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基于脑肠轴探讨功能性消化不良大鼠胃肠动力及脑肠肽水平

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基于脑肠轴探讨功能性消化不良大鼠胃肠动力及脑肠肽水平

作者：梁乾坤兰州大学

学位级别：硕士

目的:功能性消化不良（Functional dyspepsia,FD）是临床上一种常见的功能性胃肠道紊乱,对患者的健康和生活产生巨大影响,并且消耗了大量的社会医疗资源。胃肠动力异常是导致该疾病的主要病因之一,且大多数患者因此出现早饱和食欲不振... 详细信息

目的:功能性消化不良（Functional dyspepsia,FD）是临床上一种常见的功能性胃肠道紊乱,对患者的健康和生活产生巨大影响,并且消耗了大量的社会医疗资源。胃肠动力异常是导致该疾病的主要病因之一,且大多数患者因此出现早饱和食欲不振等现象。FD疾病胃肠动力异常的发生与许多因素有关,其中一个主要的因素是体内脑肠肽的分泌异常。研究发现多种脑肠肽通过脑肠轴途径对胃肠动力具有重要的调节作用。由于取材限制,目前对FD的研究还不深入,其病理生理学机制还不明确。本实验的目的是基于脑肠轴研究FD大鼠胃肠动力及脑肠肽水平的变化。实验方法:将Wistar雄性大鼠随机分成正常组和模型组。两组进行无菌手术,在胃窦和十二指肠埋置电极。术后一周,模型组采用过度疲劳、限食及夹尾刺激结合的方法建立FD大鼠模型。造模过程中,测量所有大鼠的胃肠电活动及胃排空和肠推进情况,造模成功后将所有大鼠处死,取血清、胃窦、十二指肠和下丘脑组织。分别检测所取组织和血清中脑肠肽的水平。测定的脑肠肽包括胃动素（Motilin,MTL）、瘦素（Leptin）、血管活性肠肽（Vasoactive intestinal peptide,VIP）、胆囊收缩素（Cholecystokinin,CCK）、P物质（Substance P,SP）以及神经肽Y（Neuropeptide Y,NPY）。结果:与正常组相比,FD大鼠表现为易怒、好斗;胃肠电活动明显减弱,移行性综合肌电活动（Migrating motor complex,MMC）紊乱,MMCⅢ相消失;胃排空和肠推进明显减缓（P＜0.001及P＜0.01）,这表明FD大鼠模型建立成功。ELISA检测发现,FD大鼠血清MTL和SP水平显著下降（P＜0.001及P＜0.01）;leptin和VIP水平明显提高（P＜0.01及P＜0.001）。RT-PCR检测发现,FD大鼠CCK mRNA表达水平在胃窦及十二指肠组织显著降低（P＜0.05及P＜0.001）;而在下丘脑组织却显著提高（P＜0.001）。FD大鼠胃窦、十二指肠和下丘脑组织VIP、SP及NPY mRNA均显著增加（P＜0.01、P＜0.001或P＜0.05）。免疫组化实验发现,FD大鼠MTL、leptin和CCK在胃窦、十二指肠和下丘脑组织的表达与ELISA和PCR的结果趋势一致。Western Blot实验检测发现leptin和NPY在胃窦及十二指肠组织的表达情况与PCR的结果一致。结论:1.FD大鼠出现明显的胃肠动力障碍,表现为胃排空及肠推进减缓、MMC紊乱及Ⅲ相消失。2.FD大鼠脑肠肽分泌明显异常,表现为与胃肠动力密切相关的MTL及CCK在胃窦及十二指肠表达水平明显降低、NPY表达水平显著增加;与感觉过敏感相关的SP及VIP表达显著增加。3.FD的发病可能是多个脑肠肽分泌异常的综合效应。因此,对脑肠肽差异表达的分析和检测在FD的诊断和治疗上有很重要的临床实践意义。

关键词：功能性消化不良胃肠动力脑肠轴脑肠肽大鼠模型

红岩坪上“巾帼红” 记湖北省鹤峰县贺英女子民兵连

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民族大家庭 2024年第3期 12-14页

作者：何庆良梁乾坤鹤峰县人武部湖北省民宗委

湖北省恩施土家族苗族自治州鹤峰县有一个汉族、土家族、苗族等多民族共居的村落——中营镇红岩坪村。这里是革命老区，贺龙元帅曾率领红军“五进五出”，其胞姐贺英在这里带领群众开展游击斗争的故事流传至今。2020年5月，49名红岩坪...

湖北省恩施土家族苗族自治州鹤峰县有一个汉族、土家族、苗族等多民族共居的村落——中营镇红岩坪村。这里是革命老区，贺龙元帅曾率领红军“五进五出”，其胞姐贺英在这里带领群众开展游击斗争的故事流传至今。2020年5月，49名红岩坪村妇女传承红色基因，举起了新时代“女子民兵”的鲜艳旗帜，成立了贺英女子民兵连。在群众眼中，她们是红色文化的宣传员、调解纠纷的“和事佬”、基层社会治理的践行者、产业发展的带头人。2022年，该民兵连入选“荆楚楷模”年度人物，2023年被命名为“湖北省民族团结进步示范单位”。

关键词：

红岩之上飒爽英姿湖北省鹤峰县贺英女子民兵连侧记

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中国民族 2024年第5期 34-35页

作者：何庆良梁乾坤湖北省民族宗教事务委员会办公室湖北省恩施州鹤峰县人武部

英雄儿女，鹤舞中营；铁血红岩，薪火相传。湖北省恩施土家族苗族自治州鹤峰县中营镇红岩坪村，生活着汉、土家、苗、蒙古等多个民族。曾经，这里是红三军军部旧址所在地，贺龙元帅率红军“五进五出”，新中国“双百人物”贺英（贺龙的... 详细信息

英雄儿女，鹤舞中营；铁血红岩，薪火相传。湖北省恩施土家族苗族自治州鹤峰县中营镇红岩坪村，生活着汉、土家、苗、蒙古等多个民族。曾经，这里是红三军军部旧址所在地，贺龙元帅率红军“五进五出”，新中国“双百人物”贺英（贺龙的大姐）抗战故事广泛传颂；如今，这里活跃着一支49人的女子民兵连——贺英女子民兵连。

关键词：民兵连红三军贺龙元帅英雄儿女鹤峰县贺英红岩

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活跃在山沟里的“红色娘子军”

中国民兵 2023年第1期 62-64页

作者：江卉付瑞勇梁乾坤不详

[历史档案]湖北省鹤峰县中营镇红岩坪村是红三军军部旧址所在地。革命战争年代,贺龙元帅曾率红军五进五出该地,新中国“双百人物”贺英也在此坚持游击战多年。一直以来,红色基因和革命薪火在这里代代传承。2020年5月,鹤峰县正式成立贺... 详细信息

[历史档案]湖北省鹤峰县中营镇红岩坪村是红三军军部旧址所在地。革命战争年代,贺龙元帅曾率红军五进五出该地,新中国“双百人物”贺英也在此坚持游击战多年。一直以来,红色基因和革命薪火在这里代代传承。2020年5月,鹤峰县正式成立贺英女子民兵连。建连以来,她们红心向党、一心为民,争当红色基因传承人、富民为民多面手、应急应战先锋队,在新时代续写大山深处的巾帼华章。2022年8月,该连被评为湖北省“荆楚楷模”。

关键词：红三军历史档案岩坪村贺龙元帅鹤峰县红色娘子军游击战民兵连

共和盆地河流碎屑锆石U-Pb年龄特征、Hf同位素组成及其对构造和地壳演化的启示

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地质通报 2023年

作者：艾尼卡尔·艾克帕尔陈岳龙梁乾坤康欢中国地震局地质研究所地震动力学国家重点实验室中国地质大学(北京)地球科学与资源学院

通过LA-MC-ICP-MS技术，对共和盆地的曲什安河与西河河漫滩沉积物中碎屑锆石进行了U-Pb定年和Hf同位素分析。研究结果揭示，这些碎屑锆石的U-Pb年龄可分为5组：172～309Ma、368～471Ma、737～943Ma、1698～2368Ma、2453～2543Ma。结合... 详细信息

通过LA-MC-ICP-MS技术，对共和盆地的曲什安河与西河河漫滩沉积物中碎屑锆石进行了U-Pb定年和Hf同位素分析。研究结果揭示，这些碎屑锆石的U-Pb年龄可分为5组：172～309Ma、368～471Ma、737～943Ma、1698～2368Ma、2453～2543Ma。结合研究区的构造-岩浆事件认为，曲什安河与西河河漫滩碎屑沉积物是西秦岭地块在不同时期提供的结果。碎屑锆石U-Pb年龄存在2个主要峰值：～236Ma和～403Ma，反映了古特提斯洋和原特提斯洋在不同部分的俯冲导致陆块碰撞，形成强烈岩浆事件的地质记录，碰撞后伸展阶段出现裂谷和新生洋盆。Hf同位素组成特征揭示源区地壳在2.7～1.3Ga经历了主要增生期，形成了现今地壳的84%。εHf(t)值 -14.7～+15.0，Hf亏损模式年龄在3.6～0.24Ga范围内，表明源区基底存在古太古代的古老地壳物质。～0.5Ga以来，地壳增长以古老地壳物质再循环为主，并在～0.28Ga地壳停止生长。依据前人公式计算了曲什安河与西河河漫滩碎屑沉积物物源区各时期的重熔/增生比例。

关键词：共和盆地碎屑锆石 U-Pb年龄 Lu-Hf同位素大陆地壳生长

嫩江河漫滩沉积物碎屑锆石U-Pb年龄、Hf同位素组成及其地质意义

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现代地质 2023年第3期37卷 529-546页

作者：梁乾坤陈岳龙王善辉于洋杨帆中国地质大学(北京)地球科学与资源学院北京100083 山东省第三地质矿产勘查院山东烟台264000

利用LA-(MC)-ICP-MS技术,对嫩江河漫滩沉积物碎屑锆石进行了U-Pb定年和Hf同位素组成分析研究。结果显示,293颗碎屑锆石多为岩浆成因锆石,其U-Pb年龄主要分为4组:2300~1746 Ma、363~331 Ma、316~260 Ma和252~86 Ma。中生代碎屑锆石占到... 详细信息

利用LA-(MC)-ICP-MS技术,对嫩江河漫滩沉积物碎屑锆石进行了U-Pb定年和Hf同位素组成分析研究。结果显示,293颗碎屑锆石多为岩浆成因锆石,其U-Pb年龄主要分为4组:2300~1746 Ma、363~331 Ma、316~260 Ma和252~86 Ma。中生代碎屑锆石占到全部数量的80.9%,说明该时期源区岩浆活动强烈。嫩江流域不同时代地层的相对出露面积不同:侏罗系—白垩系约占72%,石炭系—二叠系约占13%,三叠系约占8%,前寒武系约占5%,寒武系—志留系约占1%。结合Lu-Hf同位素分析结果进一步分析嫩江流域大陆地壳的形成与演化历史。嫩江流域大陆地壳主要以新生地壳的产生为主,1200~400 Ma时期是嫩江流域地壳强烈增生阶段,构成了现今地壳的98.8%,可能与古亚洲洋的发展与关闭等过程有关;400~100 Ma时期嫩江流域发生了壳内再循环的岩浆作用。依据前人公式计算了嫩江河漫滩沉积物源区不同时期大陆地壳的重熔/增生比例。中生代锆石重熔比例较低,含有约70%的新生物质。该现象与蒙古—鄂霍次克洋和古太平洋俯冲引起地幔物质的部分熔融有关。

关键词：嫩江碎屑锆石 U-Pb年龄 Hf同位素

心肌成纤维细胞来源的外泌体miRNA参与放射性心肌纤维化损伤

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第1期39卷 108-120页

作者：段依璠顾静舒亚妃韩晓斐梁乾坤甘肃中医药大学基础医学院兰州730000 天津医科大学第二医院血液内科兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究省级重点实验室兰州730000 甘肃省中医方药挖掘与创新转化重点实验室兰州730000 甘肃省中医药防治慢性疾病重点实验室兰州730000

外泌体及携带的miRNA在组织器官纤维化中发挥重要作用,但相关于其在放射性心肌纤维化(RICF)的研究十分有限,本研究拟运用生物信息学分析辐射诱导的外泌体miRNA通过辐射旁效应促进RICF发生的可能分子机制。心肌成纤维细胞(CFs)是RICF的... 详细信息

外泌体及携带的miRNA在组织器官纤维化中发挥重要作用,但相关于其在放射性心肌纤维化(RICF)的研究十分有限,本研究拟运用生物信息学分析辐射诱导的外泌体miRNA通过辐射旁效应促进RICF发生的可能分子机制。心肌成纤维细胞(CFs)是RICF的主要效应细胞,用2 Gy X射线辐照CFs后超速离心提取辐射诱导的外泌体(X-exo)和未受照射的CFs外泌体(Exo),并进行外泌体电镜观察、NTA浓度检测和CD9、CD63、CD81等外泌体表面标志蛋白质的纳米流式鉴定;随后通过RNA-seq技术检测外泌体miRNA表达谱,筛选差异表达的miRNA,预测其潜在靶基因并进行富集分析。结果显示:与未受照射的CFs外泌体相比,X射线诱导的外泌体中表达上调的miRNAs共9个(|log_(2) Fold Change|>1,P2的有8个,表达下调的miRNAs共19个(|log_(2) Fold Change|>1,P2的有12个。使用targetScan、miRWalk、miRNADB预测差异miRNA的靶基因,并进行GO及KEGG富集分析。GO富集结果显示,差异表达的miRNA调控的靶基因主要参与蛋白质磷酸化、细胞信号转导等生物学过程,富集于细胞质和细胞膜等细胞组分,发挥蛋白激酶绑定和蛋白质结合等分子功能。KEGG富集结果显示,差异表达miRNAs的靶基因主要富集于PI3K-Akt、MAPK、mTOR、ECM-receptor interaction、cAMP、Wnt、TGF-β、Notch等相关通路。对本研究富集到的信号通路进行文献梳理,表明差异表达的外泌体miRNA可能通过调节靶基因及相关信号通路促进RICF的发生发展。因MAPK、PI3k-Akt、mTOR等信号通路的活化调节主要依靠关键分子的磷酸化,并非主要依靠转录水平的调控,所以未来在探讨“外泌体miRNA通过辐射旁效应参与RICF”的机制研究中,应该着重关注ECM、cAMP、TGF-β、Wnt、Notch、Ras、Rap1等信号通路。

关键词：放射性心肌纤维化心肌成纤维细胞外泌体微RNA 生物信息学分析

荧光素酶标记的Lewis肺癌细胞转移前微环境小鼠模型建立与评价

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第12期39卷 1083-1088页

作者：明海霞申明陈彦文李杨杨玲玲梁乾坤刘兆华甘肃中医药大学基础医学院甘肃兰州730000 甘肃中医药大学中西医结合基础学科甘肃兰州730000 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省中医药防治慢性疾病重点实验室甘肃兰州730000

目的通过选择荧光素酶标记的Lewis(Luc-Lewis)肺癌细胞建立肺转移前微环境小鼠模型,采用定性、定量的方法评价该模型是否成功。方法 C57BL/6小鼠分为正常对照组和模型组,每组15只,模型组小鼠通过尾静脉注射Luc-Lewis肺癌细胞建立转移... 详细信息

目的通过选择荧光素酶标记的Lewis(Luc-Lewis)肺癌细胞建立肺转移前微环境小鼠模型,采用定性、定量的方法评价该模型是否成功。方法 C57BL/6小鼠分为正常对照组和模型组,每组15只,模型组小鼠通过尾静脉注射Luc-Lewis肺癌细胞建立转移前微环境模型。每日记录各组小鼠体质量,运用高通量酶标仪检测小鼠体内肿瘤荧光信号。取小鼠肺组织观察转移情况,HE染色观察肺组织病变情况,实时定量PCR和Western blot法分别检测转移前肺组织微环境形成的特异性标志物赖氨酰氧化酶(LOX)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、多功能蛋白聚糖(VCAN)、纤连蛋白(FN)的mRNA和蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠体质量显著下降,精神萎靡。模型组小鼠肺脏可检测到明确的荧光信号,且信号强度与造模天数呈正相关;14 d时模型组小鼠LOX、 MMP9、 VCAN、 FN的mRNA和蛋白表达水平显著升高;14 d时模型组小鼠肺组织肺间隙增厚,肺泡萎缩,大量炎性细胞浸润,第21天时可观察到模型组小鼠肺组织已形成转移病灶。通过以上实验结果提示转移前微环境成熟时间约为14 d。结论成功建立了Lewis肺癌肿瘤转移前微环境小鼠模型。

关键词：肺癌转移前微环境肿瘤转移动物模型建立

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镰形棘豆总黄酮对特发性肺纤维化大鼠的影响

中成药 2023年第5期45卷 1629-1633页

作者：王彦君李杨王雪林李欣泽梁乾坤陈彦文杨玲玲明海霞甘肃中医药大学基础医学院甘肃兰州730000 甘肃中医药大学附属医院重症医学科甘肃兰州730000 陕西中医药大学第二附属医院(西咸新区中心医院) 陕西咸阳710075 甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室甘肃兰州730000 甘肃中医药大学中西医结合研究所甘肃兰州730000

目的探讨镰形棘豆总黄酮对博来霉素所致特发性肺纤维化(IPF)大鼠的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松组(阳性对照,20 mg/kg)及镰形棘豆总黄酮低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),每组10只。除空白组外,其余各组... 详细信息

目的探讨镰形棘豆总黄酮对博来霉素所致特发性肺纤维化(IPF)大鼠的影响。方法将大鼠随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松组(阳性对照,20 mg/kg)及镰形棘豆总黄酮低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),每组10只。除空白组外,其余各组经气管单次滴注博来霉素(5 mg/kg)进行造模;第15天开始,镰形棘豆总黄酮组和醋酸泼尼松组灌胃相应剂量药液,空白组和模型组灌胃等量生理盐水,每天1次,连续28 d。第29天,处死所有大鼠,HE染色观察肺泡炎症程度,透射电镜观察肺组织超微结构,Western blot、RT-qPCR法检测p-JAK1、p-STAT1蛋白及JAK1、STAT 1 mRNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肺组织肺泡炎性细胞浸润评分、肺组织p-JAK1、p-STAT1蛋白与JAK1、STAT 1 mRNA表达升高(P<0.01);与模型组比较,镰形棘豆总黄酮中、高剂量组及醋酸泼尼松组大鼠肺组织肺泡炎性细胞浸润评分、肺组织p-JAK1、p-STAT1蛋白与JAK1、STAT 1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论镰形棘豆总黄酮可能通过降低JAK1、STAT1表达改善IPF大鼠肺损伤。

关键词：镰形棘豆总黄酮特发性肺纤维化 JAK1 STAT1