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北京鸭(Anas platyrhynchos)氧合血红蛋白的晶体生长和X射线晶体学的初步研究

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生物物理学报 1998年第1期14卷 10-12页

作者：邓翔梁宇和华子千卫新成卢光莹北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室

北京鸭氧合血红蛋白晶体在以聚乙二醇６０００为沉淀剂，在ｐＨ７．１，血红蛋白浓度为２５ｍｇ／ｍｌ条件下采用一批结晶法培养得到，并且适合于Ｘ射线衍射分析。经Ｘ射线平面探测仪收集衍射强度数据和处理，确定晶体属四方晶系，空间... 详细信息

北京鸭氧合血红蛋白晶体在以聚乙二醇６０００为沉淀剂，在ｐＨ７．１，血红蛋白浓度为２５ｍｇ／ｍｌ条件下采用一批结晶法培养得到，并且适合于Ｘ射线衍射分析。经Ｘ射线平面探测仪收集衍射强度数据和处理，确定晶体属四方晶系，空间群为Ｐ４２２１２，晶胞参数为ａ＝ｂ＝８．１１３ｎｍ，ｃ＝１０．７０７ｎｍ，α＝β＝γ＝９０°，每个不对称单位中包含半个四聚体分子。进一步得到北京鸭氧合血红蛋白高分辨率晶体结构，通过与其高海拔同类－斑头雁分析比较深入研究斑头雁血红蛋白分子的高氧亲和性机制。

关键词：北京鸭氧合血红蛋白晶体生长 X射线衍射

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鸟类血红蛋白的四级结构和残基选择性特征

生物物理学报 2000年第3期16卷 459-467页

作者：刘小舟李松林梁宇和卢光莹北京大学生命科学学院蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室北京100871

对目前已知结构的三个鸟类血红蛋白与哺乳类和硬骨鱼类血红蛋白的晶体结构数据进行了比较 ,发现鸟类、硬骨鱼类和哺乳类血红蛋白具有不同的四级结构特征 ,鸟类和硬骨鱼类血红蛋白的各亚基间的距离比哺乳类血红蛋白大 ,其中 ,α1 - β1... 详细信息

对目前已知结构的三个鸟类血红蛋白与哺乳类和硬骨鱼类血红蛋白的晶体结构数据进行了比较 ,发现鸟类、硬骨鱼类和哺乳类血红蛋白具有不同的四级结构特征 ,鸟类和硬骨鱼类血红蛋白的各亚基间的距离比哺乳类血红蛋白大 ,其中 ,α1 - β1亚基间的距离为 :硬骨鱼类Hb>鸟类Hb>哺乳类Hb ;α1 - β2、α1 -α2和β1 - β2亚基间的距离以及两个αβ 二聚体的距离为 :鸟类Hb>硬骨鱼类Hb>哺乳类Hb。进一步由一级结构的比较发现 ,鸟类、硬骨鱼类和哺乳类血红蛋白具有不同的残基选择性。鸟类和硬骨鱼类血红蛋白倾向于选择侧链更大的残基 ,这些大侧链残基主要分布于分子表面和亚基之间的界面 ,导致四级结构的差异。三类血红蛋白四级结构的微妙差异与它们的协同效应中有机磷效应物的分子大小和形状不同有关 ,鸟类、硬骨鱼类和哺乳类血红蛋白似乎在进化过程中选择了不同大小的残基而进化形成稍有不同的四级结构 ,从而适应与不同的有机磷化合物相结合。

关键词：血红蛋白四级结构残基选择性分子进化鸟

口腔致病菌变形链球菌Smu.776蛋白的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)

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生物化学与生物物理进展 2007年第2期34卷 176-179页

作者：王开拓李兰芬张晓嫣梁宇和魏世成苏晓东蛋白质工程和植物基因工程国家重点实验室北京大学生命科学学院北京100871 北京大学口腔医学院北京100081

变形链球菌smu.776基因编码一段含有385个氨基酸的蛋白质,其功能可能为依赖于腺苷甲硫氨酸的甲基转移酶.smu.776的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中过量表达得到很好的产量.产物Smu.776蛋白通过Ni2+亲和柱和... 详细信息

变形链球菌smu.776基因编码一段含有385个氨基酸的蛋白质,其功能可能为依赖于腺苷甲硫氨酸的甲基转移酶.smu.776的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后,在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中过量表达得到很好的产量.产物Smu.776蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛柱层析两步得到纯化.采用悬滴气象扩散法得到了Smu.776蛋白的晶体.X射线衍射分辨率达到2.0!,晶体属单斜空间群C2,晶格参数为a=168.47",b=50.66#,c=53.96$,β=104.22°.每个最小不对称单元内含有一个蛋白质分子,溶剂含量为51.3%.

关键词：变形链球菌龋齿 Smu.776 蛋白晶体学

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β-内酰胺酶OXY-1a的晶体结构研究

β-内酰胺酶OXY-1a的晶体结构研究

龋齿致病菌变性链球菌蛋白Smu_195c的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)

第十次中国生物物理学术大会

作者：梁宇和高嵘苏晓东北京大学生命科学学院北京大学生命科学学院北京大学生命科学学院

＜正＞OXY-1a β-内酰胺酶是一种超广谱β-内酰胺酶,产生于一种在突变诱导下对青霉素、头孢菌素及氨曲南等多种β-内酰胺类抗生素表现耐药性的致病细菌Klebsiella oxytoca。该酶的活性中心为蛋白质多肽链中的第70位保守丝氨酸,它作为亲...

＜正＞OXY-1a β-内酰胺酶是一种超广谱β-内酰胺酶,产生于一种在突变诱导下对青霉素、头孢菌素及氨曲南等多种β-内酰胺类抗生素表现耐药性的致病细菌Klebsiella oxytoca。该酶的活性中心为蛋白质多肽链中的第70位保守丝氨酸,它作为亲核基团攻击β-内酰胺环的羧基,形成酰化酶中间体,然后在水分子的作用下导致β-内酰胺环开环失活。在大肠杆菌中对此蛋白进行了大量表达,通过悬滴汽相扩散法生长得到单晶并

关键词：

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生物化学与生物物理进展 2007年第2期34卷 203-206页

作者：高增强侯海峰李丽琴许锐梁宇和李兰芬苏晓东董宇辉中国科学院高能物理研究所同步辐射实验室北京100049 北京大学生命科学学院蛋白质工程和植物基因工程国家实验室

变性链球菌(Streptococcus mutans)是最主要的龋齿致病菌.其中Smu_195c为一个约10ku(86个氨基酸)的蛋白质,序列比对结果显示,它没有包含保守的结构域,功能也是未知的.为揭示其功能,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了N端结合了6个His的编码Smu... 详细信息

变性链球菌(Streptococcus mutans)是最主要的龋齿致病菌.其中Smu_195c为一个约10ku(86个氨基酸)的蛋白质,序列比对结果显示,它没有包含保守的结构域,功能也是未知的.为揭示其功能,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了N端结合了6个His的编码Smu_195c的DNA片段.通过悬滴法得到了两种不同晶系的晶体.第一种属于空间群P6122或P6522,晶格参数为a=b=62.93!,c=90.63",γ=120°;第二种属于空间群P41212或P43212,晶格参数为a=b=57.97#,c=103.51$.N端带有His的蛋白质长出的晶体属于第一种,而切掉N端的6个His后的蛋白质长出的晶体两种都有.

关键词：变性链球菌 Smu_195c 结晶 X射线衍射

龋齿致病菌变形链球菌蛋白Smu.260的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)

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生物化学与生物物理进展 2005年第3期32卷 217-220页

作者：张晓嫣米伟周艳峰刘翔宇李兰芬梁宇和魏世成苏晓东北京大学生命科学学院蛋白质工程和植物基因工程国家实验室北京大学口腔医学院北京100081

变形链球菌(Streptococcusmutans) 是最主要的龋齿致病菌,其基因Smu.260编码一个约23 ku (200个氨基酸) 的蛋白质. Smu.260的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达得到很好的产量. 产物Smu.260蛋白通过Ni2+亲... 详细信息

变形链球菌(Streptococcusmutans) 是最主要的龋齿致病菌,其基因Smu.260编码一个约23 ku (200个氨基酸) 的蛋白质. Smu.260的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达得到很好的产量. 产物Smu.260蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛两步法纯化,并发现纯化后的蛋白以两种形式存在,二聚体(约46 ku) 和四聚体,前者呈亮黄色,后者无色。采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体. 晶体的X射线衍射分辨率达到2.3 魡,晶体属正交空间群P212121,晶格参数为a=89.88 魡, b=90.91 魡, c=105.17 魡. 晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体,溶剂含量为53%.

关键词：变形链球菌龋齿 Smu.260 蛋白质晶体学

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在空间微重力条件下斑头雁血红蛋白晶体生长

北京大学学报（自然科学版） 1999年第2期35卷 237-242页

作者：华子千梁学梁宇和徐谦邝宝李会广卫新成北京大学生命科学学院

为获得高质量的斑头雁血红蛋白晶体，在我国返回式卫星ＦＳＷ－２上进行了两次蛋白质晶体生长实验。首次在１９９２年实验中生长出了小晶体；在进一步改进样品准备和精化结晶条件基础上，在１９９４年第２次实验中获得了适合于Ｘ射线分... 详细信息

为获得高质量的斑头雁血红蛋白晶体，在我国返回式卫星ＦＳＷ－２上进行了两次蛋白质晶体生长实验。首次在１９９２年实验中生长出了小晶体；在进一步改进样品准备和精化结晶条件基础上，在１９９４年第２次实验中获得了适合于Ｘ射线分析的晶体。经收集Ｘ射线衍射数据和统计分析表明，空间微重力条件有利长出优于地面对照组的晶体，其衍射分辨率比地面高约０．０６ｎｍ。在相同的晶体生长条件下，空间易生长出正交晶系的、ｃ轴方向周期较长的血红蛋白晶体。

关键词：斑头雁血红蛋白晶体生长 X射线分析微重力

人类6-磷酸氨基葡萄糖乙酰转移酶结构和功能的研究

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人类6-磷酸氨基葡萄糖乙酰转移酶结构和功能的研究

空间和地面条件下斑头雁血红蛋白晶体生长母液的共振拉曼光谱研究

中国晶体学会第四届全国会员代表大会暨学术会议

作者：王娟刘祥梁宇和李兰芬苏晓东北京大学生命科学学院北京大学深圳研究生院

＜正＞糖蛋白的寡糖链参与肽链的折叠与蛋白结构功能,是最重要的翻译后蛋白修饰之一,糖蛋白的产生、转运和分泌,对很多重要生物学功能如免疫识别、细胞生长等极为重要。6-磷酸氨基葡萄糖乙酰转移酶（GNA1）是一组参与天冬酰胺连接型（N...

＜正＞糖蛋白的寡糖链参与肽链的折叠与蛋白结构功能,是最重要的翻译后蛋白修饰之一,糖蛋白的产生、转运和分泌,对很多重要生物学功能如免疫识别、细胞生长等极为重要。6-磷酸氨基葡萄糖乙酰转移酶（GNA1）是一组参与天冬酰胺连接型（N-）聚糖合成加工的重要酶类,能将底物乙酰辅酶A（AcCoA）中的乙酰基转移到葡糖胺-6-磷酸（GlcN6P）的氨基上。对酵母GNA1的研究表明,它的表达和细胞周期密切相关,GNA1的失活是致死的。Iscove等发现GNA1同源蛋白EMeg32突变大鼠胚胎会死亡,伴随有发育延迟等现象。GNA1的结构与功能的研究日益受到人们的关注。Bourne小组解析了酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）GNA1的天然结构,GNA1-AcCoA以及GNAl-CoA-GIcNAc6P复合体结构,揭示了AcCoA和GIcNAc6P的结合位。Aalten小组也发表了烟曲霉（Aspergillusfumigatus）GNAl的天然结构,以及结合底物类似物葡萄糖6-磷酸（G1c6P）

关键词：

来源： cnki会议评论

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空间和地面条件下斑头雁血红蛋白晶体生长母液的共振拉曼光谱研究