检索结果-南通市图书馆

零陵学院学报 2005年第3X期26卷 177-178页

作者：毛蕙芸大忠桥镇中心小学湖南祁阳426100

创新能力是一个民族进步的灵魂。质疑有利于儿童创造心理品质的构建,小学数学课堂上质疑能力的培养尤为重要。

关键词：情境质疑创新

定点突变优化信号肽对嵌合抗原受体T细胞功能的影响

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生物工程学报 2024年第2期40卷 573-584页

作者：刘玉李帆戴蕙芸周润龙王梦怡甘世豪徐瑶武汉科技大学生命科学与健康学院生物医学研究院湖北武汉430081 武汉波睿达生物科技有限公司湖北武汉430075

信号肽(signal peptide, SP)参与调节嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构的分泌水平及跨膜易位过程,对嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)行使功能至关重要,本研究通过定点突变技术优化SP序列... 详细信息

信号肽(signal peptide, SP)参与调节嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构的分泌水平及跨膜易位过程,对嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell, CAR-T)行使功能至关重要,本研究通过定点突变技术优化SP序列,并研究其对CD19-CAR-T杀伤功能的影响。首先,利用基因合成和分子克隆技术,构建含野生型SP(SP-wtY)、2种突变型SP(SP-muK或SP-muR)的靶向CD19的CAR载体;对构建成功的载体进行慢病毒包装,并使用慢病毒侵染T细胞,利用流式细胞术检测细胞的转染效率,钙黄绿素释放法检测对靶细胞的体外杀瘤能力,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)技术检测2种细胞因子[干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)和干扰素-α(interferon-α, TNF-α)]的分泌水平。结果显示,构建了野生型和信号肽突变的重组慢病毒质粒,慢病毒转导T细胞后,携带3种信号肽(SP-wtY、SP-muK或SP-muR)的CD19-CAR转染效率分别为33.9%、35.5%、36.8%。进一步杀伤实验显示,与SP-muK和SP-wtY细胞相比,SP-muR细胞的肿瘤杀伤效果显著提高,当效靶比为10:1时共培养24 h后,SP-muR组CAR-T细胞的细胞因子IFN-γ和TNF-α分泌水平显著高于SP-muK和SP-wtY组。本研究揭示信号肽N端正电荷数的增加可以提高CAR的表达效率和对CD19+靶细胞的杀伤作用,为CAR结构的优化改造和临床高效应用提供了科学依据。

关键词：定点突变信号肽嵌合抗原受体 CD19-CAR-T细胞体外杀瘤细胞因子

以问导学：小学音乐单元整体教学“问题链”的设计与实施

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中国音乐教育 2024年第4期 29-34页

作者：毛梦芸海盐县向阳小学

高效的“问题链”从学生已有的认知水平出发，以思维为核心，充分挖掘知识之间的关联性，厘清问题之间的思维逻辑和演进关系。“问题链”整体架构是保障教学设计指向目标并体现结构化的关键策略。笔者通过核心问题引路，以“三基点”聚... 详细信息

高效的“问题链”从学生已有的认知水平出发，以思维为核心，充分挖掘知识之间的关联性，厘清问题之间的思维逻辑和演进关系。“问题链”整体架构是保障教学设计指向目标并体现结构化的关键策略。笔者通过核心问题引路，以“三基点”聚合单元内容重点；通过主要问题构线，以“三样式”聚焦课时目标；通过关键问题建模，以“三环节”聚力认知结构，在单元整体教学中建立内在关联的“问题链”，提高教学成效。

关键词：单元教学问题链核心问题主要问题关键问题

芸苔根肿菌效应蛋白PBRA＿2565对其致病性调控研究

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芸苔根肿菌效应蛋白PBRA＿2565对其致病性调控研究

作者：毛仲玉重庆三峡学院

学位级别：硕士

芸薹属根肿菌是造成十字花科作物根肿病的主要病原菌,由该病引发寄主植物根部肿大,阻碍营养运输,从而对作物的正常生长造成严重威胁,发病严重时则会导致作为死亡,使农业减产,造成一定的经济损失,不利于现代农业的可持续发展。根肿菌在... 详细信息

芸薹属根肿菌是造成十字花科作物根肿病的主要病原菌,由该病引发寄主植物根部肿大,阻碍营养运输,从而对作物的正常生长造成严重威胁,发病严重时则会导致作为死亡,使农业减产,造成一定的经济损失,不利于现代农业的可持续发展。根肿菌在分类上属于黏菌,其特征介于真菌和原生动物之间,目前尚不能纯培养,为该菌的致病机制研究带来了障碍。前期研究发现根肿菌效应子PBRA2565在根肿菌早期侵染榨菜过程中下调表达,因此分析了接种该蛋白对根肿菌侵染榨菜不同时期的影响,以及接种该蛋白后对榨菜根际细菌群落的影响,为进一步分析该基因的功能,构建了以PR27作为启动子的以绿色荧光蛋白为选择标记的融合表达载体PGTN为根肿菌基因融合表达载体,和以PR27启动子表达红色荧光蛋白作为选择标记的的同源敲除载体,利用崩溃酶制备根肿菌感受态,通过PEG介导转化根肿菌,建立根肿菌转化体系获得茎瘤芥转基因群体。并筛选分析了与其互作的榨菜蛋白,其主要结果如下:（1）接种根肿菌效应子PBRA＿2565蛋白30天后,榨菜发病率为80%,病情指数0.50,而接种根肿菌榨菜发病率为90%,病情指数0.53,均高于接种效应蛋白,在病级程度统计中,两种处理发病均无四级,接种根肿菌榨菜发病程度高达三级,主根和侧根均有明显的肿大,接种PBRA＿2565效应子蛋白普遍为一二级,发病程度较轻。同时在接种根肿菌效应子PBRA＿2565蛋白后,根肿菌在休眠孢子萌发阶段初级游动孢子整体数量较少,只有个别在根毛中,在初级侵染阶段接种效应蛋白后在茎瘤芥根毛内部产生的次级孢子囊数量较对照减少,在次级侵染阶段接种效应蛋白后次生原生质团数量较接种根肿菌数量少,在形成休眠孢子阶段接种效应蛋白后形成的休眠孢子数量也少于接种根肿菌,以上结果说明在接种效应蛋白后在根肿菌整个侵染时期均能够减轻根肿菌对茎瘤芥的致病性。（2）接种根肿菌效应子PBRA＿2565蛋白后,土壤细菌群落结构基本稳定,在门水平上,优势细菌门为Proteobacteria和Actinobacteriota,在属水平上,优势细菌属为Sphingomonas和Bacillus。根际土壤细菌共有属为519个,为核心细菌属,PBRA＿2565处理特有细菌属为5个,CK特有细菌属为3个,根肿菌处理特有属为2个。OTU水平上,3个处理共有的细菌为1718个,为核心优势细菌,而PBRA＿2565蛋白处理、CK和根肿菌处理各自特有的OTU分别为21、16和11个。NMDS分析表明,PBRA＿2565蛋白处理后茎瘤芥根际土壤细菌群落与CK和根肿菌差异显著,且CK和根肿菌处理下,茎瘤芥根际土壤细菌群落也存在一定差异。相似性分析表明,PBRA＿2565蛋白处理改变了茎瘤芥根际土壤细菌群落。在对PBRA＿2565蛋白处理过的茎瘤芥细菌群落相关性分析中,网络程度指数为2222,表明蛋白处理后,增强了根际细菌间的互作,提高了群落稳定性,从而具有降低榨菜根肿病发病率的可能性。（3）对不同时间崩溃酶处理的根肿菌用草酸铵结晶紫、DAPI染色和无染色进行比较,筛选出最佳观察染色剂为DAPI后;对根肿菌原生质体以酶解时间、酶解温度和酶浓度为变量进行处理,经荧光显微镜观察根肿菌休眠孢子完整程度筛选得出,最佳酶解条件为20 mg/m L的酶浓度在28℃条件下,酶解4 h。（4）利用崩溃酶制备根肿菌原生质体,通过PEG介导转化根肿菌后,活体接种于水培体系下大白菜根部,接种10 d后,分别筛选具有绿色荧光和红色荧光的单孢接种于大白菜幼苗根部,建立单孢群体,经过连续几代的单孢群体繁殖后,通过绿色荧光和红色荧光初步鉴定超表达PBRA＿2565基因群体和敲除PBRA＿2565基因,并通过PCR进一步验证,成功筛选到超表达PBRA＿2565基因的根肿菌单孢群体。（5）将成功筛选到超表达PBRA＿2565基因的根肿菌单孢群体接种茎瘤芥根系进行互作蛋白分析,WB检测后,进行质谱鉴定,以榨菜基因组为参照共筛选到榨菜蛋白5种,分别为蔗糖合成酶OS（Sucrose synthase OS）、核糖体蛋白质L2（Ribosomal protein L2）、核糖体结构蛋白（Ribosomal structural protein）、硝酸盐转运蛋白（Nitrate transporter）、RNA聚合酶亚基β（DNA-directed RNA polymerase subunit beta）。这5种蛋白均可能为与病害侵染相关的蛋白。

关键词：茎瘤芥根肿病转基因土壤微生物

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食品智能感知技术的发展与前沿探索

中国食品学报 2024年第6期24卷 1-11页

作者：田师一姜国新毛岳忠秦玉梅石双妮曹艳芸秦子涵韩剑众程时文浙江工商大学食品生物工程学院杭州310018 浙江省食品安全重点实验室杭州310012

智能感知技术是一种利用传感器模拟人类感觉器官捕捉样品各种感官属性信息,再结合智能识别算法信号处理,实现食品等样品品质拟人化综合评价的前沿仿生技术。智能感知技术作为传统感官评价技术的现代化延伸和补充,具有检测速度快,样品无... 详细信息

智能感知技术是一种利用传感器模拟人类感觉器官捕捉样品各种感官属性信息,再结合智能识别算法信号处理,实现食品等样品品质拟人化综合评价的前沿仿生技术。智能感知技术作为传统感官评价技术的现代化延伸和补充,具有检测速度快,样品无需前处理,操作简便,实时在线分析等技术特性,是深度感知食品感官品质的强有力的工具。本文综述食品领域中几种主要的智能感知技术,如模拟味觉的电子舌技术,模拟嗅觉的电子鼻技术,模拟触觉的质构分析仪和仿生视觉系统的电子眼等。另外,文章还归纳总结了智能感知技术在食品品质评价方面的应用研究进展,展望智能感知技术在静态感官、动态感官和情绪感知表征等方面的技术发展可能性。随着生物学、材料学、计算机科学等交叉学科的快速发展,智能感知技术有望从样品整体感官特性的区分、识别应用,提升至食品嗜好和情绪的检测表征,为食品产业的发展提供新的动力。

关键词：智能感知技术电子舌电子鼻电子眼质构分析仪静态感官动态感官

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李沁芸,你听我说

新读写 2024年第9期 26-27页

作者：李沁芸上海市市北中学

李沁芸,你听我说,你是春日乘风的风筝。初入高中大门的你,带着的是憧憬还是无奈,也许已经随时间流逝而显得有些模糊。这是全新的生活,你对自己说。你总是把每个人生的站台看得很重,挥手和过去四年告别,比起不舍更多的是无奈。无奈自己... 详细信息

李沁芸,你听我说,你是春日乘风的风筝。初入高中大门的你,带着的是憧憬还是无奈,也许已经随时间流逝而显得有些模糊。这是全新的生活,你对自己说。你总是把每个人生的站台看得很重,挥手和过去四年告别,比起不舍更多的是无奈。无奈自己被时光的大手推着,一转眼就升入了高一;无奈自己跑得不够快,飞得不够高,一边略显失望,一边又暗暗地告诉自己要向前看。我太了解你,不愿服输又出于自尊心不愿展现出失落,因此带着这份别扭走上了新的征程。

关键词：四年自尊心时间流逝高中