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肾癌相关基因CXorf36的克隆及亚定位研究

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中国生物化学与分子生物学报 2008年第6期24卷 531-536页

作者：卓德祥徐洪亮赵磊李载权毛泽斌北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100083

应用生物信息学分析,筛选获得1个肾癌组织中高表达,而在癌旁正常组织中低表达的新基因CXorf36(chromosome X open reading frame 36),并用RT-PCR方法,在组织和细胞系中加以验证.与肾癌组织相比,3种肾癌细胞系中该基因mRNA的表达丰度很低... 详细信息

应用生物信息学分析,筛选获得1个肾癌组织中高表达,而在癌旁正常组织中低表达的新基因CXorf36(chromosome X open reading frame 36),并用RT-PCR方法,在组织和细胞系中加以验证.与肾癌组织相比,3种肾癌细胞系中该基因mRNA的表达丰度很低.为观察CXorf36基因表达产物在哺乳动物细胞内的亚定位,构建了pEGFP N1-CXorf36融合表达载体,转染786-O细胞,其融合蛋白均匀分布于细胞浆.氨基酸序列比对分析显示,CXorf36蛋白与小鼠来源的猜测蛋白LOC75905具有79%的同源性,而小鼠LOC75905蛋白可能是一种水解酶.因此,推测CXorf36蛋白是通过其水解酶活性,在肿瘤的发生、生长或侵袭过程中发挥重要作用.进一步关于CXorf36基因功能的研究,如其在肿瘤组织中的定位、对细胞生物学功能的影响,及其寻找相互作用分子的实验等仍在进行中.

关键词：肾癌基因水解酶

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DNA甲基化与衰老

国外医学（老年医学分册） 1992年第1期13卷 13-16页

作者：毛泽斌张宗玉北京医科大学生化教研室

DNA甲基化在基因表达调控和维持细胞的正常分化状态起着重要的作用。衰老过程中DNA甲基化水平的改变势必引起基因表达和细胞分化状态的异常,本文就DNA甲基化与衰老的关系综述如下。

关键词： DNA甲基化衰老

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pAkt在衰老细胞中的核转位

中国生物化学与分子生物学报 2009年第1期25卷 45-49页

作者：赵磊谢步善韩秀丽陈丽婷何维清毛泽斌北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100191

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称为Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路在从酵母菌到小鼠的寿命以及衰老的调节上都起着非常重要的作用.有研究发现,血清可以激活年轻细胞、衰老细胞胞浆内的Akt,并且年轻细胞核内磷酸化Akt(pAkt... 详细信息

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB,又称为Akt)/叉头转录因子(FOXO)信号通路在从酵母菌到小鼠的寿命以及衰老的调节上都起着非常重要的作用.有研究发现,血清可以激活年轻细胞、衰老细胞胞浆内的Akt,并且年轻细胞核内磷酸化Akt(pAkt)增多,而衰老细胞核内pAkt没有增多.为了研究衰老细胞膜是否发生转位受损,即pAkt能否通过衰老细胞核膜进入核内,通过激光共聚焦显微镜(CLSM)、Western印迹等实验方法,发现衰老细胞胞浆中pAkt可以进入核内,进入核内的pAkt很快被去磷酸化灭活.

关键词： PI3K/Akt通路 Akt 衰老细胞细胞核转位

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云南丽江观测井水温趋势上升原因分析

地震研究 2019年第3期42卷 358-365页

作者：李利波邓盛昌杨永文毛泽斌云南省地震局云南昆明650224 丽江市地震局云南丽江674100

针对云南丽江观测井水温自2012年来处于趋势上升状态这一现象,分析了该井的水文变化过程,利用Piper图、Schoeller图和氢氧同位素等方法,对其地下水化学特征及与周围水体的水力联系进行定量分析,讨论了该井水温上升变化原因。结果认为:... 详细信息

针对云南丽江观测井水温自2012年来处于趋势上升状态这一现象,分析了该井的水文变化过程,利用Piper图、Schoeller图和氢氧同位素等方法,对其地下水化学特征及与周围水体的水力联系进行定量分析,讨论了该井水温上升变化原因。结果认为:该井断流时受深部地下水径流补给,地下水类型为HCO3-Na型,自流时受大气降水直接补给,地下水类型为HCO3-Ca型;该井水-岩反应程度较弱,与周围水体有明显的水力联系,受地表水影响较大,所携带的深部信息较少。该井2012年断流后,水温受深部热水上升影响表现为持续上升状态;受雨季降雨量影响,水温随水位变化表现出一定程度的年变形态,分析认为该时期的前兆特征不明显。

关键词：水温趋势上升地下水化学特征丽江观测井

细胞衰老过程中JNK、p38和Akt的活性变化

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第7期22卷 571-574页

作者：邹平何涛陈颢周艳艳王羽毛泽斌四川省泸州医学院病生教研究室泸州646000 四川省泸州医学院分子生物学实验室泸州646000 北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100083

研究发现衰老成纤维细胞抗凋亡.为探明其机制,检测与凋亡相关的信号传导通路JNK、p38和Akt在细胞衰老过程中是否发生改变.在本研究中,UV被用作JNK和p38传导通路的诱导剂,胎牛血清用作Akt通路的诱导剂.结果表明:p38和Akt在年轻和衰老细... 详细信息

研究发现衰老成纤维细胞抗凋亡.为探明其机制,检测与凋亡相关的信号传导通路JNK、p38和Akt在细胞衰老过程中是否发生改变.在本研究中,UV被用作JNK和p38传导通路的诱导剂,胎牛血清用作Akt通路的诱导剂.结果表明:p38和Akt在年轻和衰老细胞中均能被相应的诱导剂活化;相反,UV照射却不能有效激活衰老细胞中JNK的活性.结果提示:衰老细胞对凋亡诱导不敏感可能与JNK不能被有效活化有关.

关键词：信号传导细胞衰老凋亡

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雄激素调控前列腺癌中PTTG1表达的研究

北京大学学报（医学版） 2005年第6期37卷 638-640页

作者：辛殿祺朱绪辉来永庆由然那彦群郭应禄毛泽斌北京大学第一医院泌尿外科泌尿外科研究所北京100034 北京大学医学部生物化学与分子生物学系

目的阐明雄激素与前列腺癌中雄激素应答基因PTTG1(pituitary tumor transforming gene1)表达的关系。方法选择基因芯片筛选的大鼠前列腺雄激素应答基因PTTG1,应用Northern Blot检测其在去势大鼠补充雄激素Mib(Mibolerone)前后在前列腺... 详细信息

目的阐明雄激素与前列腺癌中雄激素应答基因PTTG1(pituitary tumor transforming gene1)表达的关系。方法选择基因芯片筛选的大鼠前列腺雄激素应答基因PTTG1,应用Northern Blot检测其在去势大鼠补充雄激素Mib(Mibolerone)前后在前列腺组织中的表达。应用免疫组化检测PTTG1在人前列腺癌组织中的表达,进一步以Northern Blot检测雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP及雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3和DU145中PTTG1的表达情况。结果PTTG1在去势7d的大鼠前列腺组织中没有表达,而补充Mib2d后即有显著的表达;PTTG1主要表达于人前列腺癌上皮细胞;0.1nmol/L Mib作用48h可显著上调LNCaP细胞PTTG1的表达;与LNCaP细胞比较,PC3和DU145中PTTG1的基础表达水平更高。结论雄激素可显著上调大鼠前列腺组织及人前列腺癌细胞中PTTG1的表达,提示PTTG1可能在人前列腺癌的发生、发展中发挥重要的作用。

关键词：垂体瘤转化基因前列腺肿瘤雄激素类

衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白-3的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第3期25卷 215-218页

作者：任文君王群义吕小凤毛泽斌蒋晓刚西安交通大学体育部生物医学信息工程教育部重点实验室陕西西安710049 西安市第二医院普外科陕西西安710003 北京大学医学部基础医学院生化系北京100083 西安交通大学医学院遗传与分子生物学系陕西西安710061

目的:研究在衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)表达增加的影响因素。方法:用Northernblot的方法显示IGFBP-3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;PCR扩增出人类IGFBP-3上游包括5′-UTR区的2kb的序列并用酶切得... 详细信息

目的:研究在衰老细胞中调控胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)表达增加的影响因素。方法:用Northernblot的方法显示IGFBP-3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;PCR扩增出人类IGFBP-3上游包括5′-UTR区的2kb的序列并用酶切得到4组不同长短的IGFBP-3启动子片段;将各片段用Effectene Transfection Reagent试剂盒转染到年轻和衰老细胞中,测出几组构建基因片段的启动活性,确定可调控转录活性的区域;通过重叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域中的增强子元件。结果:与年轻的2BS细胞相比,衰老的2BS细胞中IGFBP-3基因的表达升高;在IG-FBP-3启动子+59到-58序列之间存在着蛋白结合位点;5′-ccagcctgccaagcagcgtgccccggttgc-3′是IGFBP-3的增强子元件。结论:在衰老的2BS细胞中IGFBP-3基因上游-37到-8的30bp序列存在一个新的增强子元件IEE(IGFBP-3enhancerelement),对IGFBP-3的表达起到调控作用。

关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白-3 IEE(IGFBP-3 enhancerelement) 2BS细胞

腺病毒介导的p33^(ING1b)过表达显著促进衰老细胞的DNA损伤修复

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第9期22卷 744-749页

作者：鲁云彪闫萌白俊海徐洪亮毛泽斌北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100083

p33ING1b是一个较晚发现的肿瘤抑制基因ING1的主要表达形式,但是它在细胞衰老过程中的作用特别是对衰老细胞DNA损伤修复的影响还没有被阐明.本研究首先用2BS细胞构建了细胞衰老模型,通过RTPCR和Western印迹技术证实p33ING1b在衰老细胞... 详细信息

p33ING1b是一个较晚发现的肿瘤抑制基因ING1的主要表达形式,但是它在细胞衰老过程中的作用特别是对衰老细胞DNA损伤修复的影响还没有被阐明.本研究首先用2BS细胞构建了细胞衰老模型,通过RTPCR和Western印迹技术证实p33ING1b在衰老细胞中的表达水平下调;然后,通过构建和包装包含p33ING1b基因的腺病毒,将p33ING1b导入年轻和衰老细胞中并使其过表达,用HCR(hostcellreactivation,宿主细胞复活)方法检测年轻细胞和衰老细胞DNA损伤修复能力.实验表明,相对于年轻细胞,p33ING1b过表达使衰老细胞的DNA的损伤修复能力显著增加,说明p33ING1b在衰老细胞中的表达下调与衰老细胞DNA损伤修复能力的下降有关,也进一步证实了p33ING1b在细胞衰老过程中起着十分重要的作用.

关键词：细胞衰老 DNA损伤修复 p33^ING1b 腺病毒宿主细胞复活

核转录因子激活蛋白-1对PPARδ表达的调控作用

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西安交通大学学报（医学版） 2005年第4期26卷 312-315页

作者：蒋晓刚毛泽斌孟照俊吕晓凤俞小瑞西安交通大学医学院遗传与分子生物学系北京大学医学部生化系北京853006

目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-basic载体中,转染LOVO细胞,通过观测各重组体转染活性,确定... 详细信息

目的研究在过氧化物酶体增长因子活化受体δ(PPARδ)表达中的相关调控因子.方法用RT-PCR扩增人类PPARδ启动子序列,通过Deletion及重组将不同长短的PPARδ启动子序列转化到PGL3-basic载体中,转染LOVO细胞,通过观测各重组体转染活性,确定PPARδ启动子活性区域.再通过电泳迁移率变更分析(EMSA)、突变等方法确定核转录因子激活蛋白-1(AP1)对PPARδ表达的作用.结果 Deletion及重组转染后发现PPARδ启动子活性区域在序列3361～3464之间,EMSA、突变发现AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低.结论 AP1因子结合位点突变后转染活性明显降低,提示AP1是PPARδ的一个增强子.

关键词：过氧化物酶体增长因子活化受体δ 核转录因子激活蛋白-1 突变转染