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分泌抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的制备及其应用的研究

1991年

作者：汪力亚汪美光

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解放军医学情报 1990年第6期4卷 299-302页

作者：汪力亚汪美先第四军医大学

抗肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体8F8轻链可变区基因的克隆及序列分析

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细胞与分子免疫学杂志 1993年第3期 56-57页

作者：阎岩汪力亚张劲翼汪第四军医大学微生物学教研室西安 710032 第四军医大学微生物学教研室

本文用基因工程技术,从8F8杂交瘤细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因V,并对8F8单抗V的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。 1 杂交瘤细胞系抗HFRSV血凝素McAb 8F8株培养于RPMI-1... 详细信息

本文用基因工程技术,从8F8杂交瘤细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA,应用PCR快速克隆出8F8单抗的轻链可变区基因V,并对8F8单抗V的核苷酸序列和相应编码的氨基酸序列进行了测定和推导。 1 杂交瘤细胞系抗HFRSV血凝素McAb 8F8株培养于RPMI-1640培养液(含20％小牛血清)中。

关键词：序列分析 PCR cDNA 轻链可变区血凝素基因 RNA

免疫磁化-电化学发光仪检测食品和环境水标本中大肠杆菌O_(157)和鼠伤寒沙门氏菌

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传染病信息 1996年第4期9卷 158-159页

作者：汪力亚

肉类、家禽,甚至饮用水中污染了出血性大肠杆菌O157:H7及其它有毒力的肠道致病菌均能严重威胁健康。传统的基础培养法检测食品和水源中肠道致病菌较慢而且结果可能不确切。免疫磁化分离（IMS）和检测法被认为是很有前途的食品和环境标... 详细信息

肉类、家禽,甚至饮用水中污染了出血性大肠杆菌O157:H7及其它有毒力的肠道致病菌均能严重威胁健康。传统的基础培养法检测食品和水源中肠道致病菌较慢而且结果可能不确切。免疫磁化分离（IMS）和检测法被认为是很有前途的食品和环境标本中快速细菌检查法。作者评估了一种IMS和电化学发光法（ECL）相结合的商品化传感装置,用于食品和污染物中大肠杆菌O157

关键词：鼠伤寒沙门氏菌出血性大肠杆菌肠道致病菌食品电化学发光法免疫磁化分离检测法标本污染物培养法

单克隆抗体亲和层析法纯化HFRS病毒血凝素抗原的初步研究

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免疫学杂志 1989年第4期 213-220页

作者：汪力亚汪美先王海涛姜绍谆第四军医大学微生物学教研室西安第四军医大学微生物学教研室

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈栋感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素,将此粗制血凝素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G与Sepharose 4B偶联的免疫吸附柱,获得初步纯化的HFRS病毒血凝素抗原,经鉴定具有较高的血凝滴度和较好的免疫原性。用SDS-P... 详细信息

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈栋感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素,将此粗制血凝素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G与Sepharose 4B偶联的免疫吸附柱,获得初步纯化的HFRS病毒血凝素抗原,经鉴定具有较高的血凝滴度和较好的免疫原性。用SDS-PAGE和Wes-tern-blot技木分析该纯化的血凝素抗原,并与同法纯化的正常鼠脑抗原比较,证明该特异性血凝素抗原分子量为5×10~4道尔顿。用2株抗HFRS病毒以及10株抗HFRS病毒血凝素McAb,以ELISA阻断试验分析纯化50K血凝素,结果有10株McAb可阻断McAb3 G与其结合,其抗原决定簇之间有部分相同或重叠,提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一结构蛋白上。以上结果表明,该50k血凝素蛋白特性及结构均较复杂,尚待进一步研究。

关键词：肾综合征出血热病毒单克隆抗体亲和层析血凝素抗原

单克隆抗体对肾综合征出血热病毒感染乳鼠保护作用的研究

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单克隆抗体通讯 1989年第2期5卷 5-10页

作者：卫立辛汪美先徐志凯汪力亚第四军医大学微生物学教研室

HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显... 详细信息

HFRS病毒陈株100LD_(50)腹腔感染新生乳鼠后24小时,腹腔分别接种24株抗HFRS病毒McAb,观察McAb对感染新生乳鼠的保护作用。结果发现,有5株McAb保护率为100％,1株McAb保护率为17％,另有7株McAb可使感染乳鼠的发病死亡时间推迟。取有明显保护作用的5株McAb分别接种感染后不同时间的乳鼠,结果在48小时内接种保护率均达100％;但随接种时间推后,保护率逐渐下降,感染后10天接种几乎无保护作用。此5株McAb保护作用均优于多克隆的免疫血清。应用不同稀释的McAb 3D8进行保护试验,发现保护效果与接种剂量密切相关。采用固定抗体,稀释病毒方法测得McAb 3D8对HFRS病毒陈株感染乳鼠的保护指数为5.8。

关键词：肾综合征出血热病毒保护作用感染乳鼠单克隆抗体 McAb 抗HFRS病毒新生乳鼠保护率腹腔感染死亡时间不同时间接种时间免疫血清保护效果病毒方法保护指数感染后 3D8 多克隆稀释

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用酶联免疫吸附试验检出伤寒杆菌蛋白抗原

国外医学(微生物学分册) 1988年第2期 90-91页

作者：汪力亚

本文作者应用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清中的伤寒杆菌蛋白抗原,建立了诊断伤寒的有效方法。实验方法是:（1）用0.05M pH9.8碳酸缓冲液（含0.1%NaN3）稀释兔抗伤寒杆菌蛋白抗原（BP）免疫球蛋白（Ig）或免疫前兔... 详细信息

本文作者应用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清中的伤寒杆菌蛋白抗原,建立了诊断伤寒的有效方法。实验方法是:（1）用0.05M pH9.8碳酸缓冲液（含0.1%NaN3）稀释兔抗伤寒杆菌蛋白抗原（BP）免疫球蛋白（Ig）或免疫前兔的Ig,使含50mg/ml蛋白质浓度。在微量滴定板上,每孔加100μl,37℃孵育3小时;（2）用

关键词：伤寒杆菌 Ig 血清 BP 蛋白抗原酶联免疫吸附试验

抗肾综合征出血热病毒血凝素单抗重链可变区基因的克隆及序列分析(研究简报)

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单克隆抗体通讯 1991年第4期7卷 83-84页

作者：张劲翼程云汪力亚汪美先阎岩第四军医大学微生物学教研室西安710032

近年来,基因工程抗体的研究在国内外受到广泛重视,人们试图通过研制鼠/人嵌合抗体及小分于抗体来解决鼠McAb应用于人体而产生的抗鼠抗体反应。而制备基因工程抗体的关键是获得McAb可变区基因。肾综合征出血热(HFRS)迄今尚无特异疗法。... 详细信息

近年来,基因工程抗体的研究在国内外受到广泛重视,人们试图通过研制鼠/人嵌合抗体及小分于抗体来解决鼠McAb应用于人体而产生的抗鼠抗体反应。而制备基因工程抗体的关键是获得McAb可变区基因。肾综合征出血热(HFRS)迄今尚无特异疗法。本室自1984年以来研制了几十株抗HFRS病毒及其血凝素抗原的鼠McAb,其中有5株经体内、体外实验证明,对病毒感染小鼠具有较强的中和活性和保护作用,显示出良好的应用前景。本文报告其中一株3G1重链可变区基因的克隆及序列分析结果。

关键词： HFRS病毒血凝素单克隆抗体

单克隆抗体亲和层析法纯化HFRS病毒血凝素抗原的研究

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单克隆抗体通讯 1989年第1期5卷 8-13页

作者：汪力亚汪美先王海涛姜绍谆第四军医大学微生物学教研室

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Weste... 详细信息

用蔗糖-丙酮法从HFRS病毒陈株感染的乳小白鼠鼠脑中提取粗制血凝素，特此粗制血箍素通过抗HFRS病毒血凝素McAb 3G1与Sepherose 4B偶联的免疫吸附柱，获得纯化HFRS病毒血凝素抗原具有较高的血凝滴度和良好的免疫原性．用SDS—PAGE和Western-blot技术分析该纯化的血凝素抗原，并与同法纯他的正常鼠脑抗原比较，证明谊特异性血凝素抗原分子量为5×10^4道尔顿。用2株抗HFRS病毒以及10株抗HFRS病毒血凝素McAb，以ELISA阻断试验分析纯化50K血凝素，结果育10株McAb可阻断McAb3G1与其结合，其抗碌决定簇之间有部分相同或重叠，提示这些具有不同特性的抗原决定簇确实位于同一蛋白上。以上结果表明，该SOK血疑素蛋白特性及结构均较复杂，尚待进一步研究。

关键词：单克隆抗体亲和层析法血凝素抗原肾综合征出血热病毒血凝素

双McAb-ELISA夹心法检测HFRS病毒血凝素抗原的实验研究

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单克隆抗体通讯 1989年第1期5卷 14-17页

作者：汪力亚汪美先王海涛姜绍谆第四军医大学微生物学教研室

作者采用抗HFRS病毒血凝素McAb和HRP标记的同一种McAb,建立了检验HFRS病毒血凝素抗原的双McAb-ELISA夹心法。经取代试验和抗原阻断试验均证明本法具有高度特异性,重复性也良好。用本法和血凝试验平行地检测了10批粗提HFRS陈株感染鼠脑... 详细信息

作者采用抗HFRS病毒血凝素McAb和HRP标记的同一种McAb,建立了检验HFRS病毒血凝素抗原的双McAb-ELISA夹心法。经取代试验和抗原阻断试验均证明本法具有高度特异性,重复性也良好。用本法和血凝试验平行地检测了10批粗提HFRS陈株感染鼠脑的血凝素抗原,检出率分别为100％和70％,而前法滴度明显高于后法(GMT 1:506和1:26),有显著性差异(P<0.01)。用本法检验了10种从不同疫区不同宿主分离的HFRS病毒株的感染鼠脑或Vero—E6培养上清,结果均为阳性,虽血凝素抗原滴度高低不一,却再次说明不同HFRS病毒株血凝素之间有群共同性,因此本法在HFRS的临床诊断,流行病学监测,疫苗效价鉴定中都有实用价值,可取代血凝试验。

关键词：双McAb-ELISA夹心法检测 HFRS病毒血凝素抗原实验研究