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虾青素产生菌的筛选鉴定及其转化子的研究

虾青素产生菌的筛选鉴定及其转化子的研究

作者：江胜滔福建师范大学

学位级别：硕士

本课题从来源不同的腐叶土壤中分离出虾青素产生菌株J1、J2、J3、J4、 J5,通过真菌形态和发酵产物的鉴定,初步认为它们同属于红酵母。经过进一步的筛选得到高产菌株J3,它的虾青素含量为397.0μg/gCDW。利用 18SrRNA分子技术,根据真核生... 详细信息

本课题从来源不同的腐叶土壤中分离出虾青素产生菌株J1、J2、J3、J4、 J5,通过真菌形态和发酵产物的鉴定,初步认为它们同属于红酵母。经过进一步的筛选得到高产菌株J3,它的虾青素含量为397.0μg/gCDW。利用 18SrRNA分子技术,根据真核生物18SrDNA保守区段设计出两条引物: 18SF:5’CCAACCTGGTTGATCCTGCCAGTA3’ 18SR:5’CCTTGTTACGACTTCACCTTCCTCT3’ 经过PCR体系扩增出大小为1774bp18SDNA序列,其G+C含量为46.96%,在 Genebank中,进行比对分析,进一步确定该菌株J3是粘红酵母(Rhodotorulo glutinis),并命名为粘红酵母SJ。通过电转化技术,以2.0kV、25μF、200Ω作脉冲转化的条件下,将雨生红球藻的基因组DNA导入粘红酵母SJ中,并以二苯胺,硫酸铜为筛选模型,获得了色素含量772μg/gCDW的转化子,是亲本粘红酵母SJ色素含量的1.95倍。应用微生物形态学和RAPD技术,对转化子的遗传背景进行鉴定。形态学方面,对雨生红球藻,粘红酵母SJ和粘红酵母SJ转化子三者进行菌落形态的比较;分子生物学方面,优化了PCR的反应体系,反应条件,从23条随机引物中筛选出1条引物(S168)。经过对三份供试材料的 RAPD分析,用引物S168在转化子中扩增出了双亲互补代谱,即在转化子中既有雨生红球藻DNA,也有粘红酵母JS的DNA。结果证实了获得的转化子整合有雨生红球藻基因组DNA;利用分光光度法,在波长为474nm光下测定转化子与其亲本的虾青素含量,结果显示转化子的生物量最高,色素含量高于粘红酵母SJ但低于雨生红球藻。为了证实转化子产量稳定性,进行了连续八代产量稳定性试验。结果表明:第4代最高,第1代最低,两者生物量相差4.83%、色素含量相差1.31 %、色素产量相差6.25%,转化子遗传是相对稳定的。以上转化子的生物量是1.52g/100ml,比亲本雨生红球藻的生物量提高54.3倍,生长周期比亲本雨生红球藻缩短12天,活性多糖含量为140.35 me,/100mI,比亲本粘红酵母SJ提高了10.3%、同时还富含B族维生素、麦角固醇和蛋白质等其他活性物质。

关键词：虾青素电转化技术转化子 18srRNA RAPD

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棚式袋装发酵法生产有机肥技术研究初报

中国土壤与肥料 2009年第3期 67-70页

作者：黄燕翔江胜滔福建省龙岩市土壤肥料技术站福建龙岩364000 龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000

对传统条垛发酵、棚式条垛发酵、一般袋式发酵、棚式袋装发酵法进行了堆料外观、堆料温度、堆料全N、全C、C/N变化等对比试验和成本效益分析。结果表明,棚式袋装发酵法能较好地解决堆肥发酵过程中通气、温度、水分的调控问题,具有堆制... 详细信息

对传统条垛发酵、棚式条垛发酵、一般袋式发酵、棚式袋装发酵法进行了堆料外观、堆料温度、堆料全N、全C、C/N变化等对比试验和成本效益分析。结果表明,棚式袋装发酵法能较好地解决堆肥发酵过程中通气、温度、水分的调控问题,具有堆制时间较短、保肥性较好、除臭效果好、腐熟化、无害化程度高、堆肥质量优等优点,且该法能充分利用太阳能和生物好氧发酵自身产生的热量自然干燥,可免去翻抛、烘干设备,投资成本低、运行和维护费用省、技术工艺方便易行,适合于中小型商品有机肥生产企业和养殖场的粪便就地无害化处理。

关键词：棚式袋装发酵法有机肥

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秦望广场塔楼沉降后浇带提前封闭技术研究

铁道工程学报 2024年第6期 85-92页

作者：江胜学中铁第四勘察设计院集团有限公司

研究目的：带超高层物业开发的大型地下综合体，为了不影响裙房和地下室提前投入使用，需要研究超高层建筑沉降后浇带提前封闭可行性，通过杭州富阳秦望广场通道工程实际项目，采用有限元整体建模分析，提出了残余沉降差计算方法，利用... 详细信息

研究目的：带超高层物业开发的大型地下综合体，为了不影响裙房和地下室提前投入使用，需要研究超高层建筑沉降后浇带提前封闭可行性，通过杭州富阳秦望广场通道工程实际项目，采用有限元整体建模分析，提出了残余沉降差计算方法，利用试桩静载试验P-S曲线确定了桩基线刚度参数，推导出沉降后浇带提前封闭楼层，通过实际监测数据，对理论计算结果进行对比验证。研究结论：（1）试桩线刚度与单桩承载力特征值比值在76～119之间，与传统经验值100倍单桩承载力特征值相比，试桩结果离散性较大；（2）塔楼总沉降量与楼层数关系不大，与桩基线刚度取值关系较大；（3）塔楼桩基采用相同线刚度，楼层数与总沉降量成正比；（4）塔楼沉降呈线性发展趋势，理论计算与监测数据基本一致，因成桩工艺控制不稳定，导致工程桩线刚度有离散性，理论计算沉降速率与监测相比均偏小，导致后浇带提前封闭楼层判断有误差；（5）本研究成果可为超高层建筑提前封闭沉降后浇带设计提供参考。

关键词：沉降后浇带提前封闭残余沉降差超高层建筑桩筏基础沉降速率

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益生芽孢杆菌的筛选与鉴定

安徽农业科学 2009年第33期37卷 16711-16714页

作者：江胜滔曹晓敏卢龙娣龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000 福建师范大学生命科学学院福建福州350108

[目的]筛选具有益生作用潜力的芽孢杆菌。[方法]经高温处理从鸡肠道分离芽孢杆菌,通过抗逆性、抗菌活性等性能检测筛选菌株,通过生理生化分析鉴定菌种。[结果]筛选到2株具有益生作用潜力的芽孢杆菌LBS53和LBS8;经过生理生化试验,鉴定LB... 详细信息

[目的]筛选具有益生作用潜力的芽孢杆菌。[方法]经高温处理从鸡肠道分离芽孢杆菌,通过抗逆性、抗菌活性等性能检测筛选菌株,通过生理生化分析鉴定菌种。[结果]筛选到2株具有益生作用潜力的芽孢杆菌LBS53和LBS8;经过生理生化试验,鉴定LBS53为枯草芽孢杆菌,LBS8为蜡样芽孢杆菌。[结论]筛选到的2株菌基本具备作为饲用芽孢杆菌制剂菌株的条件。尤其LBS53的优良生物学特性使其在饲料工业中具有良好的应用前景。

关键词：芽孢杆菌筛选鉴定

几种发酵基质对芽孢杆菌LYC-1芽孢量的影响

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福建轻纺 2020年第6期 12-17页

作者：江胜滔林美花宁德师范学院福建宁德352106 福建师范大学福建福州350108

利用固体发酵技术,研究了几种常见的发酵基质对芽孢杆菌LYC-1芽孢量的影响。采用单因素方差分析和LSD多重比较分析了金针菇菌糠、猴头菇菌糠、杏鲍菇菌糠、豆粕粉、玉米粉、米糠、磷酸二氢钾、和碳酸钙等基质对芽孢量的影响。结果显示:... 详细信息

利用固体发酵技术,研究了几种常见的发酵基质对芽孢杆菌LYC-1芽孢量的影响。采用单因素方差分析和LSD多重比较分析了金针菇菌糠、猴头菇菌糠、杏鲍菇菌糠、豆粕粉、玉米粉、米糠、磷酸二氢钾、和碳酸钙等基质对芽孢量的影响。结果显示:与CK(麸皮固体培养基)相比,实验组T2(猴头菇菌糠)和T6(猴头菇菌糠∶杏鲍菇菌糠=1∶1)的培养基对产芽孢量减少有显著影响,T1(金针菇菌糠)对芽孢数减少没有显著影响,芽孢数最多,为(5.58±0.19)×10^9CFU/g,金针菇菌糠可以完全替代麸皮;与T1相比较,在T1培养基中分别额外添加5.0%豆粕粉、5.0%玉米粉、4.0%米糠、0.25%磷酸二氢钾,其芽孢量在各组中最多,对芽孢杆菌LYC-1芽孢量增加都有显著影响,而不同添加量的碳酸钙对芽孢量增加都没有显著影响。

关键词：芽孢杆菌LYC-1 发酵基质芽孢量

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原子力显微镜在有机缓蚀剂研究中的应用

表面技术 2024年第2期53卷 28-48页

作者：王伦滔王慧如俄亥俄大学美国俄亥俄州阿森斯45701

有机缓蚀剂具有低毒性和高性价比等优点,在低浓度的注射剂量下可以实现优良的缓蚀效果,被广泛应用于石油化工(碳钢)、电子工业(铜)、车辆船舶和航空航天工业(铝),保护合金材料免受腐蚀危害。现有的电化学测试技术已经在有机缓蚀剂领域... 详细信息

有机缓蚀剂具有低毒性和高性价比等优点,在低浓度的注射剂量下可以实现优良的缓蚀效果,被广泛应用于石油化工(碳钢)、电子工业(铜)、车辆船舶和航空航天工业(铝),保护合金材料免受腐蚀危害。现有的电化学测试技术已经在有机缓蚀剂领域得以广泛应用,这种传统的研究方法可以提供有关界面电化学反应的平均动力学信息,但是无法直接解析缓蚀剂的吸附及作用机制。随着金属腐蚀与缓蚀剂研究的微观化和系统化发展,电化学分析手段逐渐与其他分析技术(如扫描电镜、X射线光电子能谱、拉曼光谱等)紧密结合,开展了对缓蚀剂作用机制的深入研究。在这些分析技术中,原子力显微镜(AFM)由于空间分辨率成像能力高,受工作环境和样品性质的局限较少,在有机缓蚀剂于金属/溶液界面的直观研究中起到了重要作用。本文结合近年来原子力显微镜在有机缓蚀剂领域的研究进展,简述了原子力显微镜的工作原理和几种操作模式,详述了AFM的接触模式在有机缓蚀剂研究中的普遍应用和其局限性,总结了AFM的敲击模式在表面活性剂吸附研究中的重要作用和研究现状并延伸到有机缓蚀剂的吸附研究,综述了AFM几个衍生功能(包括纳米刮擦、力-距离曲线、摩擦力和电化学原子力显微镜)在有机缓蚀剂研究中获得的缓蚀剂膜的力学和电化学相关信息,最后对AFM在有机缓蚀剂领域当前研究中存在的问题和未来发展趋势进行了展望。

关键词：原子力显微镜表面技术有机缓蚀剂表面活性剂接触模式敲击模式

茶树Ankyrin基因启动子的克隆及其5′UTR内含子功能

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应用与环境生物学报 2019年第6期25卷 1381-1387页

作者：郑世仲江胜滔陈美霞林玉玲赖钟雄林金科宁德师范学院生命科学学院宁德352100 闽东特色生物资源福建省高校工程研究中心宁德352100 福建农林大学园艺植物生物工程研究所福州350002 福建农林大学安溪茶学院福州350002

为了解启动子在茶树Ankyrin基因(CsAnkyrin)表达调控中的作用,以茶树新品系‘1005’嫩芽为材料,通过染色体步移技术克隆CsAnkyrin基因启动子序列,利用Neural Network Promoter Prediction和PlantCARE在线软件等对启动子序列进行生物信... 详细信息

为了解启动子在茶树Ankyrin基因(CsAnkyrin)表达调控中的作用,以茶树新品系‘1005’嫩芽为材料,通过染色体步移技术克隆CsAnkyrin基因启动子序列,利用Neural Network Promoter Prediction和PlantCARE在线软件等对启动子序列进行生物信息学分析,将含有内含子和删除内含子的启动子序列(+intron/-intron)分别定向替换pCAMBIA1301表达载体的CaMV35S启动子,构建重组表达载体后分别转化拟南芥,并进行GUS组织化学染色分析.结果显示,克隆得到的CsAnkyrin启动子序列(命名为proAnk)为1010 bp,含有一个5′UTR(5′Untranslated regions,5′非编码区)内含子.启动子序列除含有启动子核心元件TATA-box和CAAT-box,还存在有激素响应元件、光响应元件、厌氧胁迫应答元件以及大量功能未知或功能特异的顺式作用元件.删除5′UTR内含子后的启动子序列能够驱动下游GUS报告基因表达,保留5′UTR内含子的启动子序列不能驱动下游GUS报告基因正常表达,但是RT-PCR实验结果表明5′UTR内含子在转录后没有被切除,而是和GUS基因一起转录产生融合mRNA.本研究表明,proAnk具有诱导型启动子特性,5′UTR内含子对下游基因正常表达具有负调控作用,且可能是在翻译水平上对下游基因表达产生影响.(图7表1参32)

关键词：茶树 CsAnkyrin 启动子顺式作用元件 5′UTR内含子

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鸡肠道菌群总DNA三种提取方法的比较

中国微生态学杂志 2009年第7期21卷 588-590页

作者：卢龙娣江胜滔林跃鑫福建师范大学生命科学学院福建福州350108 龙岩学院生命科学学院福建龙岩364000

目的比较不同方法提取鸡肠道菌群总DNA的差异,为分子方法分析肠道菌群组成提供质量较高的DNA模板。方法采用反复冻融法、酶裂解法和试剂盒法(E.N.Z.A Stool DNA Kit)来提取鸡肠道菌群的总DNA,并根据DNA浓度及纯度、16S DNA扩增产物和ERI... 详细信息

目的比较不同方法提取鸡肠道菌群总DNA的差异,为分子方法分析肠道菌群组成提供质量较高的DNA模板。方法采用反复冻融法、酶裂解法和试剂盒法(E.N.Z.A Stool DNA Kit)来提取鸡肠道菌群的总DNA,并根据DNA浓度及纯度、16S DNA扩增产物和ERIC-PCR产物所反映的片段多态性4个指标,对这3种方法提取的DNA质量进行比较。结果3种方法均能提取DNA,所得DNA都可以用于16S DNA的扩增,但后2种方法所得DNA的ERIC-PCR结果能反映出更高的菌群多样性。结论试剂盒法和酶裂解法所提取的DNA质量好,适合用于肠道菌群的分子生态研究。

关键词：肠道菌群总DNA提取 16SDNA ERIC-PCR

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成人慢性疾病胎儿起源的相关分子机制

实用妇产科杂志 2024年第1期40卷 14-17页

作者：潘海滔上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院上海200030 绍兴市妇幼保健院医学研究与成果转化中心浙江绍兴312000

成人慢性疾病,如心血管疾病、糖尿病、肥胖和癌症等,已经成为全球范围内的重要健康问题。这些疾病与遗传、生活方式和环境因素密切相关,但近年来,胎儿起源也被认为在成人慢性疾病的发病中发挥着重要作用。生命的早期发育决定了组织和器... 详细信息

成人慢性疾病,如心血管疾病、糖尿病、肥胖和癌症等,已经成为全球范围内的重要健康问题。这些疾病与遗传、生活方式和环境因素密切相关,但近年来,胎儿起源也被认为在成人慢性疾病的发病中发挥着重要作用。生命的早期发育决定了组织和器官的发育轨迹,对后代健康造成长期影响。成人慢性疾病的胎儿起源是一复杂的生命早期编程过程,其涉及多种分子机制,包括表观遗传学、代谢调控、免疫调控和氧化应激等。

关键词：后代健康心血管疾病生命早期表观遗传学免疫调控氧化应激环境因素编程过程