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苯妥英钠对C57BL/6胚鼠颅面组织中Satb2和Hoxa2基因表达的影响

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苯妥英钠对C57BL/6胚鼠颅面组织中Satb2和Hoxa2基因表达的影响

作者：毛小炎汕头大学

学位级别：硕士

背景与目的面部的发生是由一系列复杂的过程所组成,包括神经嵴细胞的增殖、迁移、分化、细胞外基质的产生和细胞凋亡等。到目前为止,已知越来越多的基因在此过程中起重要作用,常见的有TGFα、TGFβ3、Msx1、IRF6等。在这个过程中... 详细信息

背景与目的面部的发生是由一系列复杂的过程所组成,包括神经嵴细胞的增殖、迁移、分化、细胞外基质的产生和细胞凋亡等。到目前为止,已知越来越多的基因在此过程中起重要作用,常见的有TGFα、TGFβ3、Msx1、IRF6等。在这个过程中任何外界致畸因子的作用或某些自身基因表达异常都有可能引起颅面畸形的发生,最常见的是先天性唇腭裂畸形。苯妥英钠是研究较多的一个致畸因子,但关于苯妥英钠引起唇腭裂机制的研究存在很多的不同点。现阶段主要有两种说法,一种是由于活化前列腺素H合成酶（prostaglandin H synthase,PHS）,引起胚胎蛋白质和DNA的氧化损伤;另一种是苯妥英钠引起Hoxa2 mRNA低表达导致腭突融合障碍。SATB2基因是最近发现的与人面部发生密切相关的一个基因,小鼠Satb2基因特异性表达于上颌突、额鼻突和逐渐形成的腭骨架的内侧,Satb2基因可以抑制Hox家族基因包括Hoxa2基因的表达。这就说明苯妥英钠与Satb2基因在唇腭裂发生过程中可能存在相互作用。本实验运用TaqMan探针技术行实时定量PCR,研究苯妥英钠对C57BL/6系胚鼠颅面组织中Satb2和Hoxa2基因mRNA表达的影响,探讨苯妥英钠在唇腭裂发生过程中可能作用机制,为寻找苯妥英钠引起唇腭裂的预防措施提供参考依据。方法 1.孕C57BL/6小鼠30只,随机分为苯妥英钠组（PHT）、生理盐水对照组（NS）,再按受孕时间的不同分为GD11.5（Gestation Day,GD）、GD12.5和GD13.5组,每组各5只。 2.PHT组小鼠在孕第10天腹腔注射苯妥英钠（溶解于生理盐水中,65 mg/kg）,对照组腹腔注射生理盐水（10 ml/kg）。分别在GD11.5、GD12.5和GD13.5断颈处死孕鼠,解剖显微镜下分离胚鼠颅面组织。 3.异硫氰酸胍-酚-氯仿法提取组织总RNA,琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法鉴定RNA的完整性及纯度。 4.DNase处理RNA样本,然后行逆转录法合成第一链cDNA。 5.运用TaqMan探针技术行实时荧光定量PCR,检测Satb2和Hoxa2基因表达量的变化。结果 1.Satb2和Hoxa2基因在正常胚鼠发育第11.5天到13.5天的颅面组织中均有表达。Satb2基因相对表达量分别为14.022、40.33、66.412;Hoxa2基因相对表达量分别为1.682、5.87、1.337。不同时点的表达量有显著性差异。 2.与对照组相比,PHT组相应时点Satb2基因表达量明显低于NS组（P＜0.01）;Hoxa2基因的表达量则高于对照组（P＜0.01）。结论 Satb2和Hoxa2基因在胚鼠唇腭发生的关键时期有表达,进一步证实Satb2和Hoxa2基因是小鼠唇腭发生中的重要基因。Satb2和Hoxa2基因在不同时点的表达量有显著性差异。从胚鼠发育第11.5天到13.5天,Satb2基因在颅面组织的表达量中逐渐升高;Hoxa2基因表达量先升高后降低。苯妥英钠作用的C57BL/6孕鼠其胚鼠颅面组织中Satb2基因表达量明显下降,Hoxa2基因表达量相对升高;苯妥英钠可能通过调节Satb2和Hoxa2基因的表达引起唇腭裂。

关键词：唇腭裂苯妥英钠 Satb2 Hoxa2 聚合酶链反应实时荧光定量PCR

拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣修复拇指软组织缺损

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广东医学 2009年第3期30卷 430-432页

作者：舒申友彭立红唐世杰毛小炎朱镇森谢思田汕头大学医学院第二附属医院烧伤整形外科广东汕头515041

目的探讨拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣修复拇指软组织缺损的效果。方法应用拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣修复拇指软组织缺损28例,皮瓣面积2.0 cm×2.5 cm至3.5 cm×5.0 cm。结果28例皮瓣全部成活,术后经6～12个月随访,拇指皮... 详细信息

目的探讨拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣修复拇指软组织缺损的效果。方法应用拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣修复拇指软组织缺损28例,皮瓣面积2.0 cm×2.5 cm至3.5 cm×5.0 cm。结果28例皮瓣全部成活,术后经6～12个月随访,拇指皮瓣修复区外观及功能良好。结论拇指指背皮神经营养血管远端蒂皮瓣,血供丰富,切取方法简单,是修复拇指软组织缺损的有效方法。

关键词：拇指皮神经皮瓣软组织缺损

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颅骨缺损的临床修复进展

中国美容整形外科杂志 2017年第3期28卷 184-186页

作者：毛小炎归来中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院颅颌面外科北京100144

目前,临床上颅骨缺损修复材料主要包括:自体骨、同种异体骨、异种骨和人工材料,自体骨修复仍是颅骨重建的金标准。随着科技的不断进步,新型颅骨修复材料不断出现,颅骨修复新材料的研发和支架-种子细胞-生长因子的组织工程骨修复将是未... 详细信息

目前,临床上颅骨缺损修复材料主要包括:自体骨、同种异体骨、异种骨和人工材料,自体骨修复仍是颅骨重建的金标准。随着科技的不断进步,新型颅骨修复材料不断出现,颅骨修复新材料的研发和支架-种子细胞-生长因子的组织工程骨修复将是未来颅骨重建的发展方向。笔者查阅近年来国内外有关颅骨缺损领域的临床修复文献,对其修复方法和发展方向进行分析总结。

关键词：颅骨缺损颅骨重建移植物修复材料

数字化三维打印硅胶肋软骨模型在耳再造术的效果

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中华医学美学美容杂志 2022年第6期28卷 493-496页

作者：毛小炎冯传波胡振富陈若思卢子敬胡志奇南方医科大学南方医院整形美容科广州510515

目的数字化技术制备小耳畸形患者供区硅胶肋软骨模型,探讨耳支架雕刻手术模拟在耳再造术的效果。方法2018年6月至2019年10月,南方医科大学南方医院整形美容科就诊的先天性小耳畸形患者19例,男16例、女3例,年龄8~35岁,平均16岁。用Mimic... 详细信息

目的数字化技术制备小耳畸形患者供区硅胶肋软骨模型,探讨耳支架雕刻手术模拟在耳再造术的效果。方法2018年6月至2019年10月,南方医科大学南方医院整形美容科就诊的先天性小耳畸形患者19例,男16例、女3例,年龄8~35岁,平均16岁。用Mimics软件行供区肋软骨三维重建,通过三维打印制备肋软骨硅胶模型,术中按照模拟手术完成耳支架雕刻。术后6个月复诊,对比两侧耳郭的外形、大小、位置和耳颅角,按照Likert五分量表法评估患者对手术的满意度。结果19例患者均在术前行硅胶肋软骨耳支架雕刻的模拟和训练。术中按照模拟手术雕刻方案顺利完成耳再造手术,雕刻时间缩短至1.0~1.5 h,术后无血肿、感染、皮肤坏死及支架外露等并发症。术后6个月随访,再造耳外形清晰、自然,与模拟手术相吻合。19例患者对手术效果均较满意。结论数字化技术及三维打印硅胶肋软骨模型用于小耳畸形患者支架雕刻的模拟,可实现支架个性化雕刻和精准拼接,缩短手术时间,提供一种安全有效的支架雕刻训练方法。

关键词：计算机辅助设计先天性小耳畸形肋软骨三维打印耳郭再造

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数字化技术在下颌角截骨术中的应用

中华整形外科杂志 2018年第1期34卷 9-13页

作者：毛小炎归来牛峰刘剑锋陈莹靳琦付茜中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院颅颌面外科一中心北京100144

目的运用计算机辅助设计下颌角肥大患者的美学下颌角点和截骨线，探讨三维数字化技术在下颌角截骨术中的临床应用。方法2016年4月至2017年4月，采用数字化技术对14例下颌角肥大的女性患者行术前分析、设计和手术模拟，制作截骨导板，完... 详细信息

目的运用计算机辅助设计下颌角肥大患者的美学下颌角点和截骨线，探讨三维数字化技术在下颌角截骨术中的临床应用。方法2016年4月至2017年4月，采用数字化技术对14例下颌角肥大的女性患者行术前分析、设计和手术模拟，制作截骨导板，完成下颌角截骨术。分别测量术前、手术模拟和术后患者两侧下颌角度数、下颌升支高度（Co-Go）和下颌骨体部长度（Go-Me），采用配对t检验对模拟手术和截骨术后数据进行分析。结果14例患者手术顺利，效果满意，左侧下颌角由术前的113.86°±4.11°改善为124.52°±1.26°，右侧由114.30°±4.01°改善为124.29°±1.24°。术后两侧Go-Me/Co-Go均为2.011，与术前设计非常接近。模拟手术和术后测量数据在下颌角度数和Go-Me/Co-Go之间差异无统计学意义（P〉0.05），二者之间差异的平均值在左侧分别为1.00°±0.68°和0.058±0.038，右侧0.85°±0.63°和0.072±0.053。结论计算机辅助的下颌骨截骨术可以显著地提高手术的精准度，降低手术风险，提高患者满意度。

关键词：三维数字化下颌角肥大下颌角截骨术手术导板

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唇腭裂相关基因研究进展

国际病理科学与临床杂志 2007年第3期27卷 266-270页

作者：毛小炎唐世杰汕头大学医学院第二附属医院整形烧伤科广东汕头515041

唇腭裂是一种常见的先天性畸形,其病因非常复杂,目前倾向认为是由多种基因和环境因素共同作用的结果。常见的引起唇腭裂相关的基因有TGFA,TGFβ3,BCL3,F13A等;环境因素在唇腭裂发生中的遗传修饰作用也很重要,主要的环境激发因素包括致... 详细信息

唇腭裂是一种常见的先天性畸形,其病因非常复杂,目前倾向认为是由多种基因和环境因素共同作用的结果。常见的引起唇腭裂相关的基因有TGFA,TGFβ3,BCL3,F13A等;环境因素在唇腭裂发生中的遗传修饰作用也很重要,主要的环境激发因素包括致畸因子(如烟草、酒精、糖皮质激素等)、感染和营养缺乏。基于基因打靶技术建立的鼠基因敲除模型很好地模拟了人类疾病的表现型,成为研究唇腭裂的一种强有力手段。

关键词：唇腭裂基因动物模型

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完全性腭裂腭形态学定量统计分析研究

当代医学 2014年第3期20卷 111-113页

作者：谢思田谢燕丹唐世杰彭立毛小炎广东省汕头市汕头大学医学院第二附属医院唇腭裂中心广东515041 汕头大学医学院第一附属医院

目的：研究完全性腭裂患者不同年龄段腭裂腭形态学定量测量统计分析，为完全性腭裂取得最佳的近期和远期效果而选择最佳的手术方案提供参考依据，并且对完全性腭裂上腭在各个年龄阶段的发育趋势进行初步探讨。方法对82例完全性腭裂患者... 详细信息

目的：研究完全性腭裂患者不同年龄段腭裂腭形态学定量测量统计分析，为完全性腭裂取得最佳的近期和远期效果而选择最佳的手术方案提供参考依据，并且对完全性腭裂上腭在各个年龄阶段的发育趋势进行初步探讨。方法对82例完全性腭裂患者根据手术时年龄段分成7个组，分别于手术前测量腭健侧和裂侧的直线长度、曲线长度、硬腭长、软腭长、上颌结节至裂隙距离、软腭最宽度、两侧上颌结节距离和上颌结节间裂隙宽度等指标，统计分析。结果≤12月组的上腭曲线长度健侧与裂侧的长度比较具有统计学意义，健侧长于裂侧。而在10～15周岁时，硬腭长度、上颌结节至裂隙缘长度在健侧与裂侧的比较均有统计学意义。不同年龄组的上颌结节间距与上颌结节间裂隙的宽度存在线性关系。结论不同年龄段完全性腭裂患者，上腭健侧和裂侧组织发育不一致。为完全性腭裂手术术式以及序列治疗方案，提供重要的参考依据。

关键词：完全性腭裂腭形态学定量测量腭裂修复术

探究增生性瘢痕成纤维细胞中CDK4、CDK2、CDK1基因与细胞周期的相关性

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中国医学创新 2015年第9期12卷 4-6页

作者：张明君舒申友周镜桂毛小炎汕头大学医学院第二附属医院广东汕头515041

目的:探究与分析增生性瘢痕成纤维细胞中CDK4、CDK2、CDK1基因及蛋白的表达与细胞周期之间的相关性。方法:选取本院自2012年7月-2014年7月采集的40份增生性瘢痕标本,按照增生性瘢痕的时间段将所采集的标本进行分组,共分为3个月组、6个... 详细信息

目的:探究与分析增生性瘢痕成纤维细胞中CDK4、CDK2、CDK1基因及蛋白的表达与细胞周期之间的相关性。方法:选取本院自2012年7月-2014年7月采集的40份增生性瘢痕标本,按照增生性瘢痕的时间段将所采集的标本进行分组,共分为3个月组、6个月组、1年组及2年组,每组各10份标本,另选择同时期采集到的10份正常标本作为常规对照组。观察与对比各个标本中CDK4、CDK2、CDK1基因及蛋白情况,同时对成纤维细胞周期进行检测。结果:3个月组、6个月组标本中CDK4、CDK2、CDK1基因含量及蛋白含量与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);6个月、1年组、2年组标本中CDK4、CDK2、CDK1基因含量及蛋白含量与3个月组相比差异均有统计学意义(P<0.05);3个月、1年组、2年组标本中CDK4、CDK2、CDK1基因含量及蛋白含量与6个月组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。增生期瘢痕早期高比例在细胞分裂周期中的S期间及G2/M期,结果可见,针对此细胞周期进行相关的基因调控干预,可对增生性瘢痕进一步发生发展起到有效抑制作用。结论:处于不同增生性瘢痕的时期中CDK4、CDK2、CDK1基因及蛋白的表达趋势大致相符,增生性瘢痕细胞周期的分布情况与上述三个蛋白执行功能的情况呈相互对应的关系,为临床研究提供可靠依据。

关键词：增生性瘢痕成纤维细胞 CDK4 CDK2 CDK1 细胞周期

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双侧完全性唇裂修复的体会

双侧完全性唇裂修复的体会