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诱导多功能干细胞的研究进展

中国组织工程研究与临床康复 2011年第23期15卷 4344-4350页

作者：王格陈哲武栋成武汉大学湖北省武汉市430071 武汉大学生物化学系武汉红桥脑科医院湖北省武汉市430071

背景:由于胚胎干细胞移植存在致瘤性和伦理学争议,有关胚胎干细胞的研究及临床应用存在较大的限制。2006年Yamanaka实验室利用Oct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc4种因子将鼠成纤维细胞重编程为诱导多功能干细胞,标志着一种新型类胚胎干细胞的... 详细信息

背景:由于胚胎干细胞移植存在致瘤性和伦理学争议,有关胚胎干细胞的研究及临床应用存在较大的限制。2006年Yamanaka实验室利用Oct3/4、Sox2、Klf4、c-Myc4种因子将鼠成纤维细胞重编程为诱导多功能干细胞,标志着一种新型类胚胎干细胞的问世。目的:了解诱导多功能干细胞的研究进展和应用前景。方法:由第一作者检索2006/2010PubMed数据库(http://***/PubMed)及万方数据库(http://***/)有关诱导多功能干细胞的产生、细胞特征、产生技术的研究进展及应用前景等方面的文章,英文检索词为"induced pluripotent stem cells,defined factors,reprogramming,vectors,disease",排除重复性研究,共保留其中的69篇进行归纳总结。结果与结论:诱导多功能干细胞研究在诱导因子种类,因子导入方式,重编程效率及应用研究等诸多方面取得进展。然而体细胞重编程为诱导多功能干细胞仍存在一定的风险,重编程效率还非常低。一旦解决诱导多功能干细胞的安全性和重编程效率问题,诱导多功能干细胞就可被广泛应用于疾病模型,药物测试,细胞移植及患者和疾病特异性多功能干细胞的建立等诸多方面。

关键词：诱导多功能干细胞重编程因子载体效率

他克林对星形孢菌素诱导NG108-15细胞凋亡的保护作用

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中国药科大学学报 2002年第4期33卷 344-347页

作者：彭芳芳张百芳章江洲武栋成武汉大学医学院生物化学教研室武汉430071

目的　用星形孢菌素诱导 NG1 0 8-1 5细胞损伤建立凋亡模型 ,观察乙酰胆碱酯酶 (ACh E)抑制剂他克林是否具有抗凋亡作用。方法　 LDH活性测定判断细胞损伤状况 ,DNA染料 Hoechst3 3 3 42染色观察细胞核形态 ,SDS-PAGE和 Western blot印... 详细信息

目的　用星形孢菌素诱导 NG1 0 8-1 5细胞损伤建立凋亡模型 ,观察乙酰胆碱酯酶 (ACh E)抑制剂他克林是否具有抗凋亡作用。方法　 LDH活性测定判断细胞损伤状况 ,DNA染料 Hoechst3 3 3 42染色观察细胞核形态 ,SDS-PAGE和 Western blot印迹分析 Bax及 Bcl-2的蛋白表达水平。结果　 NG1 0 8-1 5细胞经 0 .1μmol/ L星形孢菌素处理 2 4h,细胞内大量 LDH释放至培养液中 ,用 0 .1 mmol/ L 他克林预处理 2 h可使 LDH释放量由 45 %减至 3 2 % (P<0 .0 1 )。他克林预处理能延迟和减少星形孢菌素诱导的 Bax表达的上调 ,同时增加了星形孢菌素诱导 1 2～ 2 4h后 Bcl-2的表达水平。结论　他克林预处理对星形孢菌素诱导的凋亡性损伤有显著保护作用 ,可能通过抑制或延迟 Bax表达及促进

关键词： NG108-15细胞他克林星形孢菌素乙酰胆碱酯酶抑制剂阿尔茨海默病细胞凋亡

神经干细胞与骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤修复的比较

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武汉大学学报（医学版） 2013年第1期34卷 50-56页

作者：熊文平江普查武栋成袁先厚武汉大学中南医院神经外科湖北武汉430071 武汉大学基础医学院生物化学与分子生物学系湖北武汉430071

目的:比较神经干细胞和骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤效果与机制的差异。方法:用成年Wist-ar大鼠建立脊髓半横切模型,随机分为神经干细胞(NSCs)组(n=10)、骨髓间充质干细胞(BMSC)注射组(n=10)、PBS注射组(n=10)及只打开椎板的假手术... 详细信息

目的:比较神经干细胞和骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤效果与机制的差异。方法:用成年Wist-ar大鼠建立脊髓半横切模型,随机分为神经干细胞(NSCs)组(n=10)、骨髓间充质干细胞(BMSC)注射组(n=10)、PBS注射组(n=10)及只打开椎板的假手术组(n=10)。移植后行BBB运动功能学评分,半切位置的免疫组化及核磁成像比较。结果:BBB评分NSCs注射组明显高于BMSCs注射组,NSCs注射组和BMSCs注射组均明显高于PBS注射组,脊髓切片中可观察到被标记的NSCs及BMSCs,核磁成像显示移植后半切形成的脊髓空洞有所减小。结论:静脉注射NSCs、BMSCs均能改善脊髓损伤大鼠的运动功能,但注射NSCs效果更明显。静脉注射干细胞后,细胞可迁移至脊髓损伤的位置,核磁成像显示脊髓空洞有所减小,提示干细胞可能通过补充或替代损失的神经细胞,修复已缺失的神经组织和功能性神经单位,重建神经环路。

关键词：大鼠脊髓半横切 NSCs BMSCs

乙酰胆碱酯酶抑制剂他克林和多奈哌齐抗星形孢菌素致凋亡作用的比较

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药学学报 2002年第2期37卷 98-106页

作者：张百芳彭芳芳章江洲武栋成武汉大学医学院生物化学教研室湖北武汉430071

目的　用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和多奈哌齐是否具有抗凋亡作用。方法　MTT测定分析细胞损伤状况 ;相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ;... 详细信息

目的　用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和多奈哌齐是否具有抗凋亡作用。方法　MTT测定分析细胞损伤状况 ;相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ;免疫印迹分析Bcl 2和Bax的表达水平。结果　经 0 1mmol·L- 1 他克林预处理后 ,由STS诱导的NG10 8 15细胞凋亡受到明显抑制。多奈哌齐预处理无保护作用。免疫印迹表明他克林可显著抑制Bax的表达 ,同时还可促进Bcl 2的表达。多奈哌齐和他克林预处理对STS诱导的HeLa细胞损伤无明显的保护作用。结论他克林的抗凋亡作用与AChE抑制作用似乎没有明显关联。

关键词：他克林多奈哌齐乙酰胆碱酯酶抑制剂细胞凋亡阿尔茨海默病抗星形孔菌素

骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的应用技术

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中国组织工程研究 2012年第23期16卷 4354-4358页

作者：王格武栋成武汉大学湖北省武汉市430071 武汉大学生物化学系武汉红桥脑科医院湖北省武汉市430071

背景:目前临床上对脊髓损伤患者脊神经的萎缩与坏死缺乏有效的修复方法。研究发现干细胞移植治疗脊髓损伤具有广阔的应用前景。目的:综述骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展。方法:由第一作者检索2001/2011PubMed数据库(http:/... 详细信息

背景:目前临床上对脊髓损伤患者脊神经的萎缩与坏死缺乏有效的修复方法。研究发现干细胞移植治疗脊髓损伤具有广阔的应用前景。目的:综述骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展。方法:由第一作者检索2001/2011PubMed数据库(http://***/PubMed)及万方数据库(http://***/)有关骨髓间充质干细胞、脊髓损伤、细胞移植等方面的文章,英文检索词为"bone marrow mesenchymal stem cells,spinal cord injury,cell transplantation",排除重复性研究,共保留其中的32篇文献进行归纳总结。结果与结论:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究在脊髓损伤模型制作、移植时间、移植方式、移植浓度、联合移植等多方面取得了成就,临床实验在国内外也已有所开展。但移植机制仍不十分明确,临床移植治疗的安全性和疗效需进一步研究。

关键词：脊髓损伤骨髓间充质干细胞细胞移植研究治疗干细胞

逆转录病毒载体导入重组ICAD和ICAD-DM对STS诱导大鼠C6细胞凋亡的影响

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武汉大学学报（理学版） 2004年第2期50卷 223-228页

作者：张雯张百芳彭芳芳武栋成武汉大学医学院湖北武汉430071

为了观察caspase依赖的脱氧核糖核酸酶(CAD)及其抑制剂ICAD对星形孢菌素(STS)诱导的C6细胞凋亡的影响,用含有ICAD/DFF45和caspase抗性的ICAD/DFF45突变体ICAD DM基因的复制缺陷型逆转录病毒载体转染包装细胞,并用产生的病毒感染大鼠神... 详细信息

为了观察caspase依赖的脱氧核糖核酸酶(CAD)及其抑制剂ICAD对星形孢菌素(STS)诱导的C6细胞凋亡的影响,用含有ICAD/DFF45和caspase抗性的ICAD/DFF45突变体ICAD DM基因的复制缺陷型逆转录病毒载体转染包装细胞,并用产生的病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞株C6,筛选获得稳定表达目的蛋白的细胞.结果发现STS可显著诱导ICAD组的C6细胞出现DNA凋亡梯带,而ICAD DM组不出现DNA凋亡梯带;与ICAD DM组相比,STS对ICAD组MTT代谢的抑制作用更强(P<0.05);透射电镜观察显示ICAD DM组的细胞核形态改变弱于ICAD组.表明ICAD/DFF45的切割应在CAD/DFF40的激活中占主导地位,抑制ICAD/DFF45的切割并不能阻止凋亡的发生,但可延迟细胞死亡的速度,对染色质凝聚和核固缩的出现亦有一定抑制作用.

关键词：逆转录病毒载体 caspase依赖脱氧核糖核酸酶 CAD抑制剂星形孢菌素细胞凋亡

神经生长因子撤退诱导神经元样PC12细胞凋亡及HRK/MCL-1基因表达变化

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实用医学杂志 2011年第21期27卷 3834-3838页

作者：沈晗吴少波武栋成广东药学院生命科学与生物制药学院广州市510006 广东省珠海保亚美有限公司 519000 武汉大学医学院生物化学与分子生物学系 430071

目的:探讨神经生长因子(NGF)撤退对已分化神经元样PC12细胞的影响。方法:建立NGF诱导PC12细胞交感神经元样分化模型,观察NGF撤退后,神经元样PC12细胞形态学及超微结构的变化情况,检测凋亡相关基因HRK/MCL-1的表达变化情况。结果:神经元... 详细信息

目的:探讨神经生长因子(NGF)撤退对已分化神经元样PC12细胞的影响。方法:建立NGF诱导PC12细胞交感神经元样分化模型,观察NGF撤退后,神经元样PC12细胞形态学及超微结构的变化情况,检测凋亡相关基因HRK/MCL-1的表达变化情况。结果:神经元样PC12细胞在NGF撤退后,可观察到显著的细胞凋亡样特征性改变,并随着NGF撤退时间的延长,凋亡率不断增加,同时随着NGF撤退时间的延长,促凋亡基因HRK的表达不断增高,而抑凋亡基因MCL-1在撤退24h内表达水平下降明显,撤退24h后变化不显著。结论:NGF撤退确实能诱导已分化的神经元样PC12细胞出现典型的神经元细胞凋亡现象,该现象与凋亡相关基因HRK/MCL-1的表达变化有密切关系。

关键词：神经元 PC12细胞 NGF撤退凋亡

他克林和双他克林抗星形孢菌素致凋亡作用的比较

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生物化学与生物物理进展 2002年第4期29卷 615-620页

作者：彭芳芳张百芳章江洲武栋成武汉大学医学院生物化学教研室武汉430071

用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15细胞和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和双他克林是否具有抗凋亡作用 .相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;噻唑蓝 (MTT)测定分析细胞损伤状况 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ... 详细信息

用星形孢菌素 (STS)诱导NG10 8 15细胞和HeLa细胞凋亡 ,观察他克林和双他克林是否具有抗凋亡作用 .相差显微镜和Hoechst 33342染色观察细胞及胞核形态 ;噻唑蓝 (MTT)测定分析细胞损伤状况 ;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯带 ;蛋白质印迹分析Bcl 2和Bax的表达水平 .结果表明 ,经 0 1mmol/L他克林预处理后 ,由STS诱导的NG10 8 15细胞凋亡受到明显抑制 .双他克林预处理无保护作用 .蛋白质印迹分析表明他克林可显著抑制Bax的表达 ,同时还可促进Bcl 2的表达 .他克林和双他克林预处理对STS诱导的HeLa细胞损伤无明显的保护作用 .结论为 :a 他克林对STS诱导的神经细胞损伤有显著的保护作用 ,但这种保护作用与其AChE抑制作用似乎没有明显关联 .b 他克林对STS损伤的保护作用有细胞选择性 .

关键词：他克林双他克林星形孢菌素 AChE抑制剂细胞凋亡阿尔茨海默病神经细胞损伤抑制作用抗凋亡

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人脐带间充质干细胞的体外免疫调节特性

中国组织工程研究 2020年第7期24卷 1063-1068页

作者：刘梦婷饶巍韩兵肖翠红武栋成武汉汉密顿生物科技股份有限公司研发中心湖北省武汉市430075 武汉大学基础医学院湖北省武汉市430071

背景:人脐带间充质干细胞被应用于治疗多种疾病,包括与免疫相关疾病的临床应用研究。深入研究人脐带间充质干细胞免疫调节特性及其作用途径,是其临床应用的基础。目的:探讨人脐带间充质干细胞的免疫调节特性及作用途径。方法:人脐带间... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞被应用于治疗多种疾病,包括与免疫相关疾病的临床应用研究。深入研究人脐带间充质干细胞免疫调节特性及其作用途径,是其临床应用的基础。目的:探讨人脐带间充质干细胞的免疫调节特性及作用途径。方法:人脐带间充质干细胞与荧光染料CFSE标记的人外周血单个核细胞直接共培养(二者比例为1∶5,1∶10,1∶20),或在Transwell非接触体系中间接共培养(二者比例为1∶5),流式细胞术检测植物血凝素刺激的外周血单个核细胞增殖情况,Th1、Th17及Treg淋巴细胞亚群的比例;ELISA检测炎症因子肿瘤坏死因子α及干扰素γ水平。结果与结论:①直接接触共培养时,人脐带间充质干细胞对植物血凝素刺激的外周血单个核细胞增殖呈显著的剂量依赖性抑制;采用非接触培养体系,外周血单个核细胞的增殖未受明显抑制;②人脐带间充质干细胞共培养显著抑制炎性淋巴细胞Th1、Th17亚群的比例,升高抑制性淋巴细胞Treg的比例;③人脐带间充质干细胞共培养显著性抑制外周血单个核细胞的肿瘤坏死因子α及干扰素γ分泌水平;④结果显示,人脐带间充质干细胞通过细胞间相互接触而对免疫细胞的增殖、分化及其炎症因子的产生发挥抑制性调节作用。

关键词：人脐带间充质干细胞免疫调节免疫抑制炎症抑制淋巴细胞增殖淋巴细胞亚群