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B7-H4在间充质干细胞C3H10 T1／2移植治疗EAE中的作用研究

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中华神经医学杂志 2016年第10期15卷 984-990页

作者：尹周古彦铮汲晓沛李小平应鸣翘刘星志张学光薛群苏州大学附属第一医院神经内科苏州215006 苏州大学附属第一医院骨科研究所苏州215006 江苏省临床免疫研究所 215006

目的从病理学角度探讨B7-H4分子在C3H10T1／2（C3H10）细胞移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中的作用。方法雌性C57BL／6小鼠20只按照随机数字表法分为正常组、EAE模型组、C3H10细胞组、C3H10-对照（NC）细胞组、C3H10-短发... 详细信息

目的从病理学角度探讨B7-H4分子在C3H10T1／2（C3H10）细胞移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中的作用。方法雌性C57BL／6小鼠20只按照随机数字表法分为正常组、EAE模型组、C3H10细胞组、C3H10-对照（NC）细胞组、C3H10-短发夹RNA（shRNA）细胞组，每组4只。后4组小鼠经髓鞘少突胶质糖蛋白（MOG）等免疫诱导EAE模型，后3组小鼠分别移植C3H10细胞、C3H10-NC细胞（转染了无靶基因的空载体）（、C3H10-shRNA细胞（转染了B7-H4 shRNA靶向慢病毒载体）。观察移植后细胞的分布，并通过HE染色、牢固蓝染色观察炎性细胞浸润和髓鞘脱失的改变、同时用免疫荧光法观察星型胶质细胞和小胶质细胞的活化及迁移。检测B7-H4分子的表达，比较下调B7-H4分子后对EAE小鼠组织结构及功能的影响。结果（1）C3H10移植于EAE小鼠可延缓EAE的发病，减轻临床症状（表现为C3H10细胞组、C3H10-NC细胞组小鼠发病高峰期较EAE组小鼠推迟约3～5d，神经功能评分明显降低）；干扰B7H4分子后作用明显降低（表现为C3H10-shRNA细胞组小鼠发病高峰期及神经功能评分与EAE组小鼠均较接近）。（2）C3H10细胞组、C3H10-NC细胞组、C3H10-shRNA细胞组小鼠脊髓组织内移植细胞主要分布在病灶区周围，未发病区少见或未见移植细胞存在。（3）C3H10移植于EAE小鼠可减少炎性细胞浸润、髓鞘脱失和胶质细胞活化及迁移，而下调干细胞内B7-H4分子后抑制炎性细胞浸润、髓鞘脱失和胶质细胞活化及迁移的作用明显减弱。（4）C3H10干细胞影响组织内B7-H4分子介导EAE的免疫调节，表现为EAE组小鼠脊髓组织B7-H4表达较正常组减少，C3H10及C3H10-NC细胞组可见B7-H4表达明显增加．而C3H10-shRNA细胞组B7-H4表达较C3H10细胞组及C3H10-NC细胞组明显减少．差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论C3H10细胞可以迁移至病灶区，通过多种途径延缓EAE的发病或改善症状：B7-H4负性共刺激分子可下调C3H10细胞对EAE的免疫调节。

关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎间充质干细胞 B7-H4

负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2移植治疗EAE中作用机制的研究

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负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2移植治疗EAE中作用机制的研究

B7-H4介导小鼠间充质干细胞株C3 H10 T1/2对EAE小鼠T细胞亚群的作用

第十届全国免疫学学术大会

作者：汲晓沛薛群古彦铮张学光苏州大学附属第一医院神经内科江苏省临床免疫研究所

目的 :探讨负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2细胞移植治疗小鼠EAE模型的体内效应机制。方法 :利用MOG35-55和完全弗氏佐剂制备小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,将n=50只小鼠分为正常对照组、EAE组、C3H10组(移植C3H10细胞)、C3H... 详细信息

目的 :探讨负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2细胞移植治疗小鼠EAE模型的体内效应机制。方法 :利用MOG35-55和完全弗氏佐剂制备小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,将n=50只小鼠分为正常对照组、EAE组、C3H10组(移植C3H10细胞)、C3H10-NC组(移植sh RNA对照质粒转染的

关键词： B7-H4 间充质干细胞免疫调节 EAE 细胞因子

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第6期36卷 408-413页

作者：汲晓沛张莹尹周李小平应鸣翘王明元董万利古彦铮薛群苏州大学附属第一医院神经内科 215006 苏州市红十字中心血站 215006 江苏省临床免疫研究所苏州215006

目的：探讨负性共刺激分子B7-H4在小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2（以下简称C3H10）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠免疫调节的作用及其机制。方法体外试验：构建小鼠B7-H4靶向shRNA稳定转染的C3H10细胞（C3H10-B7-H4细胞），将转... 详细信息

目的：探讨负性共刺激分子B7-H4在小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2（以下简称C3H10）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠免疫调节的作用及其机制。方法体外试验：构建小鼠B7-H4靶向shRNA稳定转染的C3H10细胞（C3H10-B7-H4细胞），将转染前后的细胞分别与植物血凝素（ PHA）激发的小鼠脾脏淋巴细胞共培养，用ELISA法检测培养上清细胞因子的分泌。体内试验：制备小鼠EAE模型，将50只小鼠分为5组：正常对照组、EAE组、C3H10组（移植 C3H10细胞）、C3H10-NC组（移植shRNA对照质粒转染的C3H10细胞）、C3H10-B7-H4组（移植C3H10-B7-H4细胞），并在免疫后第6天，各组细胞以1×106个/只小鼠尾静脉输注，每日对各组小鼠进行神经功能缺损评分；用ELISA法检测小鼠外周血IL-2、IL-17、IFN-γ、IL-4的表达变化。结果体外试验：B7-H4靶向shRNA转染C3H10可抑制B7-H4的表达；下调表达B7-H4的C3H10细胞对脾细胞分泌IL-2、IL-17、IFN-γ的抑制作用减弱，而对IL-4无明显影响；体内试验：下调表达B7-H4的C3H10细胞对EAE小鼠的治疗作用减弱，表现在神经功能缺损评分增高，发病时间及发病高峰时间均较C3H10组提前。下调表达B7-H4的C3H10细胞治疗EAE小鼠后对血浆中IL-2、IL-17、IFN-γ的表达抑制作用减弱，但对IL-4的表达无影响。结论负性协同刺激分子B7-H4介导了C3H10移植治疗EAE的免疫调节，这一过程可能是调节Th1、Th17等炎性效应性T细胞间接发挥作用。

关键词： B7-H4 间充质干细胞免疫调节 T细胞极化

负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2移植治疗EAE中作用机制的研究

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负性协同刺激分子B7-H4在C3H10T1/2移植治疗EAE中作用机制的研究

shRNA干扰B7-H4基因对C3H10T1/2细胞免疫调节作用的影响

中华医学会第十八次全国神经病学学术会议

作者：汲晓沛薛群董万利古彦铮张学光苏州大学附属第一医院神经内科苏州大学附属第一医院临床免疫研究所

目的通过体内实验探讨B7-H4在C3H10细胞移植治疗小鼠EAE模型中体内效应的机制。方法利用MOG35-55和完全弗氏佐剂制备小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,将n=50只小鼠分为正常对照组(n=10)、EAE组(n=10)、C3H10组(移植C3H10细胞)(n=...

目的通过体内实验探讨B7-H4在C3H10细胞移植治疗小鼠EAE模型中体内效应的机制。方法利用MOG35-55和完全弗氏佐剂制备小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,将n=50只小鼠分为正常对照组(n=10)、EAE组(n=10)、C3H10组(移植C3H10细胞)(n=10)、C3H10-NC组(移植shRNA对照质粒转染的C3H10细胞)(n=10)、

关键词：

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shRNA干扰B7-H4基因对C3H10T1/2细胞免疫调节作用的影响

Hcy、HIF-1α对PCI患者预后的预测价值

中华医学会第十八次全国神经病学学术会议

作者：汲晓沛薛群董万利古彦铮张学光苏州大学附属第一医院神经内科苏州大学附属第一医院临床免疫研究所

目的通过体外实验探讨靶向干扰B7-H4分子前后C3H10T1/2(以下简称C3H10)细胞生存、增殖、迁移等生物学行为的改变及其对T细胞亚群的影响,方法用慢病毒将B7-H4靶向shRNA转染至C3H10细胞构建小鼠B7-H4靶向shRNA稳定转染的C3H10细胞(C3H10-B...

目的通过体外实验探讨靶向干扰B7-H4分子前后C3H10T1/2(以下简称C3H10)细胞生存、增殖、迁移等生物学行为的改变及其对T细胞亚群的影响,方法用慢病毒将B7-H4靶向shRNA转染至C3H10细胞构建小鼠B7-H4靶向shRNA稳定转染的C3H10细胞(C3H10-B7-H4细胞),应用Ki-67检测靶向干扰B7-H4

关键词：

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脑与神经疾病杂志 2024年第3期32卷 176-179页

作者：沈佳慧李瑞霞汲晓沛张莹南京大学医学院附属苏州医院神经内科江苏215000 苏州大学附属第一医院神经内科

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、低氧诱导因子-1 α (HIF-1 α)对进展性脑梗死(PCI)患者预后的预测价值。方法选取2020年1月至2022年11月南京大学医学院附属苏州医院收治的急性脑梗死(ACI)患者178例,其中PCI患者95例为进展组,非PCI患者8... 详细信息

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、低氧诱导因子-1 α (HIF-1 α)对进展性脑梗死(PCI)患者预后的预测价值。方法选取2020年1月至2022年11月南京大学医学院附属苏州医院收治的急性脑梗死(ACI)患者178例,其中PCI患者95例为进展组,非PCI患者83例为非进展组。根据治疗90d时预后将PCI患者分为预后良好组64例和预后不良组31例。检测各组血清Hcy、HIF-1α水平,分析两项因子与梗死体积、NIHSS的相关性,绘制ROC曲线评价Hcy、HIF-1α对PCI患者预后的评估价值。结果进展组中易损斑块比例、梗死体积、NIHSS评分高于非进展组,血清Hcy、HIF-1 α水平也高于非进展组(均P<0.05)。进展组患者血清Hcy及HIF-1 α水平与梗死体积、NIHSS评分呈正相关(均P<0.05)。预后不良组患者血清Hcy、HIF-1α水平明显高于预后良好组(均P<0.05)。Hcy联合HIF-1α预测PCI患者预后的曲线下面积为0.825,联合预测敏感度高于单一指标(P<0.05)。结论血清Hcy、HIF-1 α水平与PCI患者病情密切相关,检测血清Hcy、HIF-1α水平有助于早期评估PCI患者预后。

关键词：进展性脑梗死同型半胱氨酸低氧诱导因子-1α 预后

CT灌注成像联合CT血管成像对发病12h内的急性缺血性脑卒中临床应用价值的研究

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中国血液流变学杂志 2016年第3期26卷 293-297页

作者：卢曼周赟汲晓沛王辉蔡秀英方琪苏州大学附属第一医院神经内科江苏苏州215006

目的评价CT灌注成像（CT perfusion imaging，CTP）联合CT血管成像（CT angiography,CTA）对发病12h内缺血性脑卒中的临床价值。方法对15例发病时间在12h内的脑卒中患者同时行CT平扫、CTP、CTA检查，将CTP图像通过图像工作站（***）经过... 详细信息

目的评价CT灌注成像（CT perfusion imaging，CTP）联合CT血管成像（CT angiography,CTA）对发病12h内缺血性脑卒中的临床价值。方法对15例发病时间在12h内的脑卒中患者同时行CT平扫、CTP、CTA检查，将CTP图像通过图像工作站（***）经过VPCT Neuro-STROKE进行处理，测量缺血区的脑灌注参数值并分析缺血半暗带（ischemic penumbra，IP）；通过CT血管减影（CT-DSA）模式获取头颅及颈部脑血管图像，并分析CTA结果。结果15例患者中7例患者头颅CT出现早期低密度病灶，其余8例未见明显异常；发病在4．5h之内的患者有6例，其中有5例患者经CTP显示存在缺血半暗带，另外1例患者CTP显示未见缺血半暗带，经随访证实为短暂性脑缺血发作（TIA）；发病在4．5～6h的患者有2例，其中有1例患者经CTP显示存在缺血半暗带，另外1例不存在；发病在6～12h的患者有7例，其中仅有1例经CTP显示存在缺血半暗带，其余不存在缺血半暗带。在经CTP显示存在缺血半暗带的7例患者中，梗死区的脑血流量（CBF）、脑血容量（CBV）、平均通过时间（MTT）较对侧差异均有统计学意义（P〈0．05）；缺血半暗带区的CBF、MTT较对侧差异有统计学意义（P〈0．05），CBV较对侧差异无统计学意义（P〉0．05）；缺血半暗带区的CBF、CBV及MTT较梗死区差异有统计学意义（P〈0．05）。CTA显示有14例患者存在颈内动脉（ICA）或大脑中动脉（MCA）不同程度的狭窄或完全闭塞。结论CTP联合CTA对急性缺血性脑梗死患者的诊断和治疗具有指导意义，并通过CTP判定是否存在缺血半暗带可以指导急性缺血性脑卒中的个体化治疗。

关键词： CTP CTA 急性缺血性脑卒中缺血半暗带

B7H4在间充质干细胞C3H10T1／2移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎中的作用研究

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国际免疫学杂志 2015年第2期38卷 105-109页

作者：汲晓沛古彦铮张莹李楠张学光薛群苏州大学附属第一医院神经内科 215006 苏州大学附属第一医院临床免疫研究所 215006

目的探讨B7．H4分子在C3H10T1／2细胞（C3H10）移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中的作用。方法①用慢病毒将B7-H4靶向shRNA转染至C3H10细胞（C3H10-shRNA）并观察其对小鼠脾脏细胞活化增殖的调节作用；②利用MOG35-55和完... 详细信息

目的探讨B7．H4分子在C3H10T1／2细胞（C3H10）移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）中的作用。方法①用慢病毒将B7-H4靶向shRNA转染至C3H10细胞（C3H10-shRNA）并观察其对小鼠脾脏细胞活化增殖的调节作用；②利用MOG35-55和完全弗氏佐剂制备小鼠EAE模型，将50只小鼠分为正常对照组、EAE模型组、C3H10细胞组、C3H10-NC细胞组、C3H10-shRNA细胞组，通过HE染色、Fast-blue染色观察病理学改变，用免疫组化法检测B7-H4表达，结合神经功能评分观察不同干预方式对EAE损伤组织结构和功能的影响。结果①下调表达B7-H4的C3H10细胞可使其对小鼠脾细胞的免疫抑制作用减弱；②C3H10移植于EAE小鼠可减少、延缓发病，而移植C3H10-shRNA细胞的EAE小鼠发病时间、神经缺损评分和炎性细胞浸润、脱髓鞘改变及B7-H4的阳性细胞数均介于EAE组与其他对照组之间。结论C3H10细胞移植治疗EAE的安全、有效，B7-H4分子可能通过影响C3H10的免疫调节作用等生物学行为而影响移植疗效。

关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎间充质干细胞 B7-H4 C3H10 T1/2

可诱导共刺激分子与程序性死亡-1在重症肌无力患者外周血表达的研究

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中华神经科杂志 2018年第2期51卷 105-110页

作者：王彩琴应鸣翘薛群古彦铮段晓宇高晗清王明元汲晓沛严晓铭方琪董万利张学光江苏省苏州大学附属第一医院神经内科 215006 浙江省金华市中心医院苏州大学附属第一医院临床免疫研究所、江苏省(高校)临床免疫学重点实验室苏州市红十字中心血站

目的检测重症肌无力（myasthenia gravis, MG）早期患者外周血中正性共刺激分子可诱导共刺激分子（inducible costimulator, ICOS）与负性共刺激分子程序性死亡－1（programmed death 1, PD－1）的表达，并探讨其临床意义。方法分别收... 详细信息

目的检测重症肌无力（myasthenia gravis, MG）早期患者外周血中正性共刺激分子可诱导共刺激分子（inducible costimulator, ICOS）与负性共刺激分子程序性死亡－1（programmed death 1, PD－1）的表达，并探讨其临床意义。方法分别收集2014年2月到2016年12月间在苏州大学附属第一医院就诊且确诊为MG患者82例外周血标本，作为试验组，同时收集20例非MG患者的其他免疫病患者（non－myasthenia gravis, NMG）及健康体检者56名的外周血标本作为对照组。应用免疫荧光标记、流式细胞术检测3组成员外周血单个核细胞膜上PD－1、ICOS及相应配体程序性死亡－1配体（PD－L1）、可诱导共刺激分子配体（ICOSL）的表达；同时收集2组患者及健康对照组血清，应用酶联免疫吸附法检测3组成员血清中可溶性PD－1（sPD－1）、可溶性PD－L1（sPD－L1）和细胞因子IL－4等的含量并进行统计学分析。结果（1）流式分析结果：MG组CD4＋T细胞上ICOS＋亚群[57.29%（57.32%）]较健康对照组[15.6%（14.23%），Z＝－6.560，P〈0.05]及NMG组[23.4%（8.48%），Z＝－3.645，P〈0.05]显著增高，CD14＋单核细胞上和CD19＋B细胞上ICOSL＋亚群较健康对照组和NMG组表达增高。MG组CD4＋T细胞上PD－1＋亚群[16.82%（10.66%）]较健康对照组[9.34%（9.18%）, Z＝－4.345，P〈0.05]及NMG组[7.07%（3.40%）, Z＝－4.594，P〈0.05]表达增高，CD14＋单核细胞和CD19＋B细胞上PD－L1＋亚群较健康对照组及NMG组明显升高。MG患者外周血CD4＋T上PD－1与ICOS的共表达[9.64%（8.82%）]较健康对照组[1.81%（2.10%）, Z＝－7.389，P〈0.05]及NMG组[2.86%（1.49%）, Z＝－4.636，P〈0.05]上调。（2）EILSA检测结果：MG组血清中sPD－1[（1.87±0.64） ng/ml]明显高于健康对照组[（1.49±0.70） ng/ml, t＝2.04, P〈0.05]及NMG组[（1.05±0.5） ng/ml, t＝2.08, P〈0.05]；MG组血清中sPD－L1与健康对照组及NMG组差异无统计学意义。（3）血清细胞因子检测结果：MG组血清中IL－4表达[（61.88±5.15） pg/ml]较健康对照组[（32.03±1.84） pg/ml，t＝2.50, P〈0.05]及NMG组[（42.62±3.31） pg/ml，t＝2.34, P〈0.05]上调，MG患者sPD－1与IL－4呈正相关（r＝0.406，P＝0.029）。结论 CD4＋T细胞上的PD－1＋ICOS＋亚群升高提示该亚群参与了MG免疫病理过程，sPD－1可能干扰了T细胞上膜型PD－1的负性信号传导，引起ICOS正性信号相对亢进，导致该群细胞过度活跃推动MG病情进展。

关键词：重症肌无力细胞因子类流式细胞术可诱导共刺激分子程序性死亡-1