检索结果-南通市图书馆

作者：桑松文上海海洋大学

学位级别：硕士

近年来,包括病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)在内的多种新发疫病的大范围流行对中国对虾养殖产业造成了严重损失。偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)是引起对虾VCMD的病原,在流行病学调查中我们发现... 详细信息

近年来,包括病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)在内的多种新发疫病的大范围流行对中国对虾养殖产业造成了严重损失。偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)是引起对虾VCMD的病原,在流行病学调查中我们发现,我国养殖对虾中除了广泛流行的CMNV外,最近还出现了一种新型野田村病毒,这种病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,Rd Rp)基因序列与CMNV Rd RP基因片段的相似性为78%,是一种不同于CMNV的新病毒。感染这种新型野田村病毒的养殖凡纳滨对虾多表现出游泳能力下降的症状,因此被暂命名为“行动障碍野田村病毒(Movement disorder nodavirus,MDNV)”。本研究拟在前期建立MDNV逆转录巢式PCR(RT-n PCR)和逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)的基础上,研发MDNV的一步法Taq Man实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测方法,以期为MDNV的快速以及定量检测提供新的技术支持,同时通过人工感染实验对MDNV的致病性进行了初步分析,并采用已建立的分子生物学、组织学等方法对近年我国养殖虾类中MDNV的流行情况进行了检测分析。首先,本研究在流行病学调查中,从山东寿光某一凡纳滨对虾养殖场采集了患病凡纳滨对虾样品,对该批次样品进行了RT-n PCR检测、组织原位杂交和组织病理分析。RT-n PCR结果显示,该批次样品呈现MDNV阳性,样品中未检测到CMNV和其他常见虾类病原;组织病理和原位杂交分析结果表明,患病凡纳滨对虾的肝胰腺组织中部分肝胰腺小管呈现明显的病理变化,病变肝胰腺小管的上皮细胞出现坏死,坏死部位均可观测到MDNV RNA探针的阳性杂交信号。将患病对虾肝胰腺组织进行匀浆、密度梯度离心,对纯化后的病毒进行电镜观测,可观察到大量直径约30纳米的MDNV样病毒颗粒。上述研究结果表明,山东寿光此养殖场的养殖凡纳滨对虾感染了MDNV。其次,利用上述纯化的MDNV病毒对健康凡纳滨对虾进行了体内注射感染实验。MDNV注射组对虾个体出现了明显的发病症状,主要表现为肝胰腺颜色变浅,腹节体色不透亮,甲壳变软。患病个体的组织病理分析结果显示,肝胰腺组织中部分小管坏死,坏死主要表现为肝胰腺小管上皮细胞的崩解和溃散。利用MDNV探针对肝胰腺组织切片进行的原位杂交结果表明,肝胰腺中坏死的上皮细胞细胞质中出现了明显的MDNV探针杂交信号;MDNV感染所致的肝胰腺小管局部性坏死与CMNV感染所致的肝胰腺全局性坏死的情况不同,反映出MDNV致病力相较于CMNV可能有所减弱;不过由于感染实验中未得到可靠的累计死亡率数据,MDNV的致病力还有待更进一步研究。第三,基于MDNV的Rd Rp基因设计了寡核苷酸引物和探针,以含有MDNV靶基因的p MD18-MDNV质粒和RNA标准品为模板,通过反应体系和反应程序优化,建立了MDNV的一步法Taq Man RT-PCR检测方法。优化后的一步法反应液主要组份为:11μL一步法RT-PCR缓冲液,0.8μL酶混合物,0.3μM正向、0.3μM反向引物,0.4μM探针,1μL模板、5.2μL RNA-free H0(共计20μL);优化后的一步法反应程序为:54.5℃15 min,95℃1 min;95℃10 s,60.3℃30 s(45cycles)。特异性实验分析,结果显示新建立的方法能实现对MDNV的特异性检测,在1.4×10～1.4×10拷贝数/μL标准质粒浓度范围内起始模板浓度与反应循环数间呈现良好的线性关系;该方法最低可检测到5.5×10拷贝的RNA标准品或者1.4×10拷贝的p MD18-MDNV标准质粒;分析还显示该检测方法批内和批间Ct值的CV分别小于1.27%和1.83%,具有良好的重复性和较高的稳定性。本研究针对MDNV建立的Taq Man RT-PCR方法具有准确、快速和灵敏等特点,可为对虾养殖过程中MDNV的定性、定量检测与监测提供技术支持。第四,采用RT-n PCR、Taq Man RT-PCR和组织原位杂交三种检测方法对2018年和2019年取自我国部分内陆和沿海省市多种养殖虾类中CMNV和MDNV的检测和流行情况进行综合分析。结果表明,养殖凡纳滨对虾、罗氏沼虾中均存在CMNV和MDNV阳性检出;其中我国山东、湖南、广西以及海南等省市养殖对虾中均存在MDNV的流行且呈现出从南到北流行率逐渐递减的趋势,而采集自山东、广西、江苏、浙江等省市的样品中有CMNV阳性检测;从总体上看,2018年上述省市养殖虾类中CMNV的检出率为20.7%。2019年上述省市养殖虾类中CMNV和MDNV的阳性检出率分别为22.6%、21.6

关键词：行动障碍野田村病毒(MDNV) 偷死野田村病毒(CMNV) 一步法TaqMan实时荧光定量PCR(RT-qPCR) 流行病学调查组织病理原位杂交

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虾类行动障碍野田村病毒(MDNV)TaqManRT-PCR检测方法的建立与应用

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渔业科学进展 2021年第5期42卷 77-85页

作者：桑松文李小平张庆利中国水产科学研究院黄海水产研究所农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

基于虾类行动障碍野田村病毒(movement disorder nodavirus,MDNV)的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因设计寡核苷酸引物和探针,以含有MDNV靶基因的pMD18-MDNV质粒和RNA标准品为模板,通过优化反应体系和反应程序,建立了MDNV的TaqMan RT-PCR... 详细信息

基于虾类行动障碍野田村病毒(movement disorder nodavirus,MDNV)的RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因设计寡核苷酸引物和探针,以含有MDNV靶基因的pMD18-MDNV质粒和RNA标准品为模板,通过优化反应体系和反应程序,建立了MDNV的TaqMan RT-PCR检测方法。优化后的反应组分:20.0μL TaqMan RT-PCR反应液预混液中包含11.0μL一步法RT-PCR缓冲液、0.8μL酶混合物、0.3μmol/L正向引物、0.3μmol/L反向引物、0.4μmol/L探针、1.0μL模板和5.2μL RNA-free H2O;优化后的反应程序:54.5℃15 min,95℃1 min;45个热循环扩增(95℃10 s,60.3℃30 s)。本研究所建立的方法能实现对MDNV的特异性检测,在1.4×10^(10)-1.4×10^(1 )copies/μL标准质粒浓度范围内,起始模板浓度对数值与反应循环数间呈良好的线性关系;该方法最低可检测5.5×101拷贝的RNA标准品或1.4×10^(1)拷贝的pMD18-MDNV标准质粒。分析结果还显示,该检测方法批内Ct值和批间Ct值的变异系数(CV)分别小于1.27%和1.83%,具有良好的重复性和稳定性。利用该方法对2019年采自我国部分省市的样品进行检测发现,凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中MDNV的阳性检出率为23.5%(16/68)。本研究建立的MDNV TaqMan RT-PCR方法具有特异性、快速和灵敏等特点,可为对虾养殖实践中MDNV的定性、定量检测与监测以及有效防控提供技术支持。

关键词：养殖对虾行动障碍野田村病毒(MDNV) TaqMan RT-PCR 定量检测方法

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悬浮隧道管体运动对锚索涡激振动的影响

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船舶工程 2024年第1期46卷 142-150页

作者：干超杰桑松石晓中国海洋大学工程学院山东青岛266404 青岛黄海学院智能制造学院山东青岛266427

根据锚索式悬浮隧道的运动特性,将锚索假设为两端铰接的非线性梁模型,在海流作用下,锚索会产生顺流向与横流向的涡激振动。当海流方向和管体轴向存在夹角时,管体运动可简化为作用在锚索上部端点的质点运动,并将质点运动沿锚索坐标系方... 详细信息

根据锚索式悬浮隧道的运动特性,将锚索假设为两端铰接的非线性梁模型,在海流作用下,锚索会产生顺流向与横流向的涡激振动。当海流方向和管体轴向存在夹角时,管体运动可简化为作用在锚索上部端点的质点运动,并将质点运动沿锚索坐标系方向逐一分解。根据Hamilton原理建立锚索三向振动方程,并通过Galerkin方法和Runge-Kutta方法对该方程进行求解,选取典型悬浮隧道的结构进行数值分析。结果表明:当锚索上部端点的输入频率与锚索固有频率的比值为整数时,锚索会发生共振现象;如上部端点除锚索轴向方向外的某一方向质点运动与锚索振动方向一致,则锚索在该方向上的振动会出现显著变化,而对另一方向振动的影响较小;在多数情况下,锚索振动平衡位置的偏离与上部端点所输入的运动频率有紧密联系,但与幅值联系不大。

关键词：悬浮隧道管体运动锚索涡激振动数值分析

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悬浮隧道管体运动对锚索涡激振动的影响规律

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科学技术与工程 2024年第2期24卷 807-815页

作者：干超杰桑松石晓中国海洋大学工程学院青岛266404 青岛黄海学院智能制造学院青岛266427

根据锚索式悬浮隧道的运动特性,假设锚索是两端铰接的非线性梁模型,并将管体运动简化为两自由度的质点运动,将其视作一种参数激励。考虑锚索长期处于海流环境下,其顺流向涡激力和管体横荡运动方向一致,锚索的运动响应可能会产生明显变... 详细信息

根据锚索式悬浮隧道的运动特性,假设锚索是两端铰接的非线性梁模型,并将管体运动简化为两自由度的质点运动,将其视作一种参数激励。考虑锚索长期处于海流环境下,其顺流向涡激力和管体横荡运动方向一致,锚索的运动响应可能会产生明显变化。建立锚索的非线性顺流向涡激振动方程,并通过Galerkin方法和Runge-Kutta方法对该方程进行求解,选取典型悬浮隧道的结构进行数值分析,结果表明:在锚索前三阶模态中,相比于一阶模态幅值,二阶和三阶模态幅值是一个很小的量,可以忽略不计;参数激励可以使锚索更快进入稳定状态,且对振动幅值的增加有显著影响;参数激励对顺流向涡激振动的影响程度与锚索顶端的端部激励幅值和频率有关。

关键词：悬浮隧道锚索参数激励顺流向涡激振动数值分析

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鲫鱼自然感染对虾偷死野田村病毒(CMNV)的初步研究

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渔业科学进展 2019年第2期40卷 25-32页

作者：王崇王秀华刘爽桑松文张庆利青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071 上海海洋大学上海201306

对虾病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)是由偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)引起的一种新发疫病,近年来使中国对虾养殖业遭受了严重的经济损失。为筛查对虾池塘养殖系统中CMNV的自然宿主种类,本研究... 详细信息

对虾病毒性偷死病(Viral covert mortality disease,VCMD)是由偷死野田村病毒(Covert mortality nodavirus,CMNV)引起的一种新发疫病,近年来使中国对虾养殖业遭受了严重的经济损失。为筛查对虾池塘养殖系统中CMNV的自然宿主种类,本研究在山东潍坊一个发生VCMD的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖场排水渠中采集了野生鲫鱼(Carassius auratus)样品,对其携带和感染CMNV的情况进行了系统分析。逆转录套式PCR检测结果显示,鲫鱼样品的总RNA能扩增出与预期大小一致的CMNVRNA依赖的RNA聚合酶目标基因片段。组织病理和原位杂交分析显示,鲫鱼脑部神经组织空泡化严重,脑皮层锥体细胞和二叠体颗粒细胞核固缩明显,心肌呈现典型的溶解样坏死病理变化,脑和心肌组织的病变部位均可见淡紫色CMNV探针杂交信号。透射电子显微镜观测显示,鲫鱼脑中可见神经组织空泡化,心肌组织坏死严重,CMNV样病毒颗粒占据了心肌细胞内大部分区域。本研究表明,CMNV在自然条件下能够跨越物种障碍、感染对虾养殖池塘排水渠中的野生鲫鱼,并导致靶组织明显的病理损伤,同时也提示,CMNV感染其他鱼类尤其是淡水鱼类的风险值得高度关注。

关键词：病毒性偷死病(VCMD) 偷死野田村病毒(CMNV) 自然感染宿主跳跃鲫鱼

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动力打桩桩周泥岩损伤特性与损伤模型

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土木工程学报 2024年第8期57卷 58-71页

作者：白晓宇银吉超张亚妹王永洪闫楠桑松魁青岛理工大学山东青岛266520

针对泥岩地基同施工场地条件下动力打入桩的承载力差异性大且部分打入桩承载力不足等异常现象,文章开展了桩周0.2m处打桩前后的桩周泥岩单轴抗压强度对比试验,和打桩后的桩端中风化泥岩三轴压缩试验,明确打桩后桩周泥岩的损伤特性,基于... 详细信息

针对泥岩地基同施工场地条件下动力打入桩的承载力差异性大且部分打入桩承载力不足等异常现象,文章开展了桩周0.2m处打桩前后的桩周泥岩单轴抗压强度对比试验,和打桩后的桩端中风化泥岩三轴压缩试验,明确打桩后桩周泥岩的损伤特性,基于统计损伤理论建立考虑受打桩影响的桩周泥岩损伤本构模型,并对泥岩地基打入桩的承载性能进行探讨。研究表明:打桩后桩周0.2m处泥岩强度平均损伤28.2%,弹性模量平均损伤41.4%;桩端中风化泥岩损伤后抗剪强度参数平均值为c=217.2kPa、φ=21.6°,φ仅是同场地原状强风化和全风化泥岩的49.1%和51.4%;打桩后桩周泥岩应力-应变曲线的损伤模型计算值的与实测值吻合较好,验证模型的合理性;泥岩地基打入桩承载力异常特征为桩端受力小,但桩端沉降显著,静载破坏时桩端阻力的平均占比为5.25%;动力打桩对桩周泥岩的损伤是泥岩地基打入桩承载力异常的重要原因;泥岩地基打入桩的设计计算与数值模拟采用原状泥岩力学参数不合理,泥岩损伤后不易恢复,建议按损伤特性赋予参数。研究结果对泥岩地基打入桩的设计、施工、承载力评价有较强的参考价值。

关键词：动力打桩泥岩单轴压缩试验三轴压缩试验损伤模型损伤变量承载力异常

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电场方向对一维断裂纳米通道连接处水桥结构的影响

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物理学报 2024年第9期73卷 70-77页

作者：孟现文中国矿业大学材料与物理学院徐州221116

电场影响纳米通道内的水分子的电偶极矩取向,进而影响纳米通道内的水分子的传输.为了有效发掘水分子在纳米通道内的传输特点,必须研究更复杂的纳米通道结构.最新一种构造复杂纳米通道的方式是构造断裂纳米通道.在研究断裂纳米通道内的... 详细信息

电场影响纳米通道内的水分子的电偶极矩取向,进而影响纳米通道内的水分子的传输.为了有效发掘水分子在纳米通道内的传输特点,必须研究更复杂的纳米通道结构.最新一种构造复杂纳米通道的方式是构造断裂纳米通道.在研究断裂纳米通道内的水分子的动力学特点时,通常是在零电场或单一电场方向下进行的,电场方向对断裂纳米通道内的水分子的影响机理尚不明确,这制约了部分场控分子器件的设计.为了探究该问题,本文采用分子动力学模拟方法,系统研究了电场方向从0°变化到180°的过程中,电场方向对完整纳米通道以及断裂长度分别为0.2和0.4 nm的断裂纳米通道内的水分子的占据数、传输、水桥、电偶极矩偏向等性质的影响.结果表明,在1 V/nm的电场强度作用下,这三种纳米通道内的水分子的占据数、传输等差别主要集中在电场方向与管轴夹角为90°时,此时完整纳米通道内能形成稳定的水链,断裂长度为0.2 nm的纳米通道的连接处能形成不稳定的水桥,而断裂长度为0.4 nm的纳米通道的连接处不能形成水桥.此外,模拟发现当电场极化方向与管轴夹角为90°时,增大电场的强度,断裂纳米通道连接处的水桥更容易断裂.

关键词：电场断裂纳米通道方向

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偷死野田村病毒（CMNV）在养殖和野生甲壳类中的流行及危害

偷死野田村病毒（CMNV）在养殖和野生甲壳类中的流行及危害

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2018年中国水产学会学术年会

作者：郝景伟王崇李小平桑松文邹莹张庆利农业部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所上海海洋大学水产与生命技术学院

为查明偷死野田村病毒（Covert mortality nodavirus,CMNV）的流行危害情况,本研究对河北、山东、江苏和浙江等4个沿海省份养殖和野生甲壳类中CMNV的存在及感染情况进行了系统调查。结果显示,上述省份沿海地区养殖凡纳滨对虾、日本对虾... 详细信息

为查明偷死野田村病毒（Covert mortality nodavirus,CMNV）的流行危害情况,本研究对河北、山东、江苏和浙江等4个沿海省份养殖和野生甲壳类中CMNV的存在及感染情况进行了系统调查。结果显示,上述省份沿海地区养殖凡纳滨对虾、日本对虾、斑节对虾和三疣梭子蟹中均存在CMNV的流行,2016-2017年CMNV的流行率分别为17.7%和12.5%。进化树分析表明来自上述省份不同甲壳类中的CMNV分离株与CMNV原始株系聚在同一个分支上。组织病理学和原位杂交结果显示,患病甲壳类的肝胰腺小管萎缩,小管上皮坏死明显,肌肉组织可见溶解样坏死,组织坏死部位均有较强的CMNV阳性杂交信号。部分野生天津厚蟹样品的肌肉、远海梭子蟹样品的性腺组织中也可观测到严重病理损伤和较强的CMNV阳性杂交信号。透射电镜分析证实上述养殖和野生甲壳类病变组织中存在大量CMNV样的病毒颗粒。本研究结果表明,CMNV在主要养殖甲壳类中存在较为广泛的流行,严重危害虾蟹类养殖,同时野生甲壳类中CMNV传播和流行的生态学风险也不容忽视。

关键词：偷死野田村病毒(CMNV) 养殖和野生甲壳类原位杂交(ISH) 透射电镜(TEM)

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大直径嵌岩灌注桩承载特性试验与有限元模拟

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重庆交通大学学报(自然科学版) 2024年第9期 25-33页

作者：白晓宇刁浩杰银吉超桑松魁张亚妹张胜凯青岛理工大学土木工程学院中铁建投(青岛)城市开发建设有限公司

基于青岛某工程的4根大直径嵌岩灌注桩，在现场开展了单桩竖向抗压静载试验和桩身完整性测试，以明确大直径嵌岩灌注桩在竖向荷载下的承载特征，拟揭示不同荷载水平下嵌岩灌注桩的承载力发挥机制。结合不同嵌岩深度的单桩承载性能有限... 详细信息

基于青岛某工程的4根大直径嵌岩灌注桩，在现场开展了单桩竖向抗压静载试验和桩身完整性测试，以明确大直径嵌岩灌注桩在竖向荷载下的承载特征，拟揭示不同荷载水平下嵌岩灌注桩的承载力发挥机制。结合不同嵌岩深度的单桩承载性能有限元模拟，重点分析了单桩在不同嵌岩深度下的竖向抗压承载特性和桩土位移分布特征。研究表明：在笔者试验条件下，大直径嵌岩灌注桩单桩竖向抗压承载力具有一定离散性，桩头部位的损坏会极大影响单桩承载力的有效发挥；加载完成后，数值模拟得到的桩顶沉降量为31.56 mm,约为现场实测值的1.1倍，模拟结果与实测结果较为吻合；通过不同嵌岩比的模拟结果对比发现，嵌岩深度越大桩端阻力占桩顶荷载的比例越小，且桩端阻力占比的变化速率随着嵌岩比的增加逐渐减缓；嵌岩深度取2.5倍桩径为宜。

关键词：岩土工程嵌岩桩泥浆护壁成孔灌注桩单桩竖向抗压承载力承载力异常现场试验数值模拟

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层状土中静压桩连续贯入现场试验与数值模拟

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吉林大学学报（地球科学版） 2024年第4期54卷 1291-1304页

作者：吴泽坤何来胜白晓宇麻栋栋牛永昌赵广桑松魁闫楠张明义青岛理工大学土木工程学院山东青岛266520 中国建筑第五工程局有限公司长沙410004 中铁建设集团有限公司北京100040 青岛市地铁规划设计院有限公司山东青岛266035 中冶东方工程技术有限公司山东青岛266555

为探讨层状土中静压桩连续贯入过程的沉贯特性,依托上海市某桩基工程开展静压桩贯入过程现场试验,探究沉桩阻力随贯入深度的演变规律,并结合ABAQUS数值模拟,明确静压桩贯入过程中沉桩阻力、桩周土体竖向应力、径向应力以及径向位移的变... 详细信息

为探讨层状土中静压桩连续贯入过程的沉贯特性,依托上海市某桩基工程开展静压桩贯入过程现场试验,探究沉桩阻力随贯入深度的演变规律,并结合ABAQUS数值模拟,明确静压桩贯入过程中沉桩阻力、桩周土体竖向应力、径向应力以及径向位移的变化规律。结果表明:层状土的软硬程度制约着沉桩阻力的大小;当桩端贯入浅部粉质黏土层和淤泥质黏土层时,沉桩阻力增长较慢甚至出现减小趋势,当桩端贯入到深部砂质粉土层、粉质黏土层和粉砂层时,沉桩阻力增长较快,其中在砂质粉土层中增长率最高可达174%;桩周土体中竖向应力和径向应力与土层性质密切相关,竖向应力和径向应力最大值均出现在桩端贯入至黏质粉土层时,分别为558.0、1 178.0 kPa,当桩端贯入到下部较软的淤泥质黏土层时,最大竖向应力和径向应力均出现明显退化现象,径向应力退化率达到52%;径向位移随径向距离的增加而减小,其变化规律基本反映了土层性质的变化特征。

关键词：静压桩现场试验沉桩阻力数值模拟竖向应力径向应力径向位移

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