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作者：段坤峰河北医科大学

学位级别：硕士

马鞭草为马鞭草科(Verbenaceae)植物马鞭草Verbena officinalis L.的干燥地上部分,具有活血散瘀,截疟,解毒,利水消肿的功效。《Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals》记载,在民间该药常常被用作利尿药、祛痰药和抗风湿药,在西班牙的N... 详细信息

马鞭草为马鞭草科(Verbenaceae)植物马鞭草Verbena officinalis L.的干燥地上部分,具有活血散瘀,截疟,解毒,利水消肿的功效。《Herbal Drugs and Phytopharmaceuticals》记载,在民间该药常常被用作利尿药、祛痰药和抗风湿药,在西班牙的Navarra地区,该药广泛用于抗炎。桂承会等于1985年报道马鞭草水煎剂有一定镇咳作用,并证明马鞭草苷的镇咳作用与水煎剂基本一致。一般而言,中药发挥药效作用的物质基础多为一类或几类物质成分,马鞭草苷为马鞭草所含成分之一,与其同类或其它类的成分还有很多。本研究在总结前人工作的基础之上,对其质量标准及药代动力学方面做了进一步研究,为马鞭草的合理应用做出了有意义的探讨。本文通过研究马鞭草提取液,在已知药效物质基础的前题下,对马鞭草药材指纹图谱、主要活性物质的含量测定以及有效成分在动物体内的吸收等情况进行了探讨,为马鞭草的开发利用奠定了基础。第一部分不同产地马鞭草药材指纹图谱研究目的:研究并建立不同产地马鞭草药材的指纹图谱,为科学评价与有效控制马鞭草药材质量提供新的方法。方法:不同产地马鞭草药材的指纹图谱研究,色谱柱为DiamonsilTM C18柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水进行梯度洗脱,柱温为30℃;检测波长为265 nm,流速1.0 mL/min。结果:建立了不同产地马鞭草药材HPLC-PDA指纹图谱共有模式,标定20个共有峰。并对12批不同产地马鞭草药材进行了相似度比较,8批马鞭草药材的相似度均在0.9以上,4批马鞭草药材相似度在0.8～0.9之间。结论:本方法操作简便、快速、准确,可作为马鞭草药材的鉴别和质量控制方法。第二部分马鞭草中主要糖苷和黄酮苷元的含量测定目的:建立HPLC法同时测定马鞭草中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷以及利用HPLC法同时测定马鞭草中木犀草素、芹菜素和山奈酚含量的方法,以控制该药材的质量。方法:取马鞭草药材粉末约0.5 g,精密称定,加入20倍量80%甲醇,密塞,称定重量,超声处理45 min,放冷,称重,用80%甲醇补充减失的重量,摇匀,0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液,进样测定。HPLC法测定马鞭草苷和戟叶马鞭草苷,采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm , 5μm) ,乙腈-水(15∶85)为流动相,检测波长为238 nm。HPLC法测定木犀草素、芹菜素和山奈酚,采用色谱柱DiamonsilTMC1(8250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05%磷酸水(40∶60)为流动相,检测波长为350 nm,柱温为30℃。流速1.0 mL/min,进样量20μL。结果:对于HPLC法马鞭草苷、戟叶马鞭草苷在17.2～155.2μg/mL和25.5～229.9μg/mL的浓度范围内与峰面积均呈良好的线性关系(r2>0.997);平均回收率分别为98.89%(RSD=1.1%)和99.00%(RSD=0.4%)。木犀草素、芹菜素和山奈酚三种组分的线性关系均良好(r2>0.995),平均回收率分别为98.14%(RSD=1.8%)、100.3%(RSD=1.5%)和97.12%(RSD=1.7%),精密度和重复性均良好。结论:本研究采用HPLC法建立了同时测定马鞭草中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷含量的方法,并利用HPLC法建立了马鞭草中木犀草素、芹菜素和山奈酚同时测定的方法,两种方法均有较高的专属性、灵敏度,具有较好的精密度和准确度,能够满足马鞭草药材质量控制的要求。第三部分马鞭草提取物中黄酮类成分的药代动力学研究目的:建立高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS-MS)测定大鼠血浆中木犀草素、山奈酚、芹菜素、槲皮素和异鼠李素浓度的方法,并研究5种黄酮在提取物单次给药后大鼠体内的药代动力学过程。方法:大鼠以灌胃给予马鞭草提取物(10 mL/kg),分别于给药后5、15、30、60、90、120、150、180、240、360、480、720 min内眦动脉取血0.3 mL,置于肝素化塑料离心管中,样品预处理采用甲醇盐酸混合溶液沉淀蛋白后90°C水解30 min,离心,取上清液,利用HPLC-MS-MS内标法(SMZ),色谱柱为反相柱Waters SunFireTM C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水(0-2 min,45%-80%乙腈;2-5 min,80%乙腈;5-5.1 min 80%-45%乙腈,v/v)梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,进样量

关键词：马鞭草环烯醚萜苷黄酮苷元指纹图谱含量测定药代动力学蛋白结合率

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RP-HPLC法同时测定马鞭草中木犀草素、芹菜素和山柰酚

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药物分析杂志 2010年第6期30卷 995-998页

作者：段坤峰卢树杰陈钟朱红张兰桐河北医科大学药学院药物分析教研室石家庄050017 河北省中药注射剂工程技术研究中心石家庄051430

目的：建立HPLC法测定马鞭草药材中木犀草素、芹菜素和山柰酚的含量。方法：采用DiamonsilTMC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水（40∶60）为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长350nm,柱温30℃。结果：木犀草素、芹菜素... 详细信息

目的：建立HPLC法测定马鞭草药材中木犀草素、芹菜素和山柰酚的含量。方法：采用DiamonsilTMC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水（40∶60）为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长350nm,柱温30℃。结果：木犀草素、芹菜素和山柰酚浓度分别在1.065-21.30,1.146-22.92,1.645-32.91μ***-1范围内与峰面积均呈良好的线性关系（r=0.9995-0.9999）;平均回收率（n=6）分别为98.1%（RSD=1.8%）,100.3%（RSD=1.5%）,97.1%（RSD=1.7%）。结论：本法操作简便、准确,具有良好的重复性,为马鞭草药材的合理应用及质量控制奠定基础。

关键词：马鞭草高效液相色谱木犀草素芹菜素山柰酚

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马鞭草镇咳有效部位化学成分的研究

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中国医院药学杂志 2013年第6期33卷 445-449页

作者：任非段坤峰付颖王欣任晓丹河北医科大学第二医院药剂科河北石家庄050000 河北医科大学第三医院药剂科河北石家庄050051 河北医科大学第四医院药剂科河北石家庄050000 河北省中医院儿科河北石家庄050011

目的:研究马鞭草镇咳有效部位的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱、制备型高效液相色谱(HPLC)进行分离纯化,通过理化性质和光谱分析进行结构鉴定。结果:从马鞭草中分离并鉴定了12个单体化合物,分别为... 详细信息

目的:研究马鞭草镇咳有效部位的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱、制备型高效液相色谱(HPLC)进行分离纯化,通过理化性质和光谱分析进行结构鉴定。结果:从马鞭草中分离并鉴定了12个单体化合物,分别为山柰酚(1)、芹菜素(2)、4’-羟基汉黄芩素(3)、槲皮苷(4)、木犀草素(5)、异鼠李素(6)、毛蕊花糖苷(7)、马鞭草苷(8)、戟叶马鞭草苷(9)、桃叶珊瑚苷(10)、龙胆苦苷(11),、β-谷甾醇(12)。结论:异鼠李素为首次从该植物中分离得到。

关键词：马鞭草镇咳作用化学成分

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中药与天然产物中有效成分的体内代谢研究进展

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中国医药工业杂志 2009年第9期40卷 708-713页

作者：段坤峰孟岩张兰桐河北医科大学药学院药物分析教研室河北石家庄050017 石家庄市中心医院药剂科河北石家庄050011

综述了近年来中药与天然产物代谢研究的概况与进展,着重介绍研究的对象、研究方法等。

关键词：中药与天然产物药物代谢药理活性综述

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HPLC法同时测定马鞭草中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷

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中草药 2009年第5期40卷 818-820页

作者：袁志芳段坤峰张兰桐史清文河北医科大学药学院药物分析教研室河北石家庄050017 河北医科大学药学院天然药物化学教研室河北石家庄050017

目的建立马鞭草药材中马鞭草苷（verbenalin）及戟叶马鞭草苷（hastatoside）的测定方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），乙腈水（15：85）为流动相，检测波长为238nm。结果马鞭草苷、戟叶马鞭草苷在17．2-155．... 详细信息

目的建立马鞭草药材中马鞭草苷（verbenalin）及戟叶马鞭草苷（hastatoside）的测定方法。方法采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），乙腈水（15：85）为流动相，检测波长为238nm。结果马鞭草苷、戟叶马鞭草苷在17．2-155．2μg／mL和25．5-229．9μg／mL与峰面积均呈良好的线性关系；平均回收率分别为98．89％（RSD=1．1％）、99．00％（RSD=0．4％）。结论本法操作简便、准确，具有良好的重现性，为马鞭草药材的合理应用及质量控制奠定基础。

关键词：马鞭草马鞭草苷戟叶马鞭草苷高效液相色谱

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河北道地药材连翘的高效液相色谱指纹图谱研究

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中草药 2010年第2期41卷 297-301页

作者：崔洋王巧张兰桐孔德志段坤峰河北医科大学药学院药物分析教研室河北石家庄050017

目的建立河北道地药材连翘的HPLC-PDA指纹图谱,得到对照图谱,与不同产地、不同采收部位连翘药材指纹图谱相比较,并测定了各批药材中连翘苷和芦丁的量,为科学评价与有效控制连翘药材质量提供方法。方法色谱柱为DiamonsilTMC18柱(250 mm×... 详细信息

目的建立河北道地药材连翘的HPLC-PDA指纹图谱,得到对照图谱,与不同产地、不同采收部位连翘药材指纹图谱相比较,并测定了各批药材中连翘苷和芦丁的量,为科学评价与有效控制连翘药材质量提供方法。方法色谱柱为DiamonsilTMC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,柱温30℃,检测波长为235 nm,体积流量0.8 mL/min,定量测定中连翘苷与芦丁的检测波长分别为210和254 nm。结果建立了河北省连翘药材HPLC-PDA指纹图谱共有模式,对不同产地、不同采收部位药材进行了相似度比较,并结合定量测定结果对各批药材进行评价。结论本方法操作简便、快速、准确,为连翘药材的鉴别和全面质量控制提供了依据。另外,连翘叶和花中连翘苷和芦丁量非常高,对于叶和花能否替代果实或与果实合并用药有待于进一步研究。

关键词：连翘指纹图谱连翘苷芦丁高效液相色谱

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马鞭草苷和戟叶马鞭草苷在大鼠体内药动学研究

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中国医院药学杂志 2014年第20期34卷 1718-1721页

作者：段坤峰李三妮丁志红唐英陈学军河北医科大学第三医院药剂科河北石家庄050051 河北省儿童医院药剂科河北石家庄050031

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠血浆中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷浓度的方法,并研究马鞭草苷和戟叶马鞭草苷单体以及马鞭草提取物单次给药后在大鼠体内的药动学过程。方法：大鼠以灌胃给予马鞭草苷和戟叶马鞭草苷单体以及马鞭... 详细信息

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定大鼠血浆中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷浓度的方法,并研究马鞭草苷和戟叶马鞭草苷单体以及马鞭草提取物单次给药后在大鼠体内的药动学过程。方法：大鼠以灌胃给予马鞭草苷和戟叶马鞭草苷单体以及马鞭草提取物,分别于给药后30,60,90,120,150,180,210,240,270,300,330,360 min内眦动脉取血,置于肝素化塑料离心管中,样品预处理后利用HPLC内标法（芍药苷）测定,色谱柱为反相C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（15∶85）,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长238 nm。结果：血浆中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷的线性范围31.2-625 ng·ml^-1和20.3-812.5 ng·ml^-1,定量下限为31.2 ng·ml^-1和20.3 ng·ml^-1,马鞭草苷在31.2,125,625 ng·ml^-13种质量浓度的日内、日间精密度（RSD）分别为5.64%-7.18%和4.89%-8.99%,准确度（RE）为-1.0%-9.5%,戟叶马鞭草苷在20.3,162,812.5 ng·ml^-13种质量浓度的日内、日间精密度（RSD）分别为0.53%-5.62%和0.59%-4.98%,准确度（RE）为-0.3%-9.5%。大鼠单次按马鞭草苷40 mg·kg^-1、戟叶马鞭草苷52 mg·kg^-1分别灌胃马鞭草苷、戟叶马鞭草苷单体和马鞭草提取物后,马鞭草苷、戟叶马鞭草苷的AUC及Cmax明显高于马鞭草提取物。结论：本研究方法准确可靠,操作简便重复性好,适用于测定血浆中马鞭草苷和戟叶马鞭草苷的浓度。

关键词：高效液相色谱法马鞭草苷戟叶马鞭草苷药动学

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马鞭草HPLC-PDA指纹图谱研究

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中草药 2009年第12期40卷 1984-1988页

作者：段坤峰袁志芳郑旭光崔洋张兰桐河北医科大学药学院药物分析教研室河北石家庄050017

目的研究并建立不同产地马鞭草药材的指纹图谱,为科学评价与有效控制马鞭草药材质量提供新的方法。方法色谱柱为Diamonsil^(TM) C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水进行梯度洗脱,柱温为30℃;检测波长为265 nm,体... 详细信息

目的研究并建立不同产地马鞭草药材的指纹图谱,为科学评价与有效控制马鞭草药材质量提供新的方法。方法色谱柱为Diamonsil^(TM) C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水进行梯度洗脱,柱温为30℃;检测波长为265 nm,体积流量1.0 mL/min。结果建立了不同产地马鞭草药材HPLC-PDA指纹图谱共有模式,标定20个共有峰。并对12批不同产地马鞭草药材进行了相似度比较,8批马鞭草药材的相似度均在0.9以上,4批马鞭草药材相似度在0.8～0.9。结论本方法操作简便、快速、准确,可作为马鞭草药材的鉴别和质量控制方法。

关键词：马鞭草高效液相色谱法指纹图谱

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马鞭草苷在大鼠体肠的吸收动力学

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中国医院药学杂志 2012年第5期32卷 340-343页

作者：任非段坤峰吴宗耀倪旭陈学军河北医科大学第二医院药剂科河北石家庄050000 河北医科大学第三医院药剂科河北石家庄050051 石家庄市第五医院药剂科河北石家庄050021

目的:建立同时测定肠循环液中马鞭草苷及酚红浓度的HPLC/DAD法,探讨马鞭草苷在大鼠各肠段的吸收动力学特征及不同药物浓度对肠吸收的影响。方法:采用大鼠在体肠灌流吸收试验,用HPLC对循环液中的马鞭草苷进行分析,色谱条件为:Diamonsil T... 详细信息

目的:建立同时测定肠循环液中马鞭草苷及酚红浓度的HPLC/DAD法,探讨马鞭草苷在大鼠各肠段的吸收动力学特征及不同药物浓度对肠吸收的影响。方法:采用大鼠在体肠灌流吸收试验,用HPLC对循环液中的马鞭草苷进行分析,色谱条件为:Diamonsil TMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,检测波长为238 nm(马鞭草苷)和430 nm(酚红),柱温为30℃。结果:在50～200μg·mL-1范围内,马鞭草苷在肠道内的吸收量与浓度成正比例关系,不同药物质量浓度(50,100,200μg·mL-1)条件下的吸收速率常数(Ka)分别为(84.7±5.6)、(86.7±7.3)、(84.4±8.0)h-1,Ka无显著性差异;在十二指肠、空肠、回肠、结肠的Ka分别为(0.054±0.006)、(0.050±0.005)、(0.052±0.004)、(0.049 2±0.002 3)h-1,Ka无显著性差异。结论:马鞭草苷在大鼠肠道的吸收符合一级动力学过程,吸收机制为被动扩散。马鞭草苷在整个肠道均有吸收,可以将马鞭草苷研制成缓、控释制剂。

关键词：马鞭草苷肠吸收动力学高效液相色谱法

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间尼索地平的胶束电动毛细管电泳法测定

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中国医药工业杂志 2009年第6期40卷 450-451,456页

作者：孔德志张兰桐段坤峰崔洋杨维河北医科大学药学院药物分析教研室河北石家庄050017

建立了胶束电动毛细管电泳法测定间尼索地平。采用未涂层融硅石英毛细管,10mmol/L磷酸二氢钠-5mmol/L硼砂缓冲液(含30mmol/LSDS,pH8.1)为运行缓冲液,分离电压30kV,检测波长214nm。间尼索地平浓度在30～120μg/ml范围内线性关系良好,检... 详细信息

建立了胶束电动毛细管电泳法测定间尼索地平。采用未涂层融硅石英毛细管,10mmol/L磷酸二氢钠-5mmol/L硼砂缓冲液(含30mmol/LSDS,pH8.1)为运行缓冲液,分离电压30kV,检测波长214nm。间尼索地平浓度在30～120μg/ml范围内线性关系良好,检测限为0.9μg/ml。

关键词：间尼索地平胶束电动毛细管电泳测定

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