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大鼠FasL^+Sertoli细胞的分离与鉴定

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基础医学与临床 2004年第1期24卷 88-91页

作者：段秀庆宋纯许评宋春芳哈尔滨医科大学第一临床医学院普外科哈尔滨150001

为了将睾丸Sertoli细胞应用于细胞治疗 ,应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Sertoli细胞 ,并对其做生活观察、透射电镜检查 ,了解其功能状态。SABC法标记Fas配体和卵泡刺激素受体的表达情况 ,对睾丸Sertoli细胞加以鉴定... 详细信息

为了将睾丸Sertoli细胞应用于细胞治疗 ,应用胶原酶、胰蛋白酶及脱氧核糖核酸酶消化制备睾丸Sertoli细胞 ,并对其做生活观察、透射电镜检查 ,了解其功能状态。SABC法标记Fas配体和卵泡刺激素受体的表达情况 ,对睾丸Sertoli细胞加以鉴定。培养的睾丸Sertoli细胞 ,形态完整 ,细胞器和细胞核保持良好 ,有丰富的线粒体、内质网、高尔基复合体和溶酶体 ,功能状态良好。且高度表达Fas配体和卵泡刺激素受体 ,出现优势生长现象。Fas配体阳性的睾丸Sertoli细胞可以作为联合移植的供体。

关键词：大鼠 FasL^+ Sertoli细胞细胞分离细胞鉴定 Fas配体卵泡刺激素受体

甲状旁腺细胞与睾丸Sertoli细胞共同移植产生免疫赦免的研究

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中华器官移植杂志 2004年第4期25卷 215-217页

作者：段秀庆宋纯许评宋春芳哈尔滨医科大学第一临床学院普外科 150001

目的　研究甲状旁腺细胞与睾丸细胞共同移植是否产生免疫赦免。方法　随机将SD大鼠分为以下四组 :1组为单纯甲状旁腺细胞移植组 ;2组为甲状旁腺细胞 +1× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组 ;3组为甲状旁腺细胞 +2× 10 6个睾丸Sertoli细胞... 详细信息

目的　研究甲状旁腺细胞与睾丸细胞共同移植是否产生免疫赦免。方法　随机将SD大鼠分为以下四组 :1组为单纯甲状旁腺细胞移植组 ;2组为甲状旁腺细胞 +1× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组 ;3组为甲状旁腺细胞 +2× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组 ;4组为甲状旁腺细胞 +4× 10 6个睾丸Sertoli细胞移植组。观察移植物的存活情况 ;体外检测移植物内细胞成分及淋巴细胞凋亡情况。结果　 1组平均存活期为 (17.2 2± 3.6 3)d ;2、3、4组存活时间延长 ,分别为 (19.4 4± 4 .6 4 )d、(32 .2 2± 6 .6 7)d和 (48.80± 3.33)d。 4组在 5 0d观察期内 ,多数鼠的血清钙及甲状旁腺激素 (PTH)值维持在正常范围内 (P <0 .0 1)。移植物内可见表达FasL的睾丸细胞、甲状旁腺细胞及凋亡的淋巴细胞。FasL的表达及凋亡指数随着移植的Sertoli细胞数增加而增加。结论　睾丸Sertoli细胞FasL的表达诱导了浸润的活化淋巴细胞凋亡 ,使共同移植的甲状旁腺细胞存活期延长。

关键词：甲状旁腺细胞睾丸 Sertoli细胞器官移植免疫赦免移植物免疫排斥

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Fas配体表达对甲状旁腺细胞移植的影响

中华内分泌代谢杂志 2004年第4期20卷 342-345页

作者：段秀庆宋纯许评宋春芳哈尔滨医科大学附属第一医院普外科 150001

目的探究睾丸细胞Fas配体(FasL)表达对联合移植的甲状旁腺细胞的影响。方法将不同数量的大鼠睾丸Sertoli细胞与同种的甲状旁腺细胞联合移植,观察移植物的存活情况;并对移植物进行细胞成分、淋巴细胞凋亡及甲状旁腺功能检查。结果单纯甲... 详细信息

目的探究睾丸细胞Fas配体(FasL)表达对联合移植的甲状旁腺细胞的影响。方法将不同数量的大鼠睾丸Sertoli细胞与同种的甲状旁腺细胞联合移植,观察移植物的存活情况;并对移植物进行细胞成分、淋巴细胞凋亡及甲状旁腺功能检查。结果单纯甲状旁腺细胞移植组,存活期为(17±4)天。睾丸Sertoli细胞与甲状旁腺细胞联合移植组存活时间延长,存活期可超过60天。当Sertoli细胞数增加到4×106时,在60天观察期内,8只鼠中的6只血清钙及PTH值维持在正常范围内(P<0.01)。移植物内可见甲状旁腺细胞、表达FasL的睾丸细胞及凋亡的淋巴细胞,甲状旁腺细胞仍具有旺盛的分泌能力。结论睾丸Sertoli细胞FasL的表达诱导了活化的淋巴细胞凋亡,对联合移植的甲状旁腺细胞起到了保护作用。

关键词：甲状旁腺腺细胞联合移植睾丸表达 Sertoli细胞移植物分泌能力存活维持

模拟微重力培养对大鼠胰岛形态及分泌功能的影响

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中华内分泌代谢杂志 2004年第5期20卷 461-462页

作者：宋纯段秀庆李曦许评宋春芳金连弘哈尔滨医科大学第一临床医学院哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室

应用电镜、吖啶橙碘化丙啶双染色法及放免法对正常对照组、普通培养组和微重力培养组的大鼠胰岛细胞进行检测 ,结果提示微重力培养组的胰岛细胞结构更接近于新鲜胰岛 ,且分泌功能优于普通培养组。

关键词：分泌功能大鼠胰岛细胞放免法碘化丙啶对照组正常模拟微重力形态染色法

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三维微重力培养大鼠胰岛细胞的实验研究

中华外科杂志 2004年第9期42卷 559-561页

作者：宋纯段秀庆周毅李曦韩礼欧许评宋春芳金连弘哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室组织工程研究中心

目的　应用三维微重力组织培养对大鼠胰岛细胞的存活率及分泌功能进行研究。方法将大鼠胰岛细胞分离消化后分别进行二维普通培养 (Ⅰ组 )及三维微重力条件培养 (Ⅱ组 ) ,应用双硫腙 (DTZ)染色法 ,对胰岛细胞进行特异性染色鉴定 ;采用AO... 详细信息

目的　应用三维微重力组织培养对大鼠胰岛细胞的存活率及分泌功能进行研究。方法将大鼠胰岛细胞分离消化后分别进行二维普通培养 (Ⅰ组 )及三维微重力条件培养 (Ⅱ组 ) ,应用双硫腙 (DTZ)染色法 ,对胰岛细胞进行特异性染色鉴定 ;采用AO PI双染色法对两组培养 3d、7d、14d的胰岛细胞存活率进行检测 ;应用放射免疫法检测两种不同培养方法培养液中胰岛素分泌水平。结果　DTZ染色后胰岛呈桔红色 ,清晰可见。培养 7d和 14d时 ,Ⅱ组胰岛细胞存活率分别为(0 90 0 0± 0 0 10 7) %和 (0 80 38± 0 0 0 92 ) % ,均明显高于Ⅰ组 (P <0 0 1)。胰岛素测定结果表明 ,培养 7d时 ,Ⅱ组胰岛素水平为 (70 875± 0 31)mU/L ,Ⅰ组胰岛素水平为 (41 2 4 6± 0 35 )mU/L ,二者差异有显著意义 (P <0 0 1)。在培养的 14d、2 1d和 30d时 ,Ⅱ组胰岛素的分泌水平也均高于Ⅰ组(P <0 0 1)。结论　三维微重力培养组的胰岛细胞存活率及胰岛素分泌功能都优于二维普通培养组。

关键词：三维微重力大鼠胰岛细胞实验研究细胞培养

模拟微重力下三维培养的大鼠甲状旁腺细胞与睾丸塞尔托利细胞联合移植

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中华器官移植杂志 2011年第6期32卷 367-371页

作者：薛双峰赵大江段秀庆医科大学附属第一临床医学院甲状腺乳腺外科哈尔滨150001

目的观察模拟微重力条件下三维培养的大鼠甲状旁腺细胞与同系睾丸塞尔托利细胞联合移植后的分泌功能，以及移植物存活情况。方法取SD大鼠的甲状旁腺细胞，分别进行常规培养和模拟微重力条件下三维培养；取SD大鼠睾丸塞尔托利细胞，进行... 详细信息

目的观察模拟微重力条件下三维培养的大鼠甲状旁腺细胞与同系睾丸塞尔托利细胞联合移植后的分泌功能，以及移植物存活情况。方法取SD大鼠的甲状旁腺细胞，分别进行常规培养和模拟微重力条件下三维培养；取SD大鼠睾丸塞尔托利细胞，进行常规培养。取Wistar大鼠作为移植受者，制备甲状旁腺功能低下症模型。用随机数字表法将建模成功的Wistar大鼠分为3组：A组大鼠接受常规培养的单纯甲状旁腺细胞移植；B组大鼠接受常规培养的甲状旁腺细胞联合睾丸塞尔托利细胞移植；C组大鼠接受经三维培养的甲状旁腺细胞联合睾丸塞尔托利细胞移植。移植后观察各组移植物的存活情况，并检测移植物的细胞成分，淋巴细胞凋亡及甲状旁腺细胞功能。结果A组、B组和C组移植物的存活时间依次延长，分别为（17．3±1．6）d、（43．2±2．4）d和（52．5±1．5）d，3组间两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。C组移植物内甲状旁腺细胞已长人支架材料内部，并与之紧密结合，甲状旁腺激素分泌旺盛；还可见大量散在的、Fas配体表达阳性的睾丸塞尔托利细胞；在移植物与肾实质交界处可见大量淋巴细胞凋亡。结论模拟微重力条件下三维培养技术与具有免疫赦免作用的睾丸sertoli细胞共同应用于甲状旁腺细胞移植，可以提高移植后甲状旁腺细胞的分泌功能，延长移植物的存活时间。

关键词：模拟微重力三维培养甲状旁腺塞尔托利细胞

单侧甲状腺微小乳头状癌对侧腺体隐匿癌灶的预测因素及手术治疗策略

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医学研究生学报 2017年第6期30卷 641-644页

作者：李同昌王彪段秀庆哈尔滨医科大学附属第一医院乳腺外科哈尔滨医学硕士150001

目的既往对单侧甲状腺微小乳头状癌(PTMC)的术式仍存在分歧,文中旨在探讨单侧甲状腺微小乳头状癌对侧腺体隐匿癌灶的预测因素,分析比较单侧PTMC的手术方式。方法回顾性分析哈尔滨医科大学附属第一医院乳腺外科2014年01月至2016年01月经... 详细信息

目的既往对单侧甲状腺微小乳头状癌(PTMC)的术式仍存在分歧,文中旨在探讨单侧甲状腺微小乳头状癌对侧腺体隐匿癌灶的预测因素,分析比较单侧PTMC的手术方式。方法回顾性分析哈尔滨医科大学附属第一医院乳腺外科2014年01月至2016年01月经术前彩超检查局限于单侧腺体的PTMC患者327例,根据对侧腺体是否存在隐匿癌灶分为单侧腺体癌灶者(n=278)与双侧腺体癌灶者(n=49);根据是否行预防性中央区淋巴结清扫分为淋巴结清扫者(n=117)与淋巴结未清扫者(n=210),进一步分析对侧腺体隐匿癌灶的预测因素及中央区淋巴结预防性清扫术后相关并发症。结果预防性行中央区淋巴结清扫术患者117例中存在中央区淋巴结转移者55例,转移率为47.0%。患侧腺体内多发癌灶是对侧腺体内存在隐匿癌灶的危险因素(OR=4.924,95%CI:1.605~15.107)。淋巴结清扫者和淋巴结未清扫者术后并发症差异无统计学意义(P>0.05)。结论单侧腺体内PTMC多发癌灶可以帮助预测对侧腺体隐匿癌灶的存在,并且中央区淋巴结转移率较高,建议对于单侧腺体内多发癌灶的PTMC行甲状腺全切除术+中央区淋巴结预防性清扫术。

关键词：甲状腺微小乳头状癌隐匿癌灶预测因素

美蓝和异硫蓝在乳腺癌前哨淋巴结活检中的对比研究

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齐齐哈尔医学院学报 2008年第6期29卷 703-704页

作者：李新段秀庆哈尔滨医科大学第一附属医院普外科 150086

目的通过对比采用1％的异硫蓝和1％的美蓝行乳腺癌前哨淋巴结活检，对两种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比，了解两种染料的染色机制，比较和评价两种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别，从而为患者的治疗提供相关... 详细信息

目的通过对比采用1％的异硫蓝和1％的美蓝行乳腺癌前哨淋巴结活检，对两种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比，了解两种染料的染色机制，比较和评价两种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别，从而为患者的治疗提供相关的依据。方法从2006年4月～2007年12月间我院收治的乳腺癌患者中选取86例乳腺癌患者（T1，T2），按注射染料的类型不同随机分为关蓝组和异硫蓝组，其中美蓝组44例和异硫蓝组42例，染料被分4点注入乳晕周围皮下和乳腺组织，30分钟后行前哨淋巴结活检术（SLNB），再行腋窝淋巴结清扫术（ALND），并将前哨淋巴结及腋窝淋巴结送病理。结果美蓝组：44例患者检出前哨淋巴结者40例，其发现率为（90．91％），前哨淋巴结活检的灵敏度为93．33％（14／15），准确率为88．64％（39／44），假阴性率为6．67％（1／15），假阳性率为0。异硫蓝组：42例患者检出前哨淋巴结者39例，其发现率为92．86％，前哨淋巴结活检的灵敏度为93．75％（15／16），准确率为90．48％（38／42），假阴性率为6．25％（1／16），假阳性率为0。两组间无统计学差异（P〉0．05）。结论通过应用美蓝和异硫蓝两种染料的对比研究，其发现率、灵敏度、准确率相当，而美蓝应用起来费用较低，在我国更具有好的应用前景。

关键词：美蓝异硫蓝乳腺癌前哨淋巴结活检

美蓝、异硫蓝和纳米碳混悬液在乳腺癌前哨淋巴结活检中的对比研究

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齐齐哈尔医学院学报 2008年第9期29卷 1051-1053页

作者：李新段秀庆哈尔滨医科大学附属第一医院高校教师研究生150001 哈尔滨医科大学附属第一医院普外一科

目的通过对比采用1%异硫蓝、1%美蓝和纳米碳混悬液(卡纳琳)行乳腺癌前哨淋巴结活检,对三种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比,比较和评价三种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别,从而为患者的治疗提供相关的依据。方... 详细信息

目的通过对比采用1%异硫蓝、1%美蓝和纳米碳混悬液(卡纳琳)行乳腺癌前哨淋巴结活检,对三种染料的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率进行对比,比较和评价三种染料进行乳癌前哨淋巴结定位作用的差别,从而为患者的治疗提供相关的依据。方法选择2006年4月～2007年12月间我院收治的乳腺癌患者(T1≤2cm或2cm0.05)具有可比性。全部手术操作均由同一手术组实施。按照实验组的不同,分别取美蓝4ml或异硫蓝4ml或纳米碳混悬液2ml,分4点注入乳晕周围皮下和乳腺组织,30分钟后行前哨淋巴结活检术(Sentinellymphnodebiopsy,SLNB)将找到的前哨淋巴结送快速冰冻病理,后行乳癌根治术或乳癌改良根治术,结果回报后对此三组患者前哨淋巴结活检的发现率、灵敏度、准确率、假阴性率指标进行统计学分析。结果美蓝组:44例患者检出前哨淋巴结者40例,其发现率为(90.91%),前哨淋巴结活检的灵敏度为93.33%(14/15),准确率为88.64%(39/44),假阴性率为6.67%(1/15),假阳性率为0。异硫蓝组:42例患者检出前哨淋巴结者39例,其发现率为92.86%,前哨淋巴结活检的灵敏度为93.75%(15/16),准确率为90.48%(38/42),假阴性率为6.25%(1/16),假阳性率为0。纳米碳混悬液组(卡纳琳):40例患者检出前哨淋巴结者38例,其发现率为(95.00%),前哨淋巴结活检的灵敏度为92.86%(13/14),准确率为92.50%(37/40),假阴性率为7.14%(1/14),假阳性率为0。三组间无统计学差异(P>0.05)。结论通过应用美蓝、异硫蓝和纳米碳混悬液(卡纳琳)三种染料的对比研究,其发现率、灵敏度、准确率相当,而美蓝应用起来费用较低,又不影响疗效,在我国应用更广泛。

关键词：美蓝异硫蓝纳米碳混悬液乳腺癌前哨淋巴结活检