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解剖学报 2021年第4期52卷 520-527页

作者：王路义徐蔓汤博诣张潇月汪江杭王钰银谢乐静李英博重庆医科大学基础医学院生理学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院第二临床学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院第一临床学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院第二临床医学院重庆400016

目的探讨CTNND2基因敲除对小鼠小脑神经元发育和运动功能的影响及可能的机制。方法小鼠分为2组,每组10只,均为7周龄:野生型(WT)C57BL/6J小鼠为对照组,CTNND2基因敲除纯合子(CTNND2^(-/-))小鼠为实验组,PCR检测CTNND2^(-/-)小鼠的基因型... 详细信息

目的探讨CTNND2基因敲除对小鼠小脑神经元发育和运动功能的影响及可能的机制。方法小鼠分为2组,每组10只,均为7周龄:野生型(WT)C57BL/6J小鼠为对照组,CTNND2基因敲除纯合子(CTNND2^(-/-))小鼠为实验组,PCR检测CTNND2^(-/-)小鼠的基因型。平衡木实验、悬挂实验和步态分析实验检测两组运动功能;免疫荧光染色、高尔基染色检测小脑普肯耶细胞的变化;Western blotting检测突触相关蛋白磷酸化突触蛋白1(p-Syn1)、突触蛋白1(Syn1)、ELKS和突触后致密蛋白95(PSD95)以及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达水平。结果与WT组相比,CTNND2^(-/-)小鼠通过平衡木的时间延长,通过平衡木的比例下降,悬挂时间缩短,悬挂得分减少,前爪步幅长度和后爪步幅长度均缩短;CTNND2^(-/-)小鼠小脑中普肯耶细胞数及其树突的分支数均减少;p-Syn1/Syn1、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值以及ELKS、PSD95和PI3K表达水平均低于WT组。结论CTNND2基因敲除可能通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路,影响小脑普肯耶细胞的数量和树突结构以及突触相关蛋白的合成,导致小脑发育障碍,从而影响小鼠的运动功能。

关键词： CTNND2 基因敲除小脑普肯耶细胞运动功能高尔基染色免疫荧光小鼠

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