结果:肿瘤组血清TNF-α水平为(125.68pg/L)明显高于正常对照组(53.57pg/L)P=0.008TNF-α的表达与TNM分期相关,随着临床分期(TNM)增高而升高P<0.001.与组织学分级无明显关系(P=0.13).血清TNF-α水平与瘦素表达呈正相关(P=0.11<0.05),与HOMA-IR也呈明显正相关(P<0.001).结论:结直肠癌患者的血清中的TNF-α水平明显升高.并随着TNM分期的增加而升高,而与组织学分级无关.血清中TNF-α的水平与瘦素表达及HOMA-IR明显相关.

关键词：结直肠癌瘦素肿瘤坏死因子α 胰岛素抵抗指数

Zonulin介导的肠道微生物对肠上皮细胞屏障功能的调节

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中国细胞生物学学报 2014年第10期36卷 1362-1367页

作者：杜维霞沈名扬艾青韦红重庆医科大学附属儿童医院重庆400014

利用Caco-2肠上皮细胞单层屏障模型研究四种肠道微生物对肠道屏障的影响。实验设置空白对照组(control)、大肠埃希菌组(Eco)、肺炎克雷伯菌组(Kpn)、粪肠球菌组(Efa)、乳酸杆菌组(Lac)。加入各组细菌共培养,结果表明大肠埃希菌、肺炎克... 详细信息

利用Caco-2肠上皮细胞单层屏障模型研究四种肠道微生物对肠道屏障的影响。实验设置空白对照组(control)、大肠埃希菌组(Eco)、肺炎克雷伯菌组(Kpn)、粪肠球菌组(Efa)、乳酸杆菌组(Lac)。加入各组细菌共培养,结果表明大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌均引起单层细胞跨膜电阻值(transepithelial electrical resistance,TEER)明显下降(P0.05);Eco组、Kpn组三种紧密连接蛋白occludin、claudin-1、ZO-1表达明显减少,Efa组、Lac组occludin、claudin-1表达与空白对照组相比无明显变化,胞浆蛋白ZO-1表达降低;细菌与细胞共培养6 h后免疫荧光观察紧密连接蛋白分布情况,Eco组、Kpn组可见荧光强度减弱,荧光不连续,甚至有缺口及裂隙,Efa组、Lac组荧光强度稍减弱,但仍沿胞膜分布,条带较清晰,与空白对照组差异不明显。肠道四种微生物中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌可能通过zonulin途径降低紧密连接蛋白表达、改变蛋白分布,最终导致肠道屏障功能受损,益生菌对肠道屏障无损伤作用。

关键词： Caco-2细胞紧密连接 zonulin 肠道屏障

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土木工程中的注浆技术施工工艺及应用研究

中文科技期刊数据库（引文版）工程技术 2024年第12期 235-238页

作者：沈名扬广西机场管理集团有限责任公司广西南宁530000

为了提高土木工程中注浆技术的施工质量和效率,文章从注浆材料、参数控制、微裂缝处理和机理研究为切入角度,提出了优化注浆材料配比设计、实现注浆参数智能化控制、开发微裂缝精准定位注浆技术以及深化多场耦合注浆机理研究等策略。旨... 详细信息

为了提高土木工程中注浆技术的施工质量和效率,文章从注浆材料、参数控制、微裂缝处理和机理研究为切入角度,提出了优化注浆材料配比设计、实现注浆参数智能化控制、开发微裂缝精准定位注浆技术以及深化多场耦合注浆机理研究等策略。旨在提升注浆技术的精准性、智能化水平和理论基础,从而满足不同工程需求,解决复杂地质条件下的施工难题,推动注浆技术在土木工程领域的创新发展。

关键词：土木工程注浆技术施工工艺应用研究

乳铁蛋白对脂多糖激活的U937细胞TLR4信号通路相关膜分子表达的影响

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重庆医科大学学报 2015年第4期40卷 607-611页

作者：沈名扬韦红杜维霞艾青重庆医科大学附属儿童医院新生儿诊治中心、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿科学重庆市重点实验室、重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014

目的:研究重组人乳铁蛋白(recombinant human lactoferrin,rh LF)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活的U937细胞Toll样受体4(toll-like receptors 4,TLR4)信号通路相关膜分子TLR4、CD14、MD2表达的影响。方法:经佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导成熟的U937细胞随机分为6组:对照组、LPS组(给予100 ng/ml LPS)、LPS+50μg/ml rh LF组、LPS+100μg/ml rh LF组、LPS+200μg/ml rh LF组、LPS+500μg/ml rh LF组,采用RT-PCR和Western blot检测各组细胞TLR4、CD14、MD2 m RNA和蛋白的表达,ELISA检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。结果:LPS组U937细胞TLR4、CD14、MD2 m RNA和蛋白的表达均明显高于对照组(P0.05),LPS+100μg/ml rh LF组、LPS+200μg/ml rh LF组、LPS+500μg/ml rh LF组均明显降低了LPS诱导的TLR4、CD14、MD2 m RNA和蛋白的表达(P<0.05);LPS组TNF-α的含量明显高于对照组(P<0.05),LPS+50μg/ml rh LF组、LPS+100μg/ml rh LF组、LPS+200μg/ml rh LF组、LPS+500μg/ml rh LF组均明显降低了LPS诱导的TNF-α的产生(P<0.05)。结论:rh LF通过抑制TLR4介导的LPS跨膜信号转导和炎症因子TNF-α的分泌,对LPS所致的脓毒血症具有潜在的治疗作用。

关键词：乳铁蛋白脂多糖 U937细胞 Toll样受体4 肿瘤坏死因子-α

Ⅱ期结肠癌根治术淋巴结检取影响因素及预后价值分析

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中华肿瘤防治杂志 2014年第4期21卷 296-299页

作者：陈静张德巍李宏武李震沈名扬戴冬秋中国医科大学附属第四医院胃肠外科辽宁沈阳110032

目的:探讨Ⅱ期结肠癌根治术淋巴结检取的影响因素及预后价值。方法:收集2000-01-05-2009-12-31中国医科大学附属第四医院胃肠外科手术治疗且未经辅助治疗的Ⅱ期结肠癌患者216例,回顾性分析淋巴结检出数量与临床病理学特征的关系,采用单... 详细信息

目的:探讨Ⅱ期结肠癌根治术淋巴结检取的影响因素及预后价值。方法:收集2000-01-05-2009-12-31中国医科大学附属第四医院胃肠外科手术治疗且未经辅助治疗的Ⅱ期结肠癌患者216例,回顾性分析淋巴结检出数量与临床病理学特征的关系,采用单因素、多因素Cox比例风险模型和Kaplan-Meier法进行生存分析。结果:2000-01-2009-12淋巴结检出≥12个的比例从8.0%提高到91.7%。结肠癌淋巴结检出≥12个的患者2005-2009年手术者多于2000-2004年手术者,右半结肠癌多于左半结肠癌,肿瘤直径≥5cm多于<5cm者,T4a^T4b期多于T3期。淋巴结检出数量与手术年代(χ2=45.188,P<0.001)、肿瘤部位(χ2=5.413,P=0.020)、肿瘤大小(χ2=4.021,P=0.045)及T分期(χ2=8.533,P=0.014)明显相关,而与性别、年龄、病理类型、分化及术前CEA水平无明显相关。单因素分析显示,肿瘤大小(χ2=5.099,P=0.035)、术前CEA水平(χ2=4.244,P=0.043)、淋巴结检出数量(χ2=9.875,P=0.002)及T分期(χ2=8.012,P=0.008)是Ⅱ期结肠癌患者的预后因素。多因素分析显示,淋巴结检出数量(P=0.017)和T分期(P=0.044)是影响Ⅱ期结肠癌患者的独立预后因素。淋巴结检出≥12个的患者生存时间明显长于淋巴结检出<12个的患者生存时间,P=0.002。结论:手术年代、肿瘤部位,肿瘤大小及T分期是结肠癌根治术淋巴结检出数量的重要影响因素。淋巴结检出数量是Ⅱ期结肠癌患者生存重要的独立预后因素,因此结肠癌根治术中检取足够的淋巴结有利于合理评估预后。

关键词： Ⅱ期结肠肿瘤淋巴结淋巴结检出数目预后

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东北官话入声分派及其与北京官话的差异

安徽文学(下半月) 2016年第1期 74-76页

作者：沈名扬张辉延边大学汉语言文化学院

入声的消亡和分派是近代汉语音韵学研究中的重要课题,一直受到学界的普遍重视。在北方官话区的大多数次方言区,入声字均已分派到其他声调中,但不同次方言区甚至同一次方言区内古入声字派入的调类均有一定的差异。本文试以《哈尔滨方言... 详细信息

入声的消亡和分派是近代汉语音韵学研究中的重要课题,一直受到学界的普遍重视。在北方官话区的大多数次方言区,入声字均已分派到其他声调中,但不同次方言区甚至同一次方言区内古入声字派入的调类均有一定的差异。本文试以《哈尔滨方言词典》音系为例,对《方言调查字表》中东北官话常用的古入声字做出分类统计,并就其分派情况与北京官话中入声字的分派情况作一分析比较。

关键词：东北官话入声字统计比较

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京族聚居地老年人心血管疾病的危险因素探究

科技与健康 2022年第8期1卷 1-3页

作者：沈名扬东兴市人民医院广西东兴538100

探究了京族聚居地老年人心血管疾病的危险因素。回顾性分析2018年5月-2022年3月600例京族长寿老人的一般资料,对比发生心血管疾病老人的一般资料差异情况,将其中差异项代入logitic回归方程,分析心血管疾病的危险因素。结果表明,老人是... 详细信息

探究了京族聚居地老年人心血管疾病的危险因素。回顾性分析2018年5月-2022年3月600例京族长寿老人的一般资料,对比发生心血管疾病老人的一般资料差异情况,将其中差异项代入logitic回归方程,分析心血管疾病的危险因素。结果表明,老人是否发生心血管疾病与高龄、酗酒、吸烟、体重指数升高、血脂是否异常、锻炼是否有效有密切关系(P<0.05)。通过Logistic回归方程计算发现,上述因素均是老人发生心血管疾病的危险因素。研究还发现,摄盐量多也是导致京族聚居地老年人心血管疾病的主要危险因素,亦为相对可控因素。因此,需兼顾自然环境与社会经济的特点,因地制宜地制定干预策略,以降低心血管疾病的发生风险,减轻心血管疾病给老年人带来的重负。

关键词：老年人京族聚居地心血管疾病危险因素