检索结果-南通市图书馆

目的探究碳黑与镉(cadmium,Cd)复合暴露对人支气管上皮细胞株16HBE细胞蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)通路的影响,及其所致自噬和炎症反应的作用机制。方法于2022年1月,复苏培养人支... 详细信息

目的探究碳黑与镉(cadmium,Cd)复合暴露对人支气管上皮细胞株16HBE细胞蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)通路的影响,及其所致自噬和炎症反应的作用机制。方法于2022年1月,复苏培养人支气管上皮16HBE细胞。将碳黑纳米颗粒(carbon black nanoparticles,CBNPs)氧化后吸附Cd^(2+)构建CBNPs-Cd复合物。CCK-8试验检测CBNPs与Cd不同浓度和时间组合暴露对16HBE细胞活力的影响。以2μg/ml Cd,100μg/ml CBNPs,100μg/ml CBNPs+2μg/ml Cd联合暴露24 h作为后续剂量分组。分别应用透射电镜检测自噬体和自噬溶酶体数量。蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测PERK通路蛋白PERK、真核翻译起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIf2α)、激活转录因子4(activating transcription factor 4,ATF4)、自噬相关蛋白螯合体1(sequestosome 1,SQSTM1)/P62和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAlPILC3,简称LC3)的表达。以基因沉默技术抑制PERK基因后,检测自噬标志蛋白P62、LC3的变化,使用荧光定量PCR技术检测炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL8)的表达。多组比较采用单因素方差分析,组内两两之间的比较采用LSD检验;多因素的成分分析采用析因分析。结果CBNPs与Cd单独/复合暴露24 h后,16HBE细胞活力变化均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,CBNPs与Cd单独/复合暴露组16HBE细胞P62和LC3表达均明显升高(P0.05),但复合暴露组p-PERK/PERK、p-eIf2α/eIf2α、ATF4蛋白的表达均升高(P0.05)。结论CBNPs-Cd复合暴露可能通过激活PERK-eIf2α-ATF4通路,致人支气管上皮细胞自噬受阻、炎症反应增加。

关键词：镉碳黑纳米颗粒上皮细胞蛋白激酶R样内质网激酶-真核翻译起始因子2α-激活转录因子4(PERK-eIF2α-ATF4)通路自噬炎症

来源：

维普期刊数据库