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高通量微液滴技术在南大洋沉积物微生物分离培养中的应用研究

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极地研究 2024年

作者：刘忆思张瑾毛梦婷刘仁宗段泽东陈波廖丽 1.上海海洋大学海洋科学与生态环境学院 2.中国极地研究中心自然资源部极地科学重点实验室 3.上海交通大学海洋学院上海海洋大学海洋科学与生态环境学院中国极地研究中心自然资源部极地科学重点实验室上海交通大学海洋学院

为评估微液滴技术在极地微生物分离培养中的可行性,探索其对提升微生物培养效率的潜力,本研究采用高通量微液滴包裹技术,开展南大洋沉积物样品的微生物分离与培养研究。研究结果表明,(1)与传统平板分离法相比,高通量微液滴法分离培养出... 详细信息

为评估微液滴技术在极地微生物分离培养中的可行性,探索其对提升微生物培养效率的潜力,本研究采用高通量微液滴包裹技术,开展南大洋沉积物样品的微生物分离与培养研究。研究结果表明,(1)与传统平板分离法相比,高通量微液滴法分离培养出的菌株类群存在差异。尽管2种方法都主要分离出了盐单胞菌属(Halomonas),但它们在菌株占比上有所不同。(2)2种方法都成功分离出了对方未能培养出的其他菌株类群,这表明结合使用这两种技术可以有效增强对微生物物种多样性的覆盖。(3)在本研究测试的条件下,相较于传统平板分离法,高通量微液滴法分离培养的菌株种类总数不占优势,但在单位时间内却能够获得更多的非冗余扩增子序列可变体(ampliconsequencevariant),体现了其在提升微生物分离培养效率上的潜力。以上结论可为探索高通量微液滴包裹技术在极地微生物分离培养中的应用提供科学依据,也为今后在极地微生物的分离培养中进一步优化此类方法提供经验参考。

关键词：高通量微液滴技术菌株分离培养群落结构沉积物微生物南大洋

南极乔治王岛冰锥洞生境微生物的培养探索与新种发现

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南极乔治王岛冰锥洞生境微生物的培养探索与新种发现

作者：毛梦婷上海海洋大学

学位级别：硕士

南极洲各类独特的生境中蕴藏了大量尚未培养的微生物,是新颖微生物分类群的重要来源之一。尽管现代宏基因组测序技术能够比较全面了解特殊环境中微生物群落结构,但在解答微生物营养、代谢、与环境和其他微生物互作等重要科学问题上无法... 详细信息

南极洲各类独特的生境中蕴藏了大量尚未培养的微生物,是新颖微生物分类群的重要来源之一。尽管现代宏基因组测序技术能够比较全面了解特殊环境中微生物群落结构,但在解答微生物营养、代谢、与环境和其他微生物互作等重要科学问题上无法取代培养技术,故特殊环境微生物的分离和培养仍然是了解微生物生理代谢和互作关系等重要科学问题的重要途径。本研究以南极冰锥洞这类特殊生境为研究对象,通过培养条件的多样化提升南极微生物的培养率和多样性,并分离获得两株新种。示了南极冰锥洞可培养微生物类群多样性,为该环境可培养微生物功能研究奠定基础,也为南极极端环境未培养微生物的培养方法提供借鉴。本研究主要是探究改进培养基中的营养组分是否可以提高微生物的分离培养率并获得更多潜在的新分类群,结果显示,通过降低培养基营养浓度和添加复苏促进因子(Resuscitation promoting factor,Rpf)的方式可较大幅度提高若干微生物类群的可培养率,并有利于分离获得更多未培养的微生物类群。在本研究着重开展南极乔治王岛柯林斯冰盖冰锥洞生境的微生物培养探索,并对获得培养的分离菌株开展微生物多样性分析。采用4种不同营养水平的培养基,平行添加Rpf进行菌株培养,经分离纯化与16S rRNA鉴定,分析冰锥洞可培养微生物的多样性及培养条件对多样性的影响。结果获得分离培养的细菌407株,涵盖5个门、18个科、29个属,其中:放线菌门(Actinobacteria)为优势门,占72.73%,微杆菌科(Microbacteriaceae)为优势科,占69.78%,Lacisediminihabitans属为优势属,占45.70%。从培养基效果分析,培养出菌株数从多到少依次为:R2A培养基(188株)>1/2 R2A+Rpf培养基(144株)>1/2 R2A培养基(46株)>R2A+Rpf培养基(14株)>TSB+Rpf培养基(9株)>TSB培养基(3株)>LB培养基(3株)。其中LB+Rpf培养基未培养出微生物。按照16S相似性98.65%以下可为潜在新种的经验划分[53],69株为潜在新分类菌群,覆盖19个潜在新种,培养分离潜在新种数量较多的培养基依次为:R2A培养基、1/2 R2A培养基,及1/2 R2A+Rpf培养基。本研究发现两个潜在新种的16S rRNA基因序列与Parafrigoribacterium属和Lacisediminihabitans属模式菌株相似度较高。暂将这两株菌命名为R17和RR22,并与Parafrigoribacterium属和Lacisediminihabitans属中已知模式菌株的16S rRNA基因序列进行比对,相似度低于98.65%,之后对R17和RR22进行全基因组测序,比对(d DDH)值和平均核苷酸相似度(ANI值),结果显示,R17和RR22可能分别是Parafrigoribacterium属和Lacisediminihabitans属的新种。从菌株的表型特征、生理生化指标、细胞化学特征和分子生物学特征开展多相分类分析,结果表明,菌株R17为Parafrigoribacterium属的一株新种,RR22为Lacisediminihabitans属的一株新种。R17和RR22都分离自柯林斯冰盖上的一处冰锥洞生境,因此两株菌均表现出极端的嗜冷特性,与模式菌株的中温特性有明显区别。但这两株菌株的生长周期相对较长,R17的最适生长条件为20℃,Na Cl浓度为0%,p H为6、7。在该条件下固体TSB平板培养7d,菌落呈现白色、圆形、光滑,革兰氏阳性,氧化酶活性呈阴性。菌株R17的脂酶(C4)、脂酶(C8)、脂肪酶(C14)、亮氨酸芳基酰胺酶、胱氨酸芳基酰胺酶、酸性磷酸酶、萘酚-AS-B1-磷酸羟化酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶均为阳性。R17中主要脂肪酸是:anteiso-C15:0(49.97%),anteiso-C17:0(37.61%)和iso-C16:0(8.69%)。极性脂为两种已知的磷脂即磷脂酰甘油(PG),二磷脂酰甘油(DPG)和一种未鉴定的糖脂(GL),呼吸醌主要为MK-9和MK-10。DNA-DNA杂交(d DDH)值分析,R17菌株和Parafrigoribacterium mesophilum KCTC19311T杂交值为21.2%,显著低于新种划分的70%阈值。利用Ez Bio Cloud服务中的Ortho ANI算法计算平均核苷酸相似度(ANI)为86.83%,明显低于95-96%的同种划分标准。这些结果证明,菌株R17属于Parafrigoribacterium属的一个新种。RR22的最适生长条件为20℃,NaCl浓度为0%,pH为6、7,在该条件下固体R2A平板培养14d,菌落呈

关键词：南极冰锥洞 Parafrigoribacterium属 Lacisediminihabitans属新种

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南极乔治王岛冰锥洞微生物培养探索

微生物学报 2023年第6期63卷 2066-2077页

作者：毛梦婷张瑾文姣陈波廖丽上海海洋大学海洋生态与环境学院上海201306 中国极地研究中心自然资源部极地科学重点实验室上海200136 上海交通大学海洋学院上海200240

【目的】南极洲具备独特的环境和相对的生物地理隔离,南极洲各类生境中蕴藏了大量尚未培养和难培养的微生物,也是新颖微生物物种的重要来源之一。本研究以南极冰锥洞这类特殊生境为研究对象,通过培养条件的多样化提升南极微生物的培养... 详细信息

【目的】南极洲具备独特的环境和相对的生物地理隔离,南极洲各类生境中蕴藏了大量尚未培养和难培养的微生物,也是新颖微生物物种的重要来源之一。本研究以南极冰锥洞这类特殊生境为研究对象,通过培养条件的多样化提升南极微生物的培养率和多样性,揭示南极冰锥洞可培养微生物类群多样性,为该环境可培养微生物功能研究奠定基础,也为南极极端环境未培养微生物的培养方法提供借鉴。【方法】通过采用不同培养基添加复苏促进因子(resuscitation promoting factor, Rpf)的方式,提高南极柯林斯冰盖冰锥洞生境中微生物的可培养率,探究该生境中微生物的多样性。采用4种不同营养水平的培养基,平行添加Rpf进行菌株培养,经分离纯化与16S rRNA基因鉴定,分析冰锥洞可培养微生物的多样性及培养条件对多样性的影响。【结果】本研究共分离培养细菌407株,涵盖5个门、18个科、29个属,其中:放线菌门(Actinomycetota)为优势门,占72.73%;微杆菌科(Microbacteriaceae)为优势科,占69.78%;Lacisediminihabitans属为优势属,占45.70%。从培养基效果分析,培养出菌株数从多到少依次为:R2A培养基(188株)>1/2R2A+Rpf培养基(144株)>1/2R2A培养基(46株)>R2A+Rpf培养基(14株)>TSB+Rpf培养基(9株)>TSB培养基(3株)=LB培养基(3株)。而LB+Rpf培养基未培养出微生物。按照文献建议的16SrRNA基因序列相似性98.65%以下为潜在新种依据,分离得到的菌株中共有69株为潜在新菌,涵盖19个潜在新种,分离潜在新种率较高的培养基为R2A培养基、1/2R2A培养基以及1/2R2A+Rpf培养基。【结论】本研究共采用8种不同的培养基组合,从南极冰锥洞样品中获得了一定量的可培养细菌,提示了不同培养基添加复苏促进因子对菌株生长的促进作用,并获得多个潜在新种。分离获得的菌株具有较高的多样性,为今后利用不同培养基策略分离极地特殊环境未培养微生物带来启发。

关键词：南极冰锥洞微生物多样性 16S rRNA 培养基组合

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手工钩编女装的创新设计及工艺

针织工业 2022年第5期 66-69页

作者：袁菁红毛梦婷杭州职业技术学院达利女装学院浙江杭州310018

首先介绍手工钩针编织的特点,基于此,进行手工钩编女装设计实践。以中国青花瓷作为灵感来源,设计4款手工钩编女装,阐述设计思路、材料及钩针选择、钩编花样设计等。选取其中一款代表性手工钩编女装进行详细编织工艺说明。整体从色彩搭... 详细信息

首先介绍手工钩针编织的特点,基于此,进行手工钩编女装设计实践。以中国青花瓷作为灵感来源,设计4款手工钩编女装,阐述设计思路、材料及钩针选择、钩编花样设计等。选取其中一款代表性手工钩编女装进行详细编织工艺说明。整体从色彩搭配、钩编花样、编织工艺等方面尝试创新,为钩编行业将中国传统文化与现代时尚结合提供新思路,进而为研发独具特色的新产品提供参考。

关键词：钩针编织手工钩编钩编女装花型设计钩编工艺

用电信息采集系统电能计量数据异常的原因和优化措施

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光源与照明 2022年第5期 231-233页

作者：毛梦婷国网江苏省电力有限公司丹阳市供电分公司江苏镇江212300

提高能源的利用率是可持续发展的重要保证。对此,文章首先介绍了用电信息采集系统的功能和应用优势,详细分析了用电信息采集系统电能计量数据异常的原因;然后针对用电信息采集系统电能计量数据异常的原因提出了优化措施,从而提高电力管... 详细信息

提高能源的利用率是可持续发展的重要保证。对此,文章首先介绍了用电信息采集系统的功能和应用优势,详细分析了用电信息采集系统电能计量数据异常的原因;然后针对用电信息采集系统电能计量数据异常的原因提出了优化措施,从而提高电力管理水平,促进电力企业的高质量发展。

关键词：用电信息采集系统电能计量数据异常

基于网络药理学探讨益肺散结方治疗肺腺癌的作用机制及JAK2/STAT3/VEGF信号通路验证

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第9期25卷 3049-3062页

作者：毛梦婷董孟佳许尤琪李伟良南京中医药大学第二附属医院南京210029

目的基于网络药理学预测益肺散结方治疗肺腺癌的潜在作用机制,并通过体外细胞实验对关键信号通路之一Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路进行实验验证。方法利用中药系统药理数据... 详细信息

目的基于网络药理学预测益肺散结方治疗肺腺癌的潜在作用机制,并通过体外细胞实验对关键信号通路之一Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路进行实验验证。方法利用中药系统药理数据库(TCMSP)筛选益肺散结方的主要活性成分和潜在作用靶点。通过人类基因数据库(GeneCards)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索获取肺腺癌主要靶点。运用韦恩图获取两者的交集靶点,通过Cytoscape3.7.2进行拓扑学分析,并建立中药-活性成分-靶点网络图。采用蛋白质相互作用平台(STRING)与Cytoscape3.7.2软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。应用Metascape数据库进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。借助Vina 1.2.3软件进行分子对接验证。通过CCK-8法检测益肺散结方对细胞活性的影响,细胞划痕实验观察对细胞迁移的影响,Western blot法检测p-STAT3、STAT3、p-JAK2、JAK2、VEGF-A表达。结果获取益肺散结方活性成分94种,相关药物靶点329个,肺腺癌靶点1358个,二者交集150个。PPI网络可视化分析显示,益肺散结方治疗肺腺癌的潜在关键靶点为:蛋白激酶B1(AKT1)、β-肌动蛋白(ACTB)、抑癌基因P53(TP53)、血清白蛋白(ALB)、caspase-3(CASP3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)。KEGG富集分析筛选了138条相关信号通路,显示JAK/STAT信号通路可能在益肺散结方治疗肺腺癌的过程中起到关键作用。分子对接结果表明槲皮素、木犀草素、熊果酸与JAK2、STAT3之间均有较好的结合活性。细胞实验表明,与空白组比较,益肺散结方可显著抑制A549细胞活性(P<0.01),抑制A549细胞迁移(P<0.01),同时能降低p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、VEGF-A蛋白表达(P<0.05),此外,JAK2/STAT3通路激活剂Colivelin可逆转益肺散结方对A549相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论益肺散结方治疗肺腺癌具有多成分、多靶点、多通路的特点,其作用机制可能与下调p-JAK2、p-STAT3、VEGF-A蛋白的表达,进而抑制细胞增殖和迁移有关。

关键词：益肺散结方网络药理学肺腺癌体外细胞实验分子对接 JAK2/STAT3/VEGF信号通路

基于深度强化学习的户内变电站通风降噪优化设计

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中国电力 2023年第1期56卷 96-105,118页

作者：汤锦慧伍发元支妍力毛梦婷代小敏国网江西省电力有限公司电力科学研究院江西南昌330096 华东交通大学电气与自动化工程学院江西南昌330013

针对户内变电站运行发热导致温度过高引发安全风险,以及采取相关散热措施可能导致噪声扰民的问题,提出一种基于有限元仿真和深度强化学习的户内变电站进风口设计参数优化方法。以此对户内变电站通风系统进风口位置大小进行优化设计,使... 详细信息

针对户内变电站运行发热导致温度过高引发安全风险,以及采取相关散热措施可能导致噪声扰民的问题,提出一种基于有限元仿真和深度强化学习的户内变电站进风口设计参数优化方法。以此对户内变电站通风系统进风口位置大小进行优化设计,使其获得最优通风降噪效果。首先,通过有限元分析法对其温度场、流体场和声场进行仿真建模;然后,基于大量仿真数据,采用卷积神经网络建立温度和噪声的预测模型;最后,考虑噪声约束,利用基于最大熵强化学习框架的SAC算法,以变电站室内温度最低为目标对进风口设计参数进行优化求解。研究结果表明,经过优化后的进风口设计方案能够有效降低变电站室内温度,同时使噪声满足国家规范要求。

关键词：户内变电站有限元法通风降噪强化学习优化设计

新形势下国有企业内部审计管理模式的积极探索——基于PDCA循环

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中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2023年第10期 47-49页

作者：毛梦婷王耀得内蒙古电力(集团)有限责任公司信息通信分公司内蒙古康远工程建设监理有限责任公司内蒙古呼和浩特010020

发挥内部审计职能,可以预防化解企业风险,为新时期国有企业经济稳步发展提供保证。探索建立新的内部审计管理模式,规避传统模式的一些局限,可以进一步提升内部审计质量和审计监督效能。本文基于PDCA循环构建内部审计管理模型,通过审计... 详细信息

发挥内部审计职能,可以预防化解企业风险,为新时期国有企业经济稳步发展提供保证。探索建立新的内部审计管理模式,规避传统模式的一些局限,可以进一步提升内部审计质量和审计监督效能。本文基于PDCA循环构建内部审计管理模型,通过审计目标列示(P)、内部审计实施(D)、检查结果评价(C)和发现问题整改(A)四个阶段,将PDCA循环模式的工作方法引入国有企业内部审计工作中,增强内部审计的科学性和权威性,有效促进内部审计和企业经济高质量发展。

关键词：内部审计 PDCA循环管理水平提升

中医药防治EGFR-TKIs治疗非小细胞肺癌不良反应研究进展

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亚太传统医药 2022年第10期18卷 197-201页

作者：毛梦婷许尤琪南京中医药大学江苏南京210029 南京中医药大学第二附属医院江苏南京210017

非小细胞肺癌(NSCLC)是我国最常见的恶性肿瘤,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗驱动基因“EGFR19、EGFR21”突变的NSCLC效果显著。但在口服EGFR-TKIs过程中,相关不良反应的发生会影响患者的生活质量,降低靶向治疗的依从... 详细信息

非小细胞肺癌(NSCLC)是我国最常见的恶性肿瘤,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗驱动基因“EGFR19、EGFR21”突变的NSCLC效果显著。但在口服EGFR-TKIs过程中,相关不良反应的发生会影响患者的生活质量,降低靶向治疗的依从性,进而影响原发病的治疗。中医药联合EGFR-TKIs治疗NSCLC在降低不良反应的发生率、减轻不良反应的程度等方面具有一定的优势。文章通过对现有文献的总结和提炼,概述中医药联合EGFR-TKIs防治NSCLC不良反应的进展,为今后中西医结合进一步规范化防治NSCLC的不良反应提供借鉴。

关键词：非小细胞肺癌靶向治疗 EGFR-TKIs 不良反应中医药