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作者：殷莉阳山西农业大学

学位级别：硕士

为研究pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP基因佐剂对鸡球虫疫苗免疫增效作用的机制,本试验通过检测比较使用和不使用pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP的鸡球虫病三价四株活疫苗免疫鸡的免疫器官（胸腺、脾脏、法氏囊）和肠道（十二指肠、空肠、盲肠扁桃体... 详细信息

为研究pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP基因佐剂对鸡球虫疫苗免疫增效作用的机制,本试验通过检测比较使用和不使用pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP的鸡球虫病三价四株活疫苗免疫鸡的免疫器官（胸腺、脾脏、法氏囊）和肠道（十二指肠、空肠、盲肠扁桃体）中激活的T淋巴细胞、B淋巴细胞、抗原呈递细胞数量变化及白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）和α-肿瘤坏死因子（TNF-α）的m RNA含量和蛋白含量以及新城疫（ND）、禽流感（AI）的抗体水平,探讨pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP基因佐剂的免疫增效机制。试验结果发现:（1）接种后7 d,佐剂组（T1组）胸腺髓质、盲肠扁桃体固有层和脾小结中激活的T细胞数量显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于疫苗组（C1组）和空白组（C0组）;接种后14 d,T1组激活的T细胞数量在肠道（十二指肠、空肠和盲肠扁桃体）固有层、胸腺髓质、脾小结、动脉周围淋巴鞘和脾索中均显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于C1组和C0组;接种后28 d,T1组激活的T细胞数量在肠道固有层、胸腺髓质和脾索中显著或极显著高于（P＜0.05或P＜0.01）C1组和C0组。（2）接种后7 d,T1组鸡空肠和盲肠扁桃体固有层、胸腺皮质、脾索和法氏囊髓质中活化的B细胞数量显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）高于C1组和C0组;接种后14 d和28 d,T1组鸡三个肠段固有层、胸腺皮质、脾小结和法氏囊（皮质、髓质）中活化的B细胞数量显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于C1组和C0组。（3）接种后7 d,T1组盲肠扁桃体绒毛固有层中抗原呈递细胞数量显著高于（P＜0.05）C1组,极显著（P＜0.01）高于C0组;接种后14 d,T1组十二指肠和盲肠扁桃体绒毛固有层和脾小结中抗原呈递细胞数量显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）高于C1组和C0组;接种后28 d,T1组在三个肠段绒毛固有层、胸腺髓质、脾小结、法氏囊皮质和髓质中抗原呈递细胞数量显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于C1组和C0组。（4）接种7 d,T1组和C1组新城疫和禽流感抗体效价均差异不显著（P＞0.05）;接种后14 d,T1组新城疫抗体效价显著（P＜0.05）大于C1组,极显著（P＜0.01）大于C0组,禽流感抗体效价差异不显著;接种后28 d,T1组新城疫和禽流感抗体效价显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于C1组和C0组。（5）采用酶联免疫吸附测定试验（ELISA）检测发现:接种后7 d,T1组IL-4蛋白水平显著或极显著高于（P＜0.05或P＜0.01）C1组和C0组;接种后14 d,C1组γ-IFN蛋白水平极显著高于（P＜0.01）T1组和C0组;接种后28 d,T1组IL-2、IL-4、γ-IFN和α-TNF蛋白水平显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）高于C1组和C0组。（6）荧光定量PCR检测发现:接种后7 d,T1组鸡IL-2 m RNA的表达量在肌肉和脾脏中显著大于（P＜0.05）C1组,IL-4 m RNA在肌肉和盲肠扁桃体中显著大于（P＜0.05）C1组和C0组,IFN-γm RNA在盲肠扁桃体中分别显著（P＜0.05）和极显著（P＜0.01）大于C1组和C0组;接种后14 d,T1组IL-2 m RNA在肌肉、脾脏、空肠和盲肠扁桃体中显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）大于C1组和C0组,IL-4 m RNA在肌肉、脾脏和空肠中显著或极显著大于（P＜0.05或P＜0.01）C1组,IFN-γm RNA在空肠和盲肠扁桃体中显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）大于C1组和C0组,TNF-αm RNA在肝脏、脾脏、空肠和盲肠扁桃体中显著或极显著（P＜0.05或P＜0.01）大于C1组和C0组;接种后28 d,T1组IL-2 m RNA在空肠、肝脏和盲肠扁桃体中显著或极显著大于（P＜0.05或P＜0.01）C1组,T1组IL-4和IFN-γ在肝脏、脾脏、空肠和盲肠扁桃体中显著或极显著大于（P＜0.05或P＜0.01）C1组和C0组,TNF-αm RNA在肝脏、脾脏和盲肠扁桃体中显著或极显著大于（P＜0.05或P＜0.01）C1组和C0组。总之,基因佐剂pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP能促进十二指肠、空肠、盲肠扁桃体、脾脏、胸腺或法氏囊中T细胞和B细胞的增殖和活化,促进抗原呈递细胞MHC-II类分子的表达。基因佐剂可提高鸡体IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α基因表达,也可以提高鸡新城疫和禽流感疫苗免疫抗体效价。

关键词： pCI-chIL-4-chIL-2-EGFP基因佐剂鸡球虫病三价四株活疫苗作用机制免疫

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鸡球虫病三价四株活疫苗安全性研究

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黑龙江畜牧兽医 2020年第22期 131-134,169页

作者：杨洪静郑明学郭钰珏雷璇白瑞张黎康慧鑫范炳灵殷莉阳山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

为了评价鸡球虫病三价四株活疫苗的安全性并为临床试验提供依据,试验按照《兽用生物制品试验研究技术指导原则》将疫苗分别以一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量(20倍)接种雏鸡进行安全性试验,通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道病变... 详细信息

为了评价鸡球虫病三价四株活疫苗的安全性并为临床试验提供依据,试验按照《兽用生物制品试验研究技术指导原则》将疫苗分别以一次单剂量、单剂量重复和一次超剂量(20倍)接种雏鸡进行安全性试验,通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道病变记分、肠道病理组织学观察进行结果判定。结果表明:三个接种组鸡均无死亡,十二指肠、空场和盲肠的平均病变记分均≤1.00分;接种组与空白对照组鸡的平均增重除在14,28,35日龄差异显著外(P0.05);一次单剂量和单剂量重复接种各组绝大多数鸡的十二指肠、空肠和盲肠无明显眼观病变,镜检仅有少量绒毛上皮脱落和少数虫体寄生,一次超剂量接种鸡剖检可见十二指肠分布少量白色结节,空肠和盲肠有少量出血点,镜检发现三个肠段绒毛上皮局部脱落,固有层内有少量虫体寄生。说明该疫苗对鸡的生长性能没有影响,安全性良好。

关键词：鸡球虫病三价四株活疫苗早熟弱毒生长性能安全性试验

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鸡球虫病四价五株活疫苗的实验室效力研究

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黑龙江畜牧兽医 2020年第19期 128-133页

作者：范炳灵郑明学吕强华白瑞张黎张雪松康慧鑫李瑞琪殷莉阳雷璇杨洪静王辰郭露露山西农业大学动物科技学院山西太谷030801

为了探究自主研制的四价五株鸡球虫病活疫苗的实验室免疫效力,为临床应用提供科学依据,试验选择1日龄SPF雏鸡530只,设置了不同免疫剂量、日龄、免疫间隔及单次大剂量与两次小剂量、网上平养和地面平养组考察免疫后相对增重率、平均增重... 详细信息

为了探究自主研制的四价五株鸡球虫病活疫苗的实验室免疫效力,为临床应用提供科学依据,试验选择1日龄SPF雏鸡530只,设置了不同免疫剂量、日龄、免疫间隔及单次大剂量与两次小剂量、网上平养和地面平养组考察免疫后相对增重率、平均增重、死亡率、肠道病变记分等指标,测定疫苗的最小免疫剂量、最小首免日龄、最短免疫间隔、免疫产生期及免疫持续期、最适接种次数和适用范围。结果表明:当柔嫩艾美耳球虫山西早熟株(***,PTsx)、堆型艾美耳球虫山西早熟株(***,PAsx)、毒害艾美耳球虫山西早熟株(***,PNsx)、巨型艾美耳球虫山东和山西早熟株(***,PMsd和PMsx)的一免/二免剂量分别为≥1000/2000,400/800,200/400,100/200个/只时,免疫攻毒组鸡至少有8只各肠道病变记分均≤1.00分,死亡率≤10.0%,免疫效果良好;首免日龄≥4 d、二免间隔时间≥9 d、二免后攻毒间隔≥10 d、二免后攻毒间隔≥91 d的免疫攻毒组均至少8只鸡各肠道病变记分≤1.00分,死亡率≤10.0%,免疫效果良好;两次小剂量免疫组在死亡率、肠道病变记分方面均优于单次大剂量免疫组,免疫期间网上平养组与地面平养组鸡平均增重差异不显著(P>0.05),相对增重率均≥80.00%,攻毒后两组鸡各肠道平均病变记分均至少有8只鸡各肠道病变记分均≤1.00分,死亡率为0,免疫效果良好。说明PTsx、PAsx、PNsx和PMsd/PMsx最小一免/二免剂量分别为1000/2000,400/800,200/400,100/200个/只;最小首免日龄为4 d,最短二免间隔为9 d,二次免疫产生期为10 d,免疫持续期≥91 d;两次免疫接种方式的效果更好;该球虫疫苗对网上平养和地面平养鸡均适用。

关键词：鸡球虫病四价五株活疫苗实验室效力早熟弱毒株艾美耳属(Eimeria) 免疫

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鸡球虫病四价五株活疫苗安全性试验

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中国兽医杂志 2020年第12期56卷 52-55,I0007页

作者：殷莉阳郑明学吕强华白瑞张黎康慧鑫范炳灵段步婷山西农业大学动物医学学院山西太谷030801

为研究鸡球虫病四价五株活疫苗的安全性,对适宜日龄的无特定病原体(SPF)雏鸡按照推荐免疫剂量进行1次单剂量接种、单剂量重复接种和1次超剂量接种(推荐免疫剂量的10、20、30倍和100倍)试验。通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道(十二指... 详细信息

为研究鸡球虫病四价五株活疫苗的安全性,对适宜日龄的无特定病原体(SPF)雏鸡按照推荐免疫剂量进行1次单剂量接种、单剂量重复接种和1次超剂量接种(推荐免疫剂量的10、20、30倍和100倍)试验。通过死亡率、相对增重率(RWG)、肠道(十二指肠、空肠、盲肠)病变记分等主要指标来表示鸡球虫病四价五株活疫苗的安全性。结果显示,100倍超剂量接种,雏鸡死亡率≥80%,1次单剂量接种、单剂量重复接种和10、20、30倍超剂量接种,雏鸡均未死亡,且每组10只鸡里面至少有8只各肠道病变记分≤1.0。本试验结果表明除100倍超剂量外,按其余各组剂量接种对雏鸡都是安全的,本试验为其临床应用提供了科学依据。

关键词：鸡球虫病四价五株活疫苗早熟弱毒株安全性试验

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鸡球虫病三价四株活疫苗实验室效力试验

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中国兽医杂志 2020年第10期56卷 31-37页

作者：雷璇郑明学郭钰珏白瑞张黎张雪松康慧鑫李瑞琪殷莉阳杨洪静王辰郭露露山西农业大学动物医学学院山西太谷030801

为了确定鸡球虫病三价四株活疫苗的免疫效果,对鸡球虫病三价四株活疫苗进行了最小免疫剂量、最小首免日龄、最小二免间隔期、免疫产生期和持续期以及网上平养和地面平养试验。结果显示,当鸡球虫病三价四株活疫苗一免/二免剂量分别≥1600... 详细信息

为了确定鸡球虫病三价四株活疫苗的免疫效果,对鸡球虫病三价四株活疫苗进行了最小免疫剂量、最小首免日龄、最小二免间隔期、免疫产生期和持续期以及网上平养和地面平养试验。结果显示,当鸡球虫病三价四株活疫苗一免/二免剂量分别≥1600和3200个孢子化卵囊/只时,可达到良好免疫效果,符合疫苗效力检验标准;首免日龄≥4日龄的免疫攻毒组鸡至少9只雏鸡3个肠段的病变记分均≤1.0,死亡率≤10.0%,符合效力检验标准;二免间隔在7~11 d时均能够获得良好的免疫效果;鸡只在二免后第6~56天可产生足够免疫保护;网上和地面平养对免疫鸡群的生长性能与疫苗的免疫效果并无显著差异,均符合疫苗效力检验标准。表明鸡球虫病三价四株活疫苗的最小免疫剂量:一免剂量为1600个孢子化卵囊/只,二免剂量为3200孢子化卵囊/只;最小首免日龄为4日龄;最小二免间隔为7 d;免疫产生期为二免后的第6天,免疫持续期可至二免后第56天;该疫苗可用于网上和地面平养鸡的免疫。

关键词：鸡球虫病疫苗免疫效力

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北京南海子麋鹿苑麋鹿肠道寄生虫流行病学调查

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中国畜牧兽医 2020年第7期47卷 2223-2230页

作者：李瑞琪白加德郭青云钟震宇白冰康慧鑫雷璇杨洪静段步婷张琦范炳灵殷莉阳贡鑫席柔郑明学山西农业大学动物科技学院太谷030801 北京麋鹿生态实验中心北京102600 轻工业环境保护研究所北京100089

为了解北京南海子麋鹿苑麋鹿肠道寄生虫感染情况和影响因素,本试验分别于2018年4月和10月收集北京南海子麋鹿苑麋鹿粪便样品共53份、补料区土壤样品9份、湖水及淤泥样品9份,应用饱和食盐水漂浮法、水洗沉淀集卵法、改良抗酸染色法、饱... 详细信息

为了解北京南海子麋鹿苑麋鹿肠道寄生虫感染情况和影响因素,本试验分别于2018年4月和10月收集北京南海子麋鹿苑麋鹿粪便样品共53份、补料区土壤样品9份、湖水及淤泥样品9份,应用饱和食盐水漂浮法、水洗沉淀集卵法、改良抗酸染色法、饱和硫酸镁漂浮法、试管滤纸培养法、滤膜培养法对麋鹿寄生虫感染情况及土壤中寄生虫情况进行检测,同时对麋鹿苑湖水及淤泥中贝类进行分类鉴定。结果显示:北京南海子麋鹿苑53份麋鹿粪便样品均检出了寄生虫卵,感染率为100%,感染的寄生虫主要有线虫、吸虫、绦虫和原虫,以线虫、吸虫为主,且主要为混合感染。麋鹿苑土壤深层(90~95 cm)寄生虫虫卵的检出率为100%,高于中层(30~35 cm)和浅表层(2~7 cm)寄生虫虫卵检出率(均为33%),但未检测出钩虫卵和活的蛔虫卵。在湖水及淤泥中检测到环棱螺属、沼螺属、赤豆螺,以环棱螺属的螺类为主,其可能成为广州管圆线虫、华支睾吸虫和抱茎棘隙吸虫的中间宿主。结果表明,北京南海子麋鹿苑麋鹿普遍存在寄生虫感染情况,且与生活环境关系密切,影响麋鹿寄生虫病流行的主要因素为驱虫和轮牧不够,粪便和水塘未进行无害化处理,随粪便排出的虫卵成为循环感染的重要因素,应采取有效的综合防控措施,以保障麋鹿种群的健康发展。

关键词：麋鹿寄生虫流行情况感染

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戳穿乙肝治疗神话

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农家参谋 2004年第11期 39-39页

作者：殷莉

'应用肝病治疗史上的重大突破性成果'、'基因疗法彻底清除肝内病毒'、'乙肝转阴不是梦'-这些让乙肝患者心动的'承诺',到底有几分可信度呢?

关键词：乙肝门诊部广州病人乙型肝炎广东大三阳小三阳

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