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桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠环状RNA表达谱的影响

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 954-963页

作者：费长义张丽娟王倪褚福瑞余超薛苏君潘凌宇彭代银段贤春安徽中医药大学第一附属医院药学部安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的筛选和研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠环状RNA(circular RNA,circRNA)表达的影响,探讨THSWD的可能作用及分子机制。方法采用下一代RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠circRNA表达谱,并与MCAO模型组和对照组进行比较。生物信息学分析预测潜在的靶向微小RNA(micro RNA,miRNA)和mRNAs。应用GO富集分析和KEGG通路富集分析方法分析差异表达的circRNAs的潜在作用。对表达差异显著的circRNA进行RT-qPCR验证。结果MCAO组与对照组之间存在87个差异表达的circRNA,MCAO组与THSWD组之间存在86个差异表达的circRNA。其中,THSWD可逆转MCAO模型诱导的17个circRNAs。为了证明DECs靶向的mRNAs的作用,使用了GO和KEGG数据库。进一步分析表明,5个表达差异显著circRNAs表达量与测序结果相似。结论首次确定了THSWD治疗后MCAO大鼠circRNAs的全面表达谱,提示THSWD对MCAO的治疗作用可能是通过调节circRNAs的表达实现的。

关键词：桃红四物汤大脑中动脉闭塞环状RNA 生物信息学下一代RNA测序缺血性卒中

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桃红四物汤对大脑中动脉闭塞大鼠lncRNA表达的影响

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中国药理学通报 2024年第3期40卷 582-591页

作者：张丽娟费长义余超薛苏君李雨朦李静静潘凌宇段贤春彭代银安徽中医药大学第一附属医院药学部安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的研究中药复方桃红四物汤(Tao Hong Si Wu decoction,THSWD)治疗大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达,并确定THSWD治疗MCAO大鼠可能的分子机制。方法从对照组、MCAO组和MCAO+THSWD组各获得3个大脑半球组织。采用RNA测序技术鉴定三组中的lncRNA基因表达。鉴定了THSWD调节的lncRNA基因,然后构建了THSWD调节的lncRNA-mRNA网络。通过MCODE插件鉴定lncRNA-mRNA网络的模块。基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)用于分析富集的生物功能和信号通路。鉴定了THSWD调节的lncRNA的顺式和反式调控基因。采用逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证lncRNA。分子对接用于验证lncRNA-mRNA网络靶点和通路相关蛋白结合能力。结果在MCAO大鼠中,THSWD共调节了302个lncRNA。生物信息学分析表明,一些核心lncRNA可能在THSWD治疗MCAO大鼠中发挥重要作用,此外,我们进一步发现THSWD可能也通过lncRNA-mRNA网络以及网络富集的补体和凝血级联反应等多通路治疗MCAO大鼠。分子对接结果表明,THSWD活性化合物没食子酸和苦杏仁苷与蛋白质靶点具有一定的结合能力。结论THSWD可以通过调节lncRNA保护MCAO大鼠脑损伤,为THSWD治疗缺血性中风提供了新见解。

关键词：桃红四物汤大脑中动脉闭塞长链非编码RNA lncRNA-mRNA网络生物信息学分子对接

桃红四物汤对缺血性脑卒中损伤后微小RNA的影响

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安徽中医药大学学报 2024年第4期 70-76页

作者：余超薛苏君张丽娟李雨朦李静静彭代银段贤春安徽中医药大学第一附属医院安徽中医药大学药学院新安医学教育部重点实验室

目的研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction, THSWD)对缺血性脑卒中的微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的影响，探讨THSWD治疗缺血性脑卒中的分子机制。方法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)诱导的局灶性... 详细信息

目的研究桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction, THSWD)对缺血性脑卒中的微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱的影响，探讨THSWD治疗缺血性脑卒中的分子机制。方法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)诱导的局灶性脑缺血大鼠模型，采用单细胞RNA测序技术检测THSWD治疗后MCAO大鼠miRNA表达谱。采用GO和KEGG富集分析方法分析miRNA作用于靶基因的功能。对表达差异显著的miRNA进行RT-qPCR实验验证。结果 THSWD干预后，MCAO大鼠脑梗死区有13个miRNA表达发生变化，其中6个miRNA表达上调，7个miRNA表达下调。利用miRanda进行预测，确定了这13个miRNA的靶基因，构建了miRNA-mRNA网络，通过RT-qPCR验证了其中6个差异表达的miRNA(rno-miR-653-5p、rno-miR-216b-5p、rno-miR-3547、rno-miR-217-5p、rno-miR-758-3p和rno-miR-223-3p)。结论 THSWD可以通过逆转某些miRNA的异常表达来治疗缺血性脑卒中。

关键词：缺血性脑卒中脑缺血微小RNA 桃红四物汤

高效液相色谱法测定大鼠生物样品中人参炔醇的方法学考察

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中药药理与临床 2012年第2期28卷 181-184页

作者：耿魁魁段贤春刘圣沈爱宗夏伦祝安徽医科大学附属省立医院合肥230001 安徽中医学院第一附属医院合肥230031 国家中医药管理局中药制剂三级实验室合肥230031

目的:建立生物样品中人参炔醇(panaxynol)的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:通过对精密度、特异性、回收率、稳定性等考察建立了测定方法,得到标准曲线。结果:生物样品中的panaxynol浓度(C)与色谱峰面积(A)均呈现良好的线性关系,回... 详细信息

目的:建立生物样品中人参炔醇(panaxynol)的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法:通过对精密度、特异性、回收率、稳定性等考察建立了测定方法,得到标准曲线。结果:生物样品中的panaxynol浓度(C)与色谱峰面积(A)均呈现良好的线性关系,回归方程的相关系数r均大于0.99;panaxynol测定方法的精密度高,重现性好,血浆和各组织样品测定的日内精密度和日间精密度RSD都小于10%;回收率较高,满足生物样品回收率在80～120%的范围,相对标准偏差均小于6%;稳定性好,-20℃冷贮放置不影响测定结果。结论:本法的稳定性、精密度、回收率、专属性和定量线性范围均达到了体内药物分析的要求。

关键词： HPLC 人参炔醇方法学考察

基于网络药理学研究黄芩治疗慢性乙型病毒性肝炎的作用机制

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宁夏医科大学学报 2022年第3期44卷 296-302页

作者：胡泊孟祥云丁瑞洁李明芳段贤春安徽医科大学附属合肥市第二人民医院合肥230001 合肥市蜀山区小庙镇中心卫生院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院药学部合肥230031

目的利用网络药理学探讨黄芩治疗慢性乙型病毒性肝炎(CHB)的主要成分、作用靶点及通路。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),在类药五原则(rule of five)的基础上按照生物利用度(OB)>30%,类药性(DL)>0.18的标准筛选出黄... 详细信息

目的利用网络药理学探讨黄芩治疗慢性乙型病毒性肝炎(CHB)的主要成分、作用靶点及通路。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),在类药五原则(rule of five)的基础上按照生物利用度(OB)>30%,类药性(DL)>0.18的标准筛选出黄芩活性药物成分并下载其靶点信息,利用GeneCards和Omim数据库统计慢性乙型病毒性肝炎靶点,使用Uniport数据库对上述药物和疾病的共有靶点信息进行靶基因标注,利用Cytoscape软件制作“药物成分-疾病-靶点”关系图,通过String平台绘制蛋白互作网络(PPI),以Bioconductor平台为背景使用R语言程序进行GO富集分析和KEGG富集分析。结果共筛选出活性成分32种。药物和疾病的共有靶基因85个。PPI网络核心基因包括AR,AKT1,IL6等共计15个。GO富集分析得到生物过程132条,如键合DNA转录活化剂活性,泛素样蛋白连接酶结合等。KEGG富集分析得到包括内分泌抵抗通路,细胞凋亡通路,甲型流感通路等124条信号通路。结论黄芩对慢性乙型病毒性肝炎具有多基因、多靶点、多通道的作用特点,为后续筛选药物有效成分及中医新药研发提供了一定的设计思路和理论支持。

关键词：网络药理学黄芩慢性乙型病毒性肝炎作用机制

基于网络药理学探究桃红四物汤治疗类风湿性关节炎作用机制

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中国药理学通报 2021年第3期37卷 437-444页

作者：黄石段贤春潘凌宇陈燕汪永忠安徽中医药大学药学院安徽合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院药学部安徽合肥230031

目的应用网络药理学方法探究桃红四物汤治疗类风湿性关节炎潜在药效作用机制。方法基于课题组前期UPLC-Q-TOF-MS E数据并结合TCMSP数据库,获取桃红四物汤主要化学成分,将口服生物利用度(OB)、类药性(DL)设定为筛选参数,寻找活性成分,通... 详细信息

目的应用网络药理学方法探究桃红四物汤治疗类风湿性关节炎潜在药效作用机制。方法基于课题组前期UPLC-Q-TOF-MS E数据并结合TCMSP数据库,获取桃红四物汤主要化学成分,将口服生物利用度(OB)、类药性(DL)设定为筛选参数,寻找活性成分,通过PharmMapper数据库进行靶点预测;从OMIM、GeneCards数据库对类风湿性关节炎的靶点进行检索;使用Cytoscape 3.7.1软件构建成分-靶点相互作用网络,对该网络进行拓扑学分析得到核心活性成分;使用STRING数据库绘制蛋白-蛋白相互作用网络,对该网络进行拓扑学分析得到核心靶点;对交集靶点基因利用DAVID数据库进行GO分析和KEGG分析,探讨潜在靶点可能具有的生物学功能及通路。结果从桃红四物汤中筛选出38个活性成分,核心成分11个;治疗类风湿性关节炎的靶点291个,核心靶点33个;GO分析结果显示59个生物过程、32个分子功能、15个细胞组成;KEGG分析结果显示34条信号通路。结论本研究初步证实桃红四物汤通过多靶点、多通路治疗类风湿性关节炎,为类风湿性关节炎的治疗提供思路和参考。

关键词：桃红四物汤类风湿性关节炎网络药理学作用机制作用靶点信号通路

三七超临界CO_2萃取物对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用

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中国药理学通报 2017年第12期33卷 1685-1690页

作者：段贤春周安彭代银鲍金云夏伦祝安徽中医药大学药学院安徽合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院药学部安徽合肥230038

目的研究三七超临界CO_2萃取物(SFE)对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法以谷氨酸损伤PC12细胞为模型,采用MTT法检测细胞存活率,LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,Fluo-3/AM荧光染... 详细信息

目的研究三七超临界CO_2萃取物(SFE)对谷氨酸损伤PC12细胞的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法以谷氨酸损伤PC12细胞为模型,采用MTT法检测细胞存活率,LDH法检测乳酸脱氢酶的漏出率,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,Fluo-3/AM荧光染色法检测细胞内钙离子浓度,Western blot法检测PICK1、GluR2蛋白的表达。结果谷氨酸对PC12细胞具有兴奋性毒性作用,其半数抑制浓度(IC50)为25 mmol·L^(-1)。不同浓度三七SFE(25、50、100 mg·L^(-1))、PICK1抑制剂FSC231(100μmol·L^(-1))、三七SFE(100 mg·L^(-1))+FSC231(100μmol·L^(-1))预处理可明显提高细胞存活率,减少LDH的释放,降低PC12细胞的凋亡率,减少钙离子内流,降低PICK1蛋白表达,增加GluR2蛋白表达。结论三七超临界CO_2萃取物对谷氨酸损伤后的PC12细胞具有保护作用,机制可能与抑制PICK1、增加GluR2蛋白表达有关。

关键词：三七超临界CO2萃取物谷氨酸 PC12细胞钙离子 PICK1 GluR2

高效液相色谱法测定人参炔醇在大鼠体内血药浓度及药动学研究

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中国医院药学杂志 2017年第11期37卷 1033-1037页

作者：耿魁魁史天陆刘圣沈爱宗段贤春夏伦祝安徽医科大学附属省立医院药剂科安徽合肥230001 安徽中医药大学附属第一医院药学部国家中医药管理局中药制剂三级实验室安徽合肥230001

目的:绘制大鼠静脉注射人参炔醇(panaxynol)后血药浓度-时间曲线,揭示人参炔醇在大鼠体内动态变化过程,阐明其吸收、分布、代谢的药动学特征,提供重要的药动学参数。方法:大鼠静脉注射6,8,10 mg·kg^(-1)3组剂量的人参炔醇,给药后分时... 详细信息

目的:绘制大鼠静脉注射人参炔醇(panaxynol)后血药浓度-时间曲线,揭示人参炔醇在大鼠体内动态变化过程,阐明其吸收、分布、代谢的药动学特征,提供重要的药动学参数。方法:大鼠静脉注射6,8,10 mg·kg^(-1)3组剂量的人参炔醇,给药后分时间段于眼静脉丛取血,高效液相色谱(HPLC)法测人参炔醇含量,绘制血药浓度-时间曲线,利用DAS 1.0软件对数据进行拟合,求算药动学参数及房室模型分析。结果:人参炔醇血-药经时过程符合二室模型;3个剂量组之间的药动学参数无显著性差异,浓度-时间曲线下面积(AUC_(0-t))分别为:(3.628±0.750),(5.492±0.959),(15.468±3.088)mg·h·L^(-1);总清除率(CL)分别为:(1.649±0.365),(1.459±0.267),(0.637±0.147)L·kg·h-1;表观分布容积(V)分别为:(13.104±1.217),(5.738±2.480),(3.355±0.810)L·kg-1;分布半衰期t_(1/2)(α)分别为:(0.198±0.028),(0.193±0.015),(0.296±0.029)h;消除半衰期t_(1/2(β))分别为:(3.972±1.224),(3.168±1.235),(3.713±0.410)h。结论:panaxynol在大鼠体内呈线性动力学过程,分布消除极其迅速,给药剂量与药时曲线下面积呈正相关;二室模型拟合数据值与测定值之间差异较小,能较好地反应给药后药物浓度在体内的变化规律。

关键词：人参炔醇高效液相色谱法药时曲线药动参数房室模型

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紫参胶囊制粒工艺的优选

时珍国医国药 2014年第10期25卷 2394-2396页

作者：刘晓闯张艳艳高家荣段贤春韩燕全萧伟安徽中医药大学第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室安徽合肥230031 安徽医学高等专科学校安徽合肥230601 江苏康缘药业股份有限公司江苏连云港222001

目的优选紫参胶囊最佳制粒工艺,为其制剂生产工艺的确定提供依据。方法以颗粒性状、成品重量、成型率、吸湿性、流动性、斯皮诺素及芍药苷含量为评价指标,考察流化床制粒、湿法制粒对颗粒质量的影响,通过对多个指标综合分析筛选制粒方... 详细信息

目的优选紫参胶囊最佳制粒工艺,为其制剂生产工艺的确定提供依据。方法以颗粒性状、成品重量、成型率、吸湿性、流动性、斯皮诺素及芍药苷含量为评价指标,考察流化床制粒、湿法制粒对颗粒质量的影响,通过对多个指标综合分析筛选制粒方法。结果湿法制粒、流化床制粒所得颗粒中斯皮诺素含量分别为0.146,0.221 mg/g水提药材,芍药苷含量分别为0.692,0.675mg/g水提药材。结论湿法制粒成品重量、成型率、吸湿性、流动性优于流化床制粒,斯皮诺素含量明显高于流化床制粒,确定湿法制粒为最佳制粒方法。

关键词：紫参胶囊湿法制粒流化床制粒斯皮诺素芍药苷超高效液相色谱法