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中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏保护作用的实验研究

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安徽医科大学学报 2005年第1期40卷 13-16页

作者：郑红徐庆连韩之勋蔡晨汪思应陈志武安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院烧伤科安徽医科大学药理学教研室合肥230032

目的探讨中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏的保护作用.方法复制30% TBSAⅢ°烫伤豚鼠78只,并随机分成川芎嗪+复苏(治疗组)和复苏(对照组),每组均在烫伤后2、4、8、12、24、48 h 6个时相点,分别采血2～3 ml,用放免法测血浆肾上腺髓质素(ADM)、... 详细信息

目的探讨中药川芎嗪对烫伤豚鼠肾脏的保护作用.方法复制30% TBSAⅢ°烫伤豚鼠78只,并随机分成川芎嗪+复苏(治疗组)和复苏(对照组),每组均在烫伤后2、4、8、12、24、48 h 6个时相点,分别采血2～3 ml,用放免法测血浆肾上腺髓质素(ADM)、内皮素(ET)数值;同时在伤后4、12、24、48 h 4个时相点切取肾脏标本,用电镜观察肾脏超微结构改变;另设正常组.结果①血浆ADM:伤后两组各时相点差异均有显著性(P<0.05),8 h达峰值,两组比较对照组低于治疗组,在8、12、48 h各时相点差异有显著性(P<0.05或P<0.01).②血浆ET:两组各时相点均显著升高(P<0.01),治疗组升高明显低于对照组,在8 h内差异有显著性(P<0.05).③肾脏电镜观察:两组伤后4 h即出现明显病理改变,12 h最严重,48 h后减轻.治疗组损害明显轻于对照组.结论 ADM与ET含量变化参与了烧伤休克的发病过程,中药川芎嗪可减轻严重烫伤后肾脏的损害,提高ADM与ET的比值,对烫伤动物豚鼠肾脏有保护作用,ADM有协同作用.

关键词：肾/药物作用川芎嗪/药理学烧伤/药物疗法

MicroRNA-3666调节白血病细胞PTEN基因的表达

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中国病理生理杂志 2014年第4期30卷 615-619页

作者：倪芳张玉侠汪心怡赵华汪思应安徽医科大学病理生理学教研室安徽合肥230032

目的:探讨白血病细胞中microRNA-3666(miR-3666)对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的调控作用。方法:qRT-PCR检测miR-3666在正常人外周血单个核细胞、不同类型白血病细胞系以及临床初诊未治的不同类型白血病细胞... 详细信息

目的:探讨白血病细胞中microRNA-3666(miR-3666)对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的调控作用。方法:qRT-PCR检测miR-3666在正常人外周血单个核细胞、不同类型白血病细胞系以及临床初诊未治的不同类型白血病细胞中的表达差异,利用TargetScan在线分析软件预测miR-3666潜在靶基因PTEN后,构建含有靶基因野生型3’端非翻译区域(3’UTR)及突变型3’UTR(缺失了整段预测的miR-3666结合序列)的双萤光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹双萤光素酶重组质粒及miR-3666模拟体或阴性对照,共转染HEK293T细胞,应用双萤光素酶检测试剂盒测定萤光素酶活性。FAM标记的miR-3666抑制体和阴性对照分别核转染至K562细胞,FACS检测转染效率,并采用Western blotting检测PTEN蛋白的表达。结果:miR-3666在人白血病细胞系及原代白血病细胞中的表达明显高于正常人外周血单个核细胞,尤其高表达于K562细胞系及原代慢性粒细胞白血病细胞中;双萤光素酶报告基因测定系统验证PTEN是miR-3666的潜在靶基因;K562细胞中下调miR-3666后,Western blotting检测结果显示PTEN蛋白显著上调。结论:白血病细胞中miR-3666的表达上调,下调miR-3666后可以促进靶基因PTEN的表达,miR-3666有可能成为白血病治疗的新靶点。

关键词：白血病 MicroRNA-3666 第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因

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妊高征孕妇凝血指标的变化及其临床意义

疾病控制杂志 2005年第2期9卷 179-180页

作者：刘荃汪思应安徽医科大学病理生理教研室

妊高征是现代围产医学中常见的妊娠并发症,妊高征孕妇患病时,体内凝血功能的变化较明显,多种凝血因子和纤溶因子水平均会发生变化.为了解妊高征孕妇凝血功能和血液纤溶状态的变化,笔者对59例妊高征孕妇及74例正常孕妇血浆中凝血酶原时间... 详细信息

妊高征是现代围产医学中常见的妊娠并发症,妊高征孕妇患病时,体内凝血功能的变化较明显,多种凝血因子和纤溶因子水平均会发生变化.为了解妊高征孕妇凝血功能和血液纤溶状态的变化,笔者对59例妊高征孕妇及74例正常孕妇血浆中凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和纤维蛋白原(fibrinogen,Fbg)的含量进行测定,旨在探讨妊高征孕妇凝血象的变化及临床意义.

关键词：高血压妊娠并发症凝血酶原时间妊高征凝血功能血液纤溶状态纤维蛋白原

IL-10与HO-1在大鼠酒精性脂肪肝模型中的表达

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中国现代医学杂志 2011年第11期21卷 1335-1338,1342页

作者：王晓红曹琦汪思应胡成穆安徽医科大学动物实验中心安徽合肥230032 安徽医科大学药学院安徽合肥230032

目的探讨IL-10和HO-1在酒精性脂肪肝模型中的作用和意义。方法建立大鼠酒精性脂肪肝动物模型,检测大鼠血清IL-10以及TNF-α,肝匀浆中MDA、GSH以及SOD相关指标的变化;此外采用RT-PCR方法检测IL-10和HO-1 mRNA的表达。结果随着肝脏损伤程... 详细信息

目的探讨IL-10和HO-1在酒精性脂肪肝模型中的作用和意义。方法建立大鼠酒精性脂肪肝动物模型,检测大鼠血清IL-10以及TNF-α,肝匀浆中MDA、GSH以及SOD相关指标的变化;此外采用RT-PCR方法检测IL-10和HO-1 mRNA的表达。结果随着肝脏损伤程度的加深,TNF-α的水平明显增加而IL-10却逐渐降低;肝匀浆中GSH和SOD的活性明显下降,但MDA却呈上升趋势;IL-10和HO-1mRNA表达也随着肝脏损伤程度的加深而减弱。结论 IL-10与HO-1的表达随着肝损伤程度的加重而逐渐降低,且构成一个新的抗炎途径参与了酒精性肝病的过程,从而为今后的酒精性肝病的临床治疗和药物研发提供新的思路。

关键词：血红素氧化酶-1 白介素-10 酒精性肝病

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人THAP11慢病毒载体的构建及表达研究

安徽医科大学学报 2010年第5期45卷 605-609页

作者：黄先红李长燕詹轶群王治东许望翔杨晓明汪思应安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的构建人死亡相关蛋白11(THAP11)基因的慢病毒载体,并建立其慢病毒表达系统。方法 PCR方法获得人THAP11基因,限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒pBPLV-THAP11-myc,并通过转染HEK293细胞观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达以及Wes... 详细信息

目的构建人死亡相关蛋白11(THAP11)基因的慢病毒载体,并建立其慢病毒表达系统。方法 PCR方法获得人THAP11基因,限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒pBPLV-THAP11-myc,并通过转染HEK293细胞观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达以及Westernblot检测其表达。在脂质体介导下将重组质粒与包装质粒pLP1和pLP2、包膜质粒pLP/VSVG共转染293FT细胞包装产生慢病毒。结果构建的质粒经PCR,酶切及测序鉴定正确;该质粒与包装质粒共转染293FT细胞获取的5.5×106TU/ml慢病毒滴度。结论成功构建了人THAP11基因慢病毒载体质粒THAP11-myc-pBPLV,并建立了其慢病毒表达系统,为后续的应用研究奠定了基础。

关键词：质粒遗传载体

Tec真核表达载体构建及其对细胞信号的影响

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安徽医科大学学报 2005年第3期40卷 206-210页

作者：李菲菲刘雷郑红周颖余科科程洁王本忠汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院普外科合肥230022

目的构建人Tec酪氨酸蛋白激酶真核表达载体;研究Tec参与肝细胞再生的可能信号途径。方法经PCR扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Tec插入pCDNA3.1(hismycTec)真核表达载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用脂质体法将构建的真核表达载体... 详细信息

目的构建人Tec酪氨酸蛋白激酶真核表达载体;研究Tec参与肝细胞再生的可能信号途径。方法经PCR扩增、酶切、连接等基因重组技术将人Tec插入pCDNA3.1(hismycTec)真核表达载体中,并经酶切、PCR、测序鉴定;用脂质体法将构建的真核表达载体瞬时转染Hela细胞,用Western方法检测Tec蛋白是否表达。用荧光素酶报告基因系统,检测Tec是否参与HGF刺激信号途径的活化。结果构建的Tec真核表达载体使Hela细胞高表达Tec蛋白;并发现Tec在HGF介导下,对Elk信号分子活化的报告质粒中荧光素酶的表达有明显增强作用。结论构建了Tec真核表达载体,并能使HGF介导的MAPK途径活化,提示Tec可能参与HGF介导肝细胞增殖的信号调控。

关键词：真核表达载体构建 Tec 细胞信号 Hela细胞酪氨酸蛋白激酶 Western pcDNA3 基因重组技术 MAPK途径信号途径荧光素酶肝细胞再生 PCR扩增肝细胞增殖 HGF 瞬时转染脂质体法基因系统增强作用信号分子信号调控 c蛋白

纳米红色元素硒对C_(57)小鼠Lewis肺癌移植瘤形成与转移的影响

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中国公共卫生 2000年第2期16卷 109-110页

作者：高学云张劲松张立德汪思应中国科学技术大学 230026 中国科学院固体物理研究所安徽医科大学

纳米红色元素硒是一种纳米粒子 ,粒径在 2 0nm～6 0nm之间。采用Lewis肺癌 (LLC)移植瘤模型观察其抗肿瘤功效。小鼠分别灌喂纳米红色元素硒 2mg/kg .bw、4mg/kg .bw、8mg/kg .bw 3种剂量 10天。结果表明 :与正常对照组比 ,纳米红色元素... 详细信息

纳米红色元素硒是一种纳米粒子 ,粒径在 2 0nm～6 0nm之间。采用Lewis肺癌 (LLC)移植瘤模型观察其抗肿瘤功效。小鼠分别灌喂纳米红色元素硒 2mg/kg .bw、4mg/kg .bw、8mg/kg .bw 3种剂量 10天。结果表明 :与正常对照组比 ,纳米红色元素硒可显著抑制LLC移植瘤的体积与重量。小鼠分别灌喂纳米红色元素硒 8mg/kg .bw和环磷酰胺 2 0 μg/kg .bw10天 ,与正常对照组比 ,二者皆可明显抑制LLC移植瘤的体积、重量、自发性肺转移 ,延长荷瘤小鼠的生存时间 ,二者之间无显著性差异。表明 ,纳米红色元素晒有较好的抗Lewis肺癌移植瘤效果。

关键词：硒纳米红色素硒 Lewis肺癌环磷酰胺

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死亡相关蛋白11对染色质形态的影响

安徽医科大学学报 2008年第3期43卷 264-268页

作者：李扬朱晨雁翟倩丁丽华叶棋浓李长燕詹轶群杨晓明汪思应安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 军事医学科学院生物工程研究所北京100850

目的研究死亡相关蛋白11(THAP11)对染色质形态的影响。方法将THAP11与pRC-lac载体上lac的阻遏物融合表达于AO3-1细胞中,然后利用染色质形态检测技术检测THAP11对染色质形态的影响。结果与对照组比较,THAP11能使染色质更加浓缩。结论THA... 详细信息

目的研究死亡相关蛋白11(THAP11)对染色质形态的影响。方法将THAP11与pRC-lac载体上lac的阻遏物融合表达于AO3-1细胞中,然后利用染色质形态检测技术检测THAP11对染色质形态的影响。结果与对照组比较,THAP11能使染色质更加浓缩。结论THAP11可能具有转录抑制功能和作为白血病的抑癌因子,为进一步研究THAP11功能提供了线索。

关键词：基因染色质转录,遗传

SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性

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安徽医科大学学报 2010年第5期45卷 593-596页

作者：霍寅萍储朗余科科郑红瞿成奎汪思应安徽医科大学病理生理学教研室合肥230032

目的研究SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对白细胞素3(IL3)呈高增殖敏感性的机制。方法从野生型(WT组)、SHP-2杂合突变型(SHP-2D61G/+)小鼠骨髓中获取髓系细胞,运用细胞集落形成实验观察髓系细胞集落形成能力,用不同剂量的IL30、0.... 详细信息

目的研究SHP-2酪氨酸磷酸酶激活突变的肥大细胞对白细胞素3(IL3)呈高增殖敏感性的机制。方法从野生型(WT组)、SHP-2杂合突变型(SHP-2D61G/+)小鼠骨髓中获取髓系细胞,运用细胞集落形成实验观察髓系细胞集落形成能力,用不同剂量的IL30、0.2、2.0、10.0ng/ml)诱导比较两组髓系细胞形成集落数的差异。从髓系细胞中分离培养出肥大细胞,MTS法观察肥大细胞在IL3诱导下的细胞增殖性,Westernblot比较肥大细胞中Erk、Akt的表达及磷酸化水平,免疫共沉淀和Westernblot检测肥大细胞中SHP-2与Gab2结合能力。结果 SHP-2D61G/+组比WT组的髓系细胞集落形成能力增强;IL3诱导下的肥大细胞在SHP-2D61G/+组显示了更高的增殖活性;SHP-2D61G/+组肥大细胞中Erk和Akt的磷酸化水平较WT组明显升高;SHP-2D61G/+杂合突变后与Gab2结合能力增高。结论 SHP-2D61G/+的肥大细胞对IL3呈高增殖敏感性,其分子机制可能与SHP-2D61G/+与Gab2的结合能力增强,从而进一步参与对IL3介导的Ras-Erk、PI3K-Akt信号通路的正调控作用有关。

关键词：蛋白质酪氨酸磷酸酶白细胞介素3,非受体Ⅱ型肥大细胞细胞增殖