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草菇纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性

无锡轻工大学学报（食品与生物技术） 2002年第6期21卷 622-625页

作者：李迅吴华伟邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214036

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素、木聚糖或稻草为碳源培养草菇(Volvariellavolvacea),并对它所产生的纤维素酶进行初步研究,发现纤维素酶系主要是由纤维素诱导产生.纤维素酶中的β 葡萄糖苷酶和纤维二糖酶分布在胞内,内切葡聚糖酶分布在胞... 详细信息

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素、木聚糖或稻草为碳源培养草菇(Volvariellavolvacea),并对它所产生的纤维素酶进行初步研究,发现纤维素酶系主要是由纤维素诱导产生.纤维素酶中的β 葡萄糖苷酶和纤维二糖酶分布在胞内,内切葡聚糖酶分布在胞外.β 葡萄糖苷酶的最适反应温度为60℃,最适pH为6.6,在pH6.6～7.8时比较稳定,保温1h酶活的半衰温度是45℃.纤维二糖酶的最适反应温度为50℃、最适pH为5.8,在pH6.2最稳定,保温1h酶活的半衰温度是44℃.内切葡聚糖酶的最适反应温度为60℃,最适pH为5.4,在pH6.6～7.0时比较稳定,保温1h酶活的半衰温度是58℃.

关键词：草菇纤维素酶诱导分布初步定性

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草菇半纤维素酶系统的诱导、分布及初步定性

无锡轻工大学学报（食品与生物技术） 2003年第1期22卷 61-64页

作者：裴建军胡沂淮邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214036

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇 (Volvariellavolvacea) ,对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现 ,半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导 .半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外 ,木糖糖苷酶分布在胞内 ,阿拉伯糖苷酶胞内胞... 详细信息

以蔗糖、果胶、羧甲基纤维素或木聚糖为碳源培养草菇 (Volvariellavolvacea) ,对所产生的半纤维素酶进行初步研究发现 ,半纤维素酶系主要是由木聚糖诱导 .半纤维素酶中的木聚糖酶分布在胞外 ,木糖糖苷酶分布在胞内 ,阿拉伯糖苷酶胞内胞外都有分布 .木聚糖酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应 pH为 5 .8,在pH 5 .4～ 7.0时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 5℃ .木糖糖苷酶的最适反应温度为 5 5℃ ,最适反应 pH为 6 .6 ,在 pH 6 .6～ 7.4时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度是 5 2℃ .阿拉伯糖苷酶的最适反应温度为 6 0℃ ,最适反应pH为 5 .0 ,在 pH 4 .6～ 6 .2时比较稳定 ,保温 1h酶活的半衰温度为 6 0℃ .

关键词：草菇半纤维素酶诱导分布

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心中有蔚蓝

心中有蔚蓝

极端耐热木聚糖酶基因在大肠杆菌中的高效表达

2019年

作者：《心中有蔚蓝》编委会编

2019年5月是中国海洋大学出版社建社30周年，配合相应的纪念活动推出一部纪念图书《心中有蔚蓝-中国海洋大学出版社建社三十周年纪念》，以记录海大出版社历史足迹，传承海大出版社光荣传统，凝聚海大出版社新的发展动力。《心中有蔚蓝... 详细信息

ISBN: (纸本)9787567021570

2019年5月是中国海洋大学出版社建社30周年，配合相应的纪念活动推出一部纪念图书《心中有蔚蓝-中国海洋大学出版社建社三十周年纪念》，以记录海大出版社历史足迹，传承海大出版社光荣传统，凝聚海大出版社新的发展动力。《心中有蔚蓝-中国海洋大学出版社建社三十周年纪念》包括前置彩图、序、寄语、足迹、记忆、书缘、一瞬、跋等内容。

关键词：中国海洋大学出版社纪念文集

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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食品与发酵工业 2003年第11期29卷 20-25页

作者：薛业敏毛忠贵邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室

海栖热袍菌Thermotogamaritima为嗜极端高温的厌氧细菌 ,其产生的极耐热性木聚糖酶B具有非常可观的工业应用前景。但编码该酶的基因xynB在大肠杆菌中的表达较困难。文中利用PCR技术将xynB克隆至原核表达载体pET 2 0b ,并与组氨酸标签进... 详细信息

海栖热袍菌Thermotogamaritima为嗜极端高温的厌氧细菌 ,其产生的极耐热性木聚糖酶B具有非常可观的工业应用前景。但编码该酶的基因xynB在大肠杆菌中的表达较困难。文中利用PCR技术将xynB克隆至原核表达载体pET 2 0b ,并与组氨酸标签进行融合构建成重组质粒 pET 2 0 xynB。研究发现 ,pET 2 0 xynB在稀有密码子AGA ,AGG和AUA得到加强的大肠杆菌宿主菌株BL2 1 CodonPlus(DE3 ) RIL中 ,木聚糖酶基因的表达水平远远高于在其他菌株中的表达。结合对重组菌的诱导条件的优化 ,使得重组蛋白表达量达到11 5 % ,比酶活达到 2 5 69U/mg ,比常规基因工程菌株提高 12 5倍。

关键词：极耐热性木聚糖酶基因表达大肠杆菌 PCR技术诱导条件优化

海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B与木聚糖酶XynA CBD结构域融合基因的构建、表达及融合酶性质分析

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微生物学报 2006年第5期46卷 726-729页

作者：李相前邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室

海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B是极耐热胞外酶，氨基酸序列分析表明不含有纤维素结合结构域（CBD），对结晶纤维素无活性，但同样菌种来源的木聚糖酶XynA有催化结构域和纤维素结合结构城。用同样极耐热酶CBD区域和Cel12B融合构建重组质... 详细信息

海栖热袍菌内切葡聚糖酶Cel12B是极耐热胞外酶，氨基酸序列分析表明不含有纤维素结合结构域（CBD），对结晶纤维素无活性，但同样菌种来源的木聚糖酶XynA有催化结构域和纤维素结合结构城。用同样极耐热酶CBD区域和Cel12B融合构建重组质粒pET-20b—Cel12B—CBD，经诱导表达后，对结晶纤维素有活性，酶学特性研究表明：最适反应温度为100℃、最适pH为5．8、在pH4．5—7．0时酶活力稳定，90℃保温2h仍有87％的酶活。

关键词：海栖热袍菌纤维素结合域内切葡聚糖酶基因融合

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我的世界很小，有你刚刚好

巨大芽孢杆菌分子伴侣GroES和GroEL新基因的克隆及同源性分析

作者：七月蔚蓝

来源：南通市图书馆图书评论

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中国生物化学与分子生物学报 2007年第11期 971-974页

作者：鲍方名龚蕾邵蔚蓝南京师范大学微生物工程重点实验室

巨大芽孢杆菌作为革兰氏阳性细菌的一种,是良好的重组蛋白的表达宿主.本研究利用PCR技术从巨大芽孢杆菌基因组克隆出一条1.9Kb的基因片段.核酸序列分析结果表明,该片段全长1984bp,包含2个ORF,分别与芽孢杆菌来源的GroES和GroEL基因有高... 详细信息

巨大芽孢杆菌作为革兰氏阳性细菌的一种,是良好的重组蛋白的表达宿主.本研究利用PCR技术从巨大芽孢杆菌基因组克隆出一条1.9Kb的基因片段.核酸序列分析结果表明,该片段全长1984bp,包含2个ORF,分别与芽孢杆菌来源的GroES和GroEL基因有高度的相似性.氨基酸序列比对发现,GroES蛋白与枯草芽孢杆菌来源的GroES蛋白氨基酸序列同源性为91%,GroEL蛋白氨基酸序列同源性为90%.

关键词：巨大芽孢杆菌分子伴侣 GroES GroEL 基因克隆同源性分析

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热稳定性α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶的纯化

食品与发酵工业 2003年第9期29卷 22-26页

作者：薛业敏毛忠贵邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室

α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶对来源于被子植物的木聚糖类半纤维素的生物降解和转化是必不可少的。文中首次报道了国内对该酶的研究。α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶的基因工程菌在发酵罐中以LB为基质进行生长 ,以乳糖为诱导剂 ,所产生的α ... 详细信息

α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶对来源于被子植物的木聚糖类半纤维素的生物降解和转化是必不可少的。文中首次报道了国内对该酶的研究。α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶的基因工程菌在发酵罐中以LB为基质进行生长 ,以乳糖为诱导剂 ,所产生的α 阿拉伯糖苷酶 /木糖苷酶在 70℃热处理 3 0min后、经DEAE Sephacel阴离子柱层析、金属Ni2 + 的亲和层析等提纯步骤 ,达到了电泳纯 ,提纯倍数为 49 3倍 ,收率为 2 0 4%。SDS PAGE法测定α 阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶的分子质量为 85ku 。

关键词： α-阿拉伯糖苷酶/木糖苷酶基因工程菌发酵纯化重组酶

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草菇cDNA削减文库的构建

南京师大学报（自然科学版） 2005年第4期28卷 73-76页

作者：李迅邵蔚蓝江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214036

介绍一种改进的利用差异杂交和定向插入构建全长cDNA削减文库的方法.分别以诱导和非诱导条件培养草菇菌丝,两者都提取总RNA并采用PolyATtract mRNA Isolation System III试剂盒快速提取mRNA,由PowerScriptTM Reverse Transcriptase将诱... 详细信息

介绍一种改进的利用差异杂交和定向插入构建全长cDNA削减文库的方法.分别以诱导和非诱导条件培养草菇菌丝,两者都提取总RNA并采用PolyATtract mRNA Isolation System III试剂盒快速提取mRNA,由PowerScriptTM Reverse Transcriptase将诱导菌丝提取的mRNA进一步逆转录成cDNA第一链,用得到的cDNA第一链和非诱导菌丝提取的mRNA进行杂交,将未杂交上的cDNA第一链洗脱浓缩后,用SMARTTM cDNA Library Construction 试剂盒构建成草菇cDNA削减文库.经检测:原始文库滴度为2.5×105 pfu/mL,重组率为93%,插入cDNA大小在0.5～4.0 kb之间,文库扩增后,文库滴度为1.1×109 pfu/mL,并从中克隆到了若干植物纤维降解酶.结果表明其简化了实验步骤,而且更有利于富集所需全长基因,是构建cDNA文库的一种有效改进.

关键词：滴度重组率差异杂交 PCR