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口服VEGFR-2 DNA疫苗抗小鼠Lewis肺癌血管生成的实验研究

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口服VEGFR-2 DNA疫苗抗小鼠Lewis肺癌血管生成的实验研究

作者：武翠玲昆明医学院

学位级别：硕士

目的：研究以VEGFR-2为靶点的口服DNA疫苗抗C57BL／6小鼠Lewis肺癌生长和转移的作用，并探讨其可能的作用机制。方法：将C57BL／6小鼠分为三个大组，每个大组内又随机分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组，经口服免疫小鼠三次后，建立肺... 详细信息

目的：研究以VEGFR-2为靶点的口服DNA疫苗抗C57BL／6小鼠Lewis肺癌生长和转移的作用，并探讨其可能的作用机制。方法：将C57BL／6小鼠分为三个大组，每个大组内又随机分为疫苗组、空质粒组和生理盐水组，经口服免疫小鼠三次后，建立肺癌动物模型。第一大组用3LL细胞建立肺癌皮下移植瘤动物模型，记录小鼠的死亡时间，比较各组小鼠的累计生存率和中位生存期。第二大组用3LL细胞建立肺癌皮下移植瘤动物模型，记录小鼠皮下肿瘤生长情况;采用流式细胞术监测小鼠外周血CD3、CD4、CD8T淋巴细胞水平，评价小鼠免疫功能;记录各组小鼠离体肿瘤体积、肿瘤湿重;免疫组织化学法计数肿瘤微血管密度(MVD)，观察疫苗对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长的抑制作用，并探讨可能的作用机制。第三大组小鼠尾静脉注射3LL细胞，建立肿瘤肺转移动物模型，采用流式细胞术监测各组小鼠外周血CD44v阳性细胞;体视学方法计数肺脏肿瘤转移病灶，肺组织病理切片HE染色鉴定转移病灶，观察疫苗抑制小鼠肺转移癌的情况。结果：1．建立了小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤模型和肺转移癌模型。2．疫苗组小鼠的累计生存率与空质粒组、生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05);疫苗组的中位生存期为48天，空质粒组32天，生理盐水组31天。3．疫苗抑制小鼠Lewis肺癌生长作用的研究结果显示：1)疫苗组小鼠肿瘤生长缓慢，而空质粒组和生理盐水组肿瘤生长较快;疫苗组、空质粒组、生理盐水组的离体肿瘤体积分别为448.41±194.00、1355.39±468.91、1280.15±264.49，肿瘤重量分别为2.05±1.32、4.83±1.47、5.12±1.02，平均微血管密度分别为1.75±1.07、6.89±2.52、7.57±3.75，重组疫苗组与其他两组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)，而空质粒组和生理盐水组比较，差异均无统计学意义(P＞0.05)。2)流式细胞术检测结果显示：免疫前三组之间CD3、CD4、CD8 T细胞计数，CD4／CD8比值均无统计学意义(P＞0.05)，免疫后疫苗组CD3、CD4、CD+T细胞较免疫前明显增高(P＜0.05)，和空质粒组、生理盐水组比较差异有统计学意义(P＜0.05);接种肿瘤以后，空质粒组和生理盐水组CD3、CD4、CD8T细胞计数，CD4／CD8比值明显降低(P＜0.05)，和疫苗组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。3．疫苗抑制小鼠Lewis肺转移癌研究结果显示：1)重组疫苗能显著抑制荷瘤小鼠肺转移，疫苗组、空质粒组、生理盐水组的肺转移瘤结节分别为0.7+0.48、2.10±0.74、2.30±0.68。2)流式细胞术显示：在接种肿瘤后空质粒组和生理盐水组外周血CD44v阳性细胞计数明显高于疫苗组，差异有统计学意义(P＜0.05)，生理盐水组和空质粒组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：1．该口服DNA疫苗能延长Lewis肺癌小鼠的生存时间。2．该口服DNA疫苗能通过抑制肺癌血管生成而抑制肿瘤的生长。3．该口服DNA疫苗对Lewis肺癌的C57BL／6小鼠肺转移具有抑制作用。4．该口服DNA疫苗的作用机制，可能是通过打破机体对自身抗原的免疫耐受而激活细胞免疫，杀伤过表达VEGFR-2的肿瘤血管内皮细胞，抑制肿瘤血管生成，进而抑制肺癌生长和转移。

关键词： VEGFR-2 DNA疫苗 Lewis肺癌血管生成生长和转移

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马勃多糖的分离纯化与基本结构研究

马勃多糖的分离纯化与基本结构研究

作者：武翠玲四川大学

学位级别：硕士

本文以药用植物马勃为研究对象，研究其多糖的提取、分离纯化、结构以及理化性质，为揭示马勃多糖的结构与活性的关系，进一步开发利用此类资源初步奠定了基础。主要研究内容与结论如下：马勃经热水浸提，用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，... 详细信息

本文以药用植物马勃为研究对象，研究其多糖的提取、分离纯化、结构以及理化性质，为揭示马勃多糖的结构与活性的关系，进一步开发利用此类资源初步奠定了基础。主要研究内容与结论如下：马勃经热水浸提，用Sevage法脱蛋白，乙醇沉淀，得到马勃粗多糖。粗多糖经DEAE-sepharose fast flow离子交换层析和Sephacryl S-300 HR凝胶层析进一步纯化得到三个主要多糖组分：CGPⅠ-1，CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ。三种多糖分别经Sephacryl S-300 HR凝胶层析检测显示单一对称峰，琼脂糖电泳呈现单一斑点，紫外260nm，280nm扫描没有吸收峰，证明三种多糖为不含蛋白、核酸的均一组分。通过Sephacryl S-300 HR凝胶层析测定CGPⅠ-1，CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ的表观分子质量分别为9.12×10Dal，18.6×10Dal，15.6×10Dal;纸层析和GC-MS分析三种多糖中的单糖组成和摩尔比，研究发现CGPⅠ-1含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖，其摩尔比为1.22∶11.28∶3.92;CGP-Ⅱ含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖，其摩尔比为1.74∶26.45∶0.36，CGP-Ⅲ含有甘露糖、葡萄糖、半乳糖，其摩尔比1.06∶9.9∶3.29。CNMR图谱和咔唑-硫酸法研究均表明CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ中含有糖醛酸，用咔唑-硫酸法测得CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ中的糖醛酸含量分别为17.2％和20.5％。三种多糖的紫外光谱显示，它们的最大紫外吸收峰具有随糖浓度的降低向低波长漂移的现象。红外光谱显示，在1420 cm，2920 cm，3400 cm左右均具有多糖的特征吸收峰。三种多糖均为吡喃糖，通过对核磁共振图谱的解析进一步证实的CGPⅠ-1为多不含糖醛酸的中性多糖，同时具有α、β两种键型。而CGP-Ⅱ，CGP-Ⅲ则以β型差向异构为主，由高碘酸氧化和Smith降解得知CGPⅠ-1中存在大量的1→6、1→键型，且与1→4／1→4，6键的摩尔比为7.8∶5.5，CGP-Ⅱ中1→6，1→，和1→4／1→4，6键，摩尔比为7.4∶7.9。CGP-Ⅲ中其摩尔比为8.4∶9.3。三种多糖主链中都存在不被高碘酸氧化的Glc(1→3)键型。通过原子力显微镜对CGPⅠ-1的分子形貌观察，发现其为高度分支结构，高浓度时易形成强大的网络结构。

关键词：马勃生物活性多糖药用植物

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TMO（中国）公司售后服务流程优化研究

TMO（中国）公司售后服务流程优化研究

作者：武翠玲山东大学

学位级别：硕士

随着中国科学仪器需求的快速增长,巨大市场空间吸引着国内外各大科学仪器企业加速对中国市场投资及布局。市场竞争趋于白热化。产品质量的趋同及客户需求的多样化,让售后服务的重要性日益突出,企业希望通过售后服务的差异化来提高核心... 详细信息

随着中国科学仪器需求的快速增长,巨大市场空间吸引着国内外各大科学仪器企业加速对中国市场投资及布局。市场竞争趋于白热化。产品质量的趋同及客户需求的多样化,让售后服务的重要性日益突出,企业希望通过售后服务的差异化来提高核心竞争力。售后服务的特性导致其内容纷繁复杂,内部业务流程的运作效率严重影响其服务质量。但售后服务组织内部流程数量众多,跨部门合作效率很低,部门壁垒较高,信息化建设滞后于业务发展的需要,组织结构不够“扁平化”,导致流程不够简化高效,非增值活动较多,增加了服务运营成本,影响了客户满意度和员工满意度。TMO(中国)公司作为行业的领导者也面临同样的困境。作面向客户的窗口组织,如何依据服务管理理论对售后服务进行科学的管理,借助流程管理理论持续改进流程,提高客户满意度,是TMO(中国)公司售后服务部急需解决的问题。本文以TMO(中国)公司售后服务部业务流程优化为研究对象,通过对服务管理理论及流程管理理论的学习与研究,具体阐述并实践参与了TMO(中国)公司售后服务部流程问题的分析及新流程的构建,并提出四项新流程实施的保障措施。经过实际实践,优化后的绩效考核指标得到了明显提高。TMO(中国)公司售后服务部业务流程优化的证实了流程优化是解决售后服务运营问题的有效途径。在具体应用与实施中,本文首先分析了TMO(中国)公司售后服务遇到的问题,分析了流程存在的问题,梳理了售后服务的流程体系,利用绩效重要性矩阵选出了急需优化的三个关键业务流程：客户服务请求处理流程、服务销售合同处理流程及维修工具管理流程。通过对此三个关键业务流程的进行深度的剖析,利用流程优化方法,构建了新的额这三个流程,并提出了新流程实施的保障措施。TMO(中国)公司售后服务部的流程优化研究证实了流程优化是改善售后服务质量,提高服务运营效率的有效方法。

关键词：流程管理售后服务服务管理 TMO公司

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硒化牡丹籽粕多糖的抗氧化研究

食品与发酵工业 2020年第17期46卷 174-179页

作者：裴晋红宋英达武翠玲长治医学院山西长治046000

为了研究硒化牡丹籽粕多糖的抗氧化活性,水提醇沉法提取牡丹籽粕粗多糖,离子交换层析制备牡丹籽粕多糖(peony seed dreg polysaccharides,PSDP)PSDPⅠ、PSDPⅡ及PSDPⅢ。硝酸-亚硒酸钠法对PSDPⅢ进行硒化修饰得Se-PSDPⅢ。采用体外抗氧... 详细信息

为了研究硒化牡丹籽粕多糖的抗氧化活性,水提醇沉法提取牡丹籽粕粗多糖,离子交换层析制备牡丹籽粕多糖(peony seed dreg polysaccharides,PSDP)PSDPⅠ、PSDPⅡ及PSDPⅢ。硝酸-亚硒酸钠法对PSDPⅢ进行硒化修饰得Se-PSDPⅢ。采用体外抗氧化实验,评价Se-PSDPⅢ对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基(·OH)的清除作用及对DNA氧化损伤的抑制作用。并以巨噬细胞RAW264.7建立H 2O 2诱导的氧化损伤细胞模型,探讨Se-PSDPⅢ在细胞水平的抗氧化能力。结果表明:Se-PSDPⅢ具有较好的体外清除自由基的能力和抑制DNA氧化损伤的能力。细胞模型法评价结果显示,Se-PSDPⅢ可以降低H 2O 2诱导的巨噬细胞RAW264.7内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成。此外,Se-PSDPⅢ可以升高细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的活力。因此,硒化牡丹籽粕多糖作为潜在的抗氧化物,可用于功能产品的开发。

关键词：牡丹籽粕多糖硒化修饰 DPPH自由基清除率抗氧化

IL-17调控溃疡性结肠炎分子机制的生物信息学分析

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第1期39卷 21-25页

作者：武翠玲任晨霞长治医学院生物化学教研室山西长治046000 长治医学院中心实验室山西长治046000

目的利用生物信息学方法分析溃疡性结肠炎(UC)的枢纽基因和关键通路。方法通过基因表达数据库(GEO)下载UC表达谱芯片GSE134025。利用R语言的Limma包筛选UC组与正常组肠黏膜细胞差异表达基因,对这些基因进行GO和KEGG分析;利用STRING数据... 详细信息

目的利用生物信息学方法分析溃疡性结肠炎(UC)的枢纽基因和关键通路。方法通过基因表达数据库(GEO)下载UC表达谱芯片GSE134025。利用R语言的Limma包筛选UC组与正常组肠黏膜细胞差异表达基因,对这些基因进行GO和KEGG分析;利用STRING数据库构建蛋白互作网络(PPI)并将结果导入Cytoscape筛选出核心基因;利用KEGG mapper绘制核心基因所在的信号通路图。结果筛选出190个差异表达基因,其中147个上调,43个下调。GO分析结果表明,差异表达基因主要涉及炎症反应、细胞增殖的正调控等生物学过程,主要富集于细胞膜、质膜等细胞成分,具有肝素结合、生长因子等分子功能。KEGG分析显示差异基因主要富集于趋化因子信号通路,细胞因子受体相互作用等相关信号通路。从PPI网络中筛选出10个枢纽基因:白细胞介素6(IL-6)、CXC趋化因子配体8(CXCL8)、CXCL10、CXCL1、CXCL9、膜联素A1(ANXA1)、IL-1β、CC趋化因子配体20(CCL20)、CXCL2、CXCL11,其中多个基因位于IL-17调控的信号通路下游。结论发现了10个与UC发病风险相关的枢纽基因,IL-17可能通过这些核心基因调控UC的发生发展。

关键词：溃疡性结肠炎基因表达数据库蛋白互作网络核心基因

脂多糖结合蛋白在胃癌组织中的表达及其意义的生物信息学分析

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中国免疫学杂志 2021年第10期37卷 1201-1209页

作者：任晨霞武翠玲韩鹏勇长治医学院中心实验室长治046000

目的:通过生物信息学方法分析脂多糖结合蛋白(LBP)在胃癌组织中的表达及意义。方法:从Ualcan数据库获取正常胃组织及胃癌组织LBP表达数据,利用GEPIA数据库分析LBP表达与胃癌患者预后的关系,在LinkedOmics中检索LBP在胃癌中的共表达基因... 详细信息

目的:通过生物信息学方法分析脂多糖结合蛋白(LBP)在胃癌组织中的表达及意义。方法:从Ualcan数据库获取正常胃组织及胃癌组织LBP表达数据,利用GEPIA数据库分析LBP表达与胃癌患者预后的关系,在LinkedOmics中检索LBP在胃癌中的共表达基因,通过GO富集分析、KEGG通路分析确定这些基因参与的生物学过程及功能。最后利用STRING数据库分析相关基因编码蛋白的互作网络。结果:与正常胃组织相比,Ⅰ和Ⅲ分期、老年和男性患者胃癌组织中LBP表达水平均明显升高,但与幽门螺杆菌感染与否无显著相关性。在胃癌中与LBP共表达的基因主要涉及急性炎症反应、激活蛋白级联、蛋白质-脂质复合物亚基组织等生物学过程,介导货物受体活性、脂多糖结合、蛋白质-脂质复合物的绑定、糖胺聚糖绑定等分子功能,富集于血液微粒、蛋白质-脂质复合物、内质网腔等细胞组分。富集的KEGG信号通路主要与补体和凝血级联、胆固醇代谢、PPAR信号等通路相关。LBP高表达患者的总生存率和无病生存率明显低于LBP低表达患者。LBP蛋白与TLR4、STAT3、IL-6、STAT6、IL-4、IL-10、JAK1、JAK2、JAK3、SOCS3等存在互作关系。结论:LBP在胃癌组织中高表达,且与胃癌的发生、发展及预后密切相关,可以作为胃癌筛选、预后预测的标志物之一。

关键词：胃癌脂多糖结合蛋白生物信息学分析共表达分析

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医学检验分析前阶段质量控制探讨

基层医学论坛 2012年第23期16卷 3079-3080页

作者：武翠玲中铁十七局集团中心医院山西太原030032

医学检验分析前阶段质量控制是临床检验室质量保证体系中最重要、最关键的环节之一,其对减少实验室误差,提高检验质量是非常重要的。为了提高临床检验结果的准确性,对分析前质量控制的内容、要素进行分析十分必要。在可分析出原因的不... 详细信息

医学检验分析前阶段质量控制是临床检验室质量保证体系中最重要、最关键的环节之一,其对减少实验室误差,提高检验质量是非常重要的。为了提高临床检验结果的准确性,对分析前质量控制的内容、要素进行分析十分必要。在可分析出原因的不准确检验报告中,80%可溯源至实验室分析前质量控制操作程序的不规范所致。因此,分析前质量控制是保证检验结果准确、有效的先决条件。

关键词：分析前质量控制内容要素分析

接种流行性出血热疫苗引起反复发作荨麻疹1例

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职业与健康 2002年第6期18卷 148-149页

作者：武翠玲河北省秦皇岛市海港区卫生防疫站 066000

1病例介绍患者,刁某,男,45岁,于2001年5月6日10时,在当地卫生院注射第2针流行性出血热疫苗.(疫苗批号:20010403,失效期:2002年4月,沈阳百奥生物技术有限责任公司生产.)经常规消毒上臂三角肌附着处皮肤后,肌内注射1 ml出血热疫苗.

关键词：接种流行性出血热疫苗反复发作荨麻疹

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预防接种疫苗不良反应二例分析

中国全科医学 2013年第8期16卷 938-939页

作者：张丽洁王远红武翠玲班瑞河北省秦皇岛市第四医院 066000 秦皇岛市海港区疾控中心秦皇岛市中心血站

疫苗可以有效控制甚至消灭威胁人类健康的传染病。疫苗作为一种生物制品,对于接种疫苗的个体是一种异物,接种后有可能引起一系列的生理功能紊乱、病理变化及免疫反应,接种疫苗有发生不良反应的风险,但是拒绝疫苗又将直接危及公共卫生防... 详细信息

疫苗可以有效控制甚至消灭威胁人类健康的传染病。疫苗作为一种生物制品,对于接种疫苗的个体是一种异物,接种后有可能引起一系列的生理功能紊乱、病理变化及免疫反应,接种疫苗有发生不良反应的风险,但是拒绝疫苗又将直接危及公共卫生防疫屏障的建立。接种疫苗出现不良反应的风险远小于不开展预防接种而造成的传染病传播的风险。如果错误地判断风险关联及风险的所属性,可能破坏公众对疫苗的信心及对疫苗的接受程度,并造成灾难性发病率的后果,对预防接种后不良反应处理不当,会在社会上造成不良影响,本文以疫苗接种后出现的不良反应为例,探讨接种疫苗不良反应的表现及应对措施。

关键词：接种水痘疫苗肺炎球菌菌苗不良反应