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基于菊花金和胶体金的新型双色免疫层析法同时检测果蔬中的多效唑和克百威

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基于菊花金和胶体金的新型双色免疫层析法同时检测果蔬中的多效唑...

作者：殷佳琦南昌大学

学位级别：硕士

多效唑(Paclobutrazol,PBZ)属于三唑类植物生长调节剂,在作物种植过程中常通过叶面喷施来调节植物生长,进而起到延长植物生长、提高产量和抗逆性等作用。克百威(Carbofuran,CAR)作为一种高效、广谱的杀虫剂,被广泛应用于防治粮食、蔬菜... 详细信息

多效唑(Paclobutrazol,PBZ)属于三唑类植物生长调节剂,在作物种植过程中常通过叶面喷施来调节植物生长,进而起到延长植物生长、提高产量和抗逆性等作用。克百威(Carbofuran,CAR)作为一种高效、广谱的杀虫剂,被广泛应用于防治粮食、蔬菜和水果等农作物中的害虫。然而施用过量的PBZ和CAR,会对周围土壤和水资源环境产生负面影响,食用PBZ和CAR残留超标的果蔬,会对人体健康造成严重危害。因此亟需建立一种可用于同时检测PBZ和CAR残留的快速、灵敏的方法。本研究基于制备的多效唑和克百威单克隆抗体,使用菊花金(Chrysanthemum-like Au@polydopamine,AuNC@PDA)和胶体金(Colloidal gold nanoparticles,AuNPs)做标记物,建立了新型双色免疫层析法,用于同时检测果蔬中的多效唑和克百威。主要研究方法和结论如下:(1)设计了两种PBZ半抗原和一种CAR半抗原,分别与牛血清白蛋白通过碳化二亚胺法偶联,合成PBZ完全抗原和CAR完全抗原并分别进行小鼠免疫。第四次免疫后经血清评价,将高效价和高抑制率小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合。经3次亚克隆后获得了6株PBZ细胞株(5F3、2G12、5E3、6F12、11A7和5H5)和3株CAR细胞株(3D1、3B1和3E6)。细胞株扩增培养后制备腹水,纯化后获得6种PBZ和3种CAR的单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)。采用间接竞争酶联免疫吸附法评价所获得的抗体,PBZ抗体的半数抑制浓度(Half maximal inhibitory concentration,IC)分别为0.77、17.64、5.85、3.25、2.75和5.27 ng/m L。CAR抗体的IC分别为0.82、2.07和1.33 ng/m L。选择灵敏度最高的PBZ-5F3 mAb和CAR-3D1 mAb进行亲和力和特异性评价,PBZ-5F3 mAb和CAR-3D1 mAb的亲和常数分别为3.22×10和1.51×10 L/mol,说明两种抗体均具有良好的亲和力;交叉反应实验结果显示,PBZ-5F3 mAb和CAR-3D1 mAb特异性良好。(2)将PBZ-5F3 mAb与AuNC@PDA偶联制备黑色AuNC@PDA-PBZ mAb免疫探针,将CAR-3D1 mAb与AuNPs偶联制备红色AuNPs-CAR mAb免疫探针。基于两种颜色的免疫探针建立一种同时检测PBZ和CAR残留的快速、灵敏的双色免疫层析法。在最优条件下,柑橘中PBZ和CAR的检测限(Limit of detection,LOD)分别为0.117μg/kg和0.087μg/kg,葡萄中PBZ和CAR的LOD分别为0.109μg/kg和0.056μg/kg,芥蓝中PBZ和CAR的LOD分别为0.131μg/kg和0.094μg/kg。通过仪器法比对和回收率实验,证实双色免疫层析法具有可靠性和准确性。本方法对果蔬中PBZ和CAR残留快速检测的灵敏度满足国家需求,可用于基层对PBZ和CAR的初步筛查。综上所述,本研究制备了灵敏度高、特异性强的PBZ mAb和CAR mAb,建立了基于AuNC@PDA和AuNPs的新型双色免疫层析方法,实现了对柑橘、葡萄和芥蓝中PBZ和CAR的残留检测,为果蔬中的PBZ和CAR残留快速检测提供了有力的技术支撑。

关键词：多效唑克百威单克隆抗体菊花金胶体金同时检测

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黄芩中黄芩素的提取与抑菌效果的初步研究

陕西农业科学 2018年第4期64卷 53-57页

作者：张涛张晓虎沈艳霞殷佳琦商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

以黄茶根为原料,采用单因素及正交试验,研究料液比、酶料比、超声时间、超声温度等因素对黄芩素得率的影响,结果表明:优化提取方法为料液比1:22、酶料比2:1、酶提6 h、50℃超声处理20min,黄芩素的得率为23.122 mg·g^(-1)。以大肠杆菌... 详细信息

以黄茶根为原料,采用单因素及正交试验,研究料液比、酶料比、超声时间、超声温度等因素对黄芩素得率的影响,结果表明:优化提取方法为料液比1:22、酶料比2:1、酶提6 h、50℃超声处理20min,黄芩素的得率为23.122 mg·g^(-1)。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌,以最低抑菌浓度为评价指标,对黄芩素的抑菌效果进行研究,结果表明:金黄色葡萄球菌添加黄芩素溶液浓度超过10 mg·mL^(-1)、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌添加黄芩素溶液浓度超过20 mg·mL^(-1)时,表现出抑菌效果。研究结果可作为提取黄芩中黄芩素和研究天然食品防腐剂的技术参考。

关键词：黄芩黄芩素酶法超声法抑菌

黄芩苷-姜辣素-海藻酸钠-蔗糖酯复合保鲜膜在鸡蛋保鲜中的应用

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农学学报 2020年第10期10卷 60-68页

作者：殷佳琦张晓虎高梦蝶商洛学院生物医药与食品工程学院/陕西秦岭特色生物资源产业技术研究院陕西商洛726000

为研究黄芩苷-姜辣素-海藻酸钠-蔗糖酯复合保鲜膜最佳配方,以新鲜鸡蛋为试验对象,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对黄芩苷、姜辣素、海藻酸钠、蔗糖酯复合保鲜防腐剂配方进行优化,并将其应用于鸡蛋防腐保鲜试验。结果表明,复合... 详细信息

为研究黄芩苷-姜辣素-海藻酸钠-蔗糖酯复合保鲜膜最佳配方,以新鲜鸡蛋为试验对象,在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对黄芩苷、姜辣素、海藻酸钠、蔗糖酯复合保鲜防腐剂配方进行优化,并将其应用于鸡蛋防腐保鲜试验。结果表明,复合保鲜防腐剂配方为黄芩苷浓度1.90%、姜辣素浓度2.70%、海藻酸钠浓度1.45%、蔗糖酯浓度2.00%。在此条件下,37℃下保藏25天后,鸡蛋哈夫单位为69,蛋黄指数为0.38,失重率为4.8%,表明该复合保鲜膜具有良好的保鲜效果。所研制的复合生物保鲜膜具有绿色、天然、优质等特点,能够作为鸡蛋贮藏和保鲜的技术参考。

关键词：鸡蛋黄芩苷姜辣素海藻酸钠蔗糖酯

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黄芩中黄芩素的提取与抑菌效果的初步研究

陕西农业科学 2017年第12期63卷 33-36页

作者：张涛张晓虎沈艳霞殷佳琦商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

本文以黄芩根为原料,采用单因素及正交试验,研究料液比、酶料比、超声时间、超声温度等因素对黄芩素得率的影响,结果表明:优化提取方法为料液比1:22、酶料比2:1、酶提6 h、50℃超声处理20 min,黄芩素的得率为23.122 mg·g^(-1)。以大肠... 详细信息

本文以黄芩根为原料,采用单因素及正交试验,研究料液比、酶料比、超声时间、超声温度等因素对黄芩素得率的影响,结果表明:优化提取方法为料液比1:22、酶料比2:1、酶提6 h、50℃超声处理20 min,黄芩素的得率为23.122 mg·g^(-1)。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌为供试菌,以最低抑菌浓度为评价指标,对黄芩素的抑菌效果进行研究,结果表明:金黄色葡萄球菌添加黄芩素溶液浓度超过10 mg·mL^(-1)、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌添加黄芩素溶液浓度超过20 mg·mL^(-1)时,表现出抑菌效果。研究结果可作为提取黄芩中黄芩素和研究天然食品防腐剂的技术参考。

关键词：黄芩黄芩素酶法超声法抑菌

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商洛黄芩叶部黄芩苷的提取及抑菌效果试验

陕西农业科学 2019年第1期65卷 11-16页

作者：张晓虎白亚男殷佳琦肖秦箭商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

以采集商洛所产黄芩叶片为原料,在单因素实验的基础上,通过正交试验探讨乙醇回流法提取其黄芩苷的优化工艺,结果表明:在料液比1∶12、乙醇体积分数70%、提取温度80℃、提取时间60 min的最优提取条件下,黄芩苷的得率为2. 03%。选用大肠... 详细信息

以采集商洛所产黄芩叶片为原料,在单因素实验的基础上,通过正交试验探讨乙醇回流法提取其黄芩苷的优化工艺,结果表明:在料液比1∶12、乙醇体积分数70%、提取温度80℃、提取时间60 min的最优提取条件下,黄芩苷的得率为2. 03%。选用大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌为供试菌种,用比浊法对纯化后的黄芩苷进行抑菌效果试验,结果表明:菌浊液中添加黄芩苷溶液浓度大于4 mg·m L-1时,能够抑制金黄色葡萄球菌生长;添加黄芩苷溶液浓度大于8 mg·m L-1时,能够抑制大肠埃希氏菌生长。试验结果可以作为制定防腐保鲜产品中黄芩苷的有效浓度的技术参考。

关键词：黄芩叶黄芩苷乙醇回流提取抑菌

黄芩根汉黄芩苷提取及复合保鲜液在圣女果贮藏中的应用

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陕西农业科学 2019年第5期65卷 21-27页

作者：张晓虎杨风婷殷佳琦肖秦箭商洛学院生物医药与食品工程学院

利用商洛山区丰富的黄芩资源,采用微波辅助乙醇浸提正交试验确定其根部汉黄芩苷提取优化工艺条件;通过抑菌实验,确定汉黄芩苷的有效抑菌浓度;制备复合保鲜液,用于圣女果保鲜贮藏.结果表明:优化提取工艺参数为乙醇50%、料液比1:5、微波... 详细信息

利用商洛山区丰富的黄芩资源,采用微波辅助乙醇浸提正交试验确定其根部汉黄芩苷提取优化工艺条件;通过抑菌实验,确定汉黄芩苷的有效抑菌浓度;制备复合保鲜液,用于圣女果保鲜贮藏.结果表明:优化提取工艺参数为乙醇50%、料液比1:5、微波加热时间8min、微波功率400w时,汉黄芩苷的提取率为0.045%;向金黄色葡萄球菌添加浓度超过0.20mg·mL^-1汉黄芩苷、枯草芽孢杆菌和大肠埃希氏菌添加汉黄芩苷浓度超过0.50mg·mL^-1时,表现出抑菌效果;用1.2%海藻酸钠、2.0%氯化钙、1.5%抗坏血酸、0.5%汉黄芩苷复合保鲜液处理后,圣女果的感官品质良好,失重率及腐烂率明显下降,效果明显优于不含汉黄芩苷的复合保鲜液。研究结果将为黄芩根中所含的汉黄芩苷作为防腐保鲜成分在果蔬保藏中的应用提供技术参考。

关键词：黄芩汉黄芩苷微波辅助正交试验保鲜

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商洛黄芩汉黄芩素提取及复合保鲜液应用研究

中国农学通报 2019年第22期35卷 147-155页

作者：张晓虎李智文殷佳琦高佳商洛学院生物医药与食品工程学院

以商洛黄芩为实验材料,采用超声辅助乙醇提取黄芩中汉黄芩素,研究超声时间、超声提取温度、超声功率、料液比和乙醇体积分数等因素对汉黄芩素提取率的影响。在单因素实验的基础上,设计3因素3水平响应面实验,分析各因素的显著性和交互作... 详细信息

以商洛黄芩为实验材料,采用超声辅助乙醇提取黄芩中汉黄芩素,研究超声时间、超声提取温度、超声功率、料液比和乙醇体积分数等因素对汉黄芩素提取率的影响。在单因素实验的基础上,设计3因素3水平响应面实验,分析各因素的显著性和交互作用,在优化工艺超声功率140 W、料液比1:20、乙醇体积分数60%前提下,黄芩汉黄芩素提取率为0.526%。将汉黄芩素提取液与1.5%壳聚糖、1%柠檬酸进行复配,制备复合保鲜液,以感官指标、pH值、菌落总数为检测指标,模拟易导致新鲜草莓变质的温度和湿度进行保藏实验,通过对草莓品质的评价说明不同浓度黄芩汉黄芩素复合保鲜液的保鲜效果,结果表明0.20%复合保鲜液即可以保藏新鲜草莓3天,0.40%复合保鲜液能够有效地保藏新鲜草莓5天。由于实验模拟草莓极易腐败变质的温度,可以预测室温下草莓贮藏期更长。本研究结果可作为商洛地区黄芩中汉黄芩素应用的技术参考。

关键词：黄芩汉黄芩素超声辅助乙醇响应面法

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数据革命与人口研究新视野

南方人口 2024年第1期39卷 1-17页

作者：殷佳梁玉成中山大学社会学与人类学学院广东广州510275

数字时代,互联网的传播和人工智能技术的快速发展改变了数据的生产和使用方式,促进了可用数据的爆炸式增长,在社会科学领域掀起了一场数据革命,迎来了从设计数据(过去)到痕迹数据(现在)再到生成性数据(未来)的发展变迁。痕迹数据包括电... 详细信息

数字时代,互联网的传播和人工智能技术的快速发展改变了数据的生产和使用方式,促进了可用数据的爆炸式增长,在社会科学领域掀起了一场数据革命,迎来了从设计数据(过去)到痕迹数据(现在)再到生成性数据(未来)的发展变迁。痕迹数据包括电子存档数据、设备感知数据和网络平台数据,相较传统的设计数据在时效、规模、范围和成本上的优势为人口研究的拓展和创新带来了巨大潜力。在研究内容上,痕迹数据通过强化流动性测量、收集人口行为背景、捕捉特定研究对象,极大地推动了人口的迁移流动研究,并为微观的人口过程分析提供了丰富洞见。在研究思路上,痕迹数据从时间尺度改变了人口动态的分析单位,空间维度打破了传统人地分离的研究瓶颈,方法上要求促进不同来源类型数据的结合提升研究效度,应用中推进了人口与社会动态的实时监测与预警,为循证决策提供了及时有效的研究支撑。新时代,对痕迹数据的挖掘需要充分发挥数据想象力,加快对前沿计算方法的掌握和跨学科合作的形成,建立现代化的数据生态系统以实现数据的开放、共享和使用。

关键词：痕迹数据人口研究计算社会科学生成性数据

具有恒定输出的双分支共面式无线电能传输系统

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电源学报 2024年

作者：冯群群殷佳斌熊飚罗斌南昌大学信息工程学院

在多负载无线充电领域中，往往需要给接收设备提供恒压（CV）或者恒流（CC）充电。但在已有的多负载无线电能传输系统（WPT）研究中，通常只具有CV或CC中的一种输出模式，同时提供恒压输出或恒流输出的工作很少。对此，该文提出了一种... 详细信息

在多负载无线充电领域中，往往需要给接收设备提供恒压（CV）或者恒流（CC）充电。但在已有的多负载无线电能传输系统（WPT）研究中，通常只具有CV或CC中的一种输出模式，同时提供恒压输出或恒流输出的工作很少。对此，该文提出了一种平面式双分支WPT系统，可同时提供两路负载无关的输出，一路为恒流输出而另一路为恒压输出，两个支路可独立设计且互不影响。可通过开关控制或取走某个分支的方式提供三种供电方式：恒流分支和恒压分支同时供电、仅对恒压分支供电、仅对恒流分支供电。首先，阐述了该双分支WPT系统的拓扑结构，阐明了负载无关和两分支独立工作的工作原理；其次，揭示损耗对系统性能的影响以及负载动态范围的估算方法；最后，搭建了由5个谐振器构成的双分支实验平台，实验和理论吻合得很好。通过在共面相邻线圈结合处添加铁氧体介质板，显著增强了相邻线圈的磁耦合并提高了系统传输效率，在恒流、恒压、恒流与恒压同时供电的三种工作模式下，测量的最大传输效率分别达到了89.2%，93.5%，91.6%。

关键词：无线电能传输负载无关双分支