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蝶蛹金小蜂两种幼虫唾液蛋白分子特性及其功能初探

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蝶蛹金小蜂两种幼虫唾液蛋白分子特性及其功能初探

作者：梅耀天浙江大学

学位级别：硕士

寄生蜂是农业害虫生物防治的重要天敌昆虫资源,在自然界中种类繁多。目前本实验室的研究集中在寄生蜂雌蜂所携带的,能够对寄主天然免疫反应等一系列重要生理过程起到调控作用的一些关键寄生活性因子,如毒液,多分DNA病毒(PDVs)等,但对寄... 详细信息

寄生蜂是农业害虫生物防治的重要天敌昆虫资源,在自然界中种类繁多。目前本实验室的研究集中在寄生蜂雌蜂所携带的,能够对寄主天然免疫反应等一系列重要生理过程起到调控作用的一些关键寄生活性因子,如毒液,多分DNA病毒(PDVs)等,但对寄生蜂幼虫分泌的活性物质诸如唾液的组分,功能及其与寄主天然免疫反应的相互作用的研究较少。现对昆虫唾液蛋白的研究主要集中在植食性昆虫和吸血性昆虫,它们的唾液蛋白具有抵御植物防御反应,充当植物-昆虫间效应子,协助传播病毒等作用。本实验室蝶蛹金小蜂(Pteromalus puparum)幼虫唾液的初步研究结果表明它具有抑制寄主血淋巴黑化的作用,即可能调控寄主害虫天然免疫。有鉴于此,本论文制备唾液蛋白组并对唾液组分及富集途径进行了鉴定分析;结合幼虫唾液腺转录组数据选取两个具备信号肽和特异高表达的唾液蛋白编码基因,而后进行基因克隆,表达模式的分析和对其功能研究体系的初步探索。1、蝶蛹金小蜂幼虫唾液蛋白质组的分析通过对蝶蛹金小蜂幼虫唾液蛋白质组的分析,共鉴定到38个唾液蛋白。根据序列和结构域信息分为蛋白酶、蛋白酶抑制剂、识别与结合蛋白、碳水化合物代谢,酯酶,其他蛋白和未知蛋白。并对它们进行GO(Gene Ontology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析。利用蝶蛹金小蜂幼虫唾液腺转录组数据筛选出在幼虫唾液腺中高表达的508个基因,结合蛋白质组的分析结果,最终选择了两个具有信号肽且特异高表达的蝶蛹金小蜂幼虫唾液蛋白编码基因进行后续实验。2、两个幼虫唾液蛋白编码基因的克隆和表达模式分析通过序列比对从蝶蛹金小蜂基因组中得到PP05924和PP16911的CDS全长,对其进行序列分析和进化树分析,结果表明PP05924开放阅读框1884bp,编码628个氨基酸,预测分子量为75KDa,具信号肽。进化分析表明,PP05924与短管赤眼蜂(Trichogramma pretiosum)的arylphorin-like(XP14234947.1)亲缘关系最近。PP16911开放阅读框459bp,编码153个氨基酸,预测分子量为18.5KDa,具信号肽。进化分析表明,PP16911与两未知功能蛋白亲缘关系最近。而后成功克隆得到这两个基因去信号肽后的编码区,并采用PcoldI表达系统对它们进行原核表达,纯化,透析并制备多克隆抗体。荧光定量PCR和Western blot分析结果表明,PP05924基因在幼虫期第五天(简写为L5)高表达。对L5期的蝶蛹金小蜂各组织进行荧光定量PCR和Western blot分析结果表明,无论是在mRNA水平还是蛋白水平上,PP05924在唾液腺,唾液和肠道中均显著高表达。对成虫期第一天(简写为A1)的蝶蛹金小蜂各组织进行定量分析结果表明,PP05924在唾液腺中显著高表达。同样对PP16911基因进行上述分析结果表明,PP16911基因也在L5期高表达。对L5期的蝶蛹金小蜂各组织进行荧光定量PCR和Western blot分析结果表明,无论是在mRNA水平还是蛋白水平上,PP16911在唾液腺及唾液中均显著高表达。对A1期的蝶蛹金小蜂成虫各组织进行定量分析结果表明,PP16911在唾液腺中显著高表达。3、幼虫唾液蛋白的功能研究体系初探由于蝶蛹金小蜂两个幼虫唾液蛋白编码基因均在L5期特异性高表达,成虫期表达量低,故通过向寄主蛹注射dsRNA的方法来干扰唾液蛋白基因,达到建立幼虫高表达基因功能研究体系的目的。实验结果表明,在蝶蛹金小蜂幼虫期第二天(L2),对寄主蛹注射9000ng/μl,7μl的dsRNA,48h后对其进行qPCR检测,PP16911的转录水平显著降低,表明该研究体系能用于干扰在蝶蛹金小蜂幼虫期高表达的基因,并可为该基因的后续功能研究奠定基础。

关键词：蝶蛹金小蜂唾液蛋白基因克隆表达模式功能研究

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旋翼间距对共轴刚性旋翼气动噪声的影响

航空学报 2024年

作者：祁浩天王亮权张卫国刘超凡濮天梅扬州大学电气与能源动力工程学院中国空气动力研究与发展中心空天飞行空气动力科学与技术全国重点实验室

基于雷诺平均Navier-Stokes方程和运动嵌套网格建立了共轴刚性旋翼流场模拟方法，采用Farassat 1A公式进行气动噪声预测，通过与相关试验对比验证了所建立方法的有效性。针对悬停和前飞状态不同旋翼间距下的旋翼非定常拉力波动和气动噪... 详细信息

基于雷诺平均Navier-Stokes方程和运动嵌套网格建立了共轴刚性旋翼流场模拟方法，采用Farassat 1A公式进行气动噪声预测，通过与相关试验对比验证了所建立方法的有效性。针对悬停和前飞状态不同旋翼间距下的旋翼非定常拉力波动和气动噪声开展研究。结果表明，悬停状态随着旋翼间距的增大，双旋翼气动干扰变弱，由桨叶相遇干扰引起的拉力波动和噪声显著减弱，且上旋翼的减弱更明显。不同间距的上旋翼声压波形相似，而下旋翼波形则有所变化。小前进比时增大旋翼间距会改变上旋翼桨尖涡与下旋翼的干扰位置和强度，在特定间距这种桨-涡干扰噪声会有所增强。大前进比状态旋翼间距增大对气动噪声的影响较小；相比之下，小升力偏置状态的噪声减弱更明显。

关键词：共轴刚性旋翼气动噪声运动嵌套网格 CFD 旋翼间距

澎溪河消落带大型土壤动物群落分布格局及其影响因素

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生物多样性 2024年第07期 59-69页

作者：马骅李常青余品锋陈杰贺天耀王可洪重庆三峡学院三峡库区水环境演变与污染防治重庆市重点实验室重庆三峡学院三峡库区环境生态重庆市野外科学观测站

消落带是水体与陆地之间的过渡区域,生态过程独特,生物多样性较高,对环境变化非常敏感。土壤动物是消落带生态系统的重要组成部分,发挥着重要的生态功能。研究消落带土壤动物多样性对充分评估大型水利水电工程对生态环境的影响至关重要... 详细信息

消落带是水体与陆地之间的过渡区域,生态过程独特,生物多样性较高,对环境变化非常敏感。土壤动物是消落带生态系统的重要组成部分,发挥着重要的生态功能。研究消落带土壤动物多样性对充分评估大型水利水电工程对生态环境的影响至关重要。本文通过对澎溪河消落带8个地点和4个高程大型土壤动物群落及其环境要素的野外调查,结合冗余分析(redundancyanalysis,RDA)探讨其关键影响因素,运用扩散生态位连续体指数(dispersal-nichecontinuumindexes,DNCI)探讨扩散过程和生态位分化在土壤动物群落多样性维持中的相对重要性。结果表明,澎溪河消落带大型土壤动物共有16目77科57,072只,以马陆、鼠妇等腐食性类群和蜘蛛、步甲等捕食性类群为主。土壤动物多度和丰度沿河流流向和高程都呈现出先增加后降低的趋势,多样性指数和优势度指数趋势相反。捕食者相对多度随高程增加而降低,腐食者变化趋势与此相反。消落带大型土壤动物群落在垂向尺度上表现出明显的空间分布格局,采样地点对群落结构和功能组成无显著影响。水文情势和土壤理化性质的总解释量分别为31.53%和14.36%,共同效应分别为15.43%和14.05%,单独效应分别为16.10%和0.31%。消落带生境(150–170m)中物种扩散过程的重要性显著高于生态位分化,陆地生境(180m)中二者无显著差异。水文情势是消落带土壤动物群落组成、结构及其空间格局的关键影响因素。消落带与陆地之间生物迁移扩散是消落带土壤动物群落多样性维持的主要途径。研究结果可为消落带生物多样性的保护和恢复提供重要的科学依据。

关键词：大型土壤动物三峡水库消落带水位变化生物多样性

选择性免疫球蛋白A缺乏症合并自身免疫性胃炎及脊髓亚急性联合变性1例报告

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海军军医大学学报 2024年第2期45卷 252-254页

作者：钱小溪吴昊天陈兆耀骆守真南京中医药大学附属医院脑病中心南京210029

1病例资料患者男,62岁,主诉“四肢麻木3个月”于2022年4月28日收住南京中医药大学附属医院脑病中心。患者3个月前无明显诱因出现双下肢麻木、乏力,步态不稳,脚踩棉花感,伴双上肢麻木,间断性头晕,腰部束带感,症状逐渐加重;并有胃胀不适,... 详细信息

1病例资料患者男,62岁,主诉“四肢麻木3个月”于2022年4月28日收住南京中医药大学附属医院脑病中心。患者3个月前无明显诱因出现双下肢麻木、乏力,步态不稳,脚踩棉花感,伴双上肢麻木,间断性头晕,腰部束带感,症状逐渐加重;并有胃胀不适,大便干结难解,排尿不净感,近期体重无明显变化。既往有颈椎病病史、长期饮酒史(每天约饮白酒250 g,已戒酒半年),无药物、食物过敏史,否认家族遗传史。

关键词：选择性免疫球蛋白A缺乏症自身免疫性胃炎脊髓亚急性联合变性甲钴胺

不同加工方式的三文鱼货架期预测模型建立与应用

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食品与发酵工业 2024年第16期50卷 40-49页

作者：张德福曲耀天张永勤董浩林洪张明励建荣渤海大学食品科学与工程学院渤海大学海洋研究院辽宁省食品安全重点实验室生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心山东美佳集团有限公司中国海洋大学食品科学与工程学院

为建立简单实用的三文鱼货架期模型，以冰鲜三文鱼、冷冻三文鱼、烟熏三文鱼和炙烤三文鱼为研究对象，分析了其在0、4、10℃3种贮藏温度条件下的菌落总数、pH、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen, TVB-N)含量、感官评价和组... 详细信息

为建立简单实用的三文鱼货架期模型，以冰鲜三文鱼、冷冻三文鱼、烟熏三文鱼和炙烤三文鱼为研究对象，分析了其在0、4、10℃3种贮藏温度条件下的菌落总数、pH、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen, TVB-N)含量、感官评价和组胺含量的变化情况，并采用一级动力学模型和Arrhenius方程模拟产品的货架期，建立了预测模型。结果表明，TVB-N含量、菌落总数和组胺含量在0～10℃的品质变化规律可以为建立货架期预测模型提供直接参考，以之为基础建立的货架期预测模型准确度较高，对监测、改善三文鱼在生产流通环节易腐败变质的问题具有良好的应用价值。

关键词：三文鱼(大西洋鲑) 加工方式新鲜度货架期预测模型

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油管分级管理模式的建立与实施研究

中国科技期刊数据库工业A 2024年第6期 0024-0028页

作者：侯天耀孤岛采油厂机采装备服务部山东东营257000

油管在油田原油生产过程中,由于金属材质、油水井井况的不同,导致管柱容易发生腐蚀、断脱、偏磨、刺漏等现象,不仅降低了原油生产能力,增加作业工作量,还造成大量的油管损毁报废,直接导致生产成本增加。修复油管质量水平的高低直接影响... 详细信息

油管在油田原油生产过程中,由于金属材质、油水井井况的不同,导致管柱容易发生腐蚀、断脱、偏磨、刺漏等现象,不仅降低了原油生产能力,增加作业工作量,还造成大量的油管损毁报废,直接导致生产成本增加。修复油管质量水平的高低直接影响着作业环节,油管使用性能直接影响着原油生产成本投入和生产能力。因此,我们根据按质分级的指导原则,将油管从修复环节开始,按油管的质量对油管进行分级修复、分级管理、分级使用,组织实施了油管差异化分级管理,有效提高了油管质量和油管利用率,推动了作业质量的进一步提升。

关键词：油管修复分级管理差异化管理

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江苏省急诊预检分诊工作现况调查

中华急诊医学杂志 2024年第6期33卷 825-830页

作者：吴昊鸣黄萍周田田梅天舒彭迎欣张敏南京中医药大学护理学院南京210023 南京中医药大学鼓楼临床医学院急诊医学科南京210008 南京大学医学院附属鼓楼医院南京210008

随着社会发展以及老龄化进程加快,急诊医疗就诊量居高不下[1-2]。急诊就诊患者中有80%属于“非急诊患者”,真正需要紧急救治的患者仅占20%[3],若急诊医疗资源被过度占用则会延误真正急危患者的生命安全[4]。预检分诊是对急诊就诊患者进... 详细信息

随着社会发展以及老龄化进程加快,急诊医疗就诊量居高不下[1-2]。急诊就诊患者中有80%属于“非急诊患者”,真正需要紧急救治的患者仅占20%[3],若急诊医疗资源被过度占用则会延误真正急危患者的生命安全[4]。预检分诊是对急诊就诊患者进行快速评估,确保危重患者优先诊治,更加合理有效地分配有限的医疗资源,对保障患者安全有重要意义[5]。2018年《急诊预检分诊专家共识》的发布对预检分诊工作提出了更为规范化的要求,但在共识发布后各医院预检分诊工作开展情况鲜有报道。因此本研究从人力、环境设施、分诊信息化、分诊质控管理等多个方面对江苏省内多家医院急诊科进行预检分诊现况调查,为急诊预检分诊的建设和管理提供参考依据。

关键词：预检分诊急诊医疗医疗资源就诊量危重患者现况调查质控管理紧急救治

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当代青年理想人格的塑造途径及教育意义

中文科技期刊数据库（文摘版）社会科学

中文科技期刊数据库（文摘版）社会科学 2024年第2期 56-59页

作者：侯耀天李颖内蒙古农业大学内蒙古呼和浩特010000

当代青年理想人格的塑造是教育工作的重要任务之一。该篇文章从家庭、学校和社会三个层面探讨了塑造当代青年理想人格的途径,并强调了其教育意义。家庭是塑造青年人格的第一道防线,父母的言传身教、家庭氛围的营造对于培养青年的理想信... 详细信息

当代青年理想人格的塑造是教育工作的重要任务之一。该篇文章从家庭、学校和社会三个层面探讨了塑造当代青年理想人格的途径,并强调了其教育意义。家庭是塑造青年人格的第一道防线,父母的言传身教、家庭氛围的营造对于培养青年的理想信念和道德品质至关重要。学校作为社会教育的主要阵地,应通过课程设置、师资培养等方面,引导学生树立正确的人生观和价值观。社会则提供了广阔的实践舞台,通过参与志愿活动、社会实践等途径,使青年能够更好地融入社会,感受社会责任。塑造当代青年理想人格对于个体的健康成长和社会的繁荣稳定具有积极的意义。

关键词：当代青年理想人格塑造途径教育意义

基于单语优先级采样自训练神经机器翻译的研究

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通信学报 2024年第4期45卷 65-72页

作者：张笑燕逄磊杜晓峰陆天波夏亚梅北京邮电大学计算机学院(国家示范性软件学院) 北京100876

为了提高神经机器翻译(NMT)性能,改善不确定性过高的单语在自训练过程中对NMT模型的损害,提出了一种基于优先级采样的自训练神经机器翻译模型。首先,通过引入语法依存分析构建语法依存树并计算单语单词重要程度。然后,构建单语词典并基... 详细信息

为了提高神经机器翻译(NMT)性能,改善不确定性过高的单语在自训练过程中对NMT模型的损害,提出了一种基于优先级采样的自训练神经机器翻译模型。首先,通过引入语法依存分析构建语法依存树并计算单语单词重要程度。然后,构建单语词典并基于单语单词的重要程度和不确定性定义优先级。最后,计算单语优先级并基于优先级进行采样,进而合成平行数据集,作为学生NMT的训练输入。在大规模WMT英德部分数据集上的实验结果表明,所提模型能有效提升NMT的翻译效果,并改善不确定性过高对模型的损害。

关键词：机器翻译数据增强自训练不确定性语法依存

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