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作者：汪梦霞广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:帕金森(Parkinson's disease,PD),一种常见的中枢神经系统退行性疾病,其病因和发病机制尚不清楚,目前尚无完全有效的药物。PD的病理特征是路易小体(Lewy Body,LB)的形成,其主要成分是异常聚集的α-突触核蛋白(α-synuclein)。有研... 详细信息

目的:帕金森(Parkinson's disease,PD),一种常见的中枢神经系统退行性疾病,其病因和发病机制尚不清楚,目前尚无完全有效的药物。PD的病理特征是路易小体(Lewy Body,LB)的形成,其主要成分是异常聚集的α-突触核蛋白(α-synuclein)。有研究显示,SNCA基因突变是α-synuclein异常聚集的主要原因。α-synuclein的病理性积聚干扰正常细胞的功能和促进纹状体多巴胺(Dopamine,DA)能神经元变性缺失。如何阻断α-synuclein的异常沉积或促进聚集的α-synuclein降解越来越受到研究者的关注。三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)为中药三七最主要的有效成分。研究表明[1],三七总皂苷在神经系统、心脑血管系统以及抗炎、抗肿瘤、抗衰老等方面具有广泛的生理活性。三七总皂苷对帕金森神经系统性疾病、阿尔茨海默病和脑缺血损伤性疾病的治疗方面发挥着多方面的作用,具有广泛的开发应用前景[2]。本实验研究采用A53T突变型α-synuclein的神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞株为PD细胞模型,以稳定过表达人野生型(WT)为对照组,研究三七总皂苷对过表达人WT和A53T突变型α-synuclein稳转SH-SY5Y细胞的线粒体自噬的影响及其作用机制。为将三七总皂苷开发成治疗帕金森神经系统性疾病的有效药物奠定基础。方法:采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)作用于SH-SY5Y细胞,建立6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法、相关试剂盒测定、TUNEL染色、JC-1染色和蛋白印迹(Western blot)检测来验证三七总皂苷对6-OHDA诱导SH-SY5Y细胞损伤是否具有保护作用。采用MTT法对过表达人WT和A53T突变型α-synuclein的SH-SY5Y细胞进行活力检测。不同浓度(6.25、12.5、25、50、100μg·mL-1)三七总皂苷作用SH-SY5Y细胞24h和48h,用MTT法检测三七总皂苷对细胞活力是否有影响。JC-1检测三七总皂苷对WT或A53T稳转SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响;用免疫荧光检测LC3、线粒体及溶酶体的变化;用Western blot检测PINK1、Parkin、P62蛋白的表达。采用自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamycin)或自噬阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)进行干预,观察三七总皂苷对WT或A53T稳转SH-SY5Y细胞的线粒体自噬的影响。采用 Western blot 法检测 p-AMPK/AMPK、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR信号通路相关蛋白的表达,确证三七总皂苷对AMPK和PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响;并通过采用PI3K抑制剂LY294002和AMPK抑制剂compound C进行干预,观察AMPK和PI3K/Akt/mTOR信号通路对线粒体自噬的影响。结果:1.三七总皂苷对SH-SY5Y细胞的保护作用(1)三七总皂苷对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞具有保护作用:6.25 μg · mL-1、12.5 μ ***-1 和 25 u g ·mL-1 三七总皂苷预保护 24h,100 μmol·L-1 6-OHDA 再作用24h,MTT法表明细胞活率上调(P<0.05),LDH释放率降低(P<0.01)。(2)三七总皂苷对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞具有抗凋亡作用:TUNEL阳性细胞率显著下降(P<0.01),线粒体膜电位去极化显著抑制(P<0.01),caspase-3活力显著抑制(P<0.01)。(3)三七总皂苷对6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞具有抗氧化应激作用:ROS、MDA释放量减少(P<0.01),SOD、CAT、GSH-Px活力升高(P<0.01)。2.过表达人WT和A53T突变型α-synuclein的SH-SY5Y细胞活力无明显差异;50μ g · mL-1、100 μ g · mL-1三七总皂苷能降低细胞活力,且呈时间依赖性(P<0.05),不同浓度三七总皂苷(6.25、12.5和25 u g · mL-1)预孵育24h和48h对细胞活力无影响。3.三七总皂苷预孵育能够显著抑制A53T突变型α-synuclein的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位去极化(P<0.01);三七总皂苷能增加细胞内自噬泡和自噬溶酶体数量,上调LC3的表达量(P<0.01);预孵育3-MA能抑制三七总皂苷促线粒体自噬作用。4.三七总皂苷能降低A53T突变型α-synuclein的SH-SY5Y细胞p-AMPK/AMPK活化的抑制与 p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mT

关键词：帕金森病 α-突触核蛋白 SH-SY5Y细胞三七总皂苷线粒体自噬

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七氟烷预处理对C57BL/6J小鼠缺氧脑损伤的影响及其机制研究

七氟烷预处理对C57BL/6J小鼠缺氧脑损伤的影响及其机制研究

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作者：汪梦霞暨南大学

学位级别：硕士

目的本研究旨在观察七氟烷预处理对缺氧小鼠脑损伤的影响，并探讨其可能的作用机制，为七氟烷用于缺氧患者的麻醉提供相关的理论依据。方法实验分为两部分进行：第一部分：观察七氟烷预处理对缺氧小鼠海马CA1区细胞形态结构的影响。84... 详细信息

目的本研究旨在观察七氟烷预处理对缺氧小鼠脑损伤的影响，并探讨其可能的作用机制，为七氟烷用于缺氧患者的麻醉提供相关的理论依据。方法实验分为两部分进行：第一部分：观察七氟烷预处理对缺氧小鼠海马CA1区细胞形态结构的影响。84只小鼠随机分为六组，每组14只:对照组(Control)、缺氧组(H，6.5%O2，24h)、2%七氟烷预处理30min组(2%Sevo30min+H)、2%七氟烷预处理60min组(2%Sevo60min+H)、4%七氟烷预处理30min组(4%Sevo30min+H)、丙泊酚预处理组(Propofol+H)。分别按照要求留取海马HE染色光镜、透射电镜标本，制备切片，在光学显微镜、透射电子显微镜下观察各预处理对缺氧小鼠海马CA1区形态结构的影响。第二部分：观察七氟烷预处理对缺氧小鼠血清生化指标、脑组织的细胞因子及氧化应激的影响。小鼠随机分为六组:对照组、H组(6.5%O2,24h)、2%Sevo30min+H组、2%Sevo60min+H组、4%Sevo30min+H组、Propofol+H组。收集小鼠血清和脑组织匀浆，用IFCC法测定血清中LDH含量，用酶联免疫吸附分析(ELISA)方法测定小鼠脑匀浆的促红细胞生成素(EPO)、血管内皮生长因子(VEGF)含量、用酶标仪测定丙二醛(MDA)含量及超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果1HE染色光镜观察，七氟烷及丙泊酚预处理可减轻缺氧引起的CA1区细胞损伤，但组间无差异。透射电镜观察，各预处理组显著改善缺氧引起的CA1区细胞超微结构的病理改变，其中2%Sevo60min+H组的最为显著。2七氟烷预处理可明显降低缺氧引起血清LDH、脑组织EPO、VEGF含量的升高，在2%Sevo60min+H组最为显著。Propofol预处理能使LDH、EPO含量降低，但不能降低VEGF含量。各预处理均可降低缺氧导致的脑组织MDA含量的增高，且在2%Sevo60min+H组、4%Sevo30min+H组作用显著。缺氧可降低GPx、SOD活性，七氟烷预处理只能抑制GPx的下降，SOD没有像我们所预测的受其影响。结论七氟烷预处理可以减轻缺氧引起脑组织损伤而具有神经保护作用，且这种作用表现出与时间、浓度相关。丙泊酚则表现出较弱的保护作用，效果不及七氟烷。

关键词：七氟烷预处理缺氧神经保护细胞因子氧化应激

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经皮穴位电刺激联合静脉全麻对腔镜甲状腺手术的麻醉学价值研究

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中国中西医结合杂志 2014年第5期34卷 545-548页

作者：严彦念李雅兰吴晓意汪梦霞暨南大学第一附属医院麻醉科广州510632

目的探讨经皮穴位电刺激(transcutaneous acupoint electrical stimulation,TAES)静脉全麻行腔镜双侧甲状腺次全切除术的麻醉学价值。方法 60例择期行双侧腔镜甲状腺次全切除术患者,随机分为治疗组(TAES联合静脉全麻组)和对照组(全凭静... 详细信息

目的探讨经皮穴位电刺激(transcutaneous acupoint electrical stimulation,TAES)静脉全麻行腔镜双侧甲状腺次全切除术的麻醉学价值。方法 60例择期行双侧腔镜甲状腺次全切除术患者,随机分为治疗组(TAES联合静脉全麻组)和对照组(全凭静脉全麻组),每组30例。两组术中均采用靶控输注异丙酚复合恒速输注瑞芬太尼的方法维持麻醉,治疗组从麻醉诱导前30min至术毕持续TAES,刺激部位为双侧合谷和内关穴。分别记录入室后(基础值,T0)、插管即刻(T1)、插管后5min(T2)、切皮前5min(T3)、切皮后5min(T4)、充气30min(T5)、术毕(T6)、拔管前5min(T7)、拔管即刻(T8)、拔管后5min(T9)心率(HR)、平均动脉压(MAP),分别于T0、T3、T5、T6采用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α,记录T3、T4、T5异丙酚靶浓度。结果治疗组与对照组手术时间差异无统计学意义(P>0.05)。与本组T0比较,治疗组T3-4HR降低,T8-9HR升高,T7-9MAP升高;对照组T3HR降低,T7-9HR升高,T1、5、7-9MAP升高,T2-3MAP降低;两组T5-6IL-6均升高,T6TNF-α均降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与对照组同期比较,治疗组T6-9HR降低,T1、4、5、7-9MAP降低,T3 MAP升高,T5-6IL-6降低(P<0.05);各时间点异丙酚靶浓度及总量均降低,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论TAES在更好地维持术中血流动力学、适当抑制应激反应的同时,减少了麻醉药物的用量,提高麻醉的安全性。

关键词：经皮穴位电刺激腔镜甲状腺手术靶控输注血流动力学白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α

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1例心房颤动合并类风湿性关节炎术后食管损伤的护理体会

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第3期 138-140页

作者：汪梦霞浙江大学医学院附属第四医院心血管内科浙江金华322000

探讨房颤合并类风湿关节炎病人射频术后食管损伤的护理措施。方法通过对1例心房颤动合并类风湿性关节炎射频消融术后食道损伤病人护理进行回顾性分析。结果经我科综合治疗及护理,患者食道损伤逐渐恢复,可自主进食,感染得到控制,心衰... 详细信息

探讨房颤合并类风湿关节炎病人射频术后食管损伤的护理措施。方法通过对1例心房颤动合并类风湿性关节炎射频消融术后食道损伤病人护理进行回顾性分析。结果经我科综合治疗及护理,患者食道损伤逐渐恢复,可自主进食,感染得到控制,心衰指标和炎症指标较前好转后出院。结论房颤射频消融术已广泛应用于临床,但合并类风湿导致食道损伤的病例极为罕见,临床护理中缺乏经验,在积极治疗食道损伤的同时,控制原发病导致的炎症扩展,重点关注原发疾病继发的相关感染症状并给予对症护理,预防颅内出血、败血症等严重并发症,做好饮食护理,加强营养治疗,通过药物控制及针对性护理有效改善患者的疼痛症状,改善患者的治疗质量,促进患者康复。

关键词：心房颤动射频消融术类风湿关节炎食道损伤骨髓抑制

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双心护理模式在心血管住院患者中的研究进展

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第7期 0148-0152页

作者：汪梦霞浙江大学医学院附属第四医院心血管内科浙江义乌322000

心血管患者的心理问题受到医学界的日益重视,心血管疾病与心理问题相互影响,相互促进,形成恶性循环。双心医学模式是针对于双心疾病的主要治疗模式,国内双心医学、双心护理还在起步阶段。本文综述了双心疾病的发病机制、诊断识别,双心... 详细信息

心血管患者的心理问题受到医学界的日益重视,心血管疾病与心理问题相互影响,相互促进,形成恶性循环。双心医学模式是针对于双心疾病的主要治疗模式,国内双心医学、双心护理还在起步阶段。本文综述了双心疾病的发病机制、诊断识别,双心护理的模式以及其在心脏康复中的重要作用,为促进心血管住院患者的身心康复提供参考依据。

关键词：心血管疾病双心护理双心医学焦虑抑郁心脏康复

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布渣叶的紫外谱线组法鉴别研究

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中国药房 2015年第9期26卷 1248-1250页

作者：黄惠燕罗文汇董玉娟汪梦霞许灿新广东省人民医院/广东省医学科学院药学部广州510080 广东省中医药工程技术研究院广州510095 广州中医药大学广州510405

目的:利用紫外谱线组法对布渣叶进行鉴别。方法:采用紫外谱线组法,分别对水、无水乙醇、三氯甲烷和石油醚4种溶剂提取的不同来源布渣叶药材浸出液,采用紫外光谱法测定峰形、吸收峰的数目和峰位值。结果:不同来源布渣叶的紫外光谱谱线图... 详细信息

目的:利用紫外谱线组法对布渣叶进行鉴别。方法:采用紫外谱线组法,分别对水、无水乙醇、三氯甲烷和石油醚4种溶剂提取的不同来源布渣叶药材浸出液,采用紫外光谱法测定峰形、吸收峰的数目和峰位值。结果:不同来源布渣叶的紫外光谱谱线图的峰形、吸收峰数目及峰位值基本相同。结论:该法简便、准确、灵敏,可为布渣叶的鉴别提供参考。

关键词：布渣叶紫外谱线组法鉴别

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布渣叶化学成分和药理作用研究进展

布渣叶化学成分和药理作用研究进展

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2016年广东省药师周大会

作者：孙冬梅汪梦霞广东省中医药研究开发重点实验室广东省中医药工程技术研究院广州中医药大学

目的:本文对椴树科植物布渣叶的化学成分、质量分析和药理作用进行文献调研整理,为布渣叶进一步研究与开发提供参考。方法:查阅近20年国内外有关布渣叶化学成分、质量分析以及药理作用方面的报道,对其进行分析和综述。结果:布渣叶含有... 详细信息

目的:本文对椴树科植物布渣叶的化学成分、质量分析和药理作用进行文献调研整理,为布渣叶进一步研究与开发提供参考。方法:查阅近20年国内外有关布渣叶化学成分、质量分析以及药理作用方面的报道,对其进行分析和综述。结果:布渣叶含有多种类型的成分,研究主要集中在黄酮类,黄酮类成分具有多种生物活性,尤其在调血脂方面受到研究者的关注,但缺少其作用机制方面的研究。结论:对布渣叶进一步的研究将有利于开发新的药物和充分利用广东道地药材资源。

关键词：布渣叶化学成分质量分析药理作用综述

来源： cnki会议评论

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基于Nrf2信号通路的三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制研究

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中国药理学通报 2016年第3期32卷 343-349页

作者：赵静宇汪梦霞赵自明孟祥宝孙桂波孙晓波广州中医药大学附属广东省第二中医院广东广州510405 广东省中医药工程技术研究院广东省中医药研究开发重点实验室广东广州510095 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中药(天然产物)创新药物研发北京市重点实验室北京100193

目的探讨三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及分子机制。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤模型,MTT法检测PC12细胞活力,试剂盒测定LDH漏出量、ROS水平、MDA含量、Caspase-3活力以及抗氧化酶SOD、CAT和GHS-Px活力... 详细信息

目的探讨三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及分子机制。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤模型,MTT法检测PC12细胞活力,试剂盒测定LDH漏出量、ROS水平、MDA含量、Caspase-3活力以及抗氧化酶SOD、CAT和GHS-Px活力,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1染色观察线粒体膜电位,Western blot检测相关蛋白HO-1、Lamin-B、细胞核内Nrf2及总Nrf2的蛋白表达。结果三七总皂苷能够明显抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞活力下降(P<0.01)和LDH漏出(P<0.01),减少ROS和MDA的产生(P<0.01),增加SOD、CAT和GSH-Px活力(P<0.01),稳定线粒体膜电位,抑制caspase-3的活化(P<0.01)。而且,三七总皂苷还能够上调PC12细胞细胞核Nrf2、总Nrf2和细胞质中HO-1的蛋白表达。HO-1抑制剂Sn PP能够抑制三七总皂苷的神经保护作用。结论三七总皂苷可能通过上调Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制Aβ25-35诱导PC12细胞氧化应激和凋亡。

关键词：阿尔茨海默病三七总皂苷氧化应激凋亡 Nrf2 HO

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布渣叶化学成分和药理作用研究进展

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世界中医药 2015年第1期10卷 143-147页

作者：孙冬梅汪梦霞广东省中医药工程技术研究院广州510095 广东省中医药研究开发重点实验室广州510095 广州中医药大学广州510405

关键词：布渣叶化学成分质量分析药理作用综述

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七氟烷预处理对急性缺氧小鼠脑氧化应激的影响

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暨南大学学报（自然科学与医学版） 2013年第4期34卷 405-409,436页

作者：马达汪梦霞李雅兰梁云洁王成果暨南大学附属第一医院麻醉科广东广州510632

目的:观察七氟烷预处理对急性缺氧小鼠脑氧化应激的影响,并探讨其与预处理的时间、剂量的关系。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组:对照组(Control)、急性缺氧组(H组,6.5%O_2,24 h)、2%Sevo 30 min+H组、2%Sevo 60 min+H组、4%Sevo ... 详细信息

目的:观察七氟烷预处理对急性缺氧小鼠脑氧化应激的影响,并探讨其与预处理的时间、剂量的关系。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组:对照组(Control)、急性缺氧组(H组,6.5%O_2,24 h)、2%Sevo 30 min+H组、2%Sevo 60 min+H组、4%Sevo 30 min+H组、Propofol+H组。按试剂盒说明检测脑匀浆丙二醛(MDA)含量及超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果:与H组比较,各七氟烷预处理组脑内MDA水平下降,并在2%Sevo 60 min+H组、4%Sevo 30 min+H组降低显著,Propofol+H组则无意义;GPx活性在各七氟烷预处理组有所升高,在4%Sevo 30 min+H组上升显著,Propofol+H组GPx活性下降,但不明显;与预计相反,各预处理使SOD活性显著降低。结论:七氟烷预处理减轻脑氧化应激而具有脑保护作用,并与时间、剂量相关。

关键词：七氟烷预处理缺氧脑保护氧化应激

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