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石斛属几种植物遗传关系的SRAP和RAPD比较分析

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中草药 2010年第4期41卷 627-632页

作者：樊洪泓李廷春邱婧林毅蔡永萍安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036

目的利用SRAP和RAPD两种分子标记技术对9份石斛种质进行遗传多样性研究。方法用40对SRAP引物组合和36个RAPD引物分别对供试石斛的基因组DNA进行扩增。结果SRAP引物组合共扩增条带1977条,多态性比率为90.2%,遗传相似系数GS值变化范围为0.... 详细信息

目的利用SRAP和RAPD两种分子标记技术对9份石斛种质进行遗传多样性研究。方法用40对SRAP引物组合和36个RAPD引物分别对供试石斛的基因组DNA进行扩增。结果SRAP引物组合共扩增条带1977条,多态性比率为90.2%,遗传相似系数GS值变化范围为0.3302～0.7892。RAPD引物共扩增出281条带,多态性比率为87.1%,GS值变化范围为0.4942～0.7731。利用两种标记得到的聚类结果存在一定的差异,SRAP聚类结果与传统的基于形态特征建立的分类结果比较一致,较好地体现了供试品种的亲缘关系、地域特性。在9个石斛供试种间,SRAP的标记指数MI值(16.46)是RAPD标记MI值(3.67)的4.5倍,表明SRAP具有更大的标记效率。结论两种标记皆可有效应用于该属植物种质资源的遗传多样性分析。而SRAP标记在石斛的遗传多样性与亲缘关系的研究中,则表现出了极大的优越性。

关键词：石斛属遗传多样性 SRAP RAPD

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微生物源β-葡萄糖苷酶在发酵食品中的应用

食品安全质量检测学报 2022年第24期13卷 8041-8049页

作者：荆丰雪钟斌万娅琼樊洪泓程江华徐雅芫安徽农业大学生命科学学院合肥230036 安徽省农业科学院农产品加工研究所合肥230031 安徽农业大学茶与食品科技学院合肥230036 安徽省食品微生物发酵与功能应用工程实验室合肥230031

β-葡萄糖苷酶是一种通过水解含有β-D-葡萄糖苷键的底物释放有强烈芳香特性的游离糖苷配体的水解酶,可以制造活性芳香单体物质改善食品风味和提高营养价值。微生物来源的β-葡萄糖苷酶因具有优良的特性已广泛应用于谷物、果蔬、豆制品... 详细信息

β-葡萄糖苷酶是一种通过水解含有β-D-葡萄糖苷键的底物释放有强烈芳香特性的游离糖苷配体的水解酶,可以制造活性芳香单体物质改善食品风味和提高营养价值。微生物来源的β-葡萄糖苷酶因具有优良的特性已广泛应用于谷物、果蔬、豆制品、饮料和功能食品产业中。本文重点综述了霉菌、酵母菌和其他微生物来源的β-葡萄糖苷酶的生产菌株以及不同微生物生产的β-葡萄糖苷酶的特异性,总结和展望了β-葡萄糖苷酶在发酵食品领域中的应用及其发展趋势,以期为β-葡萄糖苷酶产菌种选育、酶学特性改造、酶工业化生产及在发酵食品中的应用提供技术导向和理论依据。

关键词： β-葡萄糖苷酶微生物发酵食品食品工业

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NO对石斛类原球茎生长及继代培养的影响

药物生物技术 2012年第6期19卷 517-520,524页

作者：金青姚瑶蔡永萍林毅樊洪泓骆倩安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036

为提高组织培养的药用石斛生物碱含量,利用一氧化氮(NO)的供体硝普钠(SNP)处理霍山杂交石斛液体悬浮培养的类原球茎。结果表明,NO对类原球茎生长有一定的抑制作用,但有利于生物碱的积累。NO处理的类原球茎在生物碱积累高峰期45 d前,发... 详细信息

为提高组织培养的药用石斛生物碱含量,利用一氧化氮(NO)的供体硝普钠(SNP)处理霍山杂交石斛液体悬浮培养的类原球茎。结果表明,NO对类原球茎生长有一定的抑制作用,但有利于生物碱的积累。NO处理的类原球茎在生物碱积累高峰期45 d前,发生活性氧迸发,过氧化氢抗氧化酶(CAT)活性提高明显。类原球茎继代培养表明,不经NO诱导的S0、S00、S0003代类原球茎的蛋白质SDS电泳条带和POD同工酶条带基本一致,NO处理使蛋白质条带和POD同工酶条带出现差异性。NO处理后类原球茎生物碱含量的提高不能在继代培养中得到保持。

关键词：石斛类原球茎生物碱一氧化氮继代

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板栗壳色素的提取、纯化及稳定性

农业工程学报 2008年第9期24卷 298-302页

作者：李永祥詹少华蔡永萍林毅樊洪泓安徽农业大学生命科学学院合肥230036 皖西学院化学与生命科学系六安237012

该文以板栗壳为材料,研究板栗壳色素的提取、纯化工艺及纯化色素的稳定性,为板栗壳色素的推广应用提供理论基础和实验数据。结果表明,板栗壳色素易溶于碱性水溶液,不溶或难溶于非极性溶剂。用1%的NaOH提取色素,石油醚和乙酸乙酯分别萃取... 详细信息

该文以板栗壳为材料,研究板栗壳色素的提取、纯化工艺及纯化色素的稳定性,为板栗壳色素的推广应用提供理论基础和实验数据。结果表明,板栗壳色素易溶于碱性水溶液,不溶或难溶于非极性溶剂。用1%的NaOH提取色素,石油醚和乙酸乙酯分别萃取3次后获得粗提色素,粗提色素经醇沉、酸沉及重结晶法三种方法纯化后通过薄层层析证明色素纯度较高。紫外-可见光谱分析表明,纯化色素的0.01%水溶液在223nm和264nm处有明显吸收峰,0.01%甲醇溶液在218m和264nm处有明显吸收峰,推测板栗壳色素含有苯环及酚羟基。纯化色素的稳定性试验表明,色素264nm处吸光度对pH值较敏感,510nm处吸光度在pH为2.0至6.0时,呈逐渐增加的趋势,在pH为8.0至14.0时变化不大,pH=10.0条件下测定510nm处吸光度可以作为色素定量的方法;不同金属离子对色素有不同影响;色素对光、热、氧化剂及还原剂的耐受力较强。

关键词：色素稳定性 UV光谱板栗

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丹参EST序列中微卫星分布特征分析

安徽农业大学学报 2010年第3期37卷 493-497页

作者：樊洪泓李廷春林毅安徽农业大学生命科学学院合肥230036 安徽省农业科学研究院合肥230031

为了开发丹参表达序列标签微卫星（EST-SSR）功能性分子标记,从公共数据库GenBank中下载获得丹参EST序列10 288条,在剔除低质量和冗余的序列后,得到全长为292.561 kb的无冗余EST序列5 073条。在这些序列中共发掘出628个SSR,分布在528条... 详细信息

为了开发丹参表达序列标签微卫星（EST-SSR）功能性分子标记,从公共数据库GenBank中下载获得丹参EST序列10 288条,在剔除低质量和冗余的序列后,得到全长为292.561 kb的无冗余EST序列5 073条。在这些序列中共发掘出628个SSR,分布在528条EST中,出现频率是10.4%,平均长度为14.47 bp,平均分布频率为每0.47 kb分布一个SSR位点,其中含SSR位点的EST长度主要分布于401~600 bp与601~800 bp之间。在检索出的SSR s中,二核苷酸是主要重复类型,占SSR总数的72.45%;其次是三核苷酸,占SSR总数的26.75%。二核苷酸类型（AG）n、（AT）n和（AC）n和三核苷酸类型（AAG）n、（AGC）n基元是SSR的主要重复类型。本研究为丹参EST-SSR标记的开发和进一步应用提供参考。

关键词：丹参 EST SSR 特征

强光下H_2S对石斛DNA甲基化及抗氧化系统的影响

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核农学报 2013年第8期27卷 1090-1098页

作者：关蕾樊洪泓陈沙沙林毅蔡永萍金青安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036

本试验以铁皮石斛为材料,研究强光胁迫下外源硫化氢对铁皮石斛的抗氧化系统及基因组DNA的甲基化水平和模式变化的影响。结果表明:200μmol.L-1的硫氢化钠(NaHS,H2S的供体)可显著促进SOD、CAT和POD的酶活性、降低MDA含量,缓解了强光胁迫... 详细信息

本试验以铁皮石斛为材料,研究强光胁迫下外源硫化氢对铁皮石斛的抗氧化系统及基因组DNA的甲基化水平和模式变化的影响。结果表明:200μmol.L-1的硫氢化钠(NaHS,H2S的供体)可显著促进SOD、CAT和POD的酶活性、降低MDA含量,缓解了强光胁迫对铁皮石斛造成的氧化损伤。而高浓度NaHS(600μmol.L-1)处理则加重了石斛的氧化损伤。甲基化敏感扩增多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)分析表明,强光胁迫下0、200和600μmol.L-1NaHS处理(T1、T3、T5)的石斛DNA甲基化比率分别为29.6%、33%和28.9%,均低于对照(正常光照,35.4%)。强光下T1与对照CK相比、T3和T5与T1相比,石斛基因组DNA的去甲基化和甲基化变化的位点比例分别为6.4%、7.7%、6.7%和9.0%、8.1%、9.2%。通过对差异条带的回收测序和Blast比对,发现其中有与光合作用有关的合成酶、与抗逆相关的转录因子等同源的片段。

关键词：铁皮石斛硫化氢 DNA甲基化甲基化敏感扩增多态性

铁皮石斛转录因子基因DoWRKY1的克隆与表达分析

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中国中药杂志 2015年第14期40卷 2807-2813页

作者：赵俊孙时伟孟灿灿金青樊洪泓林毅蔡永萍安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036

WRKY转录因子是植物中发现的新型转录调控因子,在调控植物生长发育和代谢等生理过程中发挥重要作用。该研究采用RT-PCR和RACE技术从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆得到一个新的WRKY转录因子基因cDNA全长,命名为DoW RKY1,提交GenB... 详细信息

WRKY转录因子是植物中发现的新型转录调控因子,在调控植物生长发育和代谢等生理过程中发挥重要作用。该研究采用RT-PCR和RACE技术从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆得到一个新的WRKY转录因子基因cDNA全长,命名为DoW RKY1,提交GenBank获得登录号KF716131。生物信息学分析表明,该基因全长cDNA为1 704 bp,其中开放阅读框(ORF)1629bp,编码1条由542个氨基酸组成的多肽,具有2个WRKY保守结构域,属于WRKY家族第Ⅰ类转录因子。酵母单杂交表明,DoW RKY1可以激活下游报告基因(His3,Ade2)的表达,具有转录激活功能,属于转录激活子。半定量RTPCR显示,DoWRKY1在根、茎、叶和类原球茎中均有表达。qRT-PCR分析表明,DoW RKY1响应茉莉酸甲酯(MeJ A)和壳聚糖(chitosan)诱导,分别在2h和1h,表达量达到最高峰。研究结果为进一步研究其在铁皮石斛次生代谢过程的调控功能奠定基础。

关键词：铁皮石斛 WRKY转录因子基因克隆转录激活表达分析

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药用石斛遗传多样性的SRAP标记研究

中国中药杂志 2008年第1期33卷 6-10页

作者：樊洪泓李廷春邱婧李正鹏林毅蔡永萍安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036 安徽省烟草研究所安徽凤阳233100

目的：利用SRAP分子标记技术进行药用石斛的遗传多样性研究。方法：采用在本实验中优化的SRAP反应体系,应用NTSYS软件对9种供试石斛的SRAP-PCR结果进行分析。结果：从中筛选得到40对多态性引物组合,共产生1 782条多态性条带,平均每个引... 详细信息

目的：利用SRAP分子标记技术进行药用石斛的遗传多样性研究。方法：采用在本实验中优化的SRAP反应体系,应用NTSYS软件对9种供试石斛的SRAP-PCR结果进行分析。结果：从中筛选得到40对多态性引物组合,共产生1 782条多态性条带,平均每个引物组合产生44.55条多态性条带,显示了较高的多态性比率。聚类分析40对引物组合的扩增结果,供试材料分为2大类,Jaccard’s遗传相似系数在0.3302~0.7892。结论：SRAP技术可有效地应用于药用石斛的遗传多样性及亲缘关系的研究。

关键词：药用石斛遗传多样性 SRAP

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石斛属植物SRAP反应体系的建立与优化

分子植物育种 2006年第S2期4卷 153-156页

作者：樊洪泓李廷春邱婧林毅蔡永萍安徽农业大学生命科学学院合肥230036 安徽省烟草研究所凤阳233100

SRAP标记是一种新的分子标记技术。本研究以霍山石斛总DNA为模板,对石斛SRAP反应体系的重要参数进行优化试验。经过大量重复性实验,建立了一套适用于石斛属植物稳定可靠、重复性强的SRAP反应体系:25μl的反应体系中,模板DNA量30ng、2.5m... 详细信息

SRAP标记是一种新的分子标记技术。本研究以霍山石斛总DNA为模板,对石斛SRAP反应体系的重要参数进行优化试验。经过大量重复性实验,建立了一套适用于石斛属植物稳定可靠、重复性强的SRAP反应体系:25μl的反应体系中,模板DNA量30ng、2.5mmol/LMg2+浓度、0.8μmol/L的上下游引物、200μmol/L的dNTPs以及Taq酶1U。该体系的建立为SRAP标记应用于石斛属植物的遗传多样性研究及原植物鉴别奠定了基础。

关键词：石斛(Dendrobium) SRAP标记优化