检索结果-南通市图书馆

猪Toll样受体7基因的克隆、表达及其结构与功能预测分析

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

猪Toll样受体7基因的克隆、表达及其结构与功能预测分析

作者：段凤云中国农业科学院

学位级别：硕士

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是介导天然免疫和获得性免疫的病原模式识别受体家族,主要参与对微生物病原体相关分子模式的识别,其中Toll样受体7(TLR7)在ssRNA病毒的识别及其感染的信号传递中起重要作用。目前,对人和鼠的(TLR7... 详细信息

Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是介导天然免疫和获得性免疫的病原模式识别受体家族,主要参与对微生物病原体相关分子模式的识别,其中Toll样受体7(TLR7)在ssRNA病毒的识别及其感染的信号传递中起重要作用。目前,对人和鼠的(TLR7的研究已取得了一定的进展,但对猪、牛和家禽等动物的TLR7分子结构与功能的研究很少。由于TLR7分子在物种间既存在相似性,又存在种属差异性,因此,对猪TLR7分子的研究具有重要科学价值。 1.本研究从经植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)联合刺激的猪脾脏淋巴细胞中,提取总RNA,利用RT-PCR技术,在国内首次克隆了猪Toll样受体7全长基因。该基因ORF为3153bp,编码1050个氨基酸,富含16.2%的亮氨酸,是一个含26个氨基酸信号肽序列的,由胞外区、跨膜区和胞内区组成的Ⅰ型跨膜蛋白受体,与GenBank上登载的猪参考序列(DQ33222)的同源性为98.8%。将所克隆的猪Toll样受体7基因的核苷酸序列与其它动物的进行遗传演化分析,发现猪与牛和绵羊的同源性较高,与马、猫、人、鼠的次之,表明TLR7基因系统发生关系上与物种之间的亲缘关系密切。同时,构建了pcDNA3.1/CT-GFP-pTLR7真核表达载体,测序鉴定后,提取重组质粒后用脂质体法转染CHO-K1细胞,在荧光显微镜下观察结果表明,pTLR7-GFP融合蛋白得到成功表达。 2. TLR7胞外区是识别和传导病原模式分子配体信息的关键结构区域,包含有LRR基序(XLXXLXLXX),本研究克隆该基因的胞外区片段2451bp,与pMAL-c2x质粒载体一起分别用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后连接,转化大肠杆菌。经酶切、PCR以及测序鉴定证明,猪TLR7基因正确插入到pMAL-c2x载体。重组菌经ITPG诱导表达的产物,用SDS-PAGE电泳进行分析表明:MBP-pTLR7基因胞外区融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为136 kDa,说明已成功表达了pTLR7基因的胞外区分子片段。 3.将TLR7全长基因和pcDNA3.1质粒分别用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后连接,转化大肠杆菌。经鉴定证明,猪TLR7全长基因正确插入到pcDNA3.1载体;用重组质粒和复性后的MBP-pTLR7基因胞外区融合蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA方法检测特异性抗体表明:BALB/c小鼠在免疫后产生了较高的抗猪TLR7分子的多克隆抗体,其效价显著高于对照组,说明成功研制了小鼠抗猪TLR7全长分子及胞外区分子片段的多克隆抗体,为下一步猪TLR7分子单克隆抗体及其结构和功能研究奠定了基础。

关键词： Toll样受体7 基因克隆结构与功能预测诱导表达多克隆抗体

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

《老牛家的战争》引发的思考

电影文学 2010年第19期 146-147页

作者：段凤云北华大学信息技术学院

《老牛家的战争》一剧,将当今我国老龄化社会、＂啃老族＂＂房产战＂等热点问题做了深刻的披露,在批判不孝子孙的种种丑行的同时,也赞扬了孝顺女儿的孝道和邻里之间互帮互助的人间真情.反思这部电视剧带给人们的教益多多,亲情无价,孝道... 详细信息

《老牛家的战争》一剧,将当今我国老龄化社会、＂啃老族＂＂房产战＂等热点问题做了深刻的披露,在批判不孝子孙的种种丑行的同时,也赞扬了孝顺女儿的孝道和邻里之间互帮互助的人间真情.反思这部电视剧带给人们的教益多多,亲情无价,孝道弥贵则为该剧给予观众的最大教益.

关键词：亲情孝道 "啃老" 养老

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

阅读教学中的本色阅读——《林海》教学设计

小学语文教学 2006年第9期 51-52页

作者：季惠杰段凤云北华大学人文学院吉林吉林市铁路一中

以市场为导向加速我省科技成果推广转化的对策研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农机化研究 1994年第1期16卷 1-7页

作者：赵龙云张元禄段凤云黑龙江省农业机械工程科学研究院

科技成果作为知识形态的潜在生产力转化为物质形态的现实生产力，需要有一个开发和应用推广的过程。为了加速科技成果的转化进程，本文在分析黑龙江省科技成果推广转化形势及存在问题的基础上，提出了相应对策与建议。

关键词：科技成果转化生产力对策

应变式压力传感器的设计及其在农机测试中与微机处理技术的结合

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农机化研究 1988年第3期 23-31页

作者：段凤云黑龙江省农业机械化研究所

本文重点介绍了经省计量部门检定核准的YMYI—16型应变式压力传感器的结构与原理,设计与计算,装配与标定,及其在农机(深松机、软管纹盘式喷灌机、三角铧子)零部件测试中与微机处理技术结合、应用情况。

关键词：压力传感器微机处理技术应变式弹性膜片农机测试

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

用改进遗传算法优化的带钢卷取温度预报模型

控制理论与应用 2015年第8期32卷 1106-1113页

作者：孙铁军杨卫东程艳明段凤云弭洪涛北京科技大学自动化学院北京100083 北华大学电气信息工程学院吉林吉林132021 北京科技大学钢铁流程先进控制教育部重点实验室北京100083 北华大学信息技术与传媒学院吉林吉林132013

由于热轧带钢卷取温度控制过程存在强非线性,经典数学模型难以精确描述,我们采用遗传神经网络建立了卷取温度预报模型,并且通过改进的遗传算法优化了神经网络的权值.其中,提出了重新进化的思想,用"返祖"操作找回丢失的较优模式并将其耦... 详细信息

由于热轧带钢卷取温度控制过程存在强非线性,经典数学模型难以精确描述,我们采用遗传神经网络建立了卷取温度预报模型,并且通过改进的遗传算法优化了神经网络的权值.其中,提出了重新进化的思想,用"返祖"操作找回丢失的较优模式并将其耦合至下一代种群中,极大的提高了算法的收敛速度;分析了"种群解的空间跨度"和"基因段距离"对种群多样性的影响,用"优生"操作来推动算法从平面到多维空间的立体式搜索,以勘探和挖掘出更广、更优的寻优区间,并在种群进化后期,强力驱动算法收敛于全局最优.MFC(微软基类库)仿真结果表明:该卷取温度预报模型的收敛速度快、精度高,满足实时在线的控制要求,预报精度在±10?范围之内,能为卷取温度的前馈补偿控制提供可靠的参考数据,从而为进一步提高卷取温度的控制精度提供了新的途径.

关键词：卷取温度遗传算法返祖基因段距离优生

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

猪Toll样受体7基因的克隆及序列分析

细胞与分子免疫学杂志 2010年第6期26卷 599-601页

作者：段凤云房永祥陈国华王生富何延华景志忠中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1... 详细信息

目的:研究猪TLR7基因的分子结构与功能。方法:用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增技术,从猪脾脏淋巴细胞中克隆猪Toll样受体7基因(pTLR7),利用生物信息学技术预测其结构与功能。结果:基因序列分析表明,克隆的pTLR7基因为3153bp,编码1050个氨基酸,富含16.2%的亮氨酸;同源性分析显示,与GenBank上登载的猪TLR7参考序列(DQ333222)的同源性为98.8%,与牛和绵羊的同源性较高,与马、狗、人、家鼠、褐鼠的次之,其遗传演化关系与亲缘关系密切;推导氨基酸的分子结构预测表明,该分子属于I型跨膜受体,由胞外区(588个氨基酸)、跨膜区(23个氨基酸)和胞内区(174个氨基酸)组成,有信号肽序列、富含亮氨酸的重复序列(LRR)和Toll/IL-1R同源区结构域。结论:成功克隆了猪TLR7基因,预测分析证实具有典型的TLR家族结构特征,这为进一步研究其参与病原分子模式识别和信号传导奠定了基础。

关键词：猪Toll样受体7 分子克隆序列分析结构预测

基于μC/OS-Ⅱ的嵌入式校园导航系统的设计与实现

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

实验室科学 2008年第2期11卷 87-88页

作者：段凤云天津大学电工电子实验中心天津300072

叙述了在基于ARM技术的MC9328MX1龙珠处理器上,移殖μC/OS-Ⅱ操作系统,用C语言及汇编语言编程,在ARM嵌入式开发平台上实现校园导航系统的过程。

关键词： μC/OS-Ⅱ系统 ARM 校园导航系统

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

嵌入式系统实验教学的探讨

单片机与嵌入式系统应用 2006年第5期6卷 72-73页

作者：段凤云天津大学

目前,嵌入式技术和嵌入式产品已经渗透到工业控制系统、信息家电、通信设备、仪器仪表、军事技术以及人们日常生活的各个领域.由于社会对掌握嵌入式技术人才的大量需求,使得嵌入式软硬件工程师成为未来几年内最为热门的职业之一.因此,... 详细信息

目前,嵌入式技术和嵌入式产品已经渗透到工业控制系统、信息家电、通信设备、仪器仪表、军事技术以及人们日常生活的各个领域.由于社会对掌握嵌入式技术人才的大量需求,使得嵌入式软硬件工程师成为未来几年内最为热门的职业之一.因此,作为对新技术研究和探索最活跃的群体--高等院校,如何接受嵌入式技术带来的挑战,尽快开设嵌入式系统的相关理论与实验课程,并通过对其研究、探讨与实践,逐渐形成较规范的教学体系已成为一个重要的研究课题.

关键词：嵌入式系统实验教学嵌入式技术工业控制系统嵌入式产品新技术研究信息家电通信设备仪器仪表军事技术