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小鼠不同电特性的心肌细胞Kir2.1、SCN5a和SCN1b通道基因的表达:膜片钳结合单细胞RT-PCR技术研究

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生理学报 2012年第1期64卷 82-86页

作者：骆红艳梁华敏胡新武唐明华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系武汉430030

本文旨在应用膜片钳技术结合单细胞逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)技术研究小鼠胚胎心肌细胞的不同电生理学特点的分子生物学基础。应用胶原酶B消化分离得到小鼠胚胎早期(E10.5)单个心肌... 详细信息

本文旨在应用膜片钳技术结合单细胞逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)技术研究小鼠胚胎心肌细胞的不同电生理学特点的分子生物学基础。应用胶原酶B消化分离得到小鼠胚胎早期(E10.5)单个心肌细胞,先用膜片钳技术记录单个胚胎心肌细胞的动作电位,随即应用玻璃微电极吸取该细胞内容物,进一步应用RT-PCR技术检测该单个心肌细胞离子通道基因Kir2.1、SCN5a和SCN1b的表达,以GAPDH为内参基因。全细胞电流钳技术记录到心室肌样细胞、心房肌样细胞和起搏样细胞的动作电位。心室肌样细胞和心房肌样细胞动作电位的最大舒张期电位(maximum diastolic potential,MDP)较起搏样细胞更负,0期最大除极速度(maximum velocity of depolarization,Vmax)更快;心室肌样细胞动作电位的MDP相对心房肌样细胞更负。相对应的,心室肌样细胞的Kir2.1、SCN5a、SCN1b三种基因表达均较强;心房肌样细胞的SCN5a表达较强,而SCN1b和Kir2.1相对心室肌样细胞表达稍弱;而起搏样细胞的上述三种基因表达均很弱。不同类型心肌细胞动作电位的基本特点与其基因表达密切相关,应用膜片钳技术结合单细胞RT-PCR技术可以敏锐检测到特定电生理特点的分子生物学基础。

关键词：膜片钳技术单细胞逆转录聚合酶链反应电生理分子生物学胚胎心肌细胞

基于谐波信号注入的含逆变型分布式电源配电网电流差动保护

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电力系统自动化 2023年第22期47卷 120-128页

作者：李海锋张正刚梁远升梁华敏王钢华南理工大学电力学院广东省广州市510641 深圳供电局有限公司广东省深圳市440304

随着逆变型分布式电源(IIDG)高比例、灵活接入,传统的保护原理逐渐难以满足配电网的安全运行要求。与此同时,基于电力电子设备的主动探测思想提供了新思路。为此,充分利用电压源换流器的可控性,提出了适用于IIDG的谐波信号主动注入方法... 详细信息

随着逆变型分布式电源(IIDG)高比例、灵活接入,传统的保护原理逐渐难以满足配电网的安全运行要求。与此同时,基于电力电子设备的主动探测思想提供了新思路。为此,充分利用电压源换流器的可控性,提出了适用于IIDG的谐波信号主动注入方法及其控制参数选取原则。然后,分析含T接IIDG配电网在区内外故障后所呈现的谐波电流故障特征,并揭示T接负荷分支对上述特征的影响规律,进而提出了一种基于谐波信号主动注入的含高比例IIDG配电网电流差动保护方案。最后,通过PSCAD/EMTDC仿真验证了所提方法的动作性能。测试结果表明,当存在T接分支时,所提方法仍能有效识别区内外故障,且无需额外的信号注入设备,经济性较好。

关键词：配电网分布式电源谐波信号主动注入电流差动保护 T接分支

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治痔胶囊止血及抗肛周溃疡作用

中国医院药学杂志 2011年第15期31卷 1306-1308页

作者：曾莹陈东生梁华敏关秀文华中科技大学附属协和医院湖北武汉430022 华中科技大学同济医学院生理系湖北武汉430030 武汉市黄陂区人民医院湖北武汉430300

目的:评价治痔胶囊的止血作用和对肛周溃疡的治疗作用。方法:将实验小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组(给予槐角丸1.4 ***-1)、高、中、低剂量组(分别给予治痔胶囊2.81,.4,0.7 ***-1),采用断尾法和玻片法分别测定出血时间和凝血时间;... 详细信息

目的:评价治痔胶囊的止血作用和对肛周溃疡的治疗作用。方法:将实验小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组(给予槐角丸1.4 ***-1)、高、中、低剂量组(分别给予治痔胶囊2.81,.4,0.7 ***-1),采用断尾法和玻片法分别测定出血时间和凝血时间;另外,通过大鼠制备肛周溃疡模型,并将造模大鼠随机分为模型组、阳性对照组(给予槐角丸***-1)、高、中、低剂量组(分别给予治痔胶囊1.75,0.88,0.44 ***-1),观察药物对肛周溃疡的治疗作用。结果:与空白组比较,治痔胶囊高、中剂量组能显著缩短出血时间和凝血时间;同时与模型组比较,治痔胶囊高中剂量组对大鼠肛周溃疡有明显的治愈效果。结论:治痔胶囊具有提高机体凝血功能,增强止血作用,并促进肛周溃疡愈合的功效。

关键词：治痔胶囊止血作用肛周溃疡治疗作用

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小鼠胚胎心肌细胞的分离及电生理特性

生理学报 2004年第5期56卷 651-655页

作者：骆红艳唐明胡新武宋明柯梁华敏杜以梅张毅华中科技大学同济医学院生理系武汉430030

本文旨在探索小鼠胚胎心肌细胞的分离方法并观察其电生理特性。应用胶原酶B 消化法获得不同时期单个小鼠胚胎心肌细胞; 利用全细胞膜片钳技术, 记录胚胎心肌细胞的超极化激活的非选择性内向阳离子电流(If)和L-钙电流( ICa-L), 并用电流... 详细信息

本文旨在探索小鼠胚胎心肌细胞的分离方法并观察其电生理特性。应用胶原酶B 消化法获得不同时期单个小鼠胚胎心肌细胞; 利用全细胞膜片钳技术, 记录胚胎心肌细胞的超极化激活的非选择性内向阳离子电流(If)和L-钙电流( ICa-L), 并用电流钳记录其自发性动作电位。胚胎心肌细胞通过相差显微镜依据其形态和自发性收缩进行鉴定。本法分离所获得的胚胎心肌细胞容易进行全细胞膜片钳记录, 可用于记录If、ICa-L电流和自发性动作电位, 已证实胚胎心肌细胞If 和ICa-L的电生理特性与成年起搏细胞或心肌细胞相似。本实验建立的分离方法简单、稳定、有效、可靠, 最早可获得 8.5 d 的胚胎心肌细胞。胚胎心肌细胞的电生理记录为探索胚胎心肌细胞的电生理特性提供了一个可用的模型, 并可能为某些心脏疾病产生的机制提供实验依据。

关键词：胚胎心肌细胞小鼠分离

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微电极矩阵研究小鼠胚胎心脏电生理活动

生理学报 2006年第1期58卷 65-70页

作者：段亚琦唐明梁华敏 Jürgen Hescheler 华中科技大学同济医学院生理学系卫生部肺疾病实验室武汉430030 德国科隆大学神经生理学系科隆d50931

本实验采用一种新方法——微电极矩阵技术从整体水平研究小鼠胚胎离体整体心脏电生理活动。我们用微电极矩阵记录与60个电极相接触的心肌细胞的电活动(细胞外记录),称为场电位(field potentials,FPs),并与全细胞膜片钳记录的动作电位(ac... 详细信息

本实验采用一种新方法——微电极矩阵技术从整体水平研究小鼠胚胎离体整体心脏电生理活动。我们用微电极矩阵记录与60个电极相接触的心肌细胞的电活动(细胞外记录),称为场电位(field potentials,FPs),并与全细胞膜片钳记录的动作电位(action potentials,APs)(细胞内记录)进行比较,发现心房、心室处场电位形态类似于负向的细胞动作电位,场电位时程亦与动作电位时程类似。为研究兴奋的传导,我们比较了不同电极处场电位发生时间,发现在房室结构还未形成的胚胎发育第9．5天(E9．5)已经观察到明显的房室传导延迟(A-V delay)[(50．21±9．7)ms],而心室不同部位兴奋几乎是同步的。在发育晚期(E16．5),房室传导延迟为(82．21±10．50)ms。进一步研究基本的神经体液因素对心脏兴奋的调控,表明: 在E9．5,异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)使胚胎兴奋频率加快(34．04±7．31)％,房室传导延迟缩短(20．00±6．44)％,同时场电位时程增宽;相反,卡巴唑(carbachol,CCh)则使兴奋频率降低(42．32±5．36)％,房室传导缩短(26．00±4．81)％, 场电位时程减小。而在E16．5,Iso的作用显著增强,兴奋频率加快(101．54±10．23)％,房室传导延迟缩短(56．62±6．43)％, 而CCh则几乎使所有晚期心脏兴奋完全消失。所以,心脏的传导系统在胚胎发育早期4个腔室还未形成时已经建立,神经体液因子对心脏基本电生理活动的调控是在发育过程中逐渐成熟的。

关键词：微电极记录场电位动作电位

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内源性心肌再生与调节

华中科技大学学报（医学版） 2016年第6期45卷 691-695,702页

作者：赵亚楠胡海涛袁佩宏巴鑫梁华敏华中科技大学同济医学院基础医学院生理学系中德干细胞中心湖北省药物靶点研究和药效学研究重点实验室华中科技大学脑研究所武汉430030

心肌细胞损伤或者功能性缺失都会导致心脏功能障碍。治疗急性心肌梗死或心衰等心脏疾病,补充心脏受损区域缺失的功能性心肌细胞是最基本的思路之一。

关键词：心肌再生细胞因子信号通路

IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及发育依赖性变化

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华中科技大学学报（医学版） 2023年第6期52卷 743-748页

作者：顾浩南王淇孙惠美周易梁华敏华中科技大学基础医学院生理学系湖北省药物靶点和药效学评价重点实验室武汉430030 华中科技大学基础医学国家级实验教学示范中心武汉430030

目的白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心肌细胞损伤后心脏微环境中重要的细胞因子,可以提高心肌细胞自身的增殖能力从而促进心脏修复。本研究旨在探索IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及其发育依赖性变化。方法用酶解法获得胚胎... 详细信息

目的白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)是心肌细胞损伤后心脏微环境中重要的细胞因子,可以提高心肌细胞自身的增殖能力从而促进心脏修复。本研究旨在探索IL-6对小鼠胚胎心肌细胞增殖能力的影响及其发育依赖性变化。方法用酶解法获得胚胎发育早期(early embryonic developmental stage,EDS)和发育晚期(late embryonic developmental stage,LDS)的单个心肌细胞,心肌细胞分别在20%DMEM培养液中培养24 h,然后再分别加入10 ng/mL和50 ng/mL IL-6处理24 h;用免疫荧光技术定位α-actinin^(+)心肌细胞并统计BrdU^(+)α-actinin^(+)细胞核数目/α-actinin^(+)细胞核百分比和BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞数目/α-actinin^(+)单核心肌细胞数目百分比,研究IL-6对心肌细胞增殖能力的影响;利用Western blot技术检测关键信号通路中关键蛋白的磷酸化水平。结果10 ng/mL IL-6不改变EDS心肌增殖能力,但对LDS心肌细胞增殖能力有显著促进作用;50 ng/mL IL-6显著抑制EDS BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞比例,增加LDS BrdU^(+)α-actinin^(+)细胞核和BrdU^(+)α-actinin^(+)单核心肌细胞比例。10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制EDS心肌细胞Akt的磷酸化、对STAT3和ERK的磷酸化水平无显著影响;但在LDS,10 ng/mL IL-6和50 ng/mL IL-6抑制心肌细胞的Akt的磷酸化,增加STAT3的磷酸化,对ERK的磷酸化水平无显著影响。检测这3个蛋白质的基础磷酸化状态发现:STAT3、Akt和ERK的总蛋白量和磷酸化水平均呈发育依赖性下降。结论IL-6影响胚胎心肌细胞的自我更新能力,且具有发育依赖性和浓度依赖性。这可能与胚胎发育不同时期的关键蛋白及其磷酸化水平存在差异,因而IL-6在不同发育阶段靶向不同的信号通路有关。这些发现为细胞替代疗法的研究在心肌微环境层面提供了重要线索。

关键词：白细胞介素6 胚胎心肌细胞心肌再生心脏微环境

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葆肾康颗粒对慢性肾衰竭大鼠的治疗作用

中国医院药学杂志 2010年第14期30卷 1180-1181页

作者：曾莹王治源张玉梁华敏赵瑛华中科技大学附属协和医院湖北武汉430022 湖北省云梦县中医院 432100 华中科技大学同济医学院生理系湖北武汉430030

目的:通过慢性肾功能衰竭的大鼠模型,验证葆肾康颗粒的治疗作用。方法:除正常组和假手术组外,利用肾5/6切除复制大鼠慢性肾衰(CRF)模型,并将造模大鼠随机分为模型组、低、中、高剂量(分别给予葆肾康颗粒5,10,***-1)组,观察治疗后大鼠的... 详细信息

目的:通过慢性肾功能衰竭的大鼠模型,验证葆肾康颗粒的治疗作用。方法:除正常组和假手术组外,利用肾5/6切除复制大鼠慢性肾衰(CRF)模型,并将造模大鼠随机分为模型组、低、中、高剂量(分别给予葆肾康颗粒5,10,***-1)组,观察治疗后大鼠的相关生化指标以及肾脏病理学切片的变化。结果:与模型组比较,葆肾康颗粒中、高剂量组BUN显著降低(P<0.05);低、中、高剂量组Scr显著降低(P<0.05);中、高剂量组Hb显著升高(P<0.05);给药组肾脏病理损伤均有不同程度的减轻。结论:葆肾康颗粒能有效治疗大鼠的CRF,同时改善CRF引起的贫血症状,并且随着给药剂量的提高疗效越明显。

关键词：慢性肾衰竭 5/6肾切除大鼠葆肾康颗粒治疗作用

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羽毛绒水解工艺优化及其产物成膜性能

纺织学报 2014年第7期35卷 23-29页

作者：李长龙刘琼王宗乾孙瑞霞梁华敏安徽工程大学安徽省纺织面料重点实验室安徽芜湖241000

为研究废弃羽毛绒的水解工艺及产物性能,先将其机械研磨制备成微细粉体,再采用还原-氢氧化钠二步水解工艺制备羽毛多肽粉,探讨还原剂用量、水解温度、助剂等因素对多肽粉产率的影响,并对多肽粉进行成膜研究,采用FT-IR、XRD、DTG、SEM等... 详细信息

为研究废弃羽毛绒的水解工艺及产物性能,先将其机械研磨制备成微细粉体,再采用还原-氢氧化钠二步水解工艺制备羽毛多肽粉,探讨还原剂用量、水解温度、助剂等因素对多肽粉产率的影响,并对多肽粉进行成膜研究,采用FT-IR、XRD、DTG、SEM等手段对粉体、多肽粉、多肽膜进行表征;研究结果表明:还原-氢氧化钠二步水解工艺可提高多肽粉产率,单因素优化还原处理工艺为:巯基乙酸0.2 mol/L,温度80℃,尿素14 g/L,十二烷基苯磺酸钠2 g/L;将多肽粉溶于甲酸,可制备多肽膜,加入交联剂可提高膜的力学性能;SEM结果表明还原工艺对羽毛绒粉体有明显的刻蚀;FT-IR分析表明还原处理破坏了羽毛绒粉体二硫键;XRD、DTG结果表明多肽粉热稳定性略有下降,结晶状态发生改变。

关键词：羽毛绒水解多肽粉成膜