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左心耳封堵之并发症——不可回避的风险

心脏杂志 2024年第1期36卷 81-86页

作者：汤学超张芝秦永文解放军第960医院心血管内科山东济南250000 海军军医大学附属长海医院心内科上海200433

心房颤动为临床最常见的心律失常,血栓的形成及脱落导致的缺血性脑卒中是房颤患者致残的主要原因。近年来左心耳封堵术已逐渐成为非瓣膜性房颤患者卒中预防中不可缺少的手段,有望发展成为抗凝治疗的合理替代方案。然而左心耳封堵术合并... 详细信息

心房颤动为临床最常见的心律失常,血栓的形成及脱落导致的缺血性脑卒中是房颤患者致残的主要原因。近年来左心耳封堵术已逐渐成为非瓣膜性房颤患者卒中预防中不可缺少的手段,有望发展成为抗凝治疗的合理替代方案。然而左心耳封堵术合并相关的并发症,如心包积液、残余漏、器械相关血栓及栓塞并发症等。如何保证操作安全,降低相关的并发症,一直是临床关注和需要亟待解决的热点问题。本文就左心耳封堵术相关的并发症作一综述。

关键词：心房颤动左心耳封堵卒中并发症

猪轮状病毒G1P[7]株分离鉴定及多克隆抗体制备

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畜牧与兽医 2024年第4期56卷 101-107页

作者：李素芬汤学超周金柱王丹丹朱雪蛟陶然李运川郭容利张雪寒李彬南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014

旨在明确猪场腹泻原因并分离猪轮状病毒(PoRV)。采集腹泻猪粪便,经RT-PCR检测为阳性的样品接种于单层细胞,通过细胞病变(CPE)和间接免疫荧光(IFA)来检测病毒增殖;RT-PCR扩增VP4和VP7基因并测序以确定G/P基因型,生物信息学软件分析VP4和... 详细信息

旨在明确猪场腹泻原因并分离猪轮状病毒(PoRV)。采集腹泻猪粪便,经RT-PCR检测为阳性的样品接种于单层细胞,通过细胞病变(CPE)和间接免疫荧光(IFA)来检测病毒增殖;RT-PCR扩增VP4和VP7基因并测序以确定G/P基因型,生物信息学软件分析VP4和VP7基因的遗传进化特征;传代病毒灭活后制苗接种家兔制备多克隆抗体,测定中和抗体,并经Western blot和IFA鉴定其特异性。结果:猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、伪狂犬病毒(PRV)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)均为阴性,只有PoRV为阳性;过滤粪便样接种单层MA104细胞,连续传5代均可观察到以细胞圆缩、最后瓦解脱落为特征的CPE,IFA检测到PoRV的特异性荧光,表明病毒分离成功,命名为JSNJ2019;分离株连续传代,病毒滴度逐步升高,介于105~106.5 TCID50/mL;分离株JSNJ2019为G1P[7]基因型;3次免疫后家兔血清的中和抗体滴度最高可达211,Western blot出现特异性条带且IFA荧光亮而特异。本研究成功分离PoRV JSNJ2019(G1P[7])且免疫原性良好,制备的多克隆抗体特异性强,为研究PoRV致病机制奠定基础。

关键词：猪轮状病毒分离鉴定基因型免疫原性,多克隆抗体

猪轮状病毒VP4蛋白截短体的原核表达及免疫原性研究

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猪轮状病毒VP4蛋白截短体的原核表达及免疫原性研究

作者：汤学超长江大学

学位级别：硕士

猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)是引起幼龄仔猪发生急性腹泻脱水的主要病原之一,低日龄仔猪感染后死亡率较高,疫苗接种是最有效、最经济的防控措施,但目前我国市售商品化疫苗很少。近些年,猪轮状病毒感染率显著升高,仅次于猪流行... 详细信息

猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)是引起幼龄仔猪发生急性腹泻脱水的主要病原之一,低日龄仔猪感染后死亡率较高,疫苗接种是最有效、最经济的防控措施,但目前我国市售商品化疫苗很少。近些年,猪轮状病毒感染率显著升高,仅次于猪流行性腹泻病毒,给养猪业健康发展造成巨大威胁。猪轮状病毒血清型多,并且不同型之间交叉保护很差。流行病学调查显示G9P7和G9P23是我国当前优势的流行血清型,但没有疫苗可用。已有企业尝试利用灭活技术研发全病毒灭活疫苗,可期望联苗获批后会在一定程度缓解无苗可用的境地。VP4是猪轮状病毒重要的具有中和活性的蛋白,单独免疫后就能够诱导高水平的免疫反应,具有良好中和病毒的能力,完全可以避免全病毒灭活疫苗散毒的风险。本研究基于实验室已有PoRV G9P7(NJ2012)和G9P23(AHFY2022)两种血清型病毒VP4蛋白的截短体(VP4*),尝试研发二价猪轮状病毒亚单位疫苗。首先对vp4*基因序列设计、优化和克隆构建vp4*P7和vp4*P23重组质粒,利用大肠杆菌实现高效表达获得重组免疫原;然后再分别将VP4*P7和VP4*P23重组蛋白与佐剂乳化制备疫苗免疫小鼠,通过中和抗体、ELISA抗体和细胞免疫指标检测全面评价单独和联合使用的免疫原性,为研发新型二价PoRV基因工程疫苗奠定基础。1.VP4*P7和VP4*P23的原核表达及蛋白纯化。根据生物信息学分析VP4优势免疫原性区段,选择26-476aa对应的基因序列送公司进行偏爱密码子优化,并克隆大肠杆菌表达载体p Cold-sumo中,成功获得重组质粒p Cold-sumo-vp4*P7和p Cold-sumo-vp4*P23。所有质粒中均包含6×His标签、sumo标签。利用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行蛋白表达,蛋白经亲和层析柱和超滤管浓缩得到V P4*P7(9 mg/L)和VP4*P23(16 mg/L),最终蛋白以可溶性形式被收取,为降低生产成本和简化生产工艺提供了可靠的途径。2.VP4*P7和VP4*P23重组蛋白的免疫原性分析。取纯化后的sumo载体标签蛋白(即sumo蛋白)、VP4*P7蛋白、VP4*P23蛋白及VP4*P7+VP4*P23混合蛋白分别作为免疫原,混合ISA201佐剂乳化制备疫苗免疫小鼠。分别于0 d、14 d、28 d、42 d取免疫小鼠血清分别进行两种病毒的中和抗体检测,并且再采用ELIS A方法测定Ig G水平、CCK8法测定小鼠淋巴细胞增殖比例、流式细胞术检测T淋巴细胞亚型比例、和细胞因子检测试剂盒检测小鼠淋巴细胞因子分泌水平。结果表明:免疫组小鼠血清中特异性Ig G、中和抗体滴度和细胞免疫指标均显著升高,而且VP4*P7+VP4*P23联合使用诱导的免疫反应优于单独使用。综上所述,我们利用猪轮状病毒VP4蛋白成功制备了一种二价亚单位疫苗,经初步检测确定其具有良好的免疫原性,并能够刺激小鼠产生高滴度的中和抗体。

关键词：猪轮状病毒 P7和P23型 vp4*基因原核表达免疫原性

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心房分流器治疗心力衰竭机制及研究进展

介入放射学杂志 2023年第6期32卷 612-616页

作者：张芝汤学超泰安八十八医院心血管内科山东泰安271000 解放军第九六〇医院心血管内科

心力衰竭(简称心衰)是各种心血管疾病终末期表现。心衰恶化是患者反复住院的主要原因。研究证实心衰恶化与死亡率间存在显著相关性。目前单纯药物治疗往往不足以改善心衰患者临床症状和体征,越来越多临床试验研究证实器械治疗可改善患... 详细信息

心力衰竭(简称心衰)是各种心血管疾病终末期表现。心衰恶化是患者反复住院的主要原因。研究证实心衰恶化与死亡率间存在显著相关性。目前单纯药物治疗往往不足以改善心衰患者临床症状和体征,越来越多临床试验研究证实器械治疗可改善患者症状及预后。近年来国内外研究开发的具有独特机制的心房分流器主要有IASD、V-Wave、AFR及D-Shant等,临床应用研究证明,可通过直接降低左心房压力改善心衰患者呼吸困难症状,降低再住院率和病死率,未来可能成为治疗心衰新方法。本文就心房分流器治疗心衰机制及研究进展作一综述。

关键词：心房分流器心力衰竭左心室射血分数器械治疗

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LACbes左心耳封堵器研发历程与展望

介入放射学杂志 2023年第7期32卷 710-714页

作者：汤学超白元秦永文解放军第960医院心血管内科山东济南250031 上海长海医院心血管内科

LACbes封堵器是我国自主创新研发的左心耳专用封堵器之一,历经外观设计、倒刺研发、定型及动物实验、上市前临床研究等阶段,于2019年上市。LACbes封堵器由远端固定盘、近端覆盖盘和中间连接铆组成,可反复回收不形变,易于操作,适合绝大... 详细信息

LACbes封堵器是我国自主创新研发的左心耳专用封堵器之一,历经外观设计、倒刺研发、定型及动物实验、上市前临床研究等阶段,于2019年上市。LACbes封堵器由远端固定盘、近端覆盖盘和中间连接铆组成,可反复回收不形变,易于操作,适合绝大多数形态的左心耳,目前正在国内推广应用。本文就LACbes封堵器研发历程、创新点、应用要点和展望进行介绍。

关键词：左心耳封堵术心房颤动脑卒中预防 LACbes封堵器

髓过氧化物酶——急性冠状动脉综合征的炎症标志物

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药学服务与研究 2010年第2期10卷 124-127页

作者：汤学超秦永文第二军医大学长海医院心血管内科上海200433 解放军第88医院心血管内科泰安271000

炎症因子参与冠状动脉粥样硬化性疾病的发生和发展。已发现作为中性粒细胞活化标志物的髓过氧化物酶能参与冠状动脉粥样硬化的全过程,且能用于预测不稳定斑块和急性冠状动脉综合征预后等。

关键词：髓过氧化物酶炎症标志物急性冠状动脉综合征综述

经导管射频去肾交感神经术治疗顽固性高血压的研究进展

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中国老年学杂志 2014年第12期34卷 3508-3510页

作者：汤学超杨曙光解放军第88医院心内科山东泰安271000

Peet等〔1〕曾采用隔上内脏神经切除术治疗严重高血压，取得一定效果，但此方法创伤大、并发症多，常导致体位性低血压、性功能障碍、膀胱括约肌功能不良等，使其临床应用受限。Krum等〔2〕首次采用经导管射频消融去肾交感神经术（ RDN... 详细信息

Peet等〔1〕曾采用隔上内脏神经切除术治疗严重高血压，取得一定效果，但此方法创伤大、并发症多，常导致体位性低血压、性功能障碍、膀胱括约肌功能不良等，使其临床应用受限。Krum等〔2〕首次采用经导管射频消融去肾交感神经术（ RDN）治疗顽固性高血压。由于该方法安全有效、创伤小，已成为顽固性高血压治疗研究的热点。本文简要介绍RDN治疗顽固性高血压的机制、方法及临床研究现状。

关键词：顽固性高血压去肾交感神经术肾交感神经射频消融

PCI术前他汀预治疗对PCI相关炎症及心肌损害的影响

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PCI术前他汀预治疗对PCI相关炎症及心肌损害的影响

作者：汤学超第二军医大学

学位级别：硕士

背景：3-羟基-3-甲基-异戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂(又称他汀类药物)在冠心病(coronary heart disease,CHD)的一级预防和二级预防中的作用日益受到重视,目前已成为CHD的治疗方案中重要组成部分。他汀类药物最初用于降低血浆总胆... 详细信息

背景：3-羟基-3-甲基-异戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂(又称他汀类药物)在冠心病(coronary heart disease,CHD)的一级预防和二级预防中的作用日益受到重视,目前已成为CHD的治疗方案中重要组成部分。他汀类药物最初用于降低血浆总胆固醇和调节血脂谱,但近年研究发现,他汀类药物在降脂作用产生之前就已经开始影响冠心病患者的临床预后。这种与降脂作用无关的作用称其为多效性,包括改善内皮功能,降低氧化应激,减少血小板粘附,促进动脉粥样斑块稳定,调节凝血级联反应,抗炎及直接的心肌保护作用等。近年的研究还发现他汀类药物冠脉介入治疗(Percutaneous coronary intervention,PCI)术前急性使用,包括术前未使用他汀的患者急性短期治疗或急性负荷治疗,以及长期使用他汀治疗的患者,负荷剂量追加治疗,可以抑制PCI相关的炎症,保护心肌,改善短期预后。然而中等剂量他汀类药物更短时间预治疗是否能表现出心肌保护作用,目前国内无相关研究。本课题通过检测PCI术前术后中性粒细胞计数及其活化标志物髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)及肌钙蛋白I的变化,观察他汀预治疗是否可以影响PCI相关炎症及心肌坏死标志物的变化,探讨阿托伐他汀中等剂量短期预治疗的急性抗炎及心肌保护作用。研究目的：探讨PCI术后炎症因子的变化及阿托伐他汀预治疗对PCI相关炎症及心肌损害的影响。研究方法：103例拟行PCI的CHD患者随机分为对照组(n=30)、低剂量预治疗组(n=36)和高剂量预治疗组(n=37)。对照组患者术前不服用阿托伐他汀,其他两组患者术前分别服用20或40mg阿托伐他汀1-3天。测定入选患者术前后中性粒细胞计数、超敏C反应蛋白(high sensitive C reactive protein,hs-CRP)、肌钙蛋白I(cardiotroponin I,cTn I),并记录围术期心肌梗死(myocardial infarction,MI)(定义围术期MI为术后cTnI＞3倍参考值范围上限的99百分位数)。分别收集术前、术后血清标本置于-80℃冰箱,集中采用ELISA法测定MPO。运用统计学方法比较PCI术前术后炎症指标的变化,分析血清MPO水平变化与中性粒细胞、hs-CRP、cTnI、支架数目的相关性,以及观察不同剂量阿托伐他汀预治疗对PCI相关炎症及围术期MI发生率的影响。结果：(1)PCI术后MPO、hs-CRP、中性粒细胞计数较术前均有显著升高[(251.67±51.72 vs 215.60±49.48)pmol/L,p0.05);高剂量预治疗组术后MPO升高值明显小于对照组[(17.33±53.52 vs 56.98±61.57)pmol/L,P<0.05],但低剂量组和对照组间无统计学差异[(37.88±55.34 vs 56.98+61.57)pmol/L,P=0.173]。高剂量预治疗组患者围术期MI发生率最低(18.9%),但组间无显著性差异(P=0.018)。结论：PCI术后中性粒细胞计数、hs-CRP、MPO水平升高,提示PCI术后存在中性粒细胞的动员及活化,同时伴随一定程度的全身炎症反应;且MPO升高程度与中性粒细胞计数的升高呈正相关。PCI术前阿托伐他汀40mg预治疗1-3天也可以抑制PCI相关炎症,并对心肌损害具有一定的保护作用。

关键词：阿托伐他汀髓过氧化物酶经皮冠状动脉介入治疗抗炎心肌保护

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经皮心室重建术——心力衰竭治疗新手段

介入放射学杂志 2016年第5期25卷 453-455页

作者：汤学超秦永文第二军医大学附属长海医院心内科上海200433 解放军第88医院心内科

经皮心室重建术(PVR)是一种经导管逆行将心室隔离装置(VPD)植入患者左心室,以隔离无功能的心室区域,减少左心室收缩和舒张容积,降低左心室张力,改善左心室重构和心功能的治疗心力衰竭新方法。近年Parachute^(TM)心室隔离系统系列试验研... 详细信息

经皮心室重建术(PVR)是一种经导管逆行将心室隔离装置(VPD)植入患者左心室,以隔离无功能的心室区域,减少左心室收缩和舒张容积,降低左心室张力,改善左心室重构和心功能的治疗心力衰竭新方法。近年Parachute^(TM)心室隔离系统系列试验研究结果显示,PVR术治疗陈旧性前壁心肌梗死伴心力衰竭具有一定疗效。本文就PVR术临床试验研究进展作一简要介绍。

关键词：经皮心室重建术心室隔离装置陈旧性前壁心肌梗死慢性心力衰竭