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骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的体外研究

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中国修复重建外科杂志 2005年第5期19卷 373-376页

作者：卓本慧江和碧瞿平李廷玉重庆医科大学附属儿童医院营养研究室

目的　探讨骨髓间充质干细胞( marrow stromal stem cells,MSCs)向神经细胞定向分化中神经蛋白分子的表达情况。　方法　取第5～7代体外培养Wistar大鼠MSCs,以0 .5μmol/ L全反式视黄酸( all- trans retinoidacid,ATRA)预诱导2 4 h后,... 详细信息

目的　探讨骨髓间充质干细胞( marrow stromal stem cells,MSCs)向神经细胞定向分化中神经蛋白分子的表达情况。　方法　取第5～7代体外培养Wistar大鼠MSCs,以0 .5μmol/ L全反式视黄酸( all- trans retinoidacid,ATRA)预诱导2 4 h后,换用改良神经细胞培养基( modified neuronal medium,MNM)继续培养。在ATRA作用2 4 h及MNM作用2、6、9、18及36 h,免疫组织化学检测巢蛋白( Nestin)、神经元特异性核心抗原( neuron- specificnuclear protein,Neu N)、微管相关蛋白2 ( microtubule- associated protein 2 ,MAP- 2 )和胶质纤维酸性蛋白的表达情况。　结果　ATRA和MNM作用后,MSCs呈典型神经元样,伸出较多的突起和分支,形成网络。Nestin最先表达,ATRA作用2 4 h出现,Neu N其次,MNM作用2 h检测到,MAP- 2最晚,MNM作用9h检测到。Nestin在MNM作用18h后表达最强,其阳性率为92 .3%±3.4 % ;36 h后表达明显减弱,阳性率仅为12 .3%±3.4 % ,而其它标志蛋白则持续表达。　结论　ATRA和MNM能促进MSCs向神经前体细胞和神经元转化,神经蛋白分子的表达顺序与神经细胞发育过程一致。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞定向分化体外研究 protein Wistar大鼠 retinoid 免疫组织化学检测胶质纤维酸性蛋白 Nestin ATRA MSCs 全反式视黄酸神经元特异性微管相关蛋白神经前体细胞神经细胞发育表达情况蛋白分子

bFGF促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经元转化及机制

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第三军医大学学报 2005年第2期27卷 98-101页

作者：江和碧卓本慧代英瞿平李廷玉重庆医科大学儿童医院儿童保健科重庆市儿童营养研究中心重庆400014

目的　探讨碱性成纤维生长因子对大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元的作用及信号通路。方法　利用bFGF与不同生长因子和化学诱导剂组合诱导间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)向神经元转化 ,观察分化过程中细胞形态、数目的变... 详细信息

目的　探讨碱性成纤维生长因子对大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元的作用及信号通路。方法　利用bFGF与不同生长因子和化学诱导剂组合诱导间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)向神经元转化 ,观察分化过程中细胞形态、数目的变化 ,观察免疫细胞化学检测分化后细胞神经细胞标志蛋白和部分神经功能相关蛋白以及FGFR的表达情况 ,并计算转化率。结果　① 3组不同条件诱导后 ,MSCs均能分化为具有典型神经元形态的细胞 ,并明显表达NSE、MAP2和 5 HT1D,但不表达GFAP ;②bFGF预诱导组的转化率明显高于未预诱导组 ;③诱导后的神经元样细胞FGFR3表达明显增强。结论　以DMSO和BHA为基础诱导剂 ,bFGF预处理可明显提高MSCs跨胚层分化为神经元样细胞的转化率 ,浓度为 10ng/ml的bFGF主要是通过FGFR3作用于MSCs。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞分化bFGF

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骨髓间充质干细胞在神经系统的应用

国外医学（生理病理科学与临床分册） 2002年第4期22卷 386-388页

作者：江和碧重庆医科大学附属儿童医院重庆400014

在骨髓中存一种间充质干细胞 ,它能够在体内外诱导分化为骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、肌细胞、脂肪细胞和神经细胞等 ,在神经系统退化性、缺血性疾病以及损伤等方面具有重要的应用价值。

关键词：应用骨髓间充质干细胞组织工程学细胞移植神经系统

成人骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的体外研究

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第三军医大学学报 2003年第11期25卷 941-944页

作者：李云玲陈笛王璐江和碧卓本慧梁熙李廷玉重庆医科大学附属儿童医院中心实验室重庆400014

目的　探索成人骨髓间充质干细胞在体外定向分化为神经元样细胞的条件。方法　采用Ficoll paque( 1 0 77g/ml)分离液密度梯度离心从人的骨髓分离出骨髓间充质干细胞 ,体外扩增到第 10代 ,选择 4组不同组合的神经分化诱导条件 ,分别诱导... 详细信息

目的　探索成人骨髓间充质干细胞在体外定向分化为神经元样细胞的条件。方法　采用Ficoll paque( 1 0 77g/ml)分离液密度梯度离心从人的骨髓分离出骨髓间充质干细胞 ,体外扩增到第 10代 ,选择 4组不同组合的神经分化诱导条件 ,分别诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞分化 ,通过免疫细胞化学鉴定诱导后细胞神经元烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白的表达情况。结果　各组诱导剂诱导后 ,骨髓间充质干细胞分化为具有典型的神经元形态的细胞 ,免疫细胞化学显示、NF M呈强阳性反应 ,NSE表达强度提高 ,在最佳的分化条件下 ,即加入bFGF、ATRA、BME、BHA、DMSO诱导条件下 ,大约 80 %细胞表达NF M ,86%的细胞为NSE强阳性。结论　成人MSCs在体外可定向诱导分化为神经元样细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞神经分化

全反式视黄酸在骨髓间充质干细胞向神经元分化中的作用研究

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营养学报 2005年第3期27卷 189-192页

作者：卓本慧李廷玉江和碧瞿平刘洋重庆医科大学附属儿童医院营养研究中心重庆400014

目的:探讨全反式视黄酸(ATRA)在骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元分化中的作用及机制。方法:大鼠MSCs在体外培养5～7代后,用0.5μmol/L的ATRA预诱导24h,再换用改良的神经细胞培养基(MNM)作用18h;对照组不用ATRA预诱导,直接用MNM培养。免... 详细信息

目的:探讨全反式视黄酸(ATRA)在骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元分化中的作用及机制。方法:大鼠MSCs在体外培养5～7代后,用0.5μmol/L的ATRA预诱导24h,再换用改良的神经细胞培养基(MNM)作用18h;对照组不用ATRA预诱导,直接用MNM培养。免疫组化检测不同组别巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经元特异性核心抗原(NeuN)和微管相关蛋白-2(MAP-2)的表达情况;ATRA作用前后检测细胞增殖周期和视黄酸受体β(RARβ)的变化。结果:***预诱导组巢蛋白、NSE、NeuN和MAP-2的阳性比例明显高于对照组。***作用前后,MSCs细胞增殖周期无明显改变。***不表达RARβ,用ATRA预诱导细胞后,RARβ表达增加,阳性比例为(20.3±4.2)%。结论:ATRA可能通过RARβ介导靶基因的转录,促进MSCs向神经元分化。

关键词：视黄酸骨髓间充质干细胞神经元

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EB病毒感染患儿淋巴细胞亚群的变化及意义

广州医药 2013年第5期44卷 28-30页

作者：江和碧张晓红广州市妇女儿童医疗中心 510120

目的研究EB病毒感染患儿免疫功能及其与临床表现和严重度的关系。方法用流式细胞仪分别对22例EB病毒感染相关性噬血细胞综合征(EBV-AHLH)和46例传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血淋巴细胞CD4、CD8、CD19、CD56和CD16进行检测。结果与... 详细信息

目的研究EB病毒感染患儿免疫功能及其与临床表现和严重度的关系。方法用流式细胞仪分别对22例EB病毒感染相关性噬血细胞综合征(EBV-AHLH)和46例传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血淋巴细胞CD4、CD8、CD19、CD56和CD16进行检测。结果与对照组相比,IM组患儿CD4+T细胞和CDl9+B细胞比例下降,CD8+T细胞比例升高,CDl6+CD56+NK无明显变化;EBV-AHLH患儿CD4+T细胞下降和CD8+T细胞升高更加明显,CDl6+CD56+NK细胞比例下降。CDl9+B细胞比例明显升高。结论检测外周血淋巴细胞亚群对评估EB病毒感染患儿的免疫功能状况、疾病的诊断、严重度及预后判断有重要意义。

关键词： EB病毒感染淋巴细胞亚群免疫功能

血管内皮生长因子反义核酸对细胞株HL60及耐药细胞株HL60/VCR的抑制作用

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实用儿科临床杂志 2008年第9期23卷 689-691,697页

作者：张晓红江和碧郭海霞李文益中山大学第二附属医院儿科广州510120

目的探讨反义血管内皮生长因子(AS-VEGF)对HL60、耐药细胞株HL60/VCR的影响及其机制,包括基因水平的耐药相关基因(Bcl-2,Mcl-1,MDR1,MRP,GSTπ,TopoⅡα,TopoⅡβ)和蛋白水平的耐药相关蛋白P糖蛋白(P-gp)表达量变化。方法分子生物学方... 详细信息

目的探讨反义血管内皮生长因子(AS-VEGF)对HL60、耐药细胞株HL60/VCR的影响及其机制,包括基因水平的耐药相关基因(Bcl-2,Mcl-1,MDR1,MRP,GSTπ,TopoⅡα,TopoⅡβ)和蛋白水平的耐药相关蛋白P糖蛋白(P-gp)表达量变化。方法分子生物学方法构建AS-VEGF表达真核载体,通过脂质体转染技术将其转染至细胞株HL60和耐药细胞株HL60/VCR内,观察并绘制细胞生长曲线,ELISA法检测细胞培养上清VEGF表达量变化,RT-PCR法从mRNA水平检测细胞内耐药相关基因表达,蛋白质印迹方法从蛋白水平检测细胞表面P-gp表达。结果1.25mmol/L的AS-VEGF真核表达载体转染HL60和HL60/VCR细胞株后继续培养24和48h与未转染组比较均可明显抑制细胞生长,细胞生长减慢;转染组细胞48与24h相比较VEGF、MDR1、MRP、GSTπ和TopoⅡβ的表达量均明显减少,Bcl-2、Mcl-1和TopoⅡα表达量则无明显变化;转染组HL60/VCR细胞表面P-gp表达量48与24h相比较也明显减少。结论AS-VEGF可通过抑制白血病细胞生长,改变细胞内的微环境和细胞膜相关蛋白转运通道,降低细胞解毒能力和自我修复能力逆转白血病细胞多药耐药。

关键词：血管内皮生长因子多药耐药 HL60 HL60/VCR

利妥昔单抗治疗造血干细胞移植后血小板输注无效的临床疗效

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广州医药 2018年第6期49卷 13-16页

作者：江和碧张晓红江华广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科广州510623

目的观察利妥昔单抗在治疗造血干细胞移植后血小板输注无效的有效性和安全性。方法回顾分析我院2014年1月—2017年6月收治的11例利妥昔单抗治疗的造血干细胞移植后血小板输注无效的病例资料,其中包括重型地中海贫血8例,急性髓系白血病1... 详细信息

目的观察利妥昔单抗在治疗造血干细胞移植后血小板输注无效的有效性和安全性。方法回顾分析我院2014年1月—2017年6月收治的11例利妥昔单抗治疗的造血干细胞移植后血小板输注无效的病例资料,其中包括重型地中海贫血8例,急性髓系白血病1例,重型再生障碍性贫血2例。结果 10例造血干细胞移植后血小板输注无效患者经利妥昔单抗治疗,375 mg/m^2,每周1次,2～3次后血小板输注无效的状况明显改善;1例造血干细胞移植后血小板输注无效患者接受1次利妥昔单抗治疗,仍存在血小板输注无效,最终因颅内出血死亡。结论利妥昔单抗是治疗造血干细胞移植后血小板输注无效的一种很有效的治疗方法。

关键词：血小板输注无效利妥昔单抗造血干细胞移植

吗替麦考酚酯不同给药途径对预防儿童异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的疗效对比分析

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中国现代医药杂志 2019年第7期21卷 43-46页

作者：江和碧屈钰华江华广东省广州市妇女儿童医疗中心血液肿瘤科

目的比较静脉注射和口服吗替麦考酚酯(MMF)在儿童异基因造血干细胞移植后预防移植物抗宿主病(GVHD)的有效性,为临床合理用药提供依据.方法选择2013年9月~2016年6月连续接受异基因造血干细胞移植的2~16岁患儿97例,其中52例经静脉注射10mg... 详细信息

目的比较静脉注射和口服吗替麦考酚酯(MMF)在儿童异基因造血干细胞移植后预防移植物抗宿主病(GVHD)的有效性,为临床合理用药提供依据.方法选择2013年9月~2016年6月连续接受异基因造血干细胞移植的2~16岁患儿97例,其中52例经静脉注射10mg/kg的MMF(静脉注射组),45例经口服给予10mg/kg的MMF(口服给药组).预处理方案主要包括白消安、环磷酰胺、氟达拉滨和抗胸腺免疫球蛋白.结果两组患儿发热、深部真菌感染和CMV感染的发生率差异无统计学意义(P>0.05).MMF静脉注射组和口服给药组Ⅰ~Ⅱ度急性移植物抗宿主病发生率分别为19.2%和37.7%,Ⅲ~Ⅳ度的发生率分别为3.8%和22.2%,静脉注射组急性GVHD的发生率显著低于口服给药组(P<0.05),其中以预防Ⅲ~Ⅳ度GVHD的效果更为明显.结论静脉注射相同剂量的吗替麦考酚酯对预防儿童异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的效果优于口服给药.

关键词：移植物抗宿主病异基因造血干细胞移植吗替麦考酚酯