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染色体分化染色法(Giemsall)在杂交细胞系中的应用

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解剖学通报 1983年第4期 368-370,390页

作者：田竞生武纯静北京市肿瘤防治研究所遗传室

在杂交细胞系(中国地鼠——人类细胞杂交或小鼠——人类细胞杂交)中。如何识别人类染色体是绘制人类基因图研究中的一大难题。尽管可用染色体的酶标记即同功酶电泳法来区分,但是耗费的试剂和时间甚多,因此如要建立含单条人类染色体的DN... 详细信息

在杂交细胞系(中国地鼠——人类细胞杂交或小鼠——人类细胞杂交)中。如何识别人类染色体是绘制人类基因图研究中的一大难题。尽管可用染色体的酶标记即同功酶电泳法来区分,但是耗费的试剂和时间甚多,因此如要建立含单条人类染色体的DNA文库,采用同功酶电泳法,以一个人的工作量计算两年方可完成。而用染色体分化染色只需要两个月则可获得同样满意的结果。

关键词：杂交细胞人类中国地鼠染色体 Giemsall 染色法

细胞松弛素B诱导离体乳腺肿瘤前细胞和乳腺肿瘤细胞产生多核细胞的差异

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国外医学(肿瘤学分册) 1980年第6期 265-266页

作者：武纯静

本文报导BALB/C小鼠正常乳腺,增生乳腺,原发肿瘤和移植性肿瘤细胞对细胞松弛素B(Cytochalasin B)反应产生多核细胞的差异,认为多核细胞增加与不可控制的核分裂有关。正常乳腺取自妊娠16-18天母鼠,肿瘤前乳腺来自增生的腺泡小结在同种小... 详细信息

本文报导BALB/C小鼠正常乳腺,增生乳腺,原发肿瘤和移植性肿瘤细胞对细胞松弛素B(Cytochalasin B)反应产生多核细胞的差异,认为多核细胞增加与不可控制的核分裂有关。正常乳腺取自妊娠16-18天母鼠,肿瘤前乳腺来自增生的腺泡小结在同种小鼠乳腺脂肪垫中连续移植增殖的组织,乳腺腺癌来自增生的腺泡小结接种小鼠生长的原发肿瘤,移植性肿瘤来自在同种小鼠中长期传代的原发肿瘤。致瘤细胞系与非致瘤细胞系分别作阳性对照和阴性对照,包括小鼠乳腺细胞系ESD/

关键词：乳腺肿瘤多核细胞原发肿瘤移植性乳腺细胞系细胞松弛素细胞分裂抑素离体差异

癌基因c-Ha-ras反义RNA对细胞恶性表型的逆转作用

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中华医学杂志 1989年第6期69卷 341-342页

作者：邓国仁刘景梅路桂荣武纯静许毅胥薇鄂征北京市肿瘤防治研究所

DNA转染及动物实验证明从胃癌细胞株BGC-823中克隆出的活化癌基因c-Ha-ras不但可使大鼠初代成纤维细胞REF在癌基因v-myc的参与下获得恶性生长的表型,而且也可使小鼠成纤维细胞系NIH-3T3获得在裸鼠中转移的表型。上述细胞可分别被转化成R... 详细信息

DNA转染及动物实验证明从胃癌细胞株BGC-823中克隆出的活化癌基因c-Ha-ras不但可使大鼠初代成纤维细胞REF在癌基因v-myc的参与下获得恶性生长的表型,而且也可使小鼠成纤维细胞系NIH-3T3获得在裸鼠中转移的表型。上述细胞可分别被转化成REF4-3和NIH GCM。为了进一步阐明活化癌基因c-Ha-ras的作用,探索恶性细胞逆转的可能性,我们用可在哺乳动物中表达c-Ha-ras反义RNA的质粒pER2.0AS与G418抗性质粒pSV2neo共同对REF4-3和NIH GCM进行转染,经G418筛选后获得含pER2.0AS和pSV2neo的细胞集落。

关键词：癌基因 C-Ha-ras 反义RNA

家族性46,XY型性腺发育不全和高发胚胎性肿瘤研究——Ⅲ.46,XY型性腺发育不全患者成纤维细胞系(TGD-8F)的建立

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中华肿瘤杂志 1983年第1期05卷 29-30页

作者：鄂征徐新来武纯静唐清秀李赤刘平北京市肿瘤研究所细胞遗传研究室

先天性性腺发育不全症中,以46,XY型性腺发育不全(46,XYGD)特别引起人们的注意和兴趣,该症特点为易继发癌症。我们研究的一例46,XY GD集聚性家庭同胞姐妹中,已有4人发生了性腺胚胎性肿瘤。为深入研究该症易发癌症机理以及它和遗传的关系... 详细信息

先天性性腺发育不全症中,以46,XY型性腺发育不全(46,XYGD)特别引起人们的注意和兴趣,该症特点为易继发癌症。我们研究的一例46,XY GD集聚性家庭同胞姐妹中,已有4人发生了性腺胚胎性肿瘤。为深入研究该症易发癌症机理以及它和遗传的关系,从患家的一个受累女孩建立了一成纤维细胞系,并做了有关细胞生物学鉴定,现报道如下。

关键词：性腺发育不全 46 XY/并发症肿瘤生殖细胞和胚胎性

INHIBITED NEOPLASTIC PHENOTYPE BY THE c-Ha-ras ANTISENSE RNA

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Science China Chemistry 1991年第12期34卷 1485-1491页

作者：路桂荣武纯静柯杨熊辛李延钧刘景梅许毅胥薇李吉友邓国仁鄂征 Beijing Institute for Cancer Research Beijing 100034 PRC

A 2.0 kb fragment DNA plasmid which expresses antisense to the upstream first exon of c-Ha-ras oncogene was transfected into Ha-ras transformed cell lines, GCM-3T3 and REF-4.3. The transfection leads to the inhibition of malignant behaviour, shown by decreasing of growth speed, colony forming ability on soft agar, tumorigenicity in nude mice and increasing ot differentiation degree. In GCM-3T3 cells the lung metastasis frequency became much less (from 60% to 12.5%) after the transfection and the expression of ras oncogene product, and p21 protein was obviously decreased in the transfected cells. This work has first shown the inhibitory effect of antisense RNA on neoplastic behaviour in China.

关键词： antisense RNA malignant cell reversion c-Ha-ras oncogene cell transfection.

中草药光敏剂的筛选及对人胃癌细胞系光动力学杀伤效应的研究

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中国中西医结合杂志 1997年第12期17卷 726-729页

作者：廖静李萍萍武纯静鄂征王淑珍李淑莲首都医科大学病理教研室北京市肿瘤防治研究所白求恩医科大学

目的：筛选中草药抗癌光敏剂，寻求中药用于肿瘤光动力学疗法新途径的可能性。方法：检测了１３种中草药提取液的荧光激发波长、发射波长；它们被ＢＧＣ－８２３人胃癌细胞（简称８２３细胞）摄取后的细胞荧光强度；提取液在固定细胞和... 详细信息

目的：筛选中草药抗癌光敏剂，寻求中药用于肿瘤光动力学疗法新途径的可能性。方法：检测了１３种中草药提取液的荧光激发波长、发射波长；它们被ＢＧＣ－８２３人胃癌细胞（简称８２３细胞）摄取后的细胞荧光强度；提取液在固定细胞和活细胞染色中荧光物质的分布。亲和部位，以及ｐＨ值对提取液染色细胞荧光强度的影响。在此基础上，进一步选择性进行了光敏抗癌实验。结果：１３种中草药中，黄柏、黄连为最理想的荧光剂。与加药不照光的对照组比较，黄连在照光实验组，使８２３细胞代谢活力、增殖能力明显降低，并使癌细胞死亡率明显增高。结论：中药具有成为新的抗癌光敏剂的潜力和将来用于肿瘤光动力学疗法的可能性。

关键词：中草药光敏剂胃癌中医药疗法

H-ras上游区2.5 Kb片段基因对提高H-ras基因转化活性及表达的研究

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北京大学学报(医学版) 1990年第2期22卷 96-96页

作者：武纯静邓国仁鄂征北京市肿瘤防治研究所

BGC-H-ras胃癌基因是我所从胃癌BGC-823细胞系中克隆出的一段具有转化活性的基因,在它的上游区我们又克隆出了一段BamHI2.5kb的基因片段。本试验在细胞水平对2.5kb片段基因在提高H-ras基因的转化活性和表达中的作用进行了探讨研究。本... 详细信息

BGC-H-ras胃癌基因是我所从胃癌BGC-823细胞系中克隆出的一段具有转化活性的基因,在它的上游区我们又克隆出了一段BamHI2.5kb的基因片段。本试验在细胞水平对2.5kb片段基因在提高H-ras基因的转化活性和表达中的作用进行了探讨研究。本实验转染分别采用磷酸钙沉淀及电穿孔(elect-roporation)转染方法。受体细胞选用大鼠成纤维细胞系Rat-1。实验分4组:2.5kb片段组;BGC-H-ra

关键词：裸鼠转化细胞 Kb H-ras 上游区

人类癌症并不经常发生P21蛋白第12氨基酸的突变

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国外医学(肿瘤学分册) 1983年第6期10卷 367-344页

作者：游伟程董志伟张坚一田竞生武纯静谭景莹

最近的研究指出人膀胱癌细胞株细胞致癌基因C-Ha-ras 发生了点突变,C-Ha-ras 基因产物是P21,突变将P21第12氨基酸从甘氨酸转变为缬氨酸,突变后的P21的膀胱癌细胞株DNA 转化N1H3T3 细胞的能力有关.其他有关ras 基因的P21经突变后似

关键词：膀胧癌细胞致癌基因人类癌症 P21 点突变基因突变癌细胞株肺癌肺肿瘤密码子氨基酸氨基羧酸基因产物

人胃癌次黄嘌呤-鸟便嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷株的建立

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解剖学报 1987年第3期 255-259页

作者：田竟生王爱民武纯静金桂芳蔡玉辉谷钰之北京市肿瘤防治研究所遗传室北京医科大学人民医院外科试验室

本研究首先用化学突变剂MNNG处理人胃癌细胞系(BGC 823),以提高突变率。然后用递增浓度的鸟便嘌呤类似物8-AG选择次黄嘌呤-鸟便嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷细胞,8-AG递增浓度为1~20μg/ml,历时半年。获得抗8-AG毒性的突变细胞,在HAT... 详细信息

本研究首先用化学突变剂MNNG处理人胃癌细胞系(BGC 823),以提高突变率。然后用递增浓度的鸟便嘌呤类似物8-AG选择次黄嘌呤-鸟便嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺陷细胞,8-AG递增浓度为1~20μg/ml,历时半年。获得抗8-AG毒性的突变细胞,在HAT培养基中不能生存。经HGPRT酶的同位素法测定,发现野生型与突变型的BGC 823细胞有明显差别。本文还对缺陷型BGC 823的A、B、C、D、E、F株的应用进行了讨论。

关键词：人类细胞系 HGPRT缺陷株胃癌