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鲈鱼生长激素的分离及其生物活性鉴定

动物学报 1998年第2期44卷 170-178页

作者：徐斌张培军苗宏志李德尚森山俊介川内浩司青岛海洋大学国家教委水产养殖开放研究实验室中国科学院海洋研究所实验海洋生物学开放研究实验室青岛海洋大学海洋生命学院日本北里大学水产学部分子内分泌学实验室

运用葡聚糖凝胶Ｇ１００过滤和反相高效液相色谱纯化两步法，首次从鲈鱼脑垂体中分离出鲈鱼生长激素。通过ＳＤＳ聚丙烯凝胶电泳测得鲈鱼非还原性的和还原性的生长激素分子量分别为１９２和２０７ｋＤ；等电聚焦证实鲈鱼生长激... 详细信息

运用葡聚糖凝胶Ｇ１００过滤和反相高效液相色谱纯化两步法，首次从鲈鱼脑垂体中分离出鲈鱼生长激素。通过ＳＤＳ聚丙烯凝胶电泳测得鲈鱼非还原性的和还原性的生长激素分子量分别为１９２和２０７ｋＤ；等电聚焦证实鲈鱼生长激素等电点为７１５。Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹反应证实，鲈鱼生长激素具有与大麻哈鱼生长激素抗体发生特异性免疫交叉反应的特性，而与大麻哈鱼催乳素和生长催乳素抗体无免疫交叉反应。制备了具有特异性的兔抗鲈鱼生长激素抗血清。腹腔注射鲈鱼生长激素给虹鳟幼鱼，具有显著促进其体长和体重增长的效应，证明分离得到的鲈鱼生长激素具有显著的生物活性。

关键词：鲈鱼生长激素分离生物活性

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鲈鱼催乳素的分离纯化与部分氨基酸序列分析

水产学报 1997年第S1期 15-23页

作者：徐斌李德尚森山俊介川内浩司张培军苗宏志国家教委水产养殖开放研究实验室青岛海洋大学!266003 日本北里大学水产学部分子内分泌学实验室!岩手县气仙郡三陆町022－01 中国科学院海洋研究所!青

首次从鲈鱼中分离出鲈鱼催乳素（sbPRL），并确定其部分氨基酸序列。鲈鱼脑垂体在碱性条件下（pH值为9．0）匀浆后，经葡聚糖凝胶（SephadexG－100）过滤和反相高效液相色谱(rpHPLC）分离，得到纯化的鲈鱼催乳素，其产率为1mg／g脑垂体... 详细信息

首次从鲈鱼中分离出鲈鱼催乳素（sbPRL），并确定其部分氨基酸序列。鲈鱼脑垂体在碱性条件下（pH值为9．0）匀浆后，经葡聚糖凝胶（SephadexG－100）过滤和反相高效液相色谱(rpHPLC）分离，得到纯化的鲈鱼催乳素，其产率为1mg／g脑垂体湿重。通过SDS-聚丙烯酸胺凝胶电泳（SDS－PAGE）确定，其非还原性和还原性的分子量分别为20．37和23．7kd；并与大麻哈鱼PRL抗体具有特异性的Western免疫印迹反应特性。根据Edman降解原理，对天冬氨酸肽链内切酶（Asp-N，AN）和赖氨酸肽链内切酶（LE）的酶解片段及完整的sbPRL进行氨基酸序列分析，已确定了鲈鱼催乳素的127个氨基酸残基的排列次序（包括N-末端序列）；它与非鲫和大麻哈鱼的相应序列比较，同源性分别为73．2％和70％。

关键词：鲈鱼催乳素分离氨基酸序列分析

豌豆蚜表皮蛋白基因响应“抗”“感”苜蓿品种的表达分析

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草业科学 2024年

作者：吴宜亭马瑞刘磊王森山甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室

豌豆蚜（Acyrthosiphon pisum）是苜蓿田的重要害虫，严重影响苜蓿的产量和品质。为解析豌豆蚜适应苜蓿的分子机制，本研究检测豌豆蚜取食“猎人河”（感蚜）和“甘农5号”（抗蚜）2个苜蓿品种后6个表皮蛋白基因（ApCP7、ApCP10、ApCP19... 详细信息

豌豆蚜（Acyrthosiphon pisum）是苜蓿田的重要害虫，严重影响苜蓿的产量和品质。为解析豌豆蚜适应苜蓿的分子机制，本研究检测豌豆蚜取食“猎人河”（感蚜）和“甘农5号”（抗蚜）2个苜蓿品种后6个表皮蛋白基因（ApCP7、ApCP10、ApCP19、ApCP35、ApCP62和ApCP19.8-like）的表达水平，并检测了沉默了2个表皮蛋白基因（ApCP7和ApCP62）的豌豆蚜在“猎人河”苜蓿上的存活率。结果表明，与取食“猎人河”苜蓿相比，取食“甘农5号”苜蓿后，豌豆蚜6个表皮蛋白基因的表达水平在头部中显著下调（P<0.01），而在卵巢显著上调（P<0.01）。在腹部组织中，除表皮蛋白ApCP7基因显著上调（P<0.01）外，其余表达水平均显著下调（P<0.01）；ApCP7、ApCP19、ApCP19.8-like和ApCP62在表皮组织中显著上调（P<0.05）。沉默表皮蛋白基因ApCP7和ApCP62后，豌豆蚜取食“猎人河”苜蓿72h后的存活率均显著降低（P＜0.05），分别为76.67%±0.37%和80.67%±0.58%。据此推测，ApCP7和ApCP62可能在豌豆蚜适应不同抗性水平的苜蓿品种中发挥作用，结果可为解析豌豆蚜与苜蓿的互作关系提供理论依据。

关键词：紫花苜蓿豌豆蚜寄主适应性 RNAi 表皮蛋白

单宁酸对豌豆蚜谷胱甘肽-S-转移酶活性与基因表达的影响

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草业科学 2024年第2期41卷 459-467页

作者：王继祖刘磊王森山宋丽雯甘肃农业大学植物保护学院甘肃兰州730070

本研究通过测定单宁酸(2 g·L^(-1))处理豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum) 48 h后体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性以及不同组织GST基因转录水平的变化,以明确单宁酸对GST活性以及基因表达的影响。结果表明:豌豆蚜取食单宁酸(2 g·L^(-1)) 4... 详细信息

本研究通过测定单宁酸(2 g·L^(-1))处理豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum) 48 h后体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性以及不同组织GST基因转录水平的变化,以明确单宁酸对GST活性以及基因表达的影响。结果表明:豌豆蚜取食单宁酸(2 g·L^(-1)) 48 h后,GST活性下降。相比不处理对照,经单宁酸处理后,豌豆蚜头部有7个GST基因上调表达,其中ApGST104、ApGSTX1上调表达3倍左右;胸部有10个GST基因上调表达,其中ApGSTD6上调表达6.4倍;腹部有10个GST基因上调表达,其中ApGST101、ApGST105上调5倍左右;中肠有9个GST基因上调表达,其中ApPGST105上调表达3.2倍。从结果可以看出,单宁酸对豌豆蚜GST基因的表达产生了影响,部分GST基因显著上调表达(P <0.05),表明GST基因可能在豌豆蚜对单宁酸的代谢中发挥重要的作用。

关键词：豌豆蚜解毒酶植物次生物质中肠 GST基因组织解剖实时荧光定量PCR

极端高温对截形叶螨体内海藻糖含量及海藻糖转运蛋白基因的影响

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中国农业科学 2024年第6期57卷 1091-1101页

作者：罗丽丹陈嘉明安琪刘磊孙勤哲刘欢王森山宋丽雯甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室

【目的】明确高温对截形叶螨（Tetranychus truncatus）海藻糖转运蛋白基因的影响，为有害生物的绿色防控提供理论依据。【方法】根据高温诱导下的截形叶螨转录组数据获取两条海藻糖转运蛋白基因TtTret1-like和TtTret1的CDS序列和蛋白... 详细信息

【目的】明确高温对截形叶螨（Tetranychus truncatus）海藻糖转运蛋白基因的影响，为有害生物的绿色防控提供理论依据。【方法】根据高温诱导下的截形叶螨转录组数据获取两条海藻糖转运蛋白基因TtTret1-like和TtTret1的CDS序列和蛋白氨基酸序列；利用ExPASy、ProScale、MEGA等分析工具对TtTret1-like和TtTret1进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析TtTret1-like和TtTret1在截形叶螨不同发育阶段及不同高温（38、42、46、50℃）处理下的表达特性；采用微量法测定不同高温处理下截形叶螨的海藻糖含量；利用RNA干扰（RNAi）技术沉默TtTret1-like和TtTret1，探究其在应对高温中的功能。【结果】生物信息学分析表明，TtTret1-like和TtTret1的CDS全长分别为1 389和1 569 bp，分别编码463和523个氨基酸，预测的蛋白分子量分别为50 189.03和57 358.10 Da，等电点分别为8.87、8.70。TtTret1-like和TtTret1均为碱性氨基酸和疏水性氨基酸且同属于不稳定蛋白；二级结构预测为螺旋和卷曲结构；两个海藻糖转运蛋白均具有协同转运蛋白超家族（major facilitator superfamily,MFS）的保守结构域及12个跨膜结构域。氨基酸序列相似性和系统发育分析表明，TtTret1-like和TtTret1与蛛形纲其他物种海藻糖转运蛋白序列的一致性较高，尤其与二斑叶螨（T. urticae）的亲缘关系最近。TtTret1-like在卵期、幼螨期和成螨期的表达量较高；TtTret1在幼螨期高表达。随处理温度的升高，TtTret1-like的表达量大致呈上升趋势，在50℃时表达量最高；而TtTret1的表达量随处理温度的升高先上升后下降，在42℃时表达量达到最高；高温胁迫后截形叶螨体内的海藻糖含量显著升高。沉默TtTret1-like和TtTret1 48 h后，截形叶螨体内整体海藻糖含量上升，但血淋巴海藻糖含量下降；用50℃高温处理截形叶螨2 h，然后恢复至96 h时，截形叶螨存活率分别为11%和46.67%，显著低于对照组。【结论】截形叶螨TtTret1-like和TtTret1在其抵御高温胁迫过程中具有重要的作用。

关键词：截形叶螨高温胁迫海藻糖海藻糖转运蛋白 RNA干扰

抗、感紫花苜蓿品种对豌豆蚜游离氨基酸的影响

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草业科学 2024年第7期41卷 1702-1709页

作者：姚路王森山马瑞魏江文王文军宋丽雯刘磊蒋琼甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室甘肃兰州730070

昆虫无法合成其生长发育过程中全部的氨基酸,必须从食物中或其他途径获取,而植物韧皮部氨基酸被认为是蚜虫生产性能的关键限制因素。为明确抗蚜紫花苜蓿品种对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)游离氨基酸含量的影响,本研究通过液相-质谱联... 详细信息

昆虫无法合成其生长发育过程中全部的氨基酸,必须从食物中或其他途径获取,而植物韧皮部氨基酸被认为是蚜虫生产性能的关键限制因素。为明确抗蚜紫花苜蓿品种对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)游离氨基酸含量的影响,本研究通过液相-质谱联用仪测定了豌豆蚜取食抗、感紫花苜蓿(Medicago sativa)品种(抗蚜品种‘甘农5号’和感蚜品种‘猎人河’)后游离氨基酸的含量及供试植物材料游离氨基酸的含量。结果表明:‘甘农5号’色氨酸含量显著高于‘猎人河’(P<0.05),差异倍数为2.25;豌豆蚜取食‘甘农5号’后天冬氨酸的含量显著高于豌豆蚜取食‘猎人河’后的含量(P<0.05),差异倍数为1.48;豌豆蚜取食‘甘农5号’后脯氨酸、甘氨酸、组氨酸和总氨基酸的含量显著低于豌豆蚜取食‘猎人河’后的含量(P<0.05),差异倍数分别为0.31、0.81、0.61和0.86。说明抗蚜紫花苜蓿品种‘甘农5号’可导致豌豆蚜的游离氨基酸含量发生变化,且可通过影响豌豆蚜的脯氨酸和总氨基酸含量来影响豌豆蚜的生存和发展。研究结果可为豌豆蚜的防治及优质抗蚜苜蓿种质资源的筛选提供一定的理论基础和依据。

关键词：豌豆蚜昆虫紫花苜蓿游离氨基酸液相-质谱联用仪抗蚜氨基酸测定

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企业人力资源管理中的薪酬管理创新路径研究

管理科学与研究（中英文版） 2024年第9期13卷 17-21页

作者：李亚庆王森山甘肃农业大学甘肃兰州730000

薪酬管理是企业人力资源管理的重要组成部分,直接影响员工的工作积极性、组织效率以及公司竞争力。随着经济环境和市场条件的不断变化,传统薪酬管理模式也逐渐显露出其局限性。本文首先通过分析企业薪酬管理理念的发展,进而针对其对于... 详细信息

薪酬管理是企业人力资源管理的重要组成部分,直接影响员工的工作积极性、组织效率以及公司竞争力。随着经济环境和市场条件的不断变化,传统薪酬管理模式也逐渐显露出其局限性。本文首先通过分析企业薪酬管理理念的发展,进而针对其对于企业发展的作用做出论述,指出当下企业薪酬管理中存在的问题并对其提出具有针对性的解决措施,旨在为企业提供改进薪酬管理的实践指导和理论支持。

关键词：人力资源薪酬管理创新路径

外周血Th17细胞/Treg细胞、IL-33水平与肺炎支原体肺炎患儿肺功能及预后的关系

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国际呼吸杂志 2024年第9期44卷 1054-1060页

作者：贺蓉张森山卢旭张娟安康市中心医院儿科安康

目的探究外周血辅助性T(Th)17细胞/调节性T(Treg)细胞、白细胞介素(IL)33水平与肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺功能及预后的关系。方法本研究为观察性研究, 采用非随机抽样的方法选取2021年1月至2023年12月安康市中心医院收治的93例MPP患儿... 详细信息

目的探究外周血辅助性T(Th)17细胞/调节性T(Treg)细胞、白细胞介素(IL)33水平与肺炎支原体肺炎(MPP)患儿肺功能及预后的关系。方法本研究为观察性研究, 采用非随机抽样的方法选取2021年1月至2023年12月安康市中心医院收治的93例MPP患儿为研究对象。根据MPP病情严重程度分为重症MPP组(40例)和轻症MPP组(53例)。另外选择同期行健康体检的40名儿童为对照组。比较3组儿童肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比(%pred)、用力肺活量(FVC)%pred、FEV1/FVC%pred和呼气流量峰值(PEF)%pred]、外周血Th17细胞、Treg细胞与炎症细胞因子水平(IL-17、IL-10和IL-33)的差异。对MPP患儿中外周血Th17细胞/Treg细胞、IL-33与肺功能指标进行相关性分析。治疗结束后根据预后情况将MPP患儿分为预后良好组(66例)和预后不良组(27例), 再次检测MPP患儿外周血Th17细胞、Treg细胞和IL-33水平, 比较预后良好组与预后不良组Th17细胞/Treg细胞、IL-33水平的差异。绘制受试者操作特征(ROC)曲线分析治疗结束后再次检测的Th17细胞/Treg细胞、IL-33对MPP患儿预后不良的诊断价值, 并采用平行试验进行联合诊断。结果重症MPP组男20例, 女20例, 年龄(5.23±1.69)岁;轻症MPP组男23例, 女30例, 年龄(5.29±1.58)岁;对照组男22名, 女18名, 年龄(5.32±1.71)岁;3组儿童性别和年龄比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。重症MPP组和轻症MPP组FEV1%pred、FVC%pred、FEV1/FVC%pred、PEF%pred均低于对照组, 且重症MPP组低于轻症MPP组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。重症MPP组和轻症MPP组Th17细胞、Th17细胞/Treg细胞、IL-17、IL-33均高于对照组, 而Treg细胞、IL-10均低于对照组, 且重症MPP组Th17细胞、Th17细胞/Treg细胞、IL-17、IL-33均高于轻症组, 而Treg细胞、IL-10均低于轻症MPP组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示, MPP患儿中外周血Th17细胞/Treg细胞、IL-33与FEV1%pred、FVC%pred、FEV1/FVC%pred、PEF%pred均呈负相关(均P<0.05)。预后不良组Th17细胞/Treg细胞、IL-33均高于预后良好组[(0.21±0.06)比(0.14±0.03), (7.04±2.16) ng/L比(4.08±1.44) ng/L, 均P<0.001]。ROC曲线分析显示, Th17细胞/Treg细胞、IL-33和二者联合诊断MPP患儿预后不良的曲线下面积分别为0.856(95%CI:0.751～0.962)、0.879(95%CI:0.790～0.968)、0.928(95%CI:0.859～0.996)。结论外周血Th17细胞/Treg细胞、IL-33水平与MPP患儿的肺功能指标呈负相关, 且对患儿预后不良具有一定诊断价值。

关键词：肺炎, 支原体儿童 Th17细胞 T淋巴细胞, 调节性白细胞介素33

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昆虫病原线虫对暗黑鳃金龟的致病力

中国生物防治学报 2024年第5期 1009-1014页

作者：张彩铃王志敏王思雨 Ibrahim Osman 李克斌张帅曹雅忠王森山尹姣甘肃农业大学植物保护学院中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室

为了筛选防治暗黑鳃金龟Holotrichia parallela的优良昆虫病原线虫品系，本文通过室内生测，比较了7个昆虫病原线虫品系对暗黑鳃金龟1龄末幼虫的致病力，并明确了其最佳侵染条件。生测结果表明，不同昆虫病原线虫品系对暗黑鳃金龟1龄末... 详细信息

为了筛选防治暗黑鳃金龟Holotrichia parallela的优良昆虫病原线虫品系，本文通过室内生测，比较了7个昆虫病原线虫品系对暗黑鳃金龟1龄末幼虫的致病力，并明确了其最佳侵染条件。生测结果表明，不同昆虫病原线虫品系对暗黑鳃金龟1龄末幼虫均有一定的致病力，其中樱桃异小杆线虫Heterorhabditis bacteriophora(D26-6)对暗黑鳃金龟幼虫致病力最强，在处理9 d后，暗黑鳃金龟幼虫的校正死亡率达到了100%。此外，温度、土壤湿度以及线虫施用剂量对D26-6线虫的致病力均会产生一定的影响，其侵染暗黑鳃金龟幼虫的适宜温度为25℃、适宜土壤含水量为18%；当暗黑鳃金龟幼虫与D26-6线虫比为1:100时，处理11 d后暗黑鳃金龟幼虫的校正死亡率可达到100%。

关键词：昆虫病原线虫樱桃异小杆线虫暗黑鳃金龟致病力