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芪蚣抗纤方（QF）中软坚散结药对免疫损伤性大鼠肝纤维化影响的实验研究

2019年

作者：梁振钰

来源：南通市图书馆图书评论

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芪蚣抗纤方（QF）中软坚散结药对免疫损伤性大鼠肝纤维化影响的实...

作者：梁振钰长春中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察临床和前期动物实验有效抗纤方剂芪蚣抗纤方(QF)的拆方中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对肝纤维化大鼠肝功能、肝脏组织病理学的影响;并通过观察QF中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对转化生长因子(TGFβ1)及Smads蛋白相关表达的调节... 详细信息

目的:通过观察临床和前期动物实验有效抗纤方剂芪蚣抗纤方(QF)的拆方中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对肝纤维化大鼠肝功能、肝脏组织病理学的影响;并通过观察QF中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对转化生长因子(TGFβ1)及Smads蛋白相关表达的调节,进一步探讨软坚散结法抗肝纤维化的作用机理。方法:将SD雄性大鼠随机分成四组,每组10只。①正常对照组②模型对照组③软坚散结药大剂量干预组④软坚散结药小剂量干预组。除正常对照组给予生理盐水(0.5ml/次,2次/周)腹腔注射外,其余各组均给予猪血清0.5ml/大鼠腹腔注射,每周2次,均注射8周,诱导肝纤维化模型。第五周开始,①、②两组灌服生理盐水2ml/100g,1次/日,③、④两组灌服大小剂量软坚散结药口服液(生药含量1 g/ml),软坚散结小剂量干预组以软坚散结冲剂1ml/200g灌胃服,1次/日;软坚散结大剂量干预组以软坚散结冲剂2ml/200g灌胃服,1次/日,四周,整个实验过程共8周。8周实验结束后,眼球放血制备血清备用;脱颈处死大鼠,取大鼠肝组织左叶一部分10%甲醛固定,制作石蜡切片以备HE、Mallory、免疫组化染色;光镜观察肝细胞变化和肝纤维化的程度;免疫组化法检测肝组织TGF-β1和smads蛋白相关表达;全自动生化分析仪测定血清肝功各项指标(ALT、A、G、A/G)和酶标仪ABC-ELISA法测血清TGF-β1含量。结果:1、与模型组比较,软坚散结药小剂量干预组血清ALT降低(P<0.05)、A/G值升高。2、HE染色实验结果显示:治疗组治疗后,与模型组大鼠肝脏比较,治疗组肝组织破坏程度、肝细胞水肿程度均较轻,总体状况较模型组有明显好转。软坚散结小剂量干预组组有肝细胞再生的表现,肝纤维改善情况比软坚散结大剂量干预组明显。3、模型组肝组织Mallory染色病理切片肝纤维化形成。4、免疫组化显示:正常组大鼠肝脏仅微弱表达TGFβ1、Smad2、Smad3,模型组较正常组TGFβ1、Smad2、Smad3阳性信号明显增强(P<0.01),软坚散结药干预后大鼠肝脏TGFβ1表达比模型组明显下调,同时Smad2、Smad3的蛋白表达下调,大、小剂量组与模型组相比有差异。5、TGF-β1含量:模型组相比,软坚散结药干预后动物血清中的TGFβl显著降低(P<0.01)结论:芪蚣抗纤方(QF)中软坚散结药对免疫损伤性大鼠肝纤维化形成和逆转有影响,对促肝纤维化细胞因子TGF-Smad蛋白通路有很好调节作用,对临床上治疗肝纤维化有一定的指导意义。

关键词：肝纤维化大鼠软坚散结药实验研究

芪蚣抗纤方及拆方药物血清对HSC-T6增殖及TGF-β_1 mRNA蛋白表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2013年第3期19卷 249-251页

作者：陈桂敏梁振钰高湲海南医学院中医学院海口571101

目的:探讨芪蚣抗纤方(QKD)及拆方抗免疫损伤性大鼠肝纤维化作用机制及配伍意义。方法:采用改良型血清药理学对比方法,观察各组血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖及转化生长因子(TGF-β1)mRNA受体蛋白表达的影响。结果:与正常大鼠血清组比较... 详细信息

目的:探讨芪蚣抗纤方(QKD)及拆方抗免疫损伤性大鼠肝纤维化作用机制及配伍意义。方法:采用改良型血清药理学对比方法,观察各组血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖及转化生长因子(TGF-β1)mRNA受体蛋白表达的影响。结果:与正常大鼠血清组比较,模型组大鼠血清组HSC-T6增殖明显增强(P<0.01);与模型组比较,药物血清各组能抑制HSC-T6增殖(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠HSC-T6细胞上清液中TGF-β1mRNA含量明显升高(P<0.01)。药物血清各组TGF-β1mRNA含量均明显下调(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方及拆方抗肝纤维化的主要机制之一是抑制HSC-T6增殖,使TGF-β1mRNA受体蛋白表达下调,芪蚣抗纤方全方较活血方和软坚方更具配伍意义,且呈剂量依赖性。

关键词：芪蚣抗纤方肝纤维化肝星状细胞转化生长因子-β mRNA 含药血清

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侧柏叶在柏叶汤中的配伍意义探讨

中华中医药杂志 2016年第8期31卷 2971-2973页

作者：梁振钰刘茜陈桂敏海南医学院海口571101

目的:观察凉血止血药侧柏叶在温中止血方柏叶汤中的配伍意义。方法:采用饮食失节法建立脾胃虚寒大鼠模型,采用玻片法测定大鼠全血凝血时间;手测测定血小板含量;测定溃疡指数。结果:柏叶汤具有调节大鼠凝血时间的作用,能够提高大鼠血小... 详细信息

目的:观察凉血止血药侧柏叶在温中止血方柏叶汤中的配伍意义。方法:采用饮食失节法建立脾胃虚寒大鼠模型,采用玻片法测定大鼠全血凝血时间;手测测定血小板含量;测定溃疡指数。结果:柏叶汤具有调节大鼠凝血时间的作用,能够提高大鼠血小板计数水平,与模型对照组及柏叶汤去侧柏叶组比较,差异显著(P<0.01),而柏叶汤去侧柏叶组与模型对照组比较,差异无统计学意义。柏叶汤组溃疡指数与模型对照组、柏叶汤去侧柏叶组比较,差异亦显著(P<0.01),而柏叶汤去侧柏叶组与模型对照组比较,差异无统计学意义;柏叶汤组及柏叶汤去侧柏叶组的溃疡抑制率分别为30.43%和4.97%。结论:凉血止血药侧柏叶在柏叶汤中的配伍对脾胃虚寒型胃出血模型大鼠具有缩短凝血时间、提高血小板计数、抑制胃溃疡形成的作用。

关键词：侧柏叶柏叶汤胃出血配伍意义脾胃虚寒

芪蚣抗纤方拆方对肝纤维化大鼠Smad2/3及Smad7蛋白的影响

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中国实验方剂学杂志 2013年第14期19卷 229-232页

作者：高湲陈桂敏梁振钰谢毅强杨世忠海南医学院海口571199

目的:观察芪蚣抗纤方(Qigong Kangxian Prescription,QF)活血组和软坚组对肝纤维化大鼠细胞内信号转导分子2,3,7(Smad 2/3及Smad7)的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组,除正常对照组10只外,其余50只均用猪血清腹腔注射法... 详细信息

目的:观察芪蚣抗纤方(Qigong Kangxian Prescription,QF)活血组和软坚组对肝纤维化大鼠细胞内信号转导分子2,3,7(Smad 2/3及Smad7)的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组,除正常对照组10只外,其余50只均用猪血清腹腔注射法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,0.5 mL/只,每周2次,连续8周。活血组和软坚组分别给于活血方和软坚方。低、高剂量组按生药量以5,10 ***-1ig给药。实验结束处死大鼠,断头取血,分离血清,用ELISA法测定转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1的含量。部分肝组织固定于10%甲醛液,石蜡包埋,制光镜切片,免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1、Smad2,Smad3及Smad7蛋白的表达。结果:①血清及肝组织TGF-β1含量及表达活血高剂量组分别为(0.65±0.09)μg.L-1,4.33±2.06,软坚低剂量组分别为(0.62±0.08)μg.L-1,4.11±1.14,与模型组(1.22±0.16)μg.L-1,10.33±3.34相比有显著差异(P<0.01);②Smad2和Smad3蛋白表达显色指数活血高剂量组分别为(3.88±2.00),(3.22±1.89)分,软坚低剂量组分别为(4.22±1.49),(4.77±1.75)分,与模型组(10.20±3.06),(10.22±3.06)分相比有显著差异(P<0.01);③Smad7蛋白表达显色指数活血高剂量组为(6.89±1.50)分,软坚低剂量组为(4.33±1.78)分,与模型组(1.56±0.73)分相比有显著差异(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方活血组及软坚组可通过减少Smad 2/3的激活,增加Smad7的表达,抑制肝纤维结缔组织增生,减轻肝损伤及肝纤维化程度。具有抑制肝纤维化作用。

关键词：芪蚣抗纤方拆方活血组软坚组肝纤维化 Smad2/3 Smad7

中医软坚散结法为主抗大鼠肝纤维化的实验研究

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临床和实验医学杂志 2009年第11期8卷 125-125,127页

作者：梁振钰陈桂敏海南医学院中医学院海南海口571101

肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理学基础,是进一步向肝硬化发展的主要中间环节。有效地预防和治疗肝纤维化对于阻止和抑制肝硬化的发生和发展有重要意义。文章主要从以软坚散结为主要作用的中药制剂抗大鼠肝纤维化的实验研究方面作一综... 详细信息

肝纤维化是各种慢性肝病的共同病理学基础,是进一步向肝硬化发展的主要中间环节。有效地预防和治疗肝纤维化对于阻止和抑制肝硬化的发生和发展有重要意义。文章主要从以软坚散结为主要作用的中药制剂抗大鼠肝纤维化的实验研究方面作一综述,旨在为临床提供依据及指导临床。

关键词：软坚散结肝纤维化实验研究

芪蚣抗纤方及拆方干预大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验研究

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芪蚣抗纤方及拆方干预大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验研究

“新成果·新进展·新突破”中华中医药学会2013年学术年会、第三次中华中医药科技成果论坛

作者：梁振钰陈桂敏海南医学院

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)及拆方干预大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验研究。方法:猪血清攻击法诱导免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,50只SD雄性大鼠随机分成五组,正常对照组、模型组、QF全方干预组、软坚散结药干预组、活血药干预组。整个实验... 详细信息

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)及拆方干预大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验研究。方法:猪血清攻击法诱导免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,50只SD雄性大鼠随机分成五组,正常对照组、模型组、QF全方干预组、软坚散结药干预组、活血药干预组。整个实验过程共8周。免疫组化法检测肝组织TGF-β1相关表达;免疫组织化学染色:TGF-β1和smad2、smad3阳性表达。结果:药物干预后,治疗组均对促肝纤维化因子TGF-β1含量有明显下调的作用,smad2、smad3表达减少,全方比拆方效果明显。结论:芪蚣抗纤方及拆方对肝纤维化大鼠转化生长因子(TGFβ1)和smads家族蛋白有显著调节,达到干预大鼠肝纤维化形成的作用,且全方比拆方效果更明显。故而说明预防和治疗肝纤维化除了运用常法活血药与软坚药,但益气健脾必不可少。这对临床上治疗肝纤维化组方思路有一定的指导意义。

关键词：芪蚣抗纤方及拆方肝纤维化实验研究

来源： cnki会议评论

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朱震亨治疗胎产的经验探讨

内蒙古中医药 2012年第11期31卷 61-62页

作者：梁振钰陈桂敏海南省海口市海南医学院中医学院 571101

朱震亨以养阴学说鸣于医林，在理论上，他认为人体“阳常有余，阴常不足”，强调相火妄动耗伤阴精。但是并不仅限于阴虚之见，重视的是辨证论治，对多种疾病皆有独特的见解。以下仅从胎产方面介绍其经验之谈。

关键词：朱震亨胎产经验探讨

芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响

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中华中医药杂志 2011年第8期26卷 1865-1867页

作者：陈桂敏梁振钰高湲谢毅强王华王少贤海南医学院海口571101 北京中医药大学北京100029

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响。方法:采用猪血清攻击法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型;用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清LN、HA、TGF-β1含量;免疫组化法观察TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad3... 详细信息

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响。方法:采用猪血清攻击法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型;用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清LN、HA、TGF-β1含量;免疫组化法观察TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表达。观察QF抗肝纤维化的分子机制。结果:①血清学指标结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。经QF干预后,大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显下降(P<0.01)。②免疫组织化学结果:模型组大鼠肝组织TGF-β1胞浆强阳性表达,Smad2棕色阳性着色由胞浆转至胞核,Smad7无阳性表达。QF干预组大鼠肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达下调(P<0.01)。结论:QF通过调节TGF-β1/Smads信号通路,能保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,发挥抗肝纤维化作用。

关键词：芪蚣抗纤方大鼠免疫损伤性肝纤维化 TGF-β1/Smads信号通路