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促吞噬肽(Tuftsin)在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的神经功能改善作用

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中国免疫学杂志 2016年第3期32卷 323-326,331页

作者：贾娜武俏丽纪勇徐小林天津医科大学天津300070 天津市环湖医院天津300060

目的:探索促吞噬肽(Tuftsin)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型中的神经功能改善作用。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠,应用微量注射泵皮下缓慢注射50... 详细信息

目的:探索促吞噬肽(Tuftsin)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠模型中的神经功能改善作用。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫C57BL/6小鼠,应用微量注射泵皮下缓慢注射500μmol/L Tuftsin。每天对各组小鼠进行神经功能评分,免疫后28 d处死各组小鼠并取其脑和脊髓组织,观察并比较各组炎性细胞浸润部位及程度、有无脱髓鞘及脱失程度,以及比较各组IL-10和TNF-α的表达情况。结果:1Tuftsin干预组小鼠发病率比EAE模型组低,平均神经功能评分小于EAE模型组(P<0.05)。2Tuftsin干预组较EAE模型组炎性细胞的浸润程度和髓鞘的脱失程度及范围减轻(P<0.05)。3Tuftsin干预组的IL-10的表达量比EAE模型组高(P<0.05),TNF-α的表达比EAE模型组低。结论:Tuftsin通过降低炎性反应、增强抗炎作用在中枢神经系统中发挥保护功能,降低EAE模型小鼠的炎性细胞浸润及脱髓鞘程度,减缓EAE小鼠的症状、促进其神经功能的恢复。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎促吞噬肽

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口服免疫耐受治疗颅脑创伤的实验研究

中华神经外科杂志 2011年第5期27卷 624-627页

作者：张洪伟闫华武俏丽张国斌刘暌只达石天津医科大学第二医院神经外科300211 天津市环湖医院神经外科

目的探讨口服免疫耐受对脑损伤的治疗作用。方法58只兔随机分为对照组、脑脊液引流组、脑脊液引流＋口服组和免疫佐剂组。收集第1、3、7、14、21天血清，以ELISA法检测IL-1、IFN-γ、IL-10、TGF-β和ABAb浓度，并进行对比。结果脑脊液... 详细信息

目的探讨口服免疫耐受对脑损伤的治疗作用。方法58只兔随机分为对照组、脑脊液引流组、脑脊液引流＋口服组和免疫佐剂组。收集第1、3、7、14、21天血清，以ELISA法检测IL-1、IFN-γ、IL-10、TGF-β和ABAb浓度，并进行对比。结果脑脊液引流组Ⅱ、-1、IFN-γ、ABAb较对照组降低，IL-10较对照组升高；脑脊液引流＋口服组IL-1、IFN-γ、ABAb较其他组明显降低，而IL-10、TGF-β明显升高；免疫佐剂组介于对照组和脑脊液引流＋口服组之间。结论脑脊液引流对颅脑创伤有治疗作用；口服免疫耐受对颅脑创伤有治疗作用；完全弗氏佐剂部分抑制了口服免疫耐受。

关键词：颅脑损伤免疫耐受抗脑抗体

神经干细胞移植联合FK506对脊髓损伤病理和超微结构变化的影响

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中华创伤杂志 2012年第8期28卷 748-753页

作者：武俏丽唐帆李庆国孔繁明孙异临刘暌任欢哈尔滨医科大学免疫学教研室、天津市神经外科研究所 150086 天津市环湖医院病理科神经外科北京市神经外科研究所天津市人民医院神经外科

目的探讨脊髓损伤后神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植对大鼠损伤脊髓病理和超微结构的影响，以及免疫抑制剂他克莫司（FKS06）对神经再生的保护作用。方法采用成年SD大鼠，制作B节段脊髓压迫损伤模型。动物按随机数字表法分... 详细信息

目的探讨脊髓损伤后神经干细胞（neural stem cells，NSCs）移植对大鼠损伤脊髓病理和超微结构的影响，以及免疫抑制剂他克莫司（FKS06）对神经再生的保护作用。方法采用成年SD大鼠，制作B节段脊髓压迫损伤模型。动物按随机数字表法分为对照组、FKS06组、NSCs组和NSCs＋FKS06组。伤后7，14，28，56d应用运动诱发电位（motor-evoked potential，MEP）监测、HE染色、免疫组织化学染色、超微结构观察及有髓纤维图像分析比较各组神经再生差异。结果伤后28dNSCs＋FKS06组MEP潜伏期与其他各组比较明显缩短（P〈0．05）。HE染色显示，56d时NSCs＋FKS06组只出现灶性坏死。与对照组比较，BrdU和NF-200免疫组织化学染色示各组阳性细胞数增多，且NSCs＋FKS06组阳性细胞数高于其他两组。电镜扫描结果显示，56d时对照组仍可见大的神经髓鞘轴膜下水肿，NSCs＋FKS06组可见典型的新生髓鞘和轴索，神经纤维再生效果均比其他各组好（P〈0．01）。结论脊髓损伤大鼠移植NSCs后，早期联合应用FKS06可改善神经再生纤维的病理和超微结构，具有良好的促神经再生作用。

关键词：脊髓损伤他克莫司结合蛋白质类干细胞移植病理学超微结构

冷诱导RNA结合蛋白在亚低温下的神经保护作用研究

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中华老年心脑血管病杂志 2014年第7期16卷 754-757页

作者：蔡英郑君毅王冠武俏丽巫嘉陵苏心天津市环湖医院天津市神经外科研究所天津市脑血管与神经变性重点实验室 300060 天津市胸科医院天津市中医药大学第二附属医院

目的研究亚低温下冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对受损海马神经元的保护作用机制。方法将原代培养的海马神经元分为3组:对照组、损伤组和治疗组。氧糖剥夺55min制作海马神经元损伤模型,损伤组和治疗组在氧糖剥夺55min后分别置于37℃和32℃培... 详细信息

目的研究亚低温下冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)对受损海马神经元的保护作用机制。方法将原代培养的海马神经元分为3组:对照组、损伤组和治疗组。氧糖剥夺55min制作海马神经元损伤模型,损伤组和治疗组在氧糖剥夺55min后分别置于37℃和32℃培养24h。收集各组细胞,MTT检测各组细胞的存活率,荧光定量PCR和Western blot检测CIRP的mRNA和蛋白的表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot检测Caspase-3蛋白表达水平。结果与对照组比较,损伤组细胞生存率明显下降[(43.3±8.1)%vs(100.0±12.7)%,P<0.05],治疗组细胞生存率明显升高[(71.8±13.6)%vs(43.3±8.1)%,P<0.05],与损伤组比较,治疗组细胞凋亡率下降[(19.5±0.6)%vs(30.7±2.5)%],CIRP的mRNA蛋白表达明显升高,Caspase-3蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温下CIRP表达水平升高,通过抑制细胞凋亡发挥神经元保护作用,是亚低温脑保护作用途径之一。

关键词：低温 RNA结合蛋白质类海马神经元细胞凋亡

颅脑创伤致瘦素渗漏人脑促进骨折愈合的实验研究

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中华骨科杂志 2012年第12期32卷 1172-1177页

作者：闫华段世博张洪伟刘暌薛静武俏丽孙志明天津市环湖医院神经外科天津市环湖医院检验科天津市环湖医院研究所天津市环湖医院脊柱外科沧州市中心医院神经外一科天津医科大学第二医院神经外科天津市人民医院神经外科

目的观察兔颅脑创伤后血清瘦素、生长激素、胰岛素样生长因子-1水平及脑脊液瘦素水平。方法15只兔麻醉后血管内注射外源性异硫氰酸荧光素标记的兔瘦素，分别给予单侧液压打击致颅脑创伤（9只）及假手术（6只），伤后30min取双侧脑组织... 详细信息

目的观察兔颅脑创伤后血清瘦素、生长激素、胰岛素样生长因子-1水平及脑脊液瘦素水平。方法15只兔麻醉后血管内注射外源性异硫氰酸荧光素标记的兔瘦素，分别给予单侧液压打击致颅脑创伤（9只）及假手术（6只），伤后30min取双侧脑组织行冰冻切片，荧光显微镜下观察颅脑创伤组和假手术组脑组织荧光范围。33只兔随机分为实验组（血）、对照组（血）、实验组（脑脊液）和对照组（脑脊液），实验组建立兔脑单侧液压打击创伤模型，对照组只开骨窗。实验组（血）和对照组（血）均于伤后第1、3、7和14天早晨空腹取耳缘静脉血2ml，分离血清；实验组（脑脊液）和对照组（脑脊液）均于上述各时间点取脑脊液0．5ml；采用ELISA法检测血清瘦素、生长激素、胰岛素样生长因子-1水平和脑脊液瘦素水平。结果颅脑创伤组打击侧脑组织在荧光显微镜下可见到荧光显影，多于假手术组。实验组颅脑创伤后各时间点血清瘦素水平均高于对照组；实验组血清生长激素、胰岛素样生长因子-1及脑脊液瘦素水平在颅脑创伤后第1、3和7天均高于对照组。结论颅脑创伤后血液内瘦素能渗漏入脑组织，引起血液内生长激素及胰岛素样生长因子-1浓度增加，可能是颅脑创伤促进骨折愈合的内分泌因素。

关键词：颅脑损伤瘦素骨折愈合

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牛磺酸在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布

中华实验外科杂志 2013年第1期30卷 86-88页

作者：王伟黄慧玲杨铭武俏丽温晓昶姚鑫天津医科大学研究生院 300070 天津市环湖医院中国医学科学院北京协和医学院血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的应用小动物活体成像技术观察牛磺酸（Tau）在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布及代谢。方法将32只雄性BALB／C裸鼠随机分为正常（normal）组、假手术（sham）组、牛磺酸治疗（TBI·Tau）组和脑创伤染料组（TBI·Cy7）。后两组用液压打击... 详细信息

目的应用小动物活体成像技术观察牛磺酸（Tau）在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布及代谢。方法将32只雄性BALB／C裸鼠随机分为正常（normal）组、假手术（sham）组、牛磺酸治疗（TBI·Tau）组和脑创伤染料组（TBI·Cy7）。后两组用液压打击仪制作左侧重型脑创伤模型，sham组在相同位置只开骨窗，不予打击。TBI-Tau、sham组伤后立即尾静脉注射***，TBI。Cy7组注射游离Cy7，normal组不做处理，直接注射Cy7-Tau，剂量均为5mg／kg。给药后1、2．4、8、12、24h行活体成像。结果各组给药后体内荧光强度灰度值12h内呈线性下降，Tau主要通过肾脏代谢；sham组手术切口皮缘24h仍有较高浓度Tau富集（0．0340±0．0058）；***组1、2．4、8h体内荧光灰度值均强于sham组（P〈0．05），24h离体脑组织成像显示TBI-Tau组脑创伤处有高浓度Tau富集（0．640±0．096，与sham组比较，P〈0．01）。结论活体成像技术可实时监测Tau在颅脑创伤裸鼠体内的分布、代谢，Tau主要通过肾脏代谢，在脑创伤区域、皮肤切口处有特异性富集并长时间存在。

关键词：颅脑创伤牛磺酸分布活体成像

促红细胞生成素及其受体在大鼠创伤性颅脑损伤模型中的表达及意义

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中华创伤杂志 2011年第3期27卷 206-209页

作者：贾强只达石黄慧玲蔡英武俏丽张学斌常小丽天津医科大学第二医院神经外科 300211 天津市环湖医院神经外科

目的研究创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠损伤周围脑组织促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）及其受体（erythropoietin receptor，EPOR）的表达。方法78只sD大鼠按随机数字表法分为对照组（6只）、假手术组（36只）、液压冲击脑创伤模型... 详细信息

目的研究创伤性颅脑损伤（TBI）大鼠损伤周围脑组织促红细胞生成素（erythropoietin，EPO）及其受体（erythropoietin receptor，EPOR）的表达。方法78只sD大鼠按随机数字表法分为对照组（6只）、假手术组（36只）、液压冲击脑创伤模型组（36只）。根据处死时间，分为6，24h和3，5，7，14d6个时相点，每个时相点假手术组和脑损伤组各处死6只大鼠，取损伤周围脑组织。利用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测EPO、EPOR的mRNA表达和蛋白表达。结果EPO在伤后24h内即升高，到第3天达到高峰，并可维持2d左右，至伤后第7天开始下降，于伤后14d基本恢复至伤前水平；而EPOR于伤后24h到达高峰，至伤后14d表达量仍可维持较高的水平。结论TBI后24h内源性EPO及其受体的表达即开始增加，但二者的表达具有不一致性，且EPO相对受体表达具有短暂性。

关键词：脑损伤促红细胞生成素受体

具核梭杆菌外膜FomA蛋白的获得及其免疫原性研究

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中华口腔医学杂志 2018年第10期53卷 674-680页

作者：马丽冯希平武俏丽张向宇张旭天津医科大学口腔医院口腔预防科 300010 天津医科大学口腔医院牙体牙髓科 300010 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔预防科上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所国家口腔疾病临床研究中心 200011 天津市神经外科研究所 300012

目的检测具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum,Fn）的主要外膜孔道FomA蛋白的免疫原性、免疫水平以及对牙龈组织的免疫效果,为研究以FomA蛋白为靶点预防及治疗牙周感染的可行性提供理论依据.方法应用基因重组技术,使用大肠杆菌表达... 详细信息

目的检测具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum,Fn）的主要外膜孔道FomA蛋白的免疫原性、免疫水平以及对牙龈组织的免疫效果,为研究以FomA蛋白为靶点预防及治疗牙周感染的可行性提供理论依据.方法应用基因重组技术,使用大肠杆菌表达系统表达并获取纯化的FomA蛋白,将50 μg该蛋白或50 ml磷酸盐缓冲液（phosphate buffer solution,PBS）通过皮下注射方式免疫C57小鼠（随机数字法分组,每组各10只）,在小鼠血清中检测FomA特异性抗体表达情况,比较组间差异,评估FomA蛋白的免疫原性.再将上述小鼠分成FomA Fn组、FomA Fn＋牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,Pg）组、PBS Fn组、PBSFn＋Pg组,分别使用Fn菌悬液或Fn与Pg混合菌悬液制备牙周脓肿模型（PBS为相应FomA组的对照组）,对小鼠牙龈脓肿评分,酶联免疫吸附测定法测定小鼠血清和牙龈组织中白介素（interleukin,IL）1β的浓度,比较上述指标的组间差异,评价FomA蛋白的免疫效果.结果通过基因重组技术成功获取1.0～1.5 g FomA蛋白,将该蛋白皮下注射免疫小鼠后,小鼠血清中均可检测到FomA特异性抗体,该抗体效价在二次免疫后2周达峰值.利用牙周致病菌Fn及Fn＋Pg成功构建小鼠下颌牙龈脓肿模型,FomA Fn组小鼠牙龈脓肿评分[（1.82±0.35）分[显著低于PBS Fn组[（2.62±0.71）分[（P=0.049）;FomA Fn＋Pg组小鼠牙龈脓肿评分[（2.31±0.55）分]亦显著低于PBS Fn＋Pg组[（3.63±0.45）分[（P=0.003）;FomA Fn＋ Pg组与FomA Fn组小鼠血清及牙龈组织中IL-1β浓度均分别显著低于PBS对照组（P＜0.001）.结论使用大肠杆菌表达系统能成功表达并获得一定量的Fn外膜FomA蛋白,该重组蛋白具有一定的免疫原性,通过对小鼠皮下注射的方式可使小鼠血清中产生一定水平的抗体,有助于机体降低牙周致病菌Fn及Pg引起的牙周感染程度.

关键词：梭杆菌具核牙周脓肿 FomA蛋白免疫原性

颅脑创伤后期大鼠代谢型谷氨酸受体5表达变化及牛磺酸治疗作用

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中国现代神经疾病杂志 2016年第8期16卷 503-508页

作者：蔡英黄慧玲范维佳武俏丽天津市环湖医院天津市神经外科研究所天津市脑血管与神经变性重点实验室 300350

目的探讨颅脑创伤后期(第7天)大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)表达变化,以及牛磺酸治疗作用。方法液压脑损伤打击仪制备液压打击颅脑创伤大鼠模型,采用随机数字表法将30只无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、颅脑... 详细信息

目的探讨颅脑创伤后期(第7天)大鼠脑组织代谢型谷氨酸受体5(m Glu R5)表达变化,以及牛磺酸治疗作用。方法液压脑损伤打击仪制备液压打击颅脑创伤大鼠模型,采用随机数字表法将30只无特定病原体级Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、颅脑创伤组和牛磺酸治疗组(各10只),干湿重法检测大鼠脑组织含水量,实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting法检测水通道蛋白4(AQP4)和m Glu R5 m RNA和蛋白表达变化。结果与对照组相比,颅脑创伤组大鼠脑组织含水量(t=4.893,P=0.002)、AQP4 m RNA(t=6.523,P=0.000)和蛋白(t=4.366,P=0.008)表达水平升高,m Glu R5m RNA(t=5.776,P=0.001)和蛋白(t=3.945,P=0.014)表达水平降低;经牛磺酸治疗后,大鼠脑组织含水量(t=2.151,P=0.140)、AQP4 m RNA(t=1.144,P=0.432)和蛋白(t=0.367,P=0.804)降至正常水平,m Glu R5 m RNA(t=1.824,P=0.216)和蛋白(t=1.185,P=0.414)升至正常水平。相关分析显示,脑组织含水量与m Glu R5 m RNA(r=-0.617,P=0.014)和蛋白(r=-0.665,P=0.007)呈负相关,与AQP4蛋白呈正相关(r=0.658,P=0.008)。结论牛磺酸可以升高颅脑创伤后期(第7天)大鼠脑组织m Glu R5表达水平,降低脑水肿和脑组织含水量,具有抑制性神经递质作用。

关键词：颅脑损伤受体谷氨酸牛磺酸疾病模型动物