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原儿茶醛调控线粒体自噬延缓软骨细胞衰老的作用机制

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医学研究生学报 2022年第11期35卷 1126-1131页

作者：揭立士时孝晴殷松江茆军王培民南京中医药大学附属医院骨伤科南京210004

目的原儿茶醛(PCA)在软骨细胞衰老中的作用及机制尚不清楚。文章旨在探讨PCA通过介导线粒体自噬延缓软骨细胞衰老的调控效应。方法将软骨细胞分为空白组(0.1%BSA)、空白+PCA组(BSA+PCA)、模型组(BSA+IL-1β)、IL-1β+PCA组、IL-1β+Mdiv... 详细信息

目的原儿茶醛(PCA)在软骨细胞衰老中的作用及机制尚不清楚。文章旨在探讨PCA通过介导线粒体自噬延缓软骨细胞衰老的调控效应。方法将软骨细胞分为空白组(0.1%BSA)、空白+PCA组(BSA+PCA)、模型组(BSA+IL-1β)、IL-1β+PCA组、IL-1β+Mdivi-1组和Mdivi-1+IL-1β+PCA组。使用IL-1β模拟膝骨关节炎(KOA)软骨周围环境并诱导软骨细胞衰老模型,按上述分组予以相应干预。检测细胞衰老水平;检测细胞线粒体膜电位水平;荧光倒置显微镜观察线粒体ROS荧光强度;检测细胞内ATP水平;蛋白质免疫印迹检测P21、P53、Acetyl-p53、P62、LC3、PINK1和Parkin表达水平。结果模型组荧光效果较空白组明显增强(P<0.05),ROS水平[(7467.981±2016.985)vs(2434.312±419.396)]明显增高(P<0.05)。与模型组ROS水平(7467.981±2016.985)相比,IL-1β+PCA组(4157.225±492.308)明显降低(P<0.05)。在SA-β-gal染色实验中,与空白组阳性细胞百分比比较,模型组明显升高(P<0.05);用PCA处理后,模型组的阳性细胞比率较IL-1β+PCA组明显升高(P<0.05)。与空白组相比,模型组细胞红色荧光强度下降,表明线粒体膜电位下降(P<0.05);而给予PCA处理后,IL-1β+PCA组软骨细胞红色荧光强度较模型组增加,线粒体膜电位上升(P<0.05)。模型组衰老相关蛋白P53、Acetyl-p53、P21的表达较空白组上调(P<0.05),自噬相关蛋白P62,LC3、Parkin、PINK1表达下调(P<0.05);IL-1β+PCA组衰老相关蛋白P53、Acetyl-p53、P21的表达较模型组下调(P<0.05),P62、LC3、Parkin、PINK1表达上调(P<0.05)。IL-1β+Mdivi-1组自噬相关蛋白表达水平较模型组降低,衰老相关蛋白表达水平增加(P<0.05);然而,使用PCA干预后,IL-1β+PCA组软骨细胞自噬水平增强,衰老水平降低(P<0.05)。结论PCA能够通过激活PINK1/Parkin增强线粒体自噬,进而延缓软骨细胞衰老。PCA可能为衰老和退行性骨关节病提供一种新策略。

关键词：原儿茶醛线粒体自噬细胞衰老骨关节炎

尿毒清颗粒灌肠治疗CKD4-5期患者临床疗效观察

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尿毒清颗粒灌肠治疗CKD4-5期患者临床疗效观察

作者：殷松江南京中医药大学

学位级别：硕士

目的：在常规治疗的基础上,观察尿毒清颗粒灌肠治疗CKD4-5期的近期疗效,比较尿毒清灌肠与通腑泄浊方灌肠的疗效差别,随访半年内各组患者进入透析的情况。方法：(1)文献研究：检索EMbase、PubMed、CNKI、VIP、Wanfang、sinoMed数据库,纳... 详细信息

目的：在常规治疗的基础上,观察尿毒清颗粒灌肠治疗CKD4-5期的近期疗效,比较尿毒清灌肠与通腑泄浊方灌肠的疗效差别,随访半年内各组患者进入透析的情况。方法：(1)文献研究：检索EMbase、PubMed、CNKI、VIP、Wanfang、sinoMed数据库,纳入尿毒清灌肠治疗CKD的随机对照试验,以采用尿毒清灌肠治疗作为干预组,未采用尿毒清灌肠治疗为对照组,经剔重文献,提取数据,评价质量等步骤后,采用RevMan 5.2软件进行分析,观察治疗后两组总有效率,及Scr. BUN的水平。(2)临床研究：选取2015.4至2016.2江苏省中医院肾内科的符合纳入标准的CKD4-5期住院患者共115例,尿毒清组39例、中药组39例及对照组37例,对照组仅采用西医基础及中医辨证治疗,尿毒清组在对照组基础上应用尿毒清颗粒灌肠治疗,中药组在对照组基础上应用通腑泄浊方灌肠治疗,疗程14天,观察治疗前后三组疾病疗效、实验室指标、中医证侯积分及症状、不良反应的变化,随访半年内各组患者进入透析的情况。结果：(1)文献研究：①干预组治疗后总有效率高于空白对照组,两者差异具有统计学意义[OR=3.30,95% CI (1.81,6.03),P=0.0005,I2=0%];②干预组治疗后Scr、BUN低于空白对照组及爱西特组,差异均具有统计学意义[Scr:MD=-40.03,95%CI (-64.55,-15.50), P=0.005,I2=82%(与空白对照组比较);MD=-66.74,95%CI(-101.47.04,-32.01), P=0.0002,I2=17%(与爱西特组比较)];[BUN:MD=-1.99,95%CI (-3.33,-0.65), P=0.004,I2=88%(与空白对照组比较);MD=-5.35,95%CI (-6.45,-4.25), P=0.0001,I2=0%(与爱西特组比较)]。(2)临床研究：①尿毒清组治疗后疾病总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);亚组分析：非湿浊证患者尿毒清组治疗后有效率与对照组相当,差异无统计学意义(P>0.05)②尿毒清组治疗后BUN、Scr、UA水平下降,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);③尿毒清组治疗后证候积分减少,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);三组进入透析常见诱因依次为感染、心衰、高血钾;⑥尿毒清组、中药组常见的不良反应为轻度腹泻、腹痛,未见便血、恶心呕吐等不良反应。结论：(1)短程应用具有益气健脾,通腑泄浊,活血化瘀功效的尿毒清颗粒灌肠有助于清除尿毒症毒素、稳定肾功能,近期疗效为71.8%,与通腑泄浊方相当,但不能延缓中晚期CKD患者进入透析的时间。(2)尿毒清灌肠可改善中晚期CKD患者乏力、腰膝酸软、纳差、头晕及恶心呕吐等症状,疗效优于通腑泄浊方,短期应用无明显不良反应。(3)尿毒清为临床应用多年的颗粒剂型,用于灌肠疗法时较水煎剂更为便利。

关键词：尿毒清灌肠 CKD4-5期 meta分析中药灌肠

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冠心病社区防治绩效管理的研究

冠心病社区防治绩效管理的研究

作者：殷松江浙江大学

学位级别：硕士

研究背景社区卫生服务(Communtiy Health Service, CHS)在我国已广泛开展,政府投入也日趋增加,但目前社区卫生服务的效果不佳,居民健康未得到有效保证,政府对社区卫生服务机构的投资效果很难体现。进一步规范、管理和考核社区卫生服务,... 详细信息

研究背景社区卫生服务(Communtiy Health Service, CHS)在我国已广泛开展,政府投入也日趋增加,但目前社区卫生服务的效果不佳,居民健康未得到有效保证,政府对社区卫生服务机构的投资效果很难体现。进一步规范、管理和考核社区卫生服务,提升社区卫生服务质量是我国现行医疗关注和改革的重点。我国政府和学者已经意识到社区卫生服务质量缺乏有效的考核监督,使社区卫生服务机构陷于当前发展瓶颈,是影响其健康和持续发展的重要因素,提出要建立社区卫生服务绩效考核制。同时,部分地区已开始以慢病管理为切入点进行探索性的实践,但具体管理指标、绩效考核指标、绩效分值等研究,国内还缺乏相关研究报道。因此,绩效考核制的相关研究、制度的出台和有效实施显得尤为重要、迫切。由于社区卫生服务涉及面广,工作内容复杂,整体研究相对较困难。本研究选择冠心病社区管理为最佳切入点,通过其工作内容、管理指标、各指标期望控制率和实际控制率、绩效考核指标和分值配比等分析研究,探索冠心病社区防治管理和评价体系,对其它慢性病管理起示范作用,同时也为社区卫生服务工作整体考核研究奠定基础,充分体现政府购买公共卫生服务的效果。当然,这也是我国目前构建和谐社会的重要内容之一研究目的通过调查社区卫生工作者和卫生行政管理者,分析确立管理指标、绩效考核指标和分值匹配,为建立冠心病社区控制评价体系提供一定的理论依据,促进我国冠心病社区防治工作的落实和发展。同时,以此为例将绩效考核制推广到其它慢性病管理及所有社区卫生服务工作,解决社区卫生服务发展改革重点问题。研究方法1、文献回顾法检索和查阅国内外文献,特别是社区卫生服务管理较为成熟的国家的做法、经验及效果,了解我国冠心病控制现状和当前冠心病社区管理存在的问题。2、问卷设计本研究根据当地卫生工作者、社区卫生服务,尤其是慢性病管理专家的实际经验和政府要求的冠心病防治工作内容及要求,自行设计调查表。3、抽样方法本课题采用分层整群抽样的方法,在浙江省11个地区根据现有的行政区划抽取4个地区,再从抽到的4个地区随机抽取一个城乡结合部,对其所属的所有CHS中心的医务人员和部分主管部门人员进行普查。4、现场调查主要了解冠心病社区防治绩效考核相关信息。主要包括的内容有：社区管理项目及所占工作比例、期望控制目标、实际控制率、期望绩效考核指标及配比分值、转诊指征选择等。研究结果1、71.4%(350人)的调查对象认为冠心病应列入社区控制疾病,居21种所供选择疾病第三位。2、冠心病社区控制管理指标选择情况为：建档率(80.2%)、随访率(75.7%)、检出率(75.1%)、登记率(68.4%)、健康教育(67.8%)、治疗率(65.3%)、控制率(51.4%)、知识知晓率(50.4%)、冠心病知晓率(46.7%)。不同人员类别组、不同机构和地区间对各项管理指标的选择没有统计学差异。3、冠心病社区控制管理指标实际控制水平为：检出率49.09%、登记率58.18%、建档率55.32%、治疗率61.76%、知识知晓率64.47%、冠心病知晓率63.83%、控制率56.74%、随访率50.60%、健康教育60.38%。冠心病社区控制管理指标期望控制水平为：检出率76.50%、登记率86.11%、建档率91．31%、治疗率88.21%、知识知晓率92.24%、冠心病知晓率92.48%、控制率90.83%、随访率91.92%、健康教育92.70%。4、测量血压、血脂和血糖和随访占CHS冠心病控制工作量的大部分,居第二位的是登记建档和治疗,第三位是健康教育,占CHS冠心病控制工作量最少的是转诊。5、绩效考核指标选择比例从高到低依次为：健康教育(78.4%)、随访(78.2%)、登记建档(77.8%)、测量血压、血脂和血糖(77.8%)、治疗(72.2%)、周期性健康体检(54.3%)、转诊(37.8%)。6、绩效考核指标的分值配比结果为：测量血压、血脂和血糖21.18分、登记建档16.75分、健康教育18.70分、治疗19.83分、随访18.97分、转诊9.80分、周期性健康体检14.46分。治疗、随访、登记建档和健康教育指标的分值与测量血压、血脂和血糖分值差距不大,且各组间统计学差异不大,表明调查对象对这几项工作对冠心病的控制意义及操作可行性认可度高。总体看来,除在四地间有所差异外,在不同人员、不同机构中各绩效分值差异不明显。7、转诊指征选择比例从高到低依次为：急性心肌梗塞(90.8%)、併发严重心率失常(84.9%)、急性心衰(84.7%)、急性冠脉综合症(73.7%)、患者及家属强烈要求(71.6%

关键词：冠心病慢性病社区防治管理指标绩效考核

基于成果导向教育理念的中医骨伤科学课程床边教学模式改革初探

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教师 2023年第14期 120-122页

作者：殷松江李晓辰茆军王培民南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210021

床边教学是以临床带教教师为主导、医学生为主体、病人为中心的临床教学模式,能有效提高医学生的临床思维能力与动手能力。目前,中医骨伤科学课程的床边教学已暴露出教学模式单一、教学方法落后、学生主观能动性差、教学质量参差不齐等... 详细信息

床边教学是以临床带教教师为主导、医学生为主体、病人为中心的临床教学模式,能有效提高医学生的临床思维能力与动手能力。目前,中医骨伤科学课程的床边教学已暴露出教学模式单一、教学方法落后、学生主观能动性差、教学质量参差不齐等诸多问题。基于此,教学团队将成果导向教育理念引入中医骨伤科学课程床边教学,通过制订三维课程教学目标,构建递进式“课堂—实践—课外”教学体系,构建多层次立体化协同教学模式,采用多元考核方式,通过评估学习产出,持续改进教学方法,以期为中医学专业课程床边教学改革提供一些参考和借鉴。

关键词：中医骨伤科学床边教学成果导向学习产出

桃仁-红花通过抑制NF-κB信号通路改善IL-1β诱导的软骨炎症和降解

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中药新药与临床药理 2023年第7期34卷 936-947页

作者：揭立士时孝晴刘子修吴鹏茆军张农山殷松江王培民南京中医药大学附属医院江苏南京210029 南京中医药大学第一临床医学院江苏南京210023

目的应用网络药理学分析桃仁-红花治疗膝骨关节炎(KOA)的潜在作用机制,并通过体内和体外实验验证。方法通过网络药理学筛选桃仁-红花治疗膝骨关节炎的可能活性成分及作用机制。体外实验:提取小鼠原代软骨细胞,CCK-8法筛选桃仁-红花冻干... 详细信息

目的应用网络药理学分析桃仁-红花治疗膝骨关节炎(KOA)的潜在作用机制,并通过体内和体外实验验证。方法通过网络药理学筛选桃仁-红花治疗膝骨关节炎的可能活性成分及作用机制。体外实验:提取小鼠原代软骨细胞,CCK-8法筛选桃仁-红花冻干粉干预软骨细胞的最佳浓度。随后,软骨细胞随机分为对照组、IL-1β组、桃仁-红花低剂量组、桃仁-红花中剂量组和桃仁-红花高剂量组。10 ng·mL^(-1)的IL-1β用于模拟KOA炎症环境。qRT-PCR用于检测软骨细胞环氧化物酶2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)和IL-6的mRNA表达。Western Blot用于检测软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)和高迁移率族框9(Sox9)的蛋白水平和NF-κB信号通路的相关标志物。此外,免疫荧光用于检测p65在细胞内的定位和表达。体内实验:采用内侧半月板失稳术(DMM)构建膝骨关节炎小鼠模型。将30只小鼠随机分为3组:假手术组、模型组和给药组。HE、番红O/快速绿染色和OARSI评分用于评估小鼠的关节损伤。结果筛选出30个桃仁-红花治疗膝骨关节炎的有效活性成分和126个靶点。潜在成分主要包括槲皮素、β-谷甾醇、鞣花酸、天竺葵素和豆甾醇等。分子对接结果表明,活性成分与核心靶点具有良好的结合活性。实验研究表明,桃仁-红花可降低IL-1β诱导的COX-2、iNOS和IL-6 mRNA的上调,并增加IL-1β诱导的Collagen Ⅱ、Aggrecan和Sox9的蛋白表达下降,降低小鼠软骨细胞中IL-1β诱导的p65磷酸化和p65核转位,以200μg·mL^(-1)组效果为佳(P<0.05)。此外,桃仁-红花改善了膝骨关节炎小鼠的关节退变(P<0.05)。结论研究表明,桃仁-红花通过抑制NF-κB信号通路改善软骨细胞基质降解和炎症状态。桃仁-红花在膝骨关节炎的发展中起着积极的治疗作用,为其进一步的基础研究和临床应用提供了新的思路。

关键词：桃仁红花膝骨关节炎(KOA) 网络药理学分子对接 NF-κB IL-1β

新冠疫情防控下境外生中医骨伤科学课程混合式线上教学模式探索

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中国中医药现代远程教育 2023年第4期21卷 7-9页

作者：殷松江茆军王培民南京中医药大学中医骨伤科学教研室江苏东南京210023 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029

中医骨伤科学是一门极具中医特色的学科,目前中医骨伤科学课程对外教育质量普遍较差,迫切需要调整教学模式。新冠疫情防控期间,境外生均调整为线上教学,对教师能力、课堂设计、气氛调动等提出更高要求。为切实落实停课不停学的指导意见... 详细信息

中医骨伤科学是一门极具中医特色的学科,目前中医骨伤科学课程对外教育质量普遍较差,迫切需要调整教学模式。新冠疫情防控期间,境外生均调整为线上教学,对教师能力、课堂设计、气氛调动等提出更高要求。为切实落实停课不停学的指导意见,南京中医药大学中医骨伤科学教研室对2020年春季本学期教学工作进行了相应规划与探讨,形成了以学校在线教育综合平台为载体开展课前导学,联合直播授课,同步利用班级教学群开展教学指导的混合式教学模式,并取得了良好的教学效果。

关键词：中医骨伤科学境外生混合式线上教学模式

基于生物信息学分析膝关节和指间关节软骨细胞的基因组学差异:机械应力对膝骨关节炎病情发展的影响

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中国处方药 2023年第3期21卷 179-182页

作者：殷松江吴鹏时孝晴揭立士金翔南京中医药大学附属医院骨伤科南京210029

目的通过分析膝关节和指间关节软骨细胞的基因组表达差异,探讨机械应力影响膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)发生发展的分子机制。方法①从公共数据库(GSE68038)下载并整合膝关节和指关节软骨细胞基因表达矩阵,进一步筛选差异表达基... 详细信息

目的通过分析膝关节和指间关节软骨细胞的基因组表达差异,探讨机械应力影响膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)发生发展的分子机制。方法①从公共数据库(GSE68038)下载并整合膝关节和指关节软骨细胞基因表达矩阵,进一步筛选差异表达基因(differential expressed genes,DEGs),进行富集分析和蛋白互作分析。②再提取KOA相关微阵列基因数据(GSE117999),与上述软骨细胞基因表达矩阵进行遗传交集分析,筛选枢纽基因,并进行富集分析与蛋白互作分析。③对遗传交集中枢纽基因进行miRNA调控网络和相关通路分析,初步为KOA提供可能的治疗靶点。结果在膝关节和指关节软骨细胞基因表达矩阵中共鉴定出213个DEGs,主要参与细胞增殖的正/负调控、细胞分裂的正调控、细胞凋亡的正调控以及胚胎肢体形态发育;两个微阵列矩阵共有122个交叉基因,这些基因主要参与DNA复制、细胞分裂、钙离子结合以及细胞凋亡过程的正调控等生物学进程。结论机械应力对软骨细胞有多种影响,在生理上有助于维持软骨细胞稳态和促进软骨发育,病理上通过促进软骨细胞分化和肥大,加速细胞凋亡,加速软骨破坏和KOA发展。

关键词：机械应力骨关节炎差异性表达基因生物信息学分析

床边教学在中医骨伤教学过程中的实施困境与对策——以南京中医药大学为例

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教师 2022年第31期 114-116页

作者：茆军吴鹏李晓辰殷松江王培民南京中医药大学中医骨伤教研室江苏南京210029 南京中医药大学附属医院骨伤科江苏南京210029

床边教学是医学生临床实习中一项重要的教学模式,南京中医药大学中医骨伤专业开展床边教学长达十余年,已出现诸多与时代不相适应的问题。文章旨在分析目前床边教学在中医骨伤专业教学过程中的困境,并提出了部分切实可行的解决办法,以期... 详细信息

床边教学是医学生临床实习中一项重要的教学模式,南京中医药大学中医骨伤专业开展床边教学长达十余年,已出现诸多与时代不相适应的问题。文章旨在分析目前床边教学在中医骨伤专业教学过程中的困境,并提出了部分切实可行的解决办法,以期使床边教学真正收到实效,为骨伤专业教学改革与创新提供新的发展方向。

关键词：中医骨伤科学床边教学困境与对策

基于thermoTRP离子通道初探膝骨关节炎(骨痹)“寒邪”为病的分子机制

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中国中医基础医学杂志 2019年第1期25卷 73-75,84页

作者：殷松江王培民南京中医药大学研究生院南京210029 南京中医药大学附属医院南京210029

"寒邪"是膝骨关节炎(骨痹)的重要致病因素,具有"致痛"及"致病"的多靶点效应。thermoTRP通道是一种参与感知温度阈值的瞬时感受器电位通道,能被寒冷刺激所激活,可视为"寒邪"为病的作用靶点。既往文献表明,不同组织中thermoTRP的作用具有... 详细信息

"寒邪"是膝骨关节炎(骨痹)的重要致病因素,具有"致痛"及"致病"的多靶点效应。thermoTRP通道是一种参与感知温度阈值的瞬时感受器电位通道,能被寒冷刺激所激活,可视为"寒邪"为病的作用靶点。既往文献表明,不同组织中thermoTRP的作用具有差异,如背根神经节thermoTRP通道激活介导疼痛,而膝关节thermoTRP通道激活则表现为促炎效应。由此可见,thermoTRP通道能被作为膝骨关节炎(骨痹)"寒邪"为病的内在分子机制,其中背根神经节thermoTRP介导"寒邪"致痛机制,而膝关节thermoTRP通道参与"寒邪"致病机制。

关键词：膝骨关节炎 thermoTRP通道骨痹寒邪