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睫状神经营养因子对颅脑伤大鼠下丘脑生长抑素mRNA及加压素表达的影响

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解剖学杂志 2005年第3期28卷 319-322页

作者：汤淑萍冀凯宏第二军医大学组织学与胚胎学教研室上海200433

目的:观察下丘脑生长抑素(SS)和精氨酸加压素(AVP)在睫状神经营养因子(CNTF)治疗颅脑伤时的变化。方法:建立颅脑伤模型并用CNTF进行治疗,采用SS原位杂交和AVP免疫组织化学双标法进行观察。结果:颅脑伤时,下丘脑室周核SS神经元数目减少,... 详细信息

目的:观察下丘脑生长抑素(SS)和精氨酸加压素(AVP)在睫状神经营养因子(CNTF)治疗颅脑伤时的变化。方法:建立颅脑伤模型并用CNTF进行治疗,采用SS原位杂交和AVP免疫组织化学双标法进行观察。结果:颅脑伤时,下丘脑室周核SS神经元数目减少,视上核SS与AVP共存的阳性神经元数目减少,经CNTF治疗均明显增多。结论:提示及时给予CNTF治疗颅脑伤,有利于神经元的恢复,进而促进SS与AVP的作用。

关键词：睫状神经营养因子生长抑素mRNA 颅脑伤下丘脑生长抑素阳性神经元数目大鼠精氨酸加压素 CNTF 免疫组织化学下丘脑室周核 AVP 原位杂交治疗 SS 双标法视上核

白血病抑制因子受体不同亚基细胞内区与HL-60细胞内STAT3激活的关系

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免疫学杂志 2001年第3期17卷 177-180页

作者：单继宽刘厚奇汤淑萍刘善荣第二军医大学组织胚胎学教研室上海200433

目的观察白血病抑制因子 (L IF)受体 gp190亚基和 gp130亚基胞内区在人白血病细胞系 HL- 6 0中与STAT3表达及激活的关系 ,了解白血病抑制因子 (L IF)引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法用基因重组技术将gp130和 gp190的细胞内区... 详细信息

目的观察白血病抑制因子 (L IF)受体 gp190亚基和 gp130亚基胞内区在人白血病细胞系 HL- 6 0中与STAT3表达及激活的关系 ,了解白血病抑制因子 (L IF)引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法用基因重组技术将gp130和 gp190的细胞内区互换以构成两个嵌合体受体基因 (130 / 190 ,190 / 130 )并分别在 HL- 6 0细胞表达。用免疫组化和免疫印迹杂交方法分析形成受体亚基细胞内区同源性二聚体后的磷酸化 STAT3的水平和 STAT3的表达水平。结果转染p ED130 / 190 ,L IF诱导 10 m in后 ,HL- 6 0细胞内的 STAT3磷酸化增加 (P<0 .0 1) ,经 L IF诱导的转染 p ED130 / 190的 HL- 6 0细胞的 STAT3磷酸化水平存在时间依赖性 ,转染 p ED190 / 130的 HL - 6 0细胞 ,L IF诱导 6 h后 ,STAT3的表达降低。结论白血病抑制因子受体 gp190亚基细胞内区在 L IF诱导下参与 HL- 6 0细胞中 STAT3的激活。

关键词：白血病抑制因子受体信号转导白血病 HL-60细胞 STAT3 亚基

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在乳腺癌细胞移动及粘附中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2003年第4期19卷 523-527页

作者：王凤玫刘厚奇刘善荣汤淑萍杨玲冯根生第二军医大学组胚教研室上海200433

探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2在乳腺癌细胞MCF 7的移动及粘附中的作用 .利用基因重组技术分别将野生型SHP 2与突变型SHP 2与绿色荧光蛋白GFP的基因片段构成重组质粒 (SHP 2 GFP、SHP 2C >S GFP) .脂质体转染法分别转入MCF 7中 ,表达成功... 详细信息

探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP 2在乳腺癌细胞MCF 7的移动及粘附中的作用 .利用基因重组技术分别将野生型SHP 2与突变型SHP 2与绿色荧光蛋白GFP的基因片段构成重组质粒 (SHP 2 GFP、SHP 2C >S GFP) .脂质体转染法分别转入MCF 7中 ,表达成功后筛选并建立SHP 2 GFP和SHP 2C >S GFP细胞株 .荧光显微镜观察细胞移动情况 ,免疫印迹法检测粘附分子E 钙粘蛋白和金属蛋白酶MMP 1及MMP 9的表达 .实验后建立SHP 2 GFP及SHP 2C >S GFP细胞株 ,同时观察到SHP 2C >S GFP细胞的形态发生明显改变 :从梭形状态变成圆形状态 .荧光显微镜发现 ,MCF 7细胞和SHP 2 GFP、SHP 2C >S GFP转染的细胞在 3h、6h、9h的移动情况分别是MCF 7为 10 %、2 3%、5 4% ,SHP 2 GFP为 15 %、4 9%、98% ,SHP 2C >S GFP为 4 %、11%、30 % .免疫印迹结果表明 ,SHP 2C >S GFP细胞的E 钙粘蛋白表达比SHP 2 GFP细胞明显升高 (P <0 0 5 ) .MMP 1及MMP 9的表达量在SHP 2 GFP细胞中有所增强 (P <0 0 5 ) .实验表明 ,SHP 2可能通过调节粘附分子和基质金属磷酸酶而在细胞移动。

关键词：蛋白酪氨酸磷酸酶乳腺癌细胞移动癌细胞粘附 E-钙粘蛋白

白血病抑制因子受体gp190细胞内区与HL-60细胞内Cdc25B激活的关系

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第二军医大学学报 2002年第12期23卷 1328-1331页

作者：冀凯宏刘厚奇陆海英刘善荣汤淑萍第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433

目的 :观察白血病抑制因子 (L IF)受体 gp190亚基完整的细胞内区和 gp190胞内区 C末端片段在人白血病细胞系HL - 6 0中与细胞周期调控因子 Cdc2 5 B表达和激活的关系 ,进一步了解 L IF引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法 :用基... 详细信息

目的 :观察白血病抑制因子 (L IF)受体 gp190亚基完整的细胞内区和 gp190胞内区 C末端片段在人白血病细胞系HL - 6 0中与细胞周期调控因子 Cdc2 5 B表达和激活的关系 ,进一步了解 L IF引发白血病细胞增殖抑制和分化的机制。方法 :用基因重组技术将 gp130的细胞内区换成 gp190的细胞内区 ,用 PCR技术扩增合成 gp190细胞内区 C末端的一个多肽 ,构成嵌合体受体基因 130 /190及 190 CT片段 ,并分别在 HL - 6 0细胞表达。用免疫组化和 Western印迹方法 ,分析在 L IF的诱导下 ,细胞生长和形态与 Cdc2 5 B表达的关系。结果 :转染 pc DNA 3.0 130 /190的 HL - 6 0细胞 Cdc2 5 B的表达量降低 ,细胞数量减少 ,细胞体积增大 ;转染 pc DNA3.0 190末端的 HL - 6 0细胞 Cdc2 5 B的表达量增高 ,细胞表现为增殖 ,细胞体积普遍减小。结论 :Cdc2 5 B表达量降低与 L IF诱导引发的白血病细胞 HL - 6 0增殖抑制有关 ,上述效应是由 gp190亚基细胞内区介导的 ,而gp190 C末端片段可干扰 L

关键词：白血病抑制因子白血病抑制因子受体 HL-60 Cdc25B 细胞周期蛋白类细胞增殖信号转导

人胚胎间充质干细胞向平滑肌细胞定向分化标志蛋白的选择

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 822-826页

作者：李红华刘厚奇刘太华汤淑萍熊俊惠宁第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部人体解剖学教研室长海医院妇产科

目的:选择平滑肌细胞(smooth musele cell,SMC)特异性标志蛋白,作为判断人胚胎间充质干细胞(mesenchymalstem cell,MSC)是否向SMC方向分化的指标。方法:采用免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹和RT-PCR等方法,检测SMC分化早、中、晚... 详细信息

目的:选择平滑肌细胞(smooth musele cell,SMC)特异性标志蛋白,作为判断人胚胎间充质干细胞(mesenchymalstem cell,MSC)是否向SMC方向分化的指标。方法:采用免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹和RT-PCR等方法,检测SMC分化早、中、晚期标志蛋白smooth muscle(SM)-α-actin、calponin、SM-myosin heavy chain(SM-MHC)在人胚MSC中的表达情况。结果:各实验均证明SM-α-actin和calponin蛋白在人胚MSC中表达。各种实验方法在人胚MSC中均检测不到SM-MHC蛋白及其mRNA的表达。结论:SM-MHC是一个有价值的SMC特异性标志物,可以做为判断人胚MSC向SMC方向分化与否的指标。

关键词：间充质干细胞胚胎平滑肌细胞细胞分化

白血病抑制因子受体细胞内区对HL-60细胞表达CD14和CD15的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2004年第5期20卷 659-663页

作者：冀凯宏汤淑萍刘善荣陆海英刘厚奇第二军医大学组胚教研室上海200433

观察白血病抑制因子 (LIF)受体gp190亚基完整的细胞内区和gp190胞内区C末端片段(190CT)对人白血病系HL 6 0表达CD14、CD15的影响 ,进一步了解LIF引发白血病细胞增殖抑制和分化的关系 .用基因重组技术将LIF另一亚基gp130的细胞内区换成gp... 详细信息

观察白血病抑制因子 (LIF)受体gp190亚基完整的细胞内区和gp190胞内区C末端片段(190CT)对人白血病系HL 6 0表达CD14、CD15的影响 ,进一步了解LIF引发白血病细胞增殖抑制和分化的关系 .用基因重组技术将LIF另一亚基gp130的细胞内区换成gp190的细胞内区 ,用PCR技术扩增gp190细胞内区C末端的一个多肽的编码序列 ,构成嵌合体受体基因 130 /190及 190CT片段 ,并分别在HL 6 0细胞表达 .用免疫组化和流式细胞术检测分析在LIF的诱导下 ,HL 6 0细胞表达CD14、CD15的水平 .转染pcDNA130 /190的HL 6 0细胞 ,CD15表达量明显增高 ;转染pcDNA190CT的细胞 ,CD15的表达量降低 ;但 2组细胞的CD14表达量均较低且水平接近 .LIF可能诱导HL 6 0细胞向粒细胞而不向单核细胞分化 ,该效应是由gp190亚基细胞内区介导的 ,而gp190C末端片段可干扰LIFα受体介导的信号传导效应 .

关键词： HL-60细胞细胞内 CD15 表达量 CD14 转染白血病抑制因子受体胞内区 CDl4 末端

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在乳腺癌细胞移动及粘附中的作用

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中国病理生理杂志 2003年第11期19卷 1582-1583页

作者：王凤玫刘厚奇刘善荣汤淑萍杨玲冯根生第二军医大学基础部组织胚胎学教研室上海200433

人早期胚胎间充质干细胞的定位和体外初步分离培养

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第二军医大学学报 2004年第8期25卷 818-821页

作者：仵敏娟刘善荣刘厚奇惠宁杨玲王凤玫汤淑萍第二军医大学基础医学部组织胚胎学教研室上海200433 长海医院妇产科上海200433

目的:从早期人胚分离培养人早期胚胎间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),并初步鉴定其生物学特性。方法:取4-6周胚龄的人胚,用免疫组织化学法,结合特定抗体SH-2,对MSC在人胚中的分布进行定位,分离组织进行培养。免疫组化和流式细... 详细信息

目的:从早期人胚分离培养人早期胚胎间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),并初步鉴定其生物学特性。方法:取4-6周胚龄的人胚,用免疫组织化学法,结合特定抗体SH-2,对MSC在人胚中的分布进行定位,分离组织进行培养。免疫组化和流式细胞术检测MSC的相对特异性抗原SH-2、CD44、ODT-4、S-100、CD34、α-smooth-actin在分离培养细胞中的表达。结果:在胚胎的四肢、躯体部紧邻神经管的下方(不包括原肠等内脏部位)有大量的MSC:分布。分离培养可得到成纤维状的MSC,贴壁生长,有生长优势,可多次传代并保持MSC:生物学特性不变。结论:通过机械分离和胰酶消化的方法,可从早期人胚得到MSC。利用MSC的贴壁生长特性及生长优势,经4-5次传代后可得到纯度很高的MSC。

关键词：间充质干细胞胚胎细胞分离细胞培养

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浅谈现代信息技术运用的问题及对策

中国科技信息 2006年第13期 225-225页

作者：汤淑萍浙江省武义县武阳中学 321200

在课堂教学中正确、恰当地使用电教媒体,可以有效地拓宽教师和学生的信息通道,加快教学的双向反馈速度,促进教学观念、教学手段、教学内容和教学模式的更新,提高了课堂教学效率。本文就现代信息技术在课堂教学运用中存在的问题及对策进... 详细信息

在课堂教学中正确、恰当地使用电教媒体,可以有效地拓宽教师和学生的信息通道,加快教学的双向反馈速度,促进教学观念、教学手段、教学内容和教学模式的更新,提高了课堂教学效率。本文就现代信息技术在课堂教学运用中存在的问题及对策进行阐述。

关键词：现代信息技术运用问题对策