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黄鳝染色体高分辨G带的制备方法

遗传 1995年第1期17卷 38-39页

作者：樊连春余其兴崔建勋武汉大学生物系

用地高辛标记原位杂交技术定位黄鳝rRNA基因于二价染色体3q12─q24和7q14─q26

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Acta Genetica Sinica 1995年第2期22卷 97-102页

作者：李奎余其兴毛勇赵则春樊连春武汉大学生命科学学院遗传学系

以地高辛标记重组质粒ＰＴＡ７１中所含的小麦ｒＲＮＡ基因作为探针，与ＥｃｏＲＩ酶切的黄鳝核基因组总ＤＮＡ经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，呈现２条带，片段长度分别为１２．８ｋｂ和４．６ｋｂ。再运用染色体原位杂交技术及杂交后多重带... 详细信息

以地高辛标记重组质粒ＰＴＡ７１中所含的小麦ｒＲＮＡ基因作为探针，与ＥｃｏＲＩ酶切的黄鳝核基因组总ＤＮＡ经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，呈现２条带，片段长度分别为１２．８ｋｂ和４．６ｋｂ。再运用染色体原位杂交技术及杂交后多重带显带技术，定位ｒＲＮＡ基因于黄鳝二价染色体３ｑ１２－ｑ２４和７ｑ１４－ｑ２６两个区间，其分布位点与硝酸银染色法结果相符。此外，还讨论了在黄鳝二价体上开展基因定位研究的突出优点。

关键词：黄鳝 rRNA基因二价染色体原位杂交

银鲫与彩鲫卵母细胞cDNA文库构建及周期蛋白A_1的cDNA克隆

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水生生物学报 2000年第6期24卷 573-581页

作者：樊连春谢京汪洋桂建芳中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室武汉430072

分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料 ,提取总RNA ,分离mRNA ,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtllSfi Not克隆载体 ,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库。测试结果表明库容量分别达到 3 ... 详细信息

分别取行天然雌核发育繁殖的银鲫和两性生殖的彩鲫的卵母细胞为材料 ,提取总RNA ,分离mRNA ,进而反转录合成cDNA并定向插入λgtllSfi Not克隆载体 ,经体外包装构建了银鲫与彩鲫卵母细胞的表达型cDNA文库。测试结果表明库容量分别达到 3 1× 1 0 6(银鲫 )和 1 6× 1 0 6(彩鲫 )。进一步人工合成CyclinA1 保守引物 ,采用PCR扩增文库的方法 ,克隆了银鲫 (1 61 6bp)与彩鲫 (1 62 6bp)的CyclinA1 全长cDNA。序列分析结果表明 :两种鱼编码区长度均为 1 1 73bp ,起始于一个包含在脊椎动物起始密码子ANNATG基元内ATG的单一开放读码框 ,编码 391个氨基酸 ;5’ -端非编码区长度也同为 70bp ,3-’端非编码区长度略有不同 ,银鲫为 373bp ,而彩鲫则为 383bp ;二者 3’ -端均带有AATAAA的Poly(A)加尾信号以及 2 4bp(银鲫 )和 2 7bp(彩鲫 )的Poly(A)尾巴。比较银鲫、彩鲫和金鱼与人、爪蟾CyclinA1氨基酸序列同源性的结果表明 ,CyclinA1 在人、爪蟾与鱼类之间具有较高同源性 ;而在银鲫、彩鲫和金鱼之间 ,CyclinA1 仅在周期蛋白框外存在 5个氨基酸的差异 ,且这些差异均是由个别碱基的变异造成的。

关键词：雌核发育银鲫彩鲫 cDNA文库周期蛋白A1

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鳙鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱

武汉大学学报（自然科学版） 1994年第1期40卷 121-125页

作者：樊连春崔建勋余其兴武汉大学生命科学学院

用１１种限制性内切酶（ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＢｃｏＲⅠ、ＨｐａⅠ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＸｈｏⅠ、ＸｂａⅠ）分析鳙鱼的线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ，简称ｍｔＤＮＡ），构建... 详细信息

用１１种限制性内切酶（ＢａｍＨⅠ、ＢｇｌⅠ、ＢｇｌⅡ、ＢｃｏＲⅠ、ＨｐａⅠ、ＫｐｎⅠ、ＰｓｔⅠ、ＳａｃⅠ、ＳａｌⅠ、ＸｈｏⅠ、ＸｂａⅠ）分析鳙鱼的线粒体ＤＮＡ（ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌＤＮＡ，简称ｍｔＤＮＡ），构建了全部１１种酶２２个切点的物理图谱．鳙鱼线粒体ＤＮＡ的分子大小约为１６．４４ｋｂ．酶切位点的分布是非随机的．

关键词：鳙鱼线粒体 DNA 限制性内切酶

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黄鳝二价染色体高分辨G带制备及模式图构建

中国科学:化学 1993年第9期23卷 947-954+1009-1010页

作者：余其兴樊连春崔建勋任修海李奎余先觉武汉大学生物系武汉 430072 武汉大学生物系

采用性腺整体长低渗,卡诺固定液处理以及胰酶-热盐复合显带方法,获得分散良好的黄鳝(Monopterus albus)粗线期二价染色体的高分辨G带,其带纹特征和数目是相对稳定和清晰可辨的,制备技术具易重复性,显示黄鳝粗线期全套二价体的带纹达310... 详细信息

采用性腺整体长低渗,卡诺固定液处理以及胰酶-热盐复合显带方法,获得分散良好的黄鳝(Monopterus albus)粗线期二价染色体的高分辨G带,其带纹特征和数目是相对稳定和清晰可辨的,制备技术具易重复性,显示黄鳝粗线期全套二价体的带纹达310—450条,是迄今鱼类多重带报道中带纹数最多的。我们参照人类细胞遗传学命名法的国际体制,首次构建了黄鳝中粗线期二价体372条带的高分辨G带模式图,并对每条二价体进行了区带划分和识别要点的描述。

关键词：鱼类二价染色体高分辨G带模式图

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沼泽绿牛蛙的核型及银染研究

水生生物学报 1996年第4期20卷 387-389页

作者：樊连春杨仲安魏丽华梁绍昌桂建芳中国科学院水生生物研究所

沼泽绿牛蛙的核型及银染研究樊连春，杨仲安，魏丽华，梁绍昌，桂建芳（中国科学院水生生物研究所武汉４３００７２）关键词沼泽绿牛蛙，核型，Ａｇ－ＮＯＲｓＡＮＩＮＶＥＳＴＩＧＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＫＡＲＹＯＴＹＰＥＡＮＤＡｇ－... 详细信息

沼泽绿牛蛙的核型及银染研究樊连春，杨仲安，魏丽华，梁绍昌，桂建芳（中国科学院水生生物研究所武汉４３００７２）关键词沼泽绿牛蛙，核型，Ａｇ－ＮＯＲｓＡＮＩＮＶＥＳＴＩＧＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＫＡＲＹＯＴＹＰＥＡＮＤＡｇ－ＮＯＲｓＯＦＲＡＮＡＧＲＹＬＩＯ￥...

关键词：沼泽绿牛蛙染色体组型 Ag-NORs

异源基因或染色体整入雌核发育银鲫的细胞学机制

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Developmental and Reproductive Biology 1997年第1期6卷 33-44页

作者：樊连春桂建芳等中国科学院水生生物研究所，中国武汉430072

银鲫（Carassius auratus gibelio Bloch)是行天然雌核发育生死的两性型三倍体鱼类，与普通两性融合生殖鱼类相比，具有独特的育种优势。八十年代以来，异育银鲫、复合四倍体异育银鲫的发现表明，雌核发育孵子不但具有保持自身全部染色... 详细信息

银鲫（Carassius auratus gibelio Bloch)是行天然雌核发育生死的两性型三倍体鱼类，与普通两性融合生殖鱼类相比，具有独特的育种优势。八十年代以来，异育银鲫、复合四倍体异育银鲫的发现表明，雌核发育孵子不但具有保持自身全部染色体的能力，还能整合异源精子部分遗传物质或整个基因组，影响雌核发育后代的性状。因此，搞清楚异源基因组的整合机制对于进一步弄清其发育模式以及诱导复合多倍体银鲫均具有十分重要的作用。两性融合发育鱼类的精子入卵后，精核在促精核活化因子的诱导下，可以逐渐解凝并形成雄性原核；而在天然雌核发育银鲫受精卵中，精核的解凝和原核化却被抑制。去掉卵壳的控制作用后，精核虽能在卵质中解凝却仍不能形成雄性原核（Fig.1)。可见，雌核发育银鲫与两性融合发育鱼类的卵质间必定存在某些差异。对哺乳类和两栖类卵质诱导精核原核化作用的研究表明，DTT和蛋白水学原精核组蛋白中－S－S－和水解精核组蛋白，从而诱导精核在卵质中形成雄性原核。本文通过显微注射以及冷休克处理等诱导方法，探讨了人工诱导外源精核在银鲫卵中解凝和原核化，培育银鲫复合种的细胞学机制。实验结果显示，向银鲫卵质中注入胰蛋白酶、DTT和AKP这些活性物质后，银鲫卵质获得了诱导入卵精核形成雄性原核的能力（Fig.2,3&4)。这表明雌核发育鱼类卵子可能缺少某些促进雄性原核形成的因子，或者含有某些抑制精子解凝及原核化的特殊因子。大量细胞学观察结果表明，在雌核发育银鲫受精卵中，精核的发育可能存在着两极控制作用，即卵细胞受精孔处存在有控制因子，这是因为脱去卵膜后，精核明显表现出膨大解凝的迹象。只是由于次级控制作用，精核虽能在卵质中解凝却不能形成雄性原核。团头鲂由于具有较强的抗病能力和鲜美的味道而在我国广为养殖，为了将这睦优良性状的基因整合进入雌核发育银鲫中，我们采用了冷休克处理的方法，诱导团头鲂精子解凝并原核化。实验结果表明，在卵子精后2－3分钟时，用－1℃－1℃的水溶处理20分钟左右，民源精子（团头鲂）也发生了一定比例的解凝及原核化，从而获得了具有父本基因组或染色体的银鲫复合种（Fig.5&6)。本实验的结果表明休克处理在以精子为介导转移外源基因组进入雌核发育物种，诱导源复合多倍体的研究中是一种非常有效的方法。已有报道表明，复合四倍体仍可以雌核发育的方式进行繁殖。因此，雌核发育鱼类以其特有的生殖方式为多倍体育种工作提供了广泛而迷人的前景。

关键词：异源基因组异源染色体整合雌核发育银鲫鱼类

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镛鱼线粒体DNA结构研究

镛鱼线粒体DNA结构研究

High Resolution G-banding and Idiogram on Pachytene Bivalents of Rice Field Eels(Monopterus albus Zuiew)

中国细胞生物学学会第五次会议

作者：樊连春余其兴武汉大学生物系

线粒体DNA(mtDNA),是普遍存在于真核细胞线粒体中的一类核外遗传物质,分子结构简单,具有许多不同于核DNA的特性,是研究真核生物基因组的结构与功能的极好模式体系。

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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Science China Chemistry 1994年第9期37卷 1090-1098页

作者：余其兴樊连春崔建勋任修海李奎余先觉 Department of Biology Wuhan University Wuhan 430072 PRC

Well spread pachytene bivalents and high resolution G-handing patterns have been obtainedby using the prolonged hypotonic treatment combined with the trypsin-hot salt banding technique in the sper-maries of rice field eels(Monopterus albus Zuiew).Each bivalent has been idendified and a total of 310—450 bands on 12 bivalents *** might bethe largest number of multiple bands obtained from fish chromosomes so far *** idiogram of 372G-bands has been set up and detailed descriptions of the landmark systems and the band positions have beengiven.

关键词： fish bivalent high resolution G-banding idiogram