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手足口病患儿外周血IL-17A+T细胞和相关细胞因子检测及意义

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手足口病患儿外周血IL-17A+T细胞和相关细胞因子检测及意义

作者：毛其芬浙江大学

学位级别：硕士

目的:通过检测不同病情的手足口病患儿(hand-foot-mouth disease,HFMD)外周血单个核细胞中IL-17A+T细胞和IL-1β,IL-17A和IL-6细胞因子,以探索不同病情手足口病患儿Th17细胞,Tc17细胞和γδT17细胞的变化及意义。方法:收集HFMD患儿60例... 详细信息

目的:通过检测不同病情的手足口病患儿(hand-foot-mouth disease,HFMD)外周血单个核细胞中IL-17A+T细胞和IL-1β,IL-17A和IL-6细胞因子,以探索不同病情手足口病患儿Th17细胞,Tc17细胞和γδT17细胞的变化及意义。方法:收集HFMD患儿60例,根据临床病情,重症组20例,轻症组40例;另外选取同龄健康体检儿童40例为对照组。分别提取各组外周血单个核细胞,Th17细胞,Tc17细胞和γδT17 细胞分别以 IL-17A+CD3+CD4+、IL-17A+CD3+CD8+和 IL-17A+yδTCR+标识,采用流式细胞术进行测定。应用液相芯片分析平台检测手足口病患儿及对照组的IL-1β,IL-17A和IL-6细胞因子水平;实时荧光定量PCR仪检测HFMD患儿及对照组外周血单个核细胞IL-1β,IL-17A和IL-6各细胞因子mRNA表达水平,并对治疗前后IL-1β,IL-17A和IL-6浓度进行比较。结果:重症手足口病患儿外周血单个核细胞中的Th17细胞和γδT17细胞含量较轻症组及正常对照组高,而Tc17细胞较低;重症手足口病患儿外周血中细胞因子IL-1β,IL-17A和IL-6蛋白水平及其mRNA的含量明显较轻症组及正常对照高;轻症组外周血中细胞因子IL-1β,IL-17A和IL-6蛋白水平及其mRNA的含量较健康对照组无明显差异(P>0.05),差异无统计学意义。但重症患儿在治疗后其含量都存在明显下降的现象;各组患儿外周血血清中IL-1β、IL-17A和IL-6的蛋白水平分别与胞内IL-1β、IL-17A和IL-6的mRNA表达水平呈正相关关系,各组患儿外周血血清中IL-1β、IL-17A和IL-6的蛋白水平分别与外周血单个核细胞中的Th17细胞、γδT17细胞呈正相关关系,与Tc17细胞呈负相关关系。结论:手足口病患儿在感染病毒后其病情的发生发展与IL-1β,IL-17A和IL-6表达相关,细胞因子表达的升高提示病毒入侵机体后,引起机体强烈的炎性及抗炎反应。IL-17A+T细胞和相关细胞因子可能参与了重症手足口病患者的发生与发展。

关键词：手足口病 IL-17A Th17细胞 Tc17细胞 γδT17细胞

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青蒿琥酯增强吉西他滨的抗胰腺癌活性

中国现代应用药学 2019年第8期36卷 924-929页

作者：毛其芬王海陈弘磊孔凡慧姜凯浙江省立同德医院杭州310000

目的探讨青蒿琥酯对吉西他滨化疗胰腺癌的辅助治疗作用并研究其机制。方法 MTT法检测胰腺癌细胞系Capan-2在青蒿琥酯和不同浓度吉西他滨处理下的细胞活力。Westernblot检测吉西他滨和青蒿琥酯对Capan-2细胞FOXO1、Noxa、Bim表达水平,细... 详细信息

目的探讨青蒿琥酯对吉西他滨化疗胰腺癌的辅助治疗作用并研究其机制。方法 MTT法检测胰腺癌细胞系Capan-2在青蒿琥酯和不同浓度吉西他滨处理下的细胞活力。Westernblot检测吉西他滨和青蒿琥酯对Capan-2细胞FOXO1、Noxa、Bim表达水平,细胞色素C、Smac/DIABLO从线粒体中的释放量及caspase-9、caspase-3活化水平的影响。流式细胞术检测Capan-2细胞的线粒体膜电位和凋亡率。结果青蒿琥酯辅助治疗明显提高吉西他滨对Capan-2细胞的杀伤活性。青蒿琥酯处理能显著促进Capan-2细胞FOXO1的表达,转染FOXO1小干扰RNA(FOXO1 siRNA)后,青蒿琥酯对吉西他滨的辅助治疗效果受到明显抑制。青蒿琥酯联合吉西他滨能显著诱导Capan-2细胞中Noxa和Bim的过表达,线粒体膜电位的降低,细胞色素C、Smac/DIABLO的释放,caspase-9、caspase-3的活化及凋亡的发生。转染FOXO1siRNA后,青蒿琥酯联合吉西他滨对Capan-2细胞的凋亡诱导途径受到显著抑制。结论青蒿琥酯可上调FOXO1的表达,增强吉西他滨对胰腺癌细胞的凋亡诱导活性。

关键词：青蒿琥酯 FOXO1 吉西他滨胰腺癌

小儿手足口病EV71型血清心肌酶谱肌钙蛋白变化的意义

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浙江临床医学 2015年第5期17卷 817-818页

作者：上官醉飞毛其芬浙江省中医院 310006 浙江省立同德医院 310012

目的探讨小儿手足口病（HFMD）EV71型血清心肌酶谱、肌钙蛋白的变化及临床意义。方法收集已确诊为EV71型感染的HFMD患儿88例，分为普通组38例，重症组50例；选取30名健康体检儿童为对照组。采用全自动生化分析仪检测88倒手足口病患儿天... 详细信息

目的探讨小儿手足口病（HFMD）EV71型血清心肌酶谱、肌钙蛋白的变化及临床意义。方法收集已确诊为EV71型感染的HFMD患儿88例，分为普通组38例，重症组50例；选取30名健康体检儿童为对照组。采用全自动生化分析仪检测88倒手足口病患儿天冬氨酸氨（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）；采用全自动化学发光免疫分析仪检测肌钙蛋白I（cTnI）水平，并与30例健康儿童检测结果进行对照分析。结果Ev71型感染重症组及普通组血清心肌酶谱、cTnI水平均明显高于对照组（P〈0．05），差异有统计学意义；重症组血清心肌酶谱、cTnI水平均显著高于普通组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论对Ev71型小儿手足口病患儿进行血清心肌酶谱及肌钙蛋白的检测，可以较早发现心肌损害，对患儿诊断治疗有较高的临床意义。

关键词：手足口病心肌酶谱肌钙蛋白 EV71

雷公藤红素通过上调PTEN的表达提高顺铂对Hep3B干细胞的凋亡诱导活性

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浙江临床医学 2018年第5期20卷 816-818页

作者：上官醉飞毛其芬浙江中医药大学附属第一医院 310003 浙江省立同德医院 310012

目的探讨雷公藤红素是否能提高顺铂对肝癌干细胞的凋亡诱导活性并研究其机制.方法 MTT法检测雷公藤红素对顺铂杀伤Hep3B肿瘤干细胞能力的影响.Western blot方法检测雷公藤红素对Hep3B肿瘤干细胞中PTEN表达水平及PI3K/AKT磷酸化水平的影... 详细信息

目的探讨雷公藤红素是否能提高顺铂对肝癌干细胞的凋亡诱导活性并研究其机制.方法 MTT法检测雷公藤红素对顺铂杀伤Hep3B肿瘤干细胞能力的影响.Western blot方法检测雷公藤红素对Hep3B肿瘤干细胞中PTEN表达水平及PI3K/AKT磷酸化水平的影响.应用免疫共沉淀检测Hep3B肿瘤干细胞中Bad与Bcl-2和Bcl-xl的相互作用.流式细胞术检测Hep3B肿瘤干细胞的凋亡水平.结果雷公藤红素＋顺铂组Hep3B肿瘤干细胞的细胞活力抑制率显著高于雷公藤红素单治疗组和顺铂单治疗组.雷公藤红素处理可诱导Hep3B肿瘤干细胞PTEN蛋白的上调从而抑制PI3K和AKT磷酸化并促进Bad与Bcl-2和Bcl-xl的结合.雷公藤红素＋顺铂组Hep3B肿瘤干细胞的凋亡诱导率和caspase-3的活化水平显著高于顺铂组和雷公藤红素＋顺铂＋PTEN siRNA.结论雷公藤红素通过PTEN/PI3K/AKT/Bad途径提高顺铂对Hep3B肿瘤干细胞的凋亡诱导活性.

关键词：雷公藤红素 PTEN 顺铂肝癌干细胞 Bad

二氢青蒿素抑制ATF2磷酸化提高胃癌细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性

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浙江中西医结合杂志 2018年第5期28卷 363-365,369页

作者：戴卓睿毛其芬浙江省诸暨市中心医院检验科绍兴311800 浙江省立同德医院检验科杭州310012

目的探讨二氢青蒿素与5-氟尿嘧啶协同抗胃癌效应的机制。方法 MTT实验检测胃癌细胞系BGC-823的细胞活力;流式细胞术检测BGC-823细胞的凋亡;Western blot实验检测BGC-823细胞中ATF2、磷酸化ATF2、Bcl-xl的表达水平及细胞色素c的释放水平... 详细信息

目的探讨二氢青蒿素与5-氟尿嘧啶协同抗胃癌效应的机制。方法 MTT实验检测胃癌细胞系BGC-823的细胞活力;流式细胞术检测BGC-823细胞的凋亡;Western blot实验检测BGC-823细胞中ATF2、磷酸化ATF2、Bcl-xl的表达水平及细胞色素c的释放水平和Caspase-3活化水平。结果 5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素对BGC-823的细胞活力抑制率[(67.1±5.5)%]和凋亡诱导率[(37.3±2.9)%]均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组[细胞活力抑制率:(18.9±1.5)%,P<0.05];凋亡诱导率[(9.5±0.9)%,P<0.05]。5-氟尿嘧啶+二氢青蒿素+ATF2质粒组BGC-823的细胞活力抑制率[(26.5±2.1)%]和凋亡诱导率[(14.9±1.1)%]显著低于5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组(P<0.05)。5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素组的ATF2磷酸化水平和Bcl-xl表达水平均显著低于5-氟尿嘧啶单治疗组,同时5-氟尿嘧啶联合二氢青蒿素治疗组的细胞色素c释放水平及Caspase-3活化水平均显著高于5-氟尿嘧啶单治疗组。结论二氢青蒿素通过抑制ATF2的磷酸化增强5-氟尿嘧啶对胃癌细胞的杀伤活性。

关键词：胃癌 BGC-823 二氢青蒿素 5-氟尿嘧啶 ATF2 凋亡

槲皮素对人胶质母细胞瘤T98G凋亡及HSP27蛋白表达的干预作用

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浙江中西医结合杂志 2015年第5期25卷 436-438,442页

作者：陶晓薇毛其芬杭州市拱墅区小河湖墅街道社区卫生服务中心检验科杭州310011 浙江省立同德医院检验科杭州310012

目的探讨天然药物槲皮素对人胶质母细胞瘤的生物效应及机制。方法采用槲皮素治疗人胶质母细胞瘤细胞系T98G,MTT法检测治疗后T98G细胞的增殖抑制情况;流式细胞术检测槲皮素治疗后T98G细胞的凋亡情况,并用Western blot检测细胞活化caspase... 详细信息

目的探讨天然药物槲皮素对人胶质母细胞瘤的生物效应及机制。方法采用槲皮素治疗人胶质母细胞瘤细胞系T98G,MTT法检测治疗后T98G细胞的增殖抑制情况;流式细胞术检测槲皮素治疗后T98G细胞的凋亡情况,并用Western blot检测细胞活化caspase-3(cleaved caspase-3)的表达和热休克蛋白27(HSP27)的表达;将T98G细胞的HSP27基因用特异性HSP27 si RNA沉默后再用槲皮素治疗,检测槲皮素对T98G细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果对照组及5μM、25μM、50μM、100μM、200μM槲皮素组对T98G细胞的48h增殖抑制率分别为0、(0.05±0.02)%、(21.8±3.4)%、(42.2±5.7)%、(67.6±6.8)%、(76.9±7.0)%,各浓度槲皮素组与对照组比较,差异有统计学意义(P其抗肿瘤机制可能和下调HSP27蛋白有关。

关键词：人胶质母细胞瘤槲皮素 T98G HSP27 凋亡 caspase-3

细胞免疫功能及辅助型T细胞因子在口腔扁平苔藓中的作用

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中国微生态学杂志 2017年第2期29卷 162-165,170页

作者：毛其芬上官醉飞浙江省立同德医院检验科浙江杭州310012 浙江中医药大学附属第一医院检验科浙江杭州310003

目的探讨细胞免疫功能及辅助型T细胞(Th)细胞因子在口腔扁平苔藓(OLP)中的作用。方法以35例糜烂型(糜烂组)及29例网纹型OLP(网纹组)患者为对象,选取同期20例健康人为对照组,流式细胞术检测外周血中T细胞、B细胞、NK细胞和调节性T细胞亚... 详细信息

目的探讨细胞免疫功能及辅助型T细胞(Th)细胞因子在口腔扁平苔藓(OLP)中的作用。方法以35例糜烂型(糜烂组)及29例网纹型OLP(网纹组)患者为对象,选取同期20例健康人为对照组,流式细胞术检测外周血中T细胞、B细胞、NK细胞和调节性T细胞亚群表达百分率。ELISA法检测外周血中TNF-α和INF-γ(Th1型细胞因子),IL-4和IL-10(Th2型细胞因子),IL-17、IL-23(Th17型细胞因子)含量;分离外周血单个核细胞,qRT-PCR检测上述因子mRNA的表达。结果与健康组相比,OLP患者CD3^+、CD4^+T细胞亚群比例(F=3.211和3.565,P其中CD8^+及Th17型细胞与糜烂型OLP发病有关,Th2型细胞与网纹型OLP发病有关。

关键词：口腔扁平苔藓细胞免疫辅助型T细胞细胞因子

OC4浮式风力机基础压载水晃荡特性数值研究

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中国造船 2024年第1期65卷 202-212页

作者：张任捷毛其然刘远传中国海洋大学工程学院青岛266100

受到波浪影响,浮式风力机会作6自由度运动,浮式基础内压载水会随之晃荡,进而影响风力机的正常运行。基于开源CFD软件OpenFOAM对OC4浮式风力机基础压载水晃荡进行数值模拟并研究其动力特性,基于指定频率和幅值的强迫激励分析激励频率和... 详细信息

受到波浪影响,浮式风力机会作6自由度运动,浮式基础内压载水会随之晃荡,进而影响风力机的正常运行。基于开源CFD软件OpenFOAM对OC4浮式风力机基础压载水晃荡进行数值模拟并研究其动力特性,基于指定频率和幅值的强迫激励分析激励频率和基础尺寸对压载水晃荡特性的影响,分析自由液面高程变化和晃荡载荷等参数随激励频率变化的规律。结果表明:晃荡力和波高都在风力机固有周期附近达到最大,并随着激励周期与固有周期偏离的增大而减小;不同立柱间的上柱晃荡力差异主要由压载水速度分量的不同引起,而下柱晃荡力差异主要由压载水流通形成的压载水体积变化引起。减小上柱直径,导致液面面积减小,立柱内压载水的速度分量减小,从而影响晃荡力。

关键词：浮式风力机压载水晃荡荷载强迫振荡

2型糖尿病患者外周血白细胞TLR2的表达及其功能的研究

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浙江预防医学 2010年第9期22卷 13-15页

作者：陈益民张丽毛其芬姚轶敏刘永林浙江中医药大学附属第一临床医学院浙江杭州310006

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞TLR2介导的免疫功能。方法应用流式细胞术检测35例2型糖尿病患者和30名对照人群外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞TLR2的表达。将两组人群外周血单个核细胞进行体外分离、培养,经TLR2配体HKLM刺激... 详细信息

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞TLR2介导的免疫功能。方法应用流式细胞术检测35例2型糖尿病患者和30名对照人群外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞TLR2的表达。将两组人群外周血单个核细胞进行体外分离、培养,经TLR2配体HKLM刺激后,检测TLR2的表达及TNF-α的分泌。结果对照组外周血淋巴细胞、单核细胞TLR2表达为(1.75±0.50)%、(28.38±13.92)%低于糖尿病组的(2.12±0.84)%、(35.09±12.69)%(P其介导的细胞免疫功能受损。

关键词： TLR2 糖尿病炎症 TNF-α