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阳和汤治疗恶性肿瘤的研究进展

中国比较医学杂志 2022年第7期32卷 109-117页

作者：韩懿存武颖烁尚艺婉陈玉龙河南中医药大学研究生院郑州450046 河南中医药大学中医药科学研究院河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室郑州450046

阳和汤出自清代《外科全生集》,功在温阳补血,散寒通滞。中医认为阳虚寒痰凝聚是恶性肿瘤发病的重要机制,阳和汤作为温阳散寒通滞的代表方之一,临床上治疗恶性肿瘤应用广泛,尤其在诸多“阳虚型”癌症患者中疗效显著,基于此,文章对2001~2... 详细信息

阳和汤出自清代《外科全生集》,功在温阳补血,散寒通滞。中医认为阳虚寒痰凝聚是恶性肿瘤发病的重要机制,阳和汤作为温阳散寒通滞的代表方之一,临床上治疗恶性肿瘤应用广泛,尤其在诸多“阳虚型”癌症患者中疗效显著,基于此,文章对2001~2021年CNKI、万方数据、维普、SinoMed中国生物医学文献系统、PubMed、Medline、Embase数据库以“阳和汤、温阳法、恶性肿瘤(癌症)、网络药理学”为主题进行检索,共检索文献225篇,整理、归纳相关文献94篇,主要从中医的理论渊源、临床观察、药理研究等方面对阳和汤的作用机制进行概述,同时结合网络药理学进一步探析其应用于恶性肿瘤的可行性,以期为恶性肿瘤的临床治疗提供科学依据。

关键词：阳和汤恶性肿瘤寒痰凝聚机制网络药理学

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基于PPARγ信号通路探讨淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物干预下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第22期29卷 47-55页

作者：周哲旭武颖烁陈星王省刘洋胡啸博刘娅茹陈玉龙河南中医药大学中医药科学研究院河南省中医方证信号传导重点实验室河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室郑州450046

目的:探讨淫羊藿苷基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路改善香烟烟雾提取物(CSE)诱导下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍及炎症反应的作用机制。方法:大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为空白组、10%香烟烟雾提取物干预后分为模型组、淫... 详细信息

目的:探讨淫羊藿苷基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路改善香烟烟雾提取物(CSE)诱导下肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍及炎症反应的作用机制。方法:大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为空白组、10%香烟烟雾提取物干预后分为模型组、淫羊藿苷低、中、高浓度组(10、20、40μmol·L^(-1))、PPARγ抑制剂组、PPARγ抑制剂联合淫羊藿苷低、中、高浓度组。Alamar Blue法检测淫羊藿苷对NR8383细胞增殖及抑制作用;流式细胞术检测NR8383细胞胞葬功能;酶联免疫吸附测定法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、乳脂球表皮生长因子8(MFG-E8)含量;蛋白免疫印迹法检测PPARγ、CD36、Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PPARγ、CD36、Rac1 mRNA的表达。结果:香烟烟雾提取物建立NR8383细胞胞葬功能障碍模型,与空白组比较,模型组胞葬率降低(P<0.05),TNF-α表达明显升高(P<0.05),TGF-β1、MFG-E8表达显著降低(P<0.01),明显下调PPARγ、CD36、Rac1 mRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,应用淫羊藿苷后各组胞葬率明显升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α表达显著降低(P<0.01),TGF-β1、MFG-E8表达明显增加(P<0.05),上调PPARγ、CD36、Rac1蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01);与淫羊藿苷单独用药组比较,PPARγ抑制剂联合淫羊藿苷组胞葬率明显降低(P<0.05),PPARγ蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),低浓度联合组CD36蛋白显著降低(P<0.01)低浓度及中浓度联合组Rac1蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:淫羊藿苷改善香烟烟雾提取物导致的肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍,其机制与调控PPARγ信号通路及细胞骨架结构重排相关。

关键词：淫羊藿苷肺泡巨噬细胞胞葬功能过氧化物酶体增殖物激活受体γ 细胞骨架

启膈散乙酸乙酯部位提取物通过抑制TGF-β_(1)信号通路干预食管癌细胞的迁移和侵袭

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中国实验方剂学杂志 2023年第7期29卷 66-75页

作者：尚艺婉朱芮武颖烁陈星周哲旭任闪闪刘燕陈玉龙杨联河河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室郑州450046 首都医科大学北京胸科医院北京100700 河南中医药大学医学院郑州450046

目的:探讨启膈散(QGS)对食管癌细胞TE-1迁移和侵袭能力的影响机制。方法:利用基因芯片技术筛选正常组和启膈散组差异表达基因,分析差异基因的本体功能和信号通路。噻唑蓝(MTT)比色法检测QGS对TE-1细胞活性的影响。后续验证实验分为空白... 详细信息

目的:探讨启膈散(QGS)对食管癌细胞TE-1迁移和侵袭能力的影响机制。方法:利用基因芯片技术筛选正常组和启膈散组差异表达基因,分析差异基因的本体功能和信号通路。噻唑蓝(MTT)比色法检测QGS对TE-1细胞活性的影响。后续验证实验分为空白组、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))组、TGF-β_(1)+QGS组、TGF-β_(1)+SB431542组。显微镜观察各实验组细胞形态,细胞划痕实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组细胞E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形纤维蛋白(Vimentin)、果蝇母本抗生存因子2(Smad2)和果蝇母本抗生存因子7(Smad7)m RNA的表达水平。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞E-Cadherin、Vimentin、p-Smad2/3、Smad2/3和Smad7蛋白的表达。结果:QGS组与空白组之间有1487个差异基因,其中1080个下调,407个上调,下调基因占差异基因的72.63%。下调基因涉及的主要生物学过程有细胞骨架蛋白结合、ATP结合、腺苷酸核苷酸结合、腺苷酸核糖核苷酸结合等,涉及的京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路主要包括TGF-β信号通路、细胞周期、细胞外基质-受体相互作用蛋白、肿瘤中的通路、卵母细胞减数分裂等;上调基因主要参与RNA结合、DNA结合、转录调节子活性、转录激活子活性、核苷酸结合等生物学过程,涉及的KEGG通路主要包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、膀胱癌、肾细胞癌、癌中通路、p53信号通路等。与空白组比较,QGS(20、30、40、60、80 mg·L^(-1))干预TE-1细胞12、24、36、48、60 h后,细胞活性抑制率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),抑制率呈时间和浓度依赖性。与空白组比较,TGF-β_(1)组细胞变长,呈成纤维细胞表型。与TGF-β_(1)组细胞比较,TGF-β_(1)+QGS组细胞变短,形态恢复正常,呈上皮细胞表型;TGF-β_(1)+SB431542组细胞形态与TGF-β_(1)+QGS组相似。与空白组比较,TGF-β_(1)组细胞的迁移和侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β_(1)组比较,TGF-β_(1)+QGS组和TGF-β_(1)+SB431542组细胞迁移和侵袭能力受到抑制而减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。但TGF-β_(1)+QGS组和TGF-β_(1)+SB431542组之间的迁移和侵袭能力差异无统计学意义。与空白组比较,TGF-β_(1)组Vimentin和Smad2 m RNA的表达水平升高(P<0.05),E-Cadherin和Smad7m RNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β_(1)组比较,TGF-β_(1)+QGS组和TGF-β_(1)+SB431542组的Vimentin和Smad2 m RNA表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),E-Cadherin和Smad7 m RNA的表达水平升高(P<0.05)。与空白组比较,TGF-β_(1)组Vimentin、p-Smad2/3和Smad2/3的蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05),E-Cadherin和Smad7蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β_(1)组比较,TGF-β_(1)+QGS组和TGF-β_(1)+SB431542组的Vimentin、p-Smad2/3和Smad2/3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),E-Cadherin和Smad7蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:QGS乙酸乙酯提取物通过TGF-β_(1)途径抑制TE-1细胞的上皮-间质转化过程,减少TE-1细胞的迁移和侵袭。

关键词：食管癌上皮间充质转化迁移侵袭启膈散转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))信号通路

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常山水提醇沉物对EC9706细胞周期、凋亡、能量代谢的影响

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中华中医药学刊 2021年第2期39卷 85-88,I0020页

作者：孟丹华尚艺婉李晨旭武颖烁陈玉龙河南中医药大学河南郑州450045 河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合实验室河南郑州450045

目的从细胞增殖、凋亡、细胞周期、能量代谢角度,研究常山水提醇沉物抗食管癌细胞EC9706的作用及机制。方法用MTT法检测EC9706细胞活性,流式细胞术检测药物对食管癌EC9706细胞凋亡、周期的影响,能量代谢检测系统检测药物对EC9706细胞能... 详细信息

目的从细胞增殖、凋亡、细胞周期、能量代谢角度,研究常山水提醇沉物抗食管癌细胞EC9706的作用及机制。方法用MTT法检测EC9706细胞活性,流式细胞术检测药物对食管癌EC9706细胞凋亡、周期的影响,能量代谢检测系统检测药物对EC9706细胞能量代谢的影响。结果不同浓度常山水提醇沉物作用48 h后能有效抑制EC9706细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.01),可以有效促进细胞凋亡(P<0.05),将EC9706细胞阻滞于S期和G2/M期(P<0.05),并且明显抑制细胞糖酵解及线粒体代谢能力(P<0.01)。结论以上结果表明,常山水提醇沉物可能通过干预细胞周期、凋亡及能量代谢抑制食管癌EC9706细胞增殖。

关键词： EC9706细胞株常山水提醇沉物增殖凋亡周期能量代谢

六君子汤干预4NQO诱导食管癌模型小鼠的血清代谢组学研究

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中国中药杂志 2024年第2期49卷 461-470页

作者：尚艺婉陈星武颖烁周哲旭刘洋刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学中医学院(仲景学院) 河南郑州450046 南阳医学高等专科学校河南南阳473000 河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室河南郑州450046

基于血清代谢组学探讨六君子汤治疗4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline-N-oxide,4NQO)诱导食管癌模型小鼠的作用机制。选取35~45日龄小鼠100只,随机分为空白组、模型组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组、六君子汤高浓度组。除... 详细信息

基于血清代谢组学探讨六君子汤治疗4-硝基喹啉-N-氧化物(4-nitroquinoline-N-oxide,4NQO)诱导食管癌模型小鼠的作用机制。选取35~45日龄小鼠100只,随机分为空白组、模型组、六君子汤低浓度组、六君子汤中浓度组、六君子汤高浓度组。除空白组外,其余小鼠自由饮用100μg·mL^(-1)的4NQO溶液16周,构建食管癌小鼠模型。六君子汤低、中、高浓度组分别用药物质量分数为18.2、36.4、54.6 g·kg^(-1)的定制饲料喂养,称量各组小鼠体质量和脏器质量计算脏器指数;采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察各组小鼠食管组织病理改变;超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS/MS)进行小鼠血清样本的代谢物采集,筛选潜在生物标志物及分析相关代谢通路。结果显示,模型组小鼠脾脏、胃脏器指数明显降低,肺、食管、肾的脏器指数明显升高,与模型组相比,六君子汤各浓度脏器指数无明显变化;HE结果显示,六君子汤能改善小鼠食管癌细胞浸润性生长及癌变情况;血清代谢组学分析筛选出9种六君子汤干预食管癌小鼠的潜在生物标志物,分别为尿刊酸(urocanic acid,UCA)、1-油酰甘油磷酸丝氨酸(1-oleoylglycerophosphoserine)、11-脱氧前列腺素E1(11-deoxy prostaglandin E1)、多肽链Leu-Glu-Lys-Glu、(±)4-羟基-5E,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-二十二碳六烯酸[(±)4-HDHA]、脲基琥珀酸(ureidosuccinic acid)、泛酸[(2R)-2,4-dihydroxy-3,3-dimethylbutanoic acid]、犬尿酸(kynurenic acid)和双环前列腺素E2(bicyclo prostaglandin E2),涉及的通路包括组氨酸、嘧啶、丙氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、泛酸和色氨酸代谢及辅酶a生物合成等。六君子汤对4NQO诱导的食管癌模型小鼠发挥治疗作用,其作用机制可能与调节小鼠体内氨基酸代谢、炎症反应和免疫功能有关。

关键词：六君子汤食管癌血清代谢组学 4-硝基喹啉-N-氧化物

基于AMPK/mTOR信号通路研究异常山碱对EC9706细胞能量代谢的调控机制

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中草药 2020年第17期51卷 4482-4488页

作者：孟丹华尚艺婉武颖烁吴耀松刘燕刘俊李晨旭陈玉龙河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室河南郑州450046

目的通过观察异常山碱对食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡、周期、能量代谢及能量代谢通路相关蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法常规培养ECC9706细胞,用MTT法检测细胞活性,筛选药物浓度,选择1、2μg/mL 2个质量浓度;流式... 详细信息

目的通过观察异常山碱对食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡、周期、能量代谢及能量代谢通路相关蛋白表达的影响,探讨其治疗食管癌的分子机制。方法常规培养ECC9706细胞,用MTT法检测细胞活性,筛选药物浓度,选择1、2μg/mL 2个质量浓度;流式细胞术检测异常山碱对EC9706细胞凋亡、周期的影响,能量代谢检测系统检测异常山碱对EC9706细胞能量代谢的影响,Westernblotting检测细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(p-ACC)、腺苷磷酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白表达。结果不同质量浓度异常山碱作用48h后能有效抑制EC9706细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.01),可以将EC9706细胞阻滞于S期和G2/M期(P<0.05),有效促进细胞凋亡(P<0.05),且明显抑制细胞糖酵解及线粒体代谢能力(P<0.01),与对照组比较,异常山碱组细胞AMPK蛋白表达水平上升,mTOR、p-mTOR、p-ACC蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论异常山碱可能通过能量代谢调节EC9706细胞周期、凋亡,抑制EC9706细胞增殖。

关键词： AMPK/mTOR通路异常山碱 EC9706细胞能量代谢增殖凋亡周期

健脾和胃法六君子汤通过影响细胞能量代谢增强顺铂对EC9706活性抑制作用

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中药药理与临床 2021年第2期37卷 7-12页

作者：尚艺婉孟丹华罗文昭武颖烁李墨颜吴耀松任闪闪刘燕陈玉龙河南中医药大学基础医学院(仲景学院) 郑州450000 河南中医药大学中医药科学院郑州450000

目的:观察六君子汤增强顺铂对食管癌EC9706细胞疗效并探索机制。方法:以EC9706细胞为研究对象,体外常规培养后将细胞进行如下分组:空白对照组、六君子汤50、100μg/mL组、顺铂1、2μg/mL组、顺铂和六君子汤联合用药组、二甲双胍15 mmol/... 详细信息

目的:观察六君子汤增强顺铂对食管癌EC9706细胞疗效并探索机制。方法:以EC9706细胞为研究对象,体外常规培养后将细胞进行如下分组:空白对照组、六君子汤50、100μg/mL组、顺铂1、2μg/mL组、顺铂和六君子汤联合用药组、二甲双胍15 mmol/L组。MTT法检测细胞活性,能量代谢分析系统检测细胞糖酵解速率和线粒体压力,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位。结果:与空白对照组相比,六君子汤(25、50、100、200μg/mL)可明显抑制EC9706细胞的活力(P<0.05),六君子汤50μg/mL组ATP合成耗氧、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧明显降低、备用呼吸能力明显降低(P<0.05),六君子汤100μg/mL组补偿糖酵解、糖酵解潜能、ATP合成耗氧、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧、备用呼吸能力明显降低(P<0.05);顺铂(1、2、4、8μg/mL)可抑制EC9706细胞的活力(P<0.05),顺铂1μg/mL组ATP合成耗氧、基础呼吸值明显降低(P<0.05),JC-1单体比率明显提高(P<0.05),顺铂2μg/mL组补偿糖酵解、基础糖酵解、ATP合成耗氧、基础呼吸值明显降低(P<0.05),JC-1单体比率明显提高(P<0.05);二甲双胍(12.5、25、50、100 mmol/L)可抑制EC9706细胞的活力(P<0.05),二甲双胍15 mmol/L组补偿糖酵解、线粒体代谢与基础糖酵解比值、糖酵解潜能、ATP合成耗氧、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧、备用呼吸能力明显降低,JC-1单体比率明显提高(P<0.05);与顺铂2μg/mL组相比,顺铂2μg/mL+六君子汤100μg/mL组细胞活力、补偿糖酵解、基础糖酵解速率、线粒体代谢与基础糖酵解比值、糖酵解潜能、ATP合成耗氧量、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧和备用呼吸能力明显降低,JC-1单体比率明显提高(P<0.05)。结论:六君子汤增强顺铂对EC9706细胞活力抑制作用,二者在调节食管癌EC9706细胞的糖酵解能力、线粒体呼吸能力和线粒体膜电位方面有协同作用。

关键词：六君子汤食管癌能量代谢顺铂健脾和胃法

补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病模型小鼠肺泡巨噬细胞胞葬功能及PPARγ通路的影响

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中医杂志 2021年第23期62卷 2084-2091页

作者：武颖烁尚艺婉孟丹华周哲旭陈星吴耀松任闪闪刘燕陈玉龙河南中医药大学河南郑州450000

目的探究补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的可能作用机制。方法60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、补肺益肾组、抑制剂组、抑制剂合补肺益肾组,每组12只。除空白组外其余各组小鼠采用香烟烟雾熏吸8周的方法制备小鼠COPD模... 详细信息

目的探究补肺益肾方治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的可能作用机制。方法60只C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、补肺益肾组、抑制剂组、抑制剂合补肺益肾组,每组12只。除空白组外其余各组小鼠采用香烟烟雾熏吸8周的方法制备小鼠COPD模型。造模后补肺益肾组给予补肺益肾方溶液5.31 g/(kg·d)灌胃,腹腔注射生理盐水(雄鼠0.20 ml/次,雌鼠0.15 ml/次);抑制剂组给予过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)通路抑制剂GW96621 mg/(kg·d)腹腔注射,灌胃生理盐水(雄鼠0.25 ml/次,雌鼠0.20 ml/次);抑制剂合补肺益肾组给予补肺益肾方溶液灌胃和腹腔注射GW9662(剂量同上);空白组与模型组小鼠采用生理盐水灌胃及腹腔注射(剂量同上)。各组均每日1次,每周6次。4周后检测小鼠体质量、肺功能指标[包括最终潮气量(TV)、每分钟呼气量(MV)、呼气峰流速(PEF)、50%潮气量呼气流量(EF50)],肺组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL-4)含量,肺泡巨噬细胞胞葬能力、肺组织细胞凋亡指数及巨噬细胞CD163、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、PPARγ表达。HE染色观察肺组织病理变化。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、肺功能指标、肺泡巨噬细胞胞葬能力降低,肺组织匀浆中TNF-α、IL-4含量及肺组织凋亡指数上升,肺泡巨噬细胞CD163、iNOS表达上升,PPARγ表达降低,差异均有统计学意义(P0.05),肺组织匀浆中TNF-α、IL-4含量上升(P<0.05或P<0.01)。结论补肺益肾方可能通过调控COPD模型小鼠肺泡巨噬细胞胞葬功能及PPARγ通路起到治疗COPD的作用。

关键词：慢性阻塞性肺疾病补肺益肾方巨噬细胞胞葬能力过氧化物酶增殖物激活受体γ通路

基于AKT/mTOR通路探讨六君子汤抑制EC9706生长的作用机制

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 180-185页

作者：尚艺婉武颖烁孟丹华陈星刘洋周哲旭刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学中医学院(仲景学院) 郑州450046 中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 河南中医药大学河南省方证信号传导重点实验室郑州450046

目的:探讨六君子汤对食管癌细胞EC9706的生长抑制作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测六君子汤对EC9706细胞的活性抑制作用,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期分布,Seahorse能量代谢分析系统检测细胞糖酵解速率和线粒体压力,实时荧光定量P... 详细信息

目的:探讨六君子汤对食管癌细胞EC9706的生长抑制作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)法检测六君子汤对EC9706细胞的活性抑制作用,流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期分布,Seahorse能量代谢分析系统检测细胞糖酵解速率和线粒体压力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和蛋白激酶B1(AKT1)mRNA相对表达,Western Blot检测各组细胞磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、mTOR和AKT1/2/3蛋白相对表达。结果:六君子汤浓度为200、300、400μg/mL时可显著抑制EC9706细胞活性(P<0.01)。选定六君子汤150、200μg/mL用于后续实验。流式细胞术结果表明,六君子汤可显著促进EC9706细胞凋亡(P<0.01),六君子汤200μg/mL可显著延长细胞S期,缩短G2/M期(P<0.05);糖酵解速率检测结果显示,六君子汤200μg/mL可显著抑制EC9706细胞的基础糖酵解、补偿糖酵解和糖酵解潜能(P<0.05);线粒体压力测试结果显示,六君子汤150μg/mL可显著抑制EC9706细胞ATP合成耗氧、基础呼吸值和非线粒体耗氧(P<0.05,P<0.01),六君子汤200μg/mL可显著抑制EC9706细胞的ATP合成耗氧、线粒体最大耗氧能力、基础呼吸值、非线粒体耗氧和备用呼吸能力(P<0.01);qRT-PCR结果显示,六君子汤150、200μg/mL可使EC9706细胞mTOR mRNA相对表达显著降低(P<0.05,P<0.01);六君子汤200μg/mL使EC9706细胞AKT1mRNA相对表达显著降低(P<0.01)。Western Blot结果显示,六君子汤150、200μg/mL可显著抑制p-mTOR和AKT1/2/3蛋白相对表达(P<0.05,P<0.01),六君子汤200μg/mL可显著抑制mTOR蛋白相对表达(P<0.01)。结论:六君子汤可通过干预AKT/mTOR通路促进食管癌细胞EC9706凋亡,诱导细胞周期阻滞,抑制细胞的能量代谢和生长。

关键词：食管癌六君子汤 EC9706 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白