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巴氏杜氏藻类胡萝卜素异构酶基因的分子克隆及外源表达系统的构建

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巴氏杜氏藻类胡萝卜素异构酶基因的分子克隆及外源表达系统的构建

作者：梁颖婕华南理工大学

学位级别：硕士

类胡萝卜素(番茄红素,β-胡萝卜素,玉米黄质等)是一类具有重要实用意义的色素,商业上被用作食品着色剂,营养保健品,化妆品,药品等。巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil,简称巴氏藻)作为杜氏藻属的一员,能在高光强、营养缺陷和高盐等胁迫条... 详细信息

类胡萝卜素(番茄红素,β-胡萝卜素,玉米黄质等)是一类具有重要实用意义的色素,商业上被用作食品着色剂,营养保健品,化妆品,药品等。巴氏杜氏藻(Dunaliella bardawil,简称巴氏藻)作为杜氏藻属的一员,能在高光强、营养缺陷和高盐等胁迫条件下大量积累β-胡萝卜素,其类胡萝卜素生物合成途径受到各种酶的催化和调控。类胡萝卜素异构酶(CRTISO)是类胡萝卜素生物合成途径中的关键酶之一,催化顺式番茄红素转化为全反式番茄红素,产物最终被环化酶催化成α-或β-胡萝卜素。本论文结合反转录PCR、简并PCR和快速扩增c DNA末端(RACE)等实验方法,率先从巴氏藻中分离得到CRTISO基因(Db CRTISO)的cDNA序列。cDNA长度为2226 bp,预测并克隆的ORF长1488 bp,编码495个氨基酸,预测的蛋白质分子量约为54.35 kDa。通过基因组步移得到Db CRTISO的基因组序列和启动子序列,其中基因组长7068 bp,包含16个外显子和15个内含子,启动子长2126 bp。保守结构域分析发现DbCRTISO存在类胡萝卜素异构酶特有的结构域carotsom。同源比对和进化树分析发现DbCRTISO与莱茵衣藻CRTISO的亲缘关系最近。分析DbCRTISO启动子的转录因子结合位点,发现存在GATA盒、CCAAT盒和GT1GMSCAM4等调控元件,推测DbCRTISO基因的表达可能与光调控、温度和盐调控有关,其中盐调控元件的发现,有助于在转录水平上研究巴氏藻在高盐环境下的类胡萝卜素合成机制。为了验证巴氏藻类胡萝卜素合成的关键酶基因的功能,将巴氏藻和欧文氏菌有关番茄红素合成的酶基因进行组合与替换,构建了质粒pACCRT-GGPS-IB,pACCRT-GGPSI-PSY,pACCRT-E-DbPDZ和pACCRT-E-DbPDZC,在大肠杆菌DH5α中表达。巴氏藻的DbGGPS和DbPSY能替代欧文氏菌的crt E和crt B,使转化子积累番茄红素。但DbPDS、DbZDS和DbCRTISO的联合表达不能直接代替欧文氏菌的crtⅠ把八氢番茄红素转化成番茄红素。这个过程可能还需要另一个异构酶——ζ-胡萝卜素异构酶(Z-ISO)的参与。

关键词：巴氏杜氏藻类胡萝卜素类胡萝卜素异构酶基因克隆功能表达

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枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的特性及补料研究

食品与发酵工业 2012年第3期38卷 43-48页

作者：陈鸿图傅金磊杨月明梁颖婕谢文化朱明军华南理工大学生物科学与工程学院广州甘蔗糖业研究所广东广州510316

采用分离纯化的枯草芽孢杆菌进行产中性蛋白酶的研究,结果表明:适宜的碳源和氮源分别为玉米粉和豆粕粉;磷酸盐能提高酶产量;未添加Na2HPO4和KH2PO4的情况下,Ca2+和Mg2+对产酶都有抑制作用;Na2HPO4和KH2PO4存在时,1 mmol/L的Ca2+和Mg2+... 详细信息

采用分离纯化的枯草芽孢杆菌进行产中性蛋白酶的研究,结果表明:适宜的碳源和氮源分别为玉米粉和豆粕粉;磷酸盐能提高酶产量;未添加Na2HPO4和KH2PO4的情况下,Ca2+和Mg2+对产酶都有抑制作用;Na2HPO4和KH2PO4存在时,1 mmol/L的Ca2+和Mg2+能使酶产量分别提高12%和8%,随着离子浓度的增加,产酶受到抑制;采用在11 h、18 h和24 h分别补加10 g/L玉米粉和7.5 g/L豆粕粉的补加策略,产量提高了96%,生产强度提高了112%。

关键词：枯草芽孢杆菌中性蛋白酶发酵分批补料

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咖啡特异性实时荧光PCR检测方法的建立

检验检疫学刊 2019年第1期29卷 13-17页

作者：梁颖婕冼钰茵刘婧文黄成栋奚星林凌莉广东检验检疫技术中心广东广州510623 广东省动植物与食品进出口技术措施研究重点实验室

本研究通过对咖啡基因信息的检索分析,根据咖啡的XMT1基因序列设计了一组咖啡特异性的引物与探针,建立咖啡物种特异性实时荧光PCR检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性测试,结果表明,该方法能快速检测出咖啡物种特异性,定性... 详细信息

本研究通过对咖啡基因信息的检索分析,根据咖啡的XMT1基因序列设计了一组咖啡特异性的引物与探针,建立咖啡物种特异性实时荧光PCR检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性测试,结果表明,该方法能快速检测出咖啡物种特异性,定性检测体系对咖啡DNA的检测灵敏度为0.1 ng/μL,特异性和稳定性良好。

关键词：咖啡物种特异性实时荧光PCR 鉴别

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“两路”精神的科学内涵和时代价值再认识

西藏民族大学学报(哲学社会科学版) 2024年第2期 20-24+46+154页

作者：曾燕梁颖西藏大学马克思主义学院

“两路”精神作为中国共产党精神谱系的重要组成部分，是中国人民的宝贵精神财富，也是实现中华民族伟大复兴的强大精神力量。“两路”人所彰显的“一不怕苦、二不怕死”的革命英雄主义精神；“顽强拼搏、甘当路石”的不懈奋斗和无私奉... 详细信息

“两路”精神作为中国共产党精神谱系的重要组成部分，是中国人民的宝贵精神财富，也是实现中华民族伟大复兴的强大精神力量。“两路”人所彰显的“一不怕苦、二不怕死”的革命英雄主义精神；“顽强拼搏、甘当路石”的不懈奋斗和无私奉献精神；“军民一家、民族团结”的军民深情和各族人民群众团结互助精神；三者既相互联系，又互相影响，形成了“两路”精神有机整体的高度统一，是对伟大建党精神的有力诠释和丰富发展。新时代新征程，我国正处于实现中华民族伟大复兴的关键时期，面临新形势、新任务和新挑战，需要传承好、弘扬好“两路”精神，激发全民族的奋进力量和精神斗志，形成新时代战胜各种艰难险阻的磅礴伟力。

关键词： “两路”精神科学内涵时代价值

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基于生态网络效用的宁波市土地碳代谢分析

环境科学 2024年

作者：李理周小平梁颖杨兰北京师范大学政府管理学院

揭示土地利用对碳代谢的影响机制，为推动土地资源可持续利用和城市绿色低碳转型发展提供依据。以宁波市为研究对象，在多源数据收集的基础上构建碳代谢分析框架，综合运用生态网络分析、标准差椭圆、推力和拉力等模型追踪碳要素流动过... 详细信息

揭示土地利用对碳代谢的影响机制，为推动土地资源可持续利用和城市绿色低碳转型发展提供依据。以宁波市为研究对象，在多源数据收集的基础上构建碳代谢分析框架，综合运用生态网络分析、标准差椭圆、推力和拉力等模型追踪碳要素流动过程，刻画碳代谢时空演化规律，进而提出土地利用碳减排策略。结果发现：①宁波市净碳排放量（以C计）由381.78万t增至2978.11万t，增加了7.80倍。②垂直方向上净碳排放量为负值，除林地和草地为正碳代谢分室外，其他用地类型均表现为负碳代谢分室；水平方向上的净碳排放量为负值，主要是耕地、林地向其他建设用地转变导致。③掠夺限制是主要的生态关系，整体生态函数值为0.86，相较于2000～2010年，2010～2020年掠夺限制标准差椭圆中心向东旋转1.47°，竞争关系标准差椭圆中心向西旋转10.46°，椭圆总体范围减小。④耕地、林地和其他建设用地是主要的推力类型，其他建设用地和城镇用地是主要的拉力类型。因此，需要通过采取多种措施降低高碳排放用地密度，同时对生态用地分类制定碳汇提升策略，实现土地利用结构优化和国土空间减排增汇的目标。

关键词：土地利用碳代谢生态网络效用分析碳流宁波市

基于遥感生态指数的淮河流域生态环境质量时空演化及其驱动因素分析

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环境科学 2024年第7期45卷 4112-4121页

作者：余慧婕张方敏马赫卢燕宇南京信息工程大学气象灾害预报预警与评估协同创新中心寿县国家气候观象台淮河流域典型农田生态气象野外科学试验基地安徽省气象局气象科学研究所大气科学与卫星遥感安徽省重点实验室

厘清流域生态环境质量的时空演化特征及其对自然环境和人为因素的响应，对流域生态环境政策实施至关重要.利用谷歌地球引擎建立遥感生态指数（RSEI），结合趋势分析、变异系数和Hurst指数对淮河流域2002～2022年的生态质量时空变化进行... 详细信息

厘清流域生态环境质量的时空演化特征及其对自然环境和人为因素的响应，对流域生态环境政策实施至关重要.利用谷歌地球引擎建立遥感生态指数（RSEI），结合趋势分析、变异系数和Hurst指数对淮河流域2002～2022年的生态质量时空变化进行评价，并运用地理探测器探究RSEI空间分异性的主要驱动因子.结果表明：(1)近21年淮河流域RSEI总体上改善，但呈阶段性上升-下降趋势，其中差和较差等级面积呈减小趋势，中等级面积呈增加趋势，良和优等级面积呈增加趋势.改善面积占比为55.93%，退化面积占比为22.01%.(2)空间分布上，RSEI整体呈现自东向西逐渐变差的分布特征（西北和西南边缘山区除外）.东部稳定性较好，西部和中部稳定性较差.未来流域生态质量变化为反持续性，以改善为主.(3)因子探测结果显示，淮河流域RSEI空间分异主要受到植被因子的驱动作用，其次为海拔.双因子间的交互作用增强了对RSEI空间分异的驱动力，其中植被因子和海拔的交互作用对RSEI空间分异的驱动力最强，达到86.3%.

关键词：生态环境质量遥感生态指数(RSEI) 谷歌地球引擎(GEE) 地理探测器

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基于地下物流系统的集装箱多式联运网络优化

计算机工程与应用 2024年第2期60卷 314-325页

作者：侯雨婕梁承姬上海海事大学物流科学与工程研究院上海201306

为减少以公路运输为主的港口群公路集疏运给城市交通和环境带来的不良影响,现提出一种新的可持续发展运输模式——地下物流系统,以解决当前港口城市发展面临的共性问题。针对长三角城市群的地下物流系统布局方案,从碳排放、时间、成本3... 详细信息

为减少以公路运输为主的港口群公路集疏运给城市交通和环境带来的不良影响,现提出一种新的可持续发展运输模式——地下物流系统,以解决当前港口城市发展面临的共性问题。针对长三角城市群的地下物流系统布局方案,从碳排放、时间、成本3个角度,建立综合运输网络优化模型,以此分析在港口城市群实行地下物流系统的合理性;利用NSGA-III算法求解,得到地下物流系统能够降低成本支出的结果,同时达到节能减排和缓解交通拥堵的目的。此外,NSGA-III算法是在NSGA-II的基础上引入参考点对拥挤度排序进行了优化,但是NSGA-III总是会优先满足约束条件来处理相互冲突的目标,从而忽略了维持种群多样性。针对种群陷入高维目标空间局部最优解等问题,提出改进NSGA-III算法,通过同时处理优化目标和约束条件,来帮助种群跨越大而离散的不可行区域。针对该问题,选择“最小化运输成本“”最小化任务完成时间”和“最小化碳排放量”作为多目标优化的目标函数,运用改进动态约束NSGA-III算法进行模拟仿真分析,比较了算法改进前后的优化结果,验证了改进算法的优越性和可靠性,最后证明了地下物流系统可以有效节能减排和缓解交通拥堵,具有一定的实际参考价值。

关键词： NSGA-III 动态约束地下物流多目标优化多式联运

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经泪前隐窝入路切口切除上颌骨血管瘤1例

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第2期59卷 174-176页

作者：罗松王明婕江苏省淮安市第五人民医院(扬州大学附属淮安医院)耳鼻咽喉科淮安223300 首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科北京100730

上颌骨血管瘤在临床上较为罕见。本文报告了1例以鼻背部渐进性隆起为主诉的上颌骨血管瘤病例。患者女性,51岁,因“右鼻背部隆起6年”就诊。术前鼻窦CT及MRI示右侧上颌窦前内壁交界处骨性高密度肿物,内部密度欠均匀,呈蜂窝状,内部见放射... 详细信息

上颌骨血管瘤在临床上较为罕见。本文报告了1例以鼻背部渐进性隆起为主诉的上颌骨血管瘤病例。患者女性,51岁,因“右鼻背部隆起6年”就诊。术前鼻窦CT及MRI示右侧上颌窦前内壁交界处骨性高密度肿物,内部密度欠均匀,呈蜂窝状,内部见放射状骨小梁,周围组织无破坏表现,考虑血管瘤可能性大。在全身麻醉下行泪前隐窝入路扩大切口,分离至梨状孔缘外侧充分暴露肿物后完整切除。该手术入路优势明显,可避免面部切口并能完整切除肿物,同时保留鼻腔鼻窦正常生理功能,创伤小,治疗效果好,具有一定临床推广应用价值。

关键词：鼻背部手术入路血管瘤梨状孔上颌骨鼻腔鼻窦上颌窦全身麻醉

考虑不确定生产因素的表面组装生产线负载平衡优化模型

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控制理论与应用 2024年第3期41卷 522-532页

作者：张怀权黄春跃梁颖廖帅冬桂林电子科技大学机电工程学院广西桂林541000 成都航空职业技术学院信息工程学院四川成都610021 模式识别与智能信息处理四川省高校重点实验室四川成都610106

针对表面组装生产中的不确定因素造成企业订单完成时间滞后问题,本文设计并实现了一种考虑不确定生产因素的生产线负载平衡优化模型.首先,以不确定生产因素的历史样本数据作为随机模拟样本预估出不确定生产因素对订单完成造成的滞后时间... 详细信息

针对表面组装生产中的不确定因素造成企业订单完成时间滞后问题,本文设计并实现了一种考虑不确定生产因素的生产线负载平衡优化模型.首先,以不确定生产因素的历史样本数据作为随机模拟样本预估出不确定生产因素对订单完成造成的滞后时间;其次,优化元器件贴装工位分配方案并以任务完成作为触发事件模拟生产线实际运行得到动态生产计划;再次,根据动态生产计划计算出模型适应度值后,采用遗传算法对模型适应度值进行启发式寻优获得最优动态生产方案.最后,利用表面组装生产线试例对该模型进行验证,结果表明,该模型可准确预测产线各时段的生产任务、任务量及各器件贴装工位,有效提高了企业生产效率.

关键词：负载平衡蒙特卡洛法神经网络遗传算法