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基于氧化应激探讨"秩边透水道"针法对早发性卵巢功能不全大鼠凋亡相关因子表达的影响

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中国针灸 2023年第4期43卷 454-460页

作者：闫婧赵季宇殷陆芸闫晓琴金晓飞山西中医药大学第二临床学院晋中030619 山西中医药大学附属晋中医院

目的:从氧化应激角度探讨"秩边透水道"针法改善早发性卵巢功能不全(POI)的可能机制.方法:将60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、假针刺组、药物组、秩边透水道组,每组12只.除空白组外,其余大鼠采用腹腔注射环磷酰胺的方式制备POI大... 详细信息

目的:从氧化应激角度探讨"秩边透水道"针法改善早发性卵巢功能不全(POI)的可能机制.方法:将60只SD雌性大鼠随机分为空白组、模型组、假针刺组、药物组、秩边透水道组,每组12只.除空白组外,其余大鼠采用腹腔注射环磷酰胺的方式制备POI大鼠模型.造模成功后,秩边透水道组针刺大鼠双侧"秩边",并刺向同侧"水道"方向,深约12 mm,留针30 min,每日1次,共4周;假针刺组用钝针头在"秩边"穴皮肤表面进行点按,不刺入皮下,每日1次,共4周;药物组给予戊酸雌二醇灌胃,共4周.干预结束后,采用荧光探针检测大鼠卵巢组织中活性氧自由基(ROS)水平;实时荧光定量PCR法和Western blot法检测大鼠卵巢组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、叉头状转录因子1(FoxO1)、肿瘤抑制基因p53(p53)和p53上调凋亡调控因子(Puma)mRNA及蛋白表达情况.结果:与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织ROS水平,JNK mRNA、p-JNK蛋白和FoxO1、p53、Puma mRNA及蛋白表达升高(P0.05),秩边透水道组、药物组大鼠卵巢组织ROS水平,JNK mRNA、p-JNK蛋白和FoxO1、p53、Puma mRNA及蛋白表达降低(P<0.01).结论:"秩边透水道"针法可以改善POI模型大鼠体内氧化应激水平,下调氧化应激引发的促凋亡相关因子JNK、FoxO1、p53、Puma表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡引发卵巢储备功能过早衰竭.

关键词：早发性卵巢功能不全秩边透水道针刺氧化应激 JNK/FoxO1

基于数据挖掘的刺络拔罐疗法临床应用特点研究

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世界中医药 2024年第7期19卷 1019-1025页

作者：殷陆芸金晓飞冯慧敏闫婧邱芳山西中医药大学晋中030619 山西中医药大学附属针灸推拿医院太原030006

目的:研究刺络拔罐疗法在相关文献中的临床应用特点,为临床使用刺络拔罐治疗疾病提供参考。方法:运用计算机和数据挖掘技术,建立“刺络拔罐疗法临床应用特点数据库”,利用数据挖掘技术对相关文献进行收集、筛选、审核、整理、提取和录... 详细信息

目的:研究刺络拔罐疗法在相关文献中的临床应用特点,为临床使用刺络拔罐治疗疾病提供参考。方法:运用计算机和数据挖掘技术,建立“刺络拔罐疗法临床应用特点数据库”,利用数据挖掘技术对相关文献进行收集、筛选、审核、整理、提取和录入并进行统计分析。结果:刺络拔罐疗法在临床运用中以皮肤科最多,外科、内科、妇科次之,五官科、儿科应用较少,其中以带状疱疹应用居多;刺络拔罐应用腧穴多以阿是穴、督脉和足太阳膀胱经穴为主;工具多选三棱针和玻璃罐;针刺深度一般为0.1~0.5 cm,放血量一般为1~5 mL,留罐10 min后取罐;刺络拔罐常配合毫针刺法使用效果更佳;治疗频次大多2~3 d 1次,多数疾病在1个月内治疗6~10次有效率可达到90%以上。结论:本研究发现带状疱疹是刺络拔罐疗法的优势病种,在临床其操作方法也有一定特点。

关键词：刺络拔罐数据挖掘临床应用选穴规律使用频次疏通气血治病祛邪文献研究

“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其受体表达的影响

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针刺研究 2023年第3期48卷 259-266,280页

作者：金晓飞闫婧赵季宇殷陆芸马梦娜王红阳山西中医药大学第二临床学院山西晋中030619

目的:通过观察“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)、诱骗受体1(DcR1)、诱骗受体2(DcR2)、死亡受体结构域(FADD)表达的影响,探讨“秩边透水道... 详细信息

目的:通过观察“秩边透水道”针法对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体死亡受体4(DR4)、死亡受体5(DR5)、诱骗受体1(DcR1)、诱骗受体2(DcR2)、死亡受体结构域(FADD)表达的影响,探讨“秩边透水道”针法治疗POI的可能机制。方法:雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、戊酸雌二醇组、秩边透水道组,每组10只。除空白组外,其余大鼠均以腹腔注射环磷酰胺的方式复制POI大鼠模型。造模成功后,秩边透水道组针刺大鼠双侧“秩边”并向同侧“水道”方向透刺,深约12 mm,留针30 min,每日1次,共4周;戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇(0.09 mg/kg)灌胃,每日1次,共4周。干预结束后,用ELISA法检测大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、血管内皮生长因子(VEGF)含量;计算大鼠卵巢系数并用HE染色法观察卵巢组织病理形态及各级卵泡数量变化;实时荧光定量PCR法检测卵巢组织TRAIL、DR4、DR5、DcR1、DcR2、FADD的mRNA表达;免疫组织化学法检测卵巢组织TRAIL、DR4、DR5的阳性表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠血清FSH、LH含量升高(P<0.01),E2和VEGF含量、卵巢系数降低(P<0.01),各级生长卵泡数量减少(P<0.01),闭锁卵泡数量及卵巢组织中TRAIL、DR4、DR5阳性表达增加(P<0.01),卵巢组织中TRAIL、DR4、DR5、FADD mRNA表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,戊酸雌二醇组、秩边透水道组大鼠血清VEGF含量、卵巢系数升高(P<0.01),各级生长卵泡数量增加(P<0.01),闭锁卵泡数量及卵巢组织中TRAIL、DR4、DR5阳性表达减少(P<0.01),卵巢组织中TRAIL、DR4、DR5、FADD mRNA表达水平降低(P<0.01,P<0.05);戊酸雌二醇组大鼠卵巢组织中初级卵泡数量多于秩边透水道组(P<0.01)。结论:秩边透水道针法可增加POI大鼠卵巢质量,改善局部血液循环,促进卵泡发育,其机制可能是通过下调死亡受体途径促凋亡蛋白TRAIL、DR4、DR5、FADD的表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,改善大鼠的卵巢功能实现的。

关键词：透刺秩边透水道早发性卵巢功能不全死亡受体肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体

“秩边”透“水道”针刺对早发性卵巢功能不全大鼠死亡受体通路Fas/FADD/Caspase-8表达的影响

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中国针灸 2023年第5期43卷 537-544页

作者：闫婧马梦娜赵季宇王红阳殷陆芸金晓飞山西中医药大学第二临床学院晋中030619

目的:基于死亡受体通路Fas/Fas相关死亡域蛋白(FADD)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8探讨“秩边”透“水道”针刺对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢功能的影响及可能机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、药物组... 详细信息

目的:基于死亡受体通路Fas/Fas相关死亡域蛋白(FADD)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8探讨“秩边”透“水道”针刺对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢功能的影响及可能机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、药物组和针刺组,每组12只。除空白组外,其余各组大鼠均采用腹腔注射环磷酰胺制备POI模型。针刺组大鼠于造模后采用“秩边”透“水道”针刺干预4周,每日1次,每次30 min;药物组予戊酸雌二醇片(0.09 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃4周。比较各组大鼠一般情况和动情周期;采用ELISA法检测大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平,HE染色法观察大鼠卵巢组织形态,免疫组化法和Western blot法检测大鼠卵巢组织Fas、FADD、Caspase-8蛋白表达。结果:造模后,除空白组外,其他各组大鼠毛发干焦、脱毛,精神萎靡,进食减少,小便增多,大便稀软不成形;干预后,针刺组、药物组大鼠大便逐渐成形。干预后,与空白组比较,模型组大鼠动情周期紊乱率升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组、药物组大鼠动情周期紊乱率降低(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠体质量和血清E2水平降低(P<0.01),血清FSH、LH水平和卵巢组织Fas、FADD、Caspase-8蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组、药物组大鼠体质量和血清E2水平升高(P<0.01),血清FSH、LH水平和卵巢组织Fas、FADD、Caspase-8蛋白表达降低(P<0.01)。结论:“秩边”透“水道”针刺可有效改善POI大鼠卵巢功能,其机制可能为调节POI大鼠血清性激素水平,降低卵巢组织Fas、FADD、Caspase-8表达水平,减缓卵巢细胞凋亡。

关键词：早发性卵巢功能不全秩边透水道针刺死亡受体 Fas/FADD/Caspase-8通路

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复合型课程推进项目化学习

思想政治课教学 2023年第6期6卷 13-16页

作者：陆芸扬州大学附属中学

教学实践中的学科本位主义已经成为影响学生核心素养发展和综合能力提升的桎梏,孤立单一的学科教学已经不能适应当今社会发展对复合型人才的需求。学科知识务必需要在内容的组织形态和呈现方式上跳出学科逻辑和知识点罗列的窠臼,进行融... 详细信息

教学实践中的学科本位主义已经成为影响学生核心素养发展和综合能力提升的桎梏,孤立单一的学科教学已经不能适应当今社会发展对复合型人才的需求。学科知识务必需要在内容的组织形态和呈现方式上跳出学科逻辑和知识点罗列的窠臼,进行融合处理和结构化重整,增强不同学科知识之间、知识学习与学生生活之间的联系。高中政治与高中历史在学科核心素养以及学科内容等方面多有交叉,通过项目化学习来组织跨学科的大主题或大任务可以有效提升核心素养培育实效。

关键词：复合型课程项目化学习学科融合

长期低氧胁迫下红鳍东方鲀血液的转录组变化及相关基因的功能分析

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长期低氧胁迫下红鳍东方鲀血液的转录组变化及相关基因的功能分析

作者：陆芸大连海洋大学

学位级别：硕士

在水生生态系统中,溶解氧(dissolved oxygen,DO)是水生生物获取氧气的主要来源。气候变化、水污染和集约化养鱼等因素常常使鱼类暴露在低氧环境中,对鱼类的行为、生长、生理代谢和免疫反应产生负面影响,严重时甚至会影响它们的繁殖和生... 详细信息

在水生生态系统中,溶解氧(dissolved oxygen,DO)是水生生物获取氧气的主要来源。气候变化、水污染和集约化养鱼等因素常常使鱼类暴露在低氧环境中,对鱼类的行为、生长、生理代谢和免疫反应产生负面影响,严重时甚至会影响它们的繁殖和生存,给鱼类养殖业带来巨大的经济损失。红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)主要分布在中国沿海、朝鲜半岛和日本等地区,因其肉质鲜美、营养价值高等优点,已成为我国沿海地区特有海水经济鱼类。然而,随着红鳍东方鲀养殖业的大幅扩增,水中溶解氧浓度的变化对红鳍东方鲀养殖业的发展产生一定影响。因此,了解红鳍东方鲀应对低氧胁迫时的分子调控机制对于河豚耐低氧品种的选育具有重要意义。我们先前已经对红鳍东方鲀应对急性低氧胁迫时的适应机制进行了探索。本研究在前期研究基础上,进一步使用RNA-Seq技术对红鳍东方鲀在长期低氧胁迫下血液的转录组变化进行分析。此外,结合先前的研究数据,将红鳍东方鲀在长期低氧胁迫下血液的转录组数据分别与急性低氧胁迫下血液的转录组数据,以及长期低氧胁迫下脑的转录组数据进行了比较分析,探究了不同低氧水平下(急性低氧和长期低氧)血液的转录组变化,以及同一低氧水平下不同组织(脑和血液)的适应性机制,以期全面了解红鳍东方鲀在低氧环境中基因的表达模式和差异表达水平。与此同时,本研究通过已有的转录组数据,筛选得到了在低氧胁迫下差异表达的FOXO3转录因子。一方面通过分子生物学手段鉴定FOXO3转录因子可能调控的下游靶基因。另一方面通过生物信息学手段来预测FOXO3转录因子的结合位点(Motif)。研究结果不仅揭示了红鳍东方鲀的低氧耐受机制以及应对低氧胁迫时的组织特异性,同时也为研究基因转录调控提供新的思路。本文的研究结果主要包括以下4个部分:1.长期低氧胁迫下红鳍东方鲀血液的转录组变化为探究长期低氧胁迫下红鳍东方鲀的分子调控机制,本文利用RNA-Seq技术测定了常氧和低氧诱导后红鳍东方鲀血液的转录组数据,结合生物信息学手段鉴定了大量差异表达基因,并进行了基因功能富集分析。研究结果表明:1)与常氧组相比,共鉴定得到710个差异表达基因,包括370个上调基因和340个下调基因;2)功能富集结果显示,在长期低氧胁迫下,血液能够上调糖酵解/糖异生、果糖与甘露糖代谢来促进红鳍东方鲀的无氧代谢以提供低氧环境中的能量供应;3)血液能够抑制红鳍东方鲀的免疫调节及细胞增殖等耗能的生物过程以达到减少长期低氧环境中能量消耗的目的。但是,先天性免疫过程受到抑制可能会使得鱼类更易染病。2.红鳍东方鲀应对低氧胁迫时的组织差异为了解红鳍东方鲀应对低氧胁迫时的组织特异性,对长期低氧诱导后红鳍东方鲀的血液和脑的转录组数据进行了深入分析。研究结果表明:1)红鳍东方鲀对长期低氧的耐受性在脑中表现突出,且同一物种的组织特异性强;2)与血液的免疫应答机制相反,脑能够显著上调免疫应答相关通路及相关基因的表达来增强低氧环境下的免疫防御能力;3)脑能够通过积极调节核糖体、糖酵解、花生四烯酸(ARA)代谢通路及其他与代谢相关的途径,进而促进低氧环境中的物质合成与能量供应;4)相比于血液通过抑制细胞周期等耗能的生物过程来应对低氧胁迫,脑更倾向于通过促进细胞凋亡来清除无用细胞以维持机体的内环境稳态,从而适应低氧环境。3.红鳍东方鲀应对不同溶氧的适应机制为了解红鳍东方鲀应对不同溶氧水平时的分子机制,对急性和长期低氧诱导后红鳍东方鲀血液的转录组数据进行了深入分析。研究结果表明:1)与长期低氧胁迫下血液的调控机制相同,急性低氧胁迫下的血液也能够通过抑制先天性免疫反应来减少低氧环境中的能量消耗,这体现了血液组织在机体中的功能特性;2)信号转导是红鳍东方鲀在急性低氧诱导下血液中的差异表达基因所涉及的主要功能类别。血液能够通过上调HIF-1信号通路和AMPK信号通路以及下游基因的表达,进而在加强心肌保护、血管形成以及快速激活无氧代谢来协调细胞内能量代谢与平衡的过程中发挥重要作用。4.FOXO3转录因子在低氧胁迫下的功能探索基于上文中的转录组数据,筛选得到一个在低氧胁迫下差异表达的FOXO3转录因子。一方面通过原核表达技术获取FOXO3转录因子的DNA结合结构域,使用片段化的DNA与挂在被纯化的GST-FOXO3蛋白进行结合实验,筛选能与GST-FOXO3蛋白结合DNA片段。研究结果共鉴定得到4个FOXO3转录因子可能直接调控的下游靶基因,即STIP1、Tbx16、RIPOR1、CPSF4。这一结果为证明FOXO3转录因子在影响机体发育,细胞增殖和细胞凋亡中发挥作用而奠定了基础。另一方面通过生物信息学手段预测得到了一个FOXO3转录因子的DNA Motif,即“AAAACAAGA”,推测该Motif可能作为FOXO3转录因子的结合位点,在低氧环境下参与调控基因转录过程。

关键词：红鳍东方鲀长期低氧血液转录组转录因子

伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p调控吗啡成瘾记忆再巩固过程的机制研究

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伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p调控吗啡成瘾记忆再巩固过程的机制...

作者：陆芸河北医科大学

学位级别：硕士

成瘾药物戒断后出现的高复吸率是国内外公共健康与社会安全面临的一大严峻挑战。毒品与环境线索反复匹配所形成的长期病理性记忆是复吸的主要原因。Micro RNAs(miRNAs)属于非编码RNA,在学习记忆过程中扮演重要角色,且编码毒品成瘾过程,... 详细信息

成瘾药物戒断后出现的高复吸率是国内外公共健康与社会安全面临的一大严峻挑战。毒品与环境线索反复匹配所形成的长期病理性记忆是复吸的主要原因。Micro RNAs(miRNAs)属于非编码RNA,在学习记忆过程中扮演重要角色,且编码毒品成瘾过程,但是对于miRNAs在毒品记忆再巩固过程中的作用和机制尚知之甚少。本研究发现在吗啡成瘾记忆再巩固过程中伏隔核miRNAs表达谱存在显著差异,并选择其中下调明显的miR-19a-3p和miR-22-3p进行生物信息学分析,发现它们与诸多神经精神性疾病(如阿尔兹海默症、帕金森等)相关,且两者的靶基因PTEN与成瘾相关。因此,本研究通过高通量基因测序、动物行为学实验以及生物信息学分析等技术,探究了miR-19a-3p、miR-22-3p及PTEN m RNA在吗啡记忆再巩固过程中的作用。目的:以小鼠伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p为靶目标研究其在吗啡成瘾记忆再巩固过程中的作用,同时探究其下游PTEN m RNA的调控机制,为治疗吗啡成瘾提供新的靶点。方法:首先,以小鼠程序性交替腹腔注射(i.p.)10 mg/kg盐酸吗啡或生理盐水,进行为期6天的训练,于第7天进行条件性位置偏爱(Conditioned Place Preference,CPP)测试(T1),建立吗啡成瘾记忆模型。于第8天通过药物配对环境唤起进入记忆再巩固阶段。利用高通量测序技术检测吗啡成瘾记忆再巩固过程中小鼠伏隔核差异表达的miRNA,经q RT-PCR验证后,以miR-19a-3p和miR-22-3p为靶目标进行后续实验。取记忆再巩固阶段小鼠伏隔核组织,采用q RT-PCR检测伏隔核核部与壳部及不同时间点miR-19a-3p和miR-22-3p的表达水平。然后,基于功能获得或缺失策略,利用agomir/antagomir调控miR-19a-3p和miR-22-3p在伏隔核中的表达,通过CPP测试观察伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p表达变化对吗啡成瘾记忆再巩固过程的影响。之后,结合Targetscan等线上数据库预测miR-19a-3p和miR-22-3p的靶基因,经qRT-PCR验证后确定了它们的靶基因PTEN。最后,利用CPP测试观察在吗啡成瘾记忆再巩固过程中干扰伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p表达对PTEN m RNA影响。结果:1.CPP测试结果显示,T1期CPP得分较T0期明显升高(P0.05),提示伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p仅在记忆时间窗内(6 h)参与吗啡记忆再巩固过程。3.吗啡成瘾记忆唤起后0.5 h,伏隔核核部与壳部miR-19a-3p和miR-22-3p表达均显著降低(P0.05)。5.过表达伏隔核miR-22-3p后,T2期CPP得分较T1明显降低(P0.05)。6.在记忆再巩固时间窗外过表达miR-19a-3p和miR-22-3p不影响吗啡成瘾记忆的再巩固。7.通过Target Scan等数据库预测到15个miR-19a-3p和miR-22-3p共同的靶基因,通过q RT-PCR结果结合文献选出与成瘾相关的PTEN作为目标基因进行研究。过表达伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p,使PTEN m RNA表达下降;下调伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p,使PTEN m RNA表达增高,提示miR-19a-3p和miR-22-3p对PTEN m RNA具有负向调控作用。8.旷场实验结果显示,过表达伏隔核核部或壳部miR-19a-3p和miR-22-3p对小鼠自发活动无影响。结论:1.伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p在吗啡成瘾记忆再巩固过程中发挥重要作用,在记忆再巩固时间窗内过表达伏隔核miR-19a-3p和miR-22-3p可破坏吗啡成瘾记忆。2.miR-19a-3p和miR-22-3p可通过负向调控PTEN m RNA的表达,参与吗啡成瘾记忆再巩固过程。

关键词：吗啡记忆再巩固伏隔核 miR-19a-3p miR-22-3p 同源性磷酸酶-张力蛋白基因

我国双向FDI与绿色创新的异质动态效应研究

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我国双向FDI与绿色创新的异质动态效应研究

作者：陆芸江苏海洋大学

学位级别：硕士

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探索多维度情境教学优化思政课育人效果

中学政治教学参考 2023年第25期 62-63页

作者：陆芸扬州大学附属中学 225002

学生学习需要在真实生活情境、社会环境中展开,为未来不确定的生活和社会做好准备。这就需要以培育核心素养为目标的思政课教学既高效又生动,能最大限度活跃课堂气氛,充分调动学生学习兴趣,帮助学生深刻理解教学内容、获得成功心理体验... 详细信息

学生学习需要在真实生活情境、社会环境中展开,为未来不确定的生活和社会做好准备。这就需要以培育核心素养为目标的思政课教学既高效又生动,能最大限度活跃课堂气氛,充分调动学生学习兴趣,帮助学生深刻理解教学内容、获得成功心理体验、解决现实生活问题。情境教学是与这种要求相契合的一种生动性强、达成度高、效果佳的教学方式,能充分挖掘多种教育资源、创设多维度情境、优化思政课教学,聚焦育人导向,突出引航铸魂、全方位育人的大格局。

关键词：思政课情境教学四个维度价值