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人表皮细胞培养增殖的动态观察

中华烧伤杂志 1989年第4期 279-280+318+323页

作者：陈璧汤朝武第四军医大学西京医院整形外科中心

将原代培养后5、10、15、20……50天和继代培养的细胞,用扫描和透射电镜进行了增殖与分化的动态观察。结果表明,培养的细胞分基底层细胞、中间层细胞和上层细胞。基底层细胞与正常细胞的超微结构相似;上层细胞器稀少,无组织结构。结果... 详细信息

将原代培养后5、10、15、20……50天和继代培养的细胞,用扫描和透射电镜进行了增殖与分化的动态观察。结果表明,培养的细胞分基底层细胞、中间层细胞和上层细胞。基底层细胞与正常细胞的超微结构相似;上层细胞器稀少,无组织结构。结果提示了经培养的表皮细胞单层,移植时间最好在3周左右,此时细胞增殖旺盛。移植时应以基底细胞层贴于创面,有利于细胞的增殖。

关键词：表皮细胞培养增殖分化

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妊娠和高脂妊娠大鼠胰腺胰高血糖素的表达

细胞与分子免疫学杂志 2010年第4期26卷 359-362页

作者：王莉曹宏伟张静汤朝武姬秋和第四军医大学西京医院内分泌科陕西西安710032 第四军医大学西京医院烧伤科陕西西安710032

目的:探讨在生理妊娠和高脂饮食诱导的病理妊娠状态下胰腺胰高血糖素的变化特点,同时观察2种妊娠状态葡萄糖耐量试验各点血糖和血清胰岛素的变化。方法:32只雌性SD大鼠随机分为对照组、高脂组、妊娠组和高脂妊娠组,高脂饲料喂养16周后,... 详细信息

目的:探讨在生理妊娠和高脂饮食诱导的病理妊娠状态下胰腺胰高血糖素的变化特点,同时观察2种妊娠状态葡萄糖耐量试验各点血糖和血清胰岛素的变化。方法:32只雌性SD大鼠随机分为对照组、高脂组、妊娠组和高脂妊娠组,高脂饲料喂养16周后,妊娠组大鼠进行配对受精,妊娠第14天,采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法分别检测大鼠胰腺胰高血糖素原mRNA和胰高血糖素蛋白表达。结果:葡萄糖耐量试验结果显示各组大鼠的血糖最高点均在服糖后30min。对照组胰岛素分泌最高点在15min,而高脂组、妊娠组和高脂妊娠组胰岛素分泌高峰为30min。妊娠组空腹胰岛素高于对照组(P<0.05),高脂妊娠组空腹胰岛素高于对照组(P<0.01),同时胰岛素AUC也高于对照组(P<0.05)。妊娠组胰腺胰高血糖素原mRNA相对表达量高于对照组1.46倍(P<0.05),高脂妊娠组胰腺胰高血糖素原mRNA相对表达量高于对照组1.77倍(P<0.01),高于高脂组1.54倍(P=0.01)。妊娠组胰高血糖素高于对照组2.57倍(P<0.01),高脂妊娠组胰高血糖素高于对照组3.44倍(P<0.01),高于高脂组2.9倍(P<0.01)。结论:高脂和妊娠两种状态均导致胰岛素高峰分泌延迟,生理妊娠中期胰岛素抵抗以基础胰岛素增高为主,而高脂妊娠中期同时存在基础和糖负荷后高胰岛素血症和胰岛素抵抗。妊娠中期胰腺胰高血糖素增高可能是妊娠胰岛素抵抗增加的组成部分。

关键词：妊娠胰岛素抵抗胰高血糖素葡萄糖耐量试验实时荧光定量-PCR

利用碱性成纤维细胞生长因子/霍乱毒素建立人正常黑素细胞体外选择性纯培养

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中华创伤杂志 2001年第7期17卷 438-439页

作者：丁国斌陈璧汤朝武第四军医大学附属西京医院烧伤科西安710032

正常人皮肤黑素细胞（MC）体外培养对研究黑素合成的过程及其调节因素，创伤后色素沉着异常及色素性疾病的发病机制和防治措施等提供了重要的条件和途径。笔者利用在培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和霍乱毒素（CT）的方法... 详细信息

正常人皮肤黑素细胞（MC）体外培养对研究黑素合成的过程及其调节因素，创伤后色素沉着异常及色素性疾病的发病机制和防治措施等提供了重要的条件和途径。笔者利用在培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和霍乱毒素（CT）的方法，成功地建立了稳定的体外MC培养系统。

关键词：正常黑素细胞体外培养黑素合成碱性成纤维细胞生长因子霍乱毒素

不同培养条件及时相对黑素细胞生物学特性的影响

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中国临床康复 2002年第24期6卷 3665-3666,T002页

作者：丁国斌陈璧汤朝武解放军第四军医大学西京医院陕西西安710032

目的观察不同培养条件及时相对体外培养的正常人黑素细胞生物学特性的影响。方法分离正常成人包皮黑素细胞,分别在添加有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和霍乱毒素(CT)的RPMI1640培养基及角质形成细胞条件培养基中培养。培养的细胞用L-D... 详细信息

目的观察不同培养条件及时相对体外培养的正常人黑素细胞生物学特性的影响。方法分离正常成人包皮黑素细胞,分别在添加有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和霍乱毒素(CT)的RPMI1640培养基及角质形成细胞条件培养基中培养。培养的细胞用L-Dopa染色及S-100蛋白染色鉴定。观察其形态、增殖特性。结果培养细胞经生物学鉴定为黑素细胞。原代培养及条件培养基传代培养中黑素细胞有多个突起,而bFGF/CT培养基中传代培养时黑素细胞多呈梭形。两种培养条件下黑素细胞增殖特性无明显区别。结论两种方法均可稳定获得黑素细胞的体外选择性纯培养,角质形成细胞可通过细胞间接触及分泌细胞外因子影响黑素细胞的树突形成。

关键词：黑素细胞角质形成细胞细胞培养

湿润烧伤膏治疗烧伤区微生物学效应与免疫功能的影响

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中华整形烧伤外科杂志 1994年第1期10卷 19-22页

作者：陈璧白刚汤朝武西安第四军医大学西京医院烧伤科 710032

我们采用雄性家兔18只,造成15%Ⅲ烫伤,并将创面涂抹绿脓杆菌1ml(10~4)。随机分为湿润烧伤膏、烧伤药水和对照组三组,每组6只,按说明涂药,分笼饲养。结果表明:湿润烧伤膏组有明显的侵袭性感染,伤后24h 烫伤区3只有出血点和坏死斑,痂下细... 详细信息

我们采用雄性家兔18只,造成15%Ⅲ烫伤,并将创面涂抹绿脓杆菌1ml(10~4)。随机分为湿润烧伤膏、烧伤药水和对照组三组,每组6只,按说明涂药,分笼饲养。结果表明:湿润烧伤膏组有明显的侵袭性感染,伤后24h 烫伤区3只有出血点和坏死斑,痂下细菌计数>10~8;48h 有大片坏死组织液化脱落,出血加重,痂下细菌计数>10^(10),中性粒细胞数及 PMN—CL 峰值明显下降,与实验前和同一时间点中其它两组比较,差异有非常显著意义(P<0.01);72h 4只动物死亡,1只垂危者血培养有绿脓杆菌生长,当日死亡。

关键词：湿润烧伤膏感染细菌中性粒细胞

不同浓度尿酸对体外培养人脐静脉血管内皮细胞增殖过程的影响(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第6期11卷 1189-1191页

作者：赵霞姬秋和汤朝武解放军广州军区广州总医院内分泌科广东省广州市510010 解放军第四军医大学西京医院内分泌科陕西省西安市710032 解放军第四军医大学西京医院烧伤科陕西省西安市710032

背景:近年对尿酸特别是其与心血管疾病的研究较多,但多集中在流行病学领域,从细胞学角度探讨尿酸对内皮细胞影响的研究并不多见。目的:观察不同浓度的尿酸对体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV304)丙二醛,一氧化氮及3-(4,5-二甲基噻唑-2)... 详细信息

背景:近年对尿酸特别是其与心血管疾病的研究较多,但多集中在流行病学领域,从细胞学角度探讨尿酸对内皮细胞影响的研究并不多见。目的:观察不同浓度的尿酸对体外培养的人脐静脉内皮细胞株(ECV304)丙二醛,一氧化氮及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐的影响。设计:以人脐静脉内皮细胞为观察对象,随机对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院内分泌科。材料:脐静脉内皮细胞株ECV304由解放军第四军医大学免疫教研室提供;DMEM低糖培养基,美国Gibco公司生产;胎牛血清,北京元亨圣马生物技术研究所生产;胰蛋白酶,美国Gibco公司生产;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,华美公司生产;二甲基亚砜(DM-SO),分析纯,天津博迪化工有限公司生产;尿酸,Sigma公司生产。一氧化氮测试盒,丙二醛测试盒,南京建成公司生产。普通倒置显微镜、酶联免疫检测仪IX70型倒置显微镜,日本Olympus生产;酶联免疫检测仪,华东电子管厂生产。方法:实验于2003-12/2004-04在第四军医大学内分泌科和烧伤科进行。内皮细胞的复苏、培养、传代、接种均参考司徒镇强等主编的《细胞培养》中的方法进行。用无血清DMEM培养24h使细胞同步化于G0/G1期,分4组实验,分别为对照组,低浓度尿酸组,中浓度尿酸组和高浓度尿酸组,每组分为24h,48h和72h3个时间点,每个时间点8个样本。对照组,低浓度尿酸组,中浓度尿酸组和高浓度尿酸组分别加入含有0mmol/L,0.1mmol/L,0.2mmol/L,0.4mmol/L尿酸的5%的血清培养液,然后将培养板放入37℃,体积分数为0.05的CO2孵箱中孵育。在24h后检测丙二醛,一氧化氮及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,48h及72h分别再检测3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐。主要观察指标:各组人脐静脉内皮细胞增殖情况及一氧化氮和丙二醛的含量。结果:随尿酸浓度增高,ECV304产生丙二醛的含量逐渐下降,分别为(2.97±0.05),(2.89±0.09),(2.78±0.10),(2.44±0.03)μmol/L。ECV304产生一氧化氮的量分别为(6.86±1.41),(12.5±2.7),(18.9±1.8),(21.1±1.4)μmol/L,ECV304产生一氧化氮的量和3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐吸光度逐渐增加,细胞增殖以48h增加最为明显。结论:尿酸有抗氧化性,可促进血管内皮细胞的增殖及一氧化氮的释放。

关键词：尿酸人脐静脉内皮细胞一氧化氮增殖

湿润烧伤膏治疗烧伤区微生物学效应与免疫功能的影响

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中华烧伤杂志 1994年第1期 19-22页

作者：陈璧白刚汤朝武西安第四军医大学西京医院烧伤科 710032

我们采用雄性家兔18只,造成15%Ⅲ烫伤,并将创面涂抹绿脓杆菌1ml(10~4)。随机分为湿润烧伤膏、烧伤药水和对照组三组,每组6只,按说明涂药,分笼饲养。结果表明:湿润烧伤膏组有明显的侵袭性感染,伤后24h 烫伤区3只有出血点和坏死斑,痂下细菌计数>10~8;48h 有大片坏死组织液化脱落,出血加重,痂下细菌计数>10,中性粒细胞数及 PMN—CL 峰值明显下降,与实验前和同一时间点中其它两组比较,差异有非常显著意义(P<0.01);72h 4只动物死亡,1只垂危者血培养有绿脓杆菌生长,当日死亡。

关键词：湿润烧伤膏感染细菌中性粒细胞